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水牛角中含巯基肽类成分的富集及抗氧化、抗炎活性研究 被引量:2
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作者 汤佳瑶 黄思莹 +5 位作者 武文星 朱悦 郭盛 赵明 段金廒 刘睿 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2741-2749,共9页
目的富集水牛角Bubali Cornu中含巯基肽类成分(thiols-rich peptide fractions,SHPF)并探讨其抗氧化、抗炎活性。方法通过巯基亲和树脂Thiopropyl Sepharose 6B从水牛角提取液中富集得到SHPF,并采用Ellman法测定游离巯基(-SH)含量;应用... 目的富集水牛角Bubali Cornu中含巯基肽类成分(thiols-rich peptide fractions,SHPF)并探讨其抗氧化、抗炎活性。方法通过巯基亲和树脂Thiopropyl Sepharose 6B从水牛角提取液中富集得到SHPF,并采用Ellman法测定游离巯基(-SH)含量;应用单因素实验法优选富集工艺;基于Nano LC-MS/MS技术鉴定SHPF。体外通过H_(2)O_(2)诱导小鼠脑微血管内皮细胞bEnd3氧化损伤,采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测SHPF抗氧化活性;通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症损伤,采用实时荧光定量PCR法测定炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌。结果优化SHPF富集工艺为上样量10μmol游离-SH、吸附时间1 h、洗脱剂为含β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,β-Me)洗脱剂。从水牛角富集液中共鉴定到704条肽段,其中154条含半胱氨酸(cysteine,Cys)肽段,占总肽段的21.9%,主要来源于角蛋白和角蛋白相关蛋白。体外细胞实验结果表明,SHPF能够提高氧化损伤bEnd3细胞的存活率,同时降低其LDH的泄露,并减少炎症损伤RAW264.7细胞炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的分泌。结论采用优选富集工艺能明显提高SHPF的富集效率,SHPF具有良好抗氧化和抗炎活性,为水牛角“清热解毒”功效物质基础的研究提供了研究思路和方向。 展开更多
关键词 水牛角 含巯基肽类 富集 抗氧化 抗炎 Nano lc-ms/ms技术 乳酸脱氢酶 实时荧光定量PCR法 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α 角蛋白 清热解毒
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基于LC-MS/MS技术的武平紫灵芝子实体化学成分分析 被引量:1
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作者 林标声 钟天明 +3 位作者 林佳慧 汤晓华 傅明骏 温德才 《龙岩学院学报》 2023年第2期77-83,共7页
采用药典规定方法、测定试剂盒及LC-MS/MS方法对武平紫灵芝各类化学成分的组成及含量进行分析,结果表明:与同样来源赤灵芝相比,紫灵芝的灵芝多糖、总黄酮和总氨基酸含量更高,三萜酸含量较低。两者的化学组成成分相似,其主要三萜为灵芝酸... 采用药典规定方法、测定试剂盒及LC-MS/MS方法对武平紫灵芝各类化学成分的组成及含量进行分析,结果表明:与同样来源赤灵芝相比,紫灵芝的灵芝多糖、总黄酮和总氨基酸含量更高,三萜酸含量较低。两者的化学组成成分相似,其主要三萜为灵芝酸B和灵芝酸C,灵芝酸A含量显著低于赤灵芝(P<0.05);多糖主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和岩藻糖组成,其中甘露糖、阿拉伯糖含量显著高于赤灵芝(P<0.05)。黄酮类中含有柚皮素、黄豆黄苷、山奈酚、表儿茶素、甘草素等成分,其中柚皮素和表儿茶素L含量显著高于赤灵芝(P<0.05)。氨基酸含量组成无显著差异(P>0.05)。LC-MS/MS分析表明,与同样来源赤灵芝相比,紫灵芝三萜类含量增加最多的是2,2'-脱水尿苷和刺囊酸,降低最多的是灵芝酸A;糖类增加最多的是阿拉伯糖,降低最多的是岩藻糖;黄酮类增加最多的是柚皮苷,降低最多的是山奈酚;氨基酸增加最多的是丙氨酸,未有差异2倍以上含量降低的氨基酸。 展开更多
关键词 紫灵芝 武平 lc-ms/ms技术 化学成分
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液相色谱串联质谱技术在新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查的运用 被引量:2
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作者 苏跃青 朱文斌 +1 位作者 周进福 陈涵强 《福建医药杂志》 CAS 2020年第1期13-15,共3页
