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联合应用重组人骨保护素和阿伦膦酸钠抑制成熟破骨细胞的体外实验研究 被引量：14
1
作者 黄鹏 王岩 +5 位作者 迟志永 杨子义 倪健 杨武剑 王冉东 白金柱 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期812-816,共5页
目的研究联合应用重组人骨保护素(rhOPGFc)和阿伦膦酸钠(ALN)对破骨细胞抑制作用。方法进行人类OPGFc融合蛋白毕赤酵母表达株的构建和鉴定。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞RAW264.7按照4∶1比例混合,培养于96孔... 目的研究联合应用重组人骨保护素(rhOPGFc)和阿伦膦酸钠(ALN)对破骨细胞抑制作用。方法进行人类OPGFc融合蛋白毕赤酵母表达株的构建和鉴定。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞RAW264.7按照4∶1比例混合,培养于96孔板中。9d后,重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色(TRAP染色)鉴定后,分别使用10-5g/LrhOPGFc、10μmol/LALN、10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN、5×10-6g/LrhOPGFc+5μmol/LALN作用于混合细胞体系,并设空白对照。加药后3、7d观察破骨细胞数目和形态,计算单位面积内TARP阳性细胞个数,并行骨磨片吸收陷窝计数。结果重组人骨保护素(rhOPGFc)分子量与预期结果相符合,蛋白印迹检测(Westernblotting)显示,该条带可被抗免疫球蛋白IgG抗体别显色。小鼠成骨细胞与破骨细胞前体细胞RAW264.7混合培养后9d,体系中出现大量多核成熟破骨细胞,TARP染色证实为成熟破骨细胞。加药3、7d后,与对照组相比,其余各组破骨细胞TARP阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数均明显减少,以10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN组减少最为显著。结论重组人骨保护素(rhOPGFc)可以有效减少成熟破骨细胞数目并抑制其功能。联合应用rhOPGFc和阿伦膦酸钠可以交互抑制成熟破骨细胞功能。 展开更多
关键词 成熟破骨细胞 人骨保护素 阿伦