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三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭及自噬的影响
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作者 殷晓庆 涂铭书 +3 位作者 庄婉珍 夏雨 张毅 黄毅 《福建中医药》 2023年第4期17-20,32,共5页
目的 探讨三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法 取对数生长期的人ESCC细胞株KYSE150细胞(以下简称KYSE150细胞)分为0μg/mL组、25μg/mL组、50μg/mL组、75μg/mL组,采用CCK-8法检测三叶青黄酮溶液干预0... 目的 探讨三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法 取对数生长期的人ESCC细胞株KYSE150细胞(以下简称KYSE150细胞)分为0μg/mL组、25μg/mL组、50μg/mL组、75μg/mL组,采用CCK-8法检测三叶青黄酮溶液干预0、24、48 h后各组细胞活力并计算干预48 h的半抑制浓度(IC_(50)),筛选出三叶青黄酮溶液最佳干预浓度为50μg/mL。取对数生长期的KYSE150细胞分为0μg/mL组、50μg/mL组,采用Transwell小室法检测三叶青黄酮溶液干预48 h后2组细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量。取对数生长期的KYSE150细胞分为空白组、氯喹组、三叶青黄酮组、三叶青黄酮+氯喹组,空白组不使用药物干预,氯喹组加入10μmol/L氯喹,三叶青黄酮组加入50μg/mL三叶青黄酮溶液,三叶青黄酮+氯喹组加入10μmol/L氯喹与50μg/mL三叶青黄酮溶液干预,均干预48 h后采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量。结果 与0μg/mL组比较,各药物组随着三叶青黄酮溶液浓度的增加,KYSE150细胞活力均逐渐下降(P均<0.05);与0μg/mL组比较,50μg/mL组KYSE150细胞迁移和侵袭数量,N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量均降低(P均<0.05);与空白组比较,氯喹组、三叶青黄酮组及三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量均显著增高(P均<0.05);与氯喹组比较,三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量增高更显著(P<0.05)。结论 三叶青黄酮可下调N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量以抑制ESCC细胞的迁移和侵袭能力,上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与p62的表达诱导自噬体的产生,从而抑制细胞自噬流,发挥对ESCC细胞活力的抑制作用。 展开更多
关键词 三叶青黄酮 自噬 细胞迁移侵袭 lc3-/lc3- P62
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远志皂苷调节细胞自噬抗Aβ25-35诱导的SH-5Y5Y细胞凋亡的研究 被引量:4
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作者 李巧 金桂芳 +2 位作者 尤付玲 王琳 杨红 《广东药科大学学报》 CAS 2017年第4期536-540,共5页
目的从细胞自噬角度探讨远志皂苷(tenuifolin,Ten)抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的作用及分子机制。方法建立Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,通过MTT法和流式细胞术测定细胞活力和凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬小泡的变... 目的从细胞自噬角度探讨远志皂苷(tenuifolin,Ten)抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的作用及分子机制。方法建立Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,通过MTT法和流式细胞术测定细胞活力和凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬小泡的变化,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平的变化。结果 Ten抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞活力降低及凋亡率增加,减少Aβ25-35诱导的自噬体增加,显著降低自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达水平。结论 Ten通过调节Aβ25-35诱导的细胞自噬,从而抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 远志皂苷 AΒ25-35 细胞自噬 凋亡 lc3-/
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沉默表皮生长因子受体的表达对肺腺癌A549细胞自噬的影响 被引量:3