目的采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术,对传统新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查方法进行改进。方法对73例时间分辨荧光法(TRFIA)初筛异常的疑似CAH患儿,先用基因分析技术为诊断标准分为CYP21A2基因突变患者、携带者和非CAH21... 目的采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术,对传统新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查方法进行改进。方法对73例时间分辨荧光法(TRFIA)初筛异常的疑似CAH患儿,先用基因分析技术为诊断标准分为CYP21A2基因突变患者、携带者和非CAH21新生儿,再用LC-MS/MS测定17-羟孕酮(17-OHP)和21-脱氧皮质醇(21-DF)浓度,最后比较LC-MS/MS技术与TRFIA法的差异。结果73例研究对象中,CAH21患者6例,携带者9例,非CAH21新生儿58例。LC-MS/MS法的17-OHP浓度1.65~218.63ng/mL,21-DF浓度0.112~23.300ng/mL;其中,CAH21患儿的17-OHP浓度显著高于携带者或非CAH21新生儿(均P<0.001);21-DF浓度:CAH21患儿>携带者>非CAH21新生儿(分别P<0.001和P<0.05)。Deming回归和Bland-Altman偏差分析:LC-MS/MS技术与TRFIA法检测结果的关联性良好,但后者明显高于前者。根据LC-MS/MS技术检测正常人群上述两指标的参考范围,前者假阳性27例,为TRFIA法40.30%;后者假阳性13例,为TRFIA法19.40%。结论LC-MS/MS技术应用对初筛阳性的疑似CAH患儿进行原干血片测定17-OHP和21-DF浓度,可降低TRFIA过高的假阳性率。 展开更多
关键词 lc-ms/ms技术 先天性肾上腺皮质增生症 17-羟孕酮 21-脱氧皮质醇
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LC/MS/MS技术在药代动力学研究中的应用 被引量:3
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作者 靳凤丹 《高师理科学刊》 2009年第3期57-59,68,共4页
介绍LC/MS/MS技术(liquid chromatography tandem mass spectrometry,液相色谱-质谱-质谱联用技术)在药代动力学研究中的应用进展.以国内外大量有代表性的论文为依据,进行分析、归纳和整理.结果表明,该项技术是一种快速灵敏的定量分析... 介绍LC/MS/MS技术(liquid chromatography tandem mass spectrometry,液相色谱-质谱-质谱联用技术)在药代动力学研究中的应用进展.以国内外大量有代表性的论文为依据,进行分析、归纳和整理.结果表明,该项技术是一种快速灵敏的定量分析生物样品中微量药物及其代谢产物的有效方法,已成为药代动力学研究及新药开发的重要工具.在高通量测定生物样品、药代动力学研究等方面发挥着不可替代的作用. 展开更多
关键词 lc/ms/ms技术 药代动力学 新药研究
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Caco-2细胞中^(13)C-D-葡萄糖含量测定方法的建立
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作者 任理 郑润生 +3 位作者 郭文峰 刘佳 陈蔚文 徐晖 《广州中医药大学学报》 CAS 北大核心 2013年第5期733-736,741,共5页
【目的】建立检测Caco-2细胞中13C-D-葡萄糖含量的液相色谱—质谱联用(LC-MS)方法。【方法】样品经前处理后,通过Atlantis HILIC色谱柱分离,以乙腈与体积分数0.1%甲酸为流动相,质谱为电喷雾离子源,在负离子模式下以选择反应监测(SRM)方... 【目的】建立检测Caco-2细胞中13C-D-葡萄糖含量的液相色谱—质谱联用(LC-MS)方法。【方法】样品经前处理后,通过Atlantis HILIC色谱柱分离,以乙腈与体积分数0.1%甲酸为流动相,质谱为电喷雾离子源,在负离子模式下以选择反应监测(SRM)方式进行检测。【结果】在选定的色谱和质谱条件下,各指标成分峰分离良好,13C-D-葡萄糖在定量范围内呈现良好的线性关系,R2=0.999 5,高、中、低浓度日内精密度和日间精密度相对标准偏差(sR)<20%,回收率在100.61%~108.34%之间,样品检测的重复性及样品稳定性良好。【结论】本方法适用于Caco-2细胞中13C-D-葡萄糖含量的测定。 展开更多
关键词 lc-ms/ms技术 13C-D-葡萄糖/分析 细胞培养
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LC-MS/MS技术在食品质量与安全研究中的应用
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作者 陈超越 《食品安全导刊》 2019年第27期129-129,共1页
食品的质量和安全与人们的身体健康具有极大的联系,对食品质量和安全实行准确分析意义重大,所以,与此相关的检测技术是国内外高度重视的研究课题。食品中的有害含量较少在痕量分析极为困难,对于检测方式的准确性具有极大的要求。近几年... 食品的质量和安全与人们的身体健康具有极大的联系,对食品质量和安全实行准确分析意义重大,所以,与此相关的检测技术是国内外高度重视的研究课题。食品中的有害含量较少在痕量分析极为困难,对于检测方式的准确性具有极大的要求。近几年来,LC-MS/MS技术得到了迅速推广,并且拥有分辨率高、扫描质量范围广、速度快以及灵敏度高等特点。在分离分析领域中获得了全面使用,特别是对于食品质量和安全的研究具有重要的影响。 展开更多