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作者 马阳 吴娟 +5 位作者 纪晓坤 王蕊 杜芸 王珩 郭晓 张艳 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第5期347-351,358,共6页
目的:研究降低表皮生长因子受体(EGFR)的表达对肺腺癌A549细胞自噬活性的影响.方法:A549细胞中加入EGF处理,分为4组,即未处理组和10、25、50 ng/mL EGF处理组,用Western blot方法检测EGFR的蛋白表达;采用转染siRNA降低肺腺癌细胞A549细... 目的:研究降低表皮生长因子受体(EGFR)的表达对肺腺癌A549细胞自噬活性的影响.方法:A549细胞中加入EGF处理,分为4组,即未处理组和10、25、50 ng/mL EGF处理组,用Western blot方法检测EGFR的蛋白表达;采用转染siRNA降低肺腺癌细胞A549细胞EGFR的表达,将A549细胞分为4组,即未处理组、EGFR siRNA-1组、EGFR siRNA-2组和EGFR siRNA-3组,分别采用Real-time RT-PCR和Western blot方法检测EGFR mRNA和蛋白表达水平来评价3个siRNA的沉默效果;将A549细胞分为转染EGFR siRNA组、转染空载体组、转染试剂组(只加入等量转染试剂)及未处理组,且4组均加入等量的50 ng/mL EGF,用Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达,观察沉默EGFR表达对自噬活性变化;A549细胞分为转染EGFR siRNA组和转染空载体组,用透射电子显微镜观察自噬小体.结果:转染siRNA后A549细胞EGF蛋白的表达降低,LC3Ⅰ向LC3Ⅱ的转化水平升高(P<0.05),细胞内出现较多自噬小体,自噬活性明显增加.结论:降低EGFR的表达可以提高肺腺癌A549细胞自噬活性. 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 肺腺癌 自噬 SIRNA lc3-/lc3-
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A型流感病毒对肺巨噬细胞自噬的影响及麻杏石甘汤含药血清的干预作用 被引量:13
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作者 李玲 张波 +5 位作者 卢芳国 蔡亮 高强 胡珏 何谷良 吴涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期878-883,共6页
目的探讨麻杏石甘汤含药血清对A型流感病毒诱导的肺巨噬细胞自噬的干预作用。方法以A型流感病毒感染的RAW264. 7细胞为研究对象,分为麻杏石甘汤含药血清低、中、高剂量组、奥司他韦组、3-MA+流感病毒组、流感病毒组、3-MA组、雷帕霉素... 目的探讨麻杏石甘汤含药血清对A型流感病毒诱导的肺巨噬细胞自噬的干预作用。方法以A型流感病毒感染的RAW264. 7细胞为研究对象,分为麻杏石甘汤含药血清低、中、高剂量组、奥司他韦组、3-MA+流感病毒组、流感病毒组、3-MA组、雷帕霉素组、空白组,干预12 h后,分别用激光共聚焦显微镜和透射电镜技术检测细胞自噬情况;Western blot法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ表达。结果麻杏石甘汤含药血清能不同程度抑制流感病毒诱导的细胞自噬标志蛋白LC3的膜聚集,抑制细胞内自噬小体和自噬溶酶体的增加,以及LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,且呈现一定的量效关系。结论麻杏石甘汤可能通过抑制A型流感病毒诱导的细胞自噬,最终调控A型流感病毒的致病作用。 展开更多
关键词 流感病毒 肺巨噬细胞 自噬 麻杏石甘汤含药血清 雷帕霉素 lc3-/lc3-比值
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Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-Ⅱ mRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA的影响 被引量:5
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作者 刘利娟 陈瑶 +4 位作者 周德生 王洪海 周颖璨 李中 胡华 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第4期509-513,共5页
目的探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型。大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 ... 目的探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型。大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 h 4个亚组。各组于再灌相应时间点行神经功能缺损评分,并断头取脑行HE染色及Real time-PCR检测。结果神经功能缺损:与假手术组比较,模型组、Sal组各时间点均有神经功能缺损(P<0.01);与模型组比较,再灌24、72 h Sal组神经功能缺损评分降低(P<0.05)。HE染色:模型组神经元减少、缺失,细胞肿胀,部分破裂,细胞核固缩、偏移、深染,胶质细胞增生,经Salubrinal干预后,再灌各时间点神经元增多,胞膜较完整,核固缩现象较轻,水肿轻微。Real time-PCR检测:与假手术组比较,模型组、Sal组各指标于再灌各时间点均增高(P<0.01)。与模型组比,Sal组LC3-ⅡmRNA表达于再灌12、24、72 h下降明显(P<0.05);Sal组LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA于再灌后各时间点下降均明显(P<0.01)。结论 Salubrinal通过下调LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA比值,对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用。 展开更多