关键词 lc-ms/ms技术 食品 质量 安全
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二维液质联用技术测定饮料中21种邻苯二甲酸酯 被引量:3
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作者 唐雷鸣 蒋玲波 +3 位作者 王萍亚 陆羚子 戴意飞 黄鹂 《食品工业》 CAS 北大核心 2020年第8期304-307,共4页
建立二维色谱-质谱联用技术(2D-LC-MS/MS)快速检测饮料中21种邻苯二甲酸酯类塑化剂的方法。饮料试样经乙腈-叔丁基甲醚(9︰1)提取后,直接进二维液相色谱-质谱联用仪分析。通过二维液相的第一维在线净化富集、第二维分离分析功能实现对2... 建立二维色谱-质谱联用技术(2D-LC-MS/MS)快速检测饮料中21种邻苯二甲酸酯类塑化剂的方法。饮料试样经乙腈-叔丁基甲醚(9︰1)提取后,直接进二维液相色谱-质谱联用仪分析。通过二维液相的第一维在线净化富集、第二维分离分析功能实现对21种邻苯二甲酸酯类塑化剂在线全自动的定性、定量分析。结果表明,21种邻苯二甲酸酯类塑化剂在8~1000 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数R2均大于0.994,方法检出限范围为20~50μg/kg,在50~1000μg/kg加标水平下的回收率为85%~106%,相对标准偏差rSD(n=6)均小于10%。该方法操作简单、灵敏度高、分析时间短,适用于饮料中多种塑化剂的快速检测分析,可为国家相关标准制定提供参考依据。 展开更多
关键词 二维色谱-质谱联用(2D-lc-ms/ms)技术 邻苯二甲酸酯 饮料
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干旱胁迫下香蕉幼苗蛋白质组学分析 被引量:1
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作者 孙洁 庞昇泽 +1 位作者 禤维言 冯斗 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2020-2026,共7页
【目的】研究干旱胁迫下香蕉蛋白表达情况,为探索香蕉的抗旱分子机制提供理论依据。【方法】以桂蕉1号组培苗叶片为材料,对其进行干旱胁迫处理,运用iTRAQ结合液相色谱—质谱联用(LC-MS-MS)技术对其差异蛋白进行检测,并通过生物信息学分... 【目的】研究干旱胁迫下香蕉蛋白表达情况,为探索香蕉的抗旱分子机制提供理论依据。【方法】以桂蕉1号组培苗叶片为材料,对其进行干旱胁迫处理,运用iTRAQ结合液相色谱—质谱联用(LC-MS-MS)技术对其差异蛋白进行检测,并通过生物信息学分析对香蕉叶片蛋白质组进行鉴定。【结果】从干旱胁迫处理的组培苗叶片中共鉴定出1655种蛋白,其中获得定量信息的蛋白有1023种,差异表达蛋白78种,包括上调蛋白32种和下调蛋白46种。GO生物进程分析结果表明,78种差异表达蛋白参与了细胞过程、代谢过程、响应刺激胁迫过程及单有机体过程等多个生物进程。GO分子功能分析结果表明,上调蛋白主要具有催化活性功能、结合功能、抗氧化活性和功能调节;下调蛋白主要具有催化活性功能和结合功能。GO富集分析结果显示,上调蛋白主要参与过氧化氢反应、活性氧反应等;下调蛋白主要参与淀粉代谢、二糖代谢、蔗糖代谢、寡糖代谢、细胞碳水化合物生物合成等多个碳素代谢进程,且其主要是质外体、胞外区、类囊体等部位的组分,参与1,6-二磷酸果糖1-磷酸酶反应、蔗糖磷酸酶反应及碳水化合物磷酸酶反应等。在氮素代谢过程中,参与甘氨酸代谢的丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)在线粒体中的含量明显下降,而参与活性氧代谢的过氧化氢酶(CAT)含量明显上升。【结论】干旱胁迫下香蕉的表达蛋白种类及数量发生明显变化,且其抗旱机制是多种蛋白质共同作用的结果,主要通过调节物质和能量代谢及应激活动来发挥作用。 展开更多
关键词 香蕉 干旱胁迫 差异表达蛋白 ITRAQ 液相色谱—质谱联用(lc-ms-ms)技术
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LC-MS/MS技术在兽药残留定性定量检测中的应用
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作者 李芮 《兽医导刊》 2019年第14期68-69,共2页
兽药残留是当前食品安全的重要问题,不当用药、兽药滥用的现象仍时有发生,为食品安全排查监测风险,大量的动物源性食品需要做兽药残留分析,为提高检测效率和可靠性,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术以其操作简便、准确度和灵敏度高、选... 兽药残留是当前食品安全的重要问题,不当用药、兽药滥用的现象仍时有发生,为食品安全排查监测风险,大量的动物源性食品需要做兽药残留分析,为提高检测效率和可靠性,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术以其操作简便、准确度和灵敏度高、选择性强等优点成为各种兽药残留的定性定量方法.本文在对兽药残留检测相关概念做简要介绍的基础上,对目前LC-MS/MS技术在兽药残留定性定量检测中的应用做一综述,为兽药残留定性定量分析方法及思路提供一定参考. 展开更多
关键词 液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)技术 兽药残留 定性定量 综述
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