关键词 Salubrinal 缺血再灌注大鼠模型 lc3- MRNA lc3-/lc3-mRNA 神经保护
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自噬与帕金森病及中药干预研究 被引量:8
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作者 何建成 《医学研究杂志》 2017年第6期1-4,共4页
自噬途径在帕金森病的发生、发展机制中发挥着重要作用,α-突触核蛋白、富亮氨酸重复激酶、泛素羧基末端水解酶、丝氨酸/苏氨酸激酶PTEN诱导激酶和E3泛素连接酶、以及雷帕霉素靶点等帕金森病相关基因与通路,均不同程度参与自噬调节。中... 自噬途径在帕金森病的发生、发展机制中发挥着重要作用,α-突触核蛋白、富亮氨酸重复激酶、泛素羧基末端水解酶、丝氨酸/苏氨酸激酶PTEN诱导激酶和E3泛素连接酶、以及雷帕霉素靶点等帕金森病相关基因与通路,均不同程度参与自噬调节。中药可通过诱导自噬,提高自噬水平,进而发挥防治帕金森病的作用。 展开更多
关键词 自噬 帕金森病 lc3/lc3 I
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8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ与T2MD患者血糖在目标范围内时间的相关性及预测糖尿病周围神经病变的价值
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作者 徐云 陈雪辉 +3 位作者 白立炜 耿锐娜 孟祥雨 覃艳 《海南医学》 CAS 2024年第10期1390-1395,共6页
目的探讨8-异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)、镍纹样蛋白(Metrnl)、微管相关蛋白3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)/微管相关蛋白-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)与2型糖尿病(T2MD)患者血糖在目标范围内时间(TIR)的相关性及对糖尿病周围神经病变(DPN)预测价值。方法选取2020年5... 目的探讨8-异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)、镍纹样蛋白(Metrnl)、微管相关蛋白3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)/微管相关蛋白-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)与2型糖尿病(T2MD)患者血糖在目标范围内时间(TIR)的相关性及对糖尿病周围神经病变(DPN)预测价值。方法选取2020年5月至2022年10月新乡医学院第一附属医院收治的187例T2DM患者进行前瞻性研究,根据是否合并DPN分为DPN组(n=48)和无DPN组(n=139)。比较两组患者及根据TIR四分位数分组的患者8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ水平,采用Pearson相关性分析8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ与TIR相关性,采用多因素Logistic回归分析DPN的相关影响因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)评价8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ预测DPN的价值。结果DPN组患者的TIR为(51.43±7.68)%,明显低于无DPN组的(56.94±8.12)%,差异有统计学意义(P<0.05);DPN组患者的8-isoPGF2α、Metrnl分别为(162.78±51.33)pg/mL、(259.18±74.42)pg/mL,明显高于无DPN组的(129.56±43.00)pg/mL、(208.37±65.61)pg/mL,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ为0.89±0.27,明显低于无DPN组的1.15±0.31,差异均有统计学意义(P<0.05);根据TIR第25、50、75百分位数将全部患者分为Q1~Q4四组,8-isoPGF2α、Metrnl在Q4组最低,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ在Q4组最高;8-isoPGF2α、Metrnl随着TIR降低逐渐升高,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ随着TIR降低而降低,四组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,8-isoPGF2α、Metrnl与TIR呈显著负相关(r=-0.786、-0.665,P<0.01),LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ与TIR呈显著正相关(r=0.711,P<0.01);多因素Logistic回归分析结果显示,TIR、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ是DPN的独立相关保护因素(P<0.05),8-isoPGF2α、Metrnl是DPN的独立相关危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,单一指标中,Metrnl预测DPN的AUC最大(0.830),特异度最高(87.05%),8-isoPGF2α+Metrnl+LC3B-Ⅱ预测DPN的AUC为0.923(95%CI:0.875~0.957),大于Metrnl,预测敏感度为87.50%,特异度为85.61%(P<0.05)。结论8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/L 展开更多
关键词 8-异前列腺素F2Α 镍纹样蛋白 微管相关蛋白3B-/微管相关蛋白- 2型糖尿病 血糖在目标范围内时间 糖尿病周围神经病变 相关性 预测价值
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PPARγ及其配体介导的自噬在染料木黄酮抑制前列腺癌细胞活性中的作用
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作者 张俊强 万久恺 +2 位作者 姚浩宇 范锐 辛士永 《中医研究》 2023年第8期61-66,共6页
目的:探讨染料木黄酮对前列腺癌PC-3细胞恶性生物行为学的抑制作用、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor,PPARγ)及其配体介导的自噬在该过程中的作用。方法:以0、10、20、40和60μmol/L染料木... 目的:探讨染料木黄酮对前列腺癌PC-3细胞恶性生物行为学的抑制作用、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor,PPARγ)及其配体介导的自噬在该过程中的作用。方法:以0、10、20、40和60μmol/L染料木黄酮处理前列腺癌细胞,采用cell counting kit-8细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖率,采用定量反转录聚合酶链反应检测细胞中PPARγ信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)相对表达量。将前列腺癌细胞随机分为对照组、罗格列酮组、染料木黄酮组、罗格列酮+染料木黄酮组。各组以相应药物处理24 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖率,采用划痕试验检测细胞迁移能力,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹法检测PPARγ、p62、Beclin1蛋白相对表达量及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ。结果:与0μmol/L染料木黄酮组对比,10、20、40和60μmol/L染料木黄酮组细胞增殖率降低、PPARγmRNA相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组对比,罗格列酮组和染料木黄酮组细胞增殖率、划痕愈合率和p62降低,侵袭细胞数减少,PPARγ、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高(P<0.05)。与罗格列酮组和染料木黄酮组对比,罗格列酮+染料木黄酮组细胞增殖率、划痕愈合率和p62降低,侵袭细胞数减少,PPARγ、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高(P<0.05)。结论:染料木黄酮可抑制前列腺癌细胞增殖,降低迁移和侵袭能力,其可能是通过激活PPARγ诱导细胞自噬而发挥作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 PC-3细胞 染料木黄酮 细胞增殖率 划痕愈合率 PPARγ P62 Beclin1 lc3/lc3
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自噬标志性分子LC3B在大鼠全脑缺血复灌损伤中海马CA1区的表达及意义 被引量:7
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作者 曾斌 王静文 +2 位作者 张玉琳 任典寰 应志国 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第6期667-669,共3页
目的探讨自噬标志分子LC3B在大鼠全脑缺血复灌不同时间的表达以及对海马神经元损伤的影响。方法采用四血管法(4-vessel-occlusion,4-VO)法制作大鼠全脑缺血模型,随机将33只SD大鼠分成假手术组和缺血再灌注组。在大鼠全脑缺血20 min后,... 目的探讨自噬标志分子LC3B在大鼠全脑缺血复灌不同时间的表达以及对海马神经元损伤的影响。方法采用四血管法(4-vessel-occlusion,4-VO)法制作大鼠全脑缺血模型,随机将33只SD大鼠分成假手术组和缺血再灌注组。在大鼠全脑缺血20 min后,分别恢复血流灌注30 min、1、2、4、6、8、12、24、48、72 h,用免疫组织化学法检测海马CA1区神经元LC3B的表达。结果 LC3B在大鼠全脑缺血20 min复灌2 h开始表达,在复灌12 h表达到达高峰,之后逐渐减弱。结论自噬的激活介导了大鼠全脑缺血再灌注海马CA1区神经元的损伤死亡,长时间脑缺血再灌注损伤中自噬激活的时间更早及介导神经元的损伤更严重。 展开更多
关键词 全脑缺血 缺血再灌注损伤 自噬 lc3B/lc3-II
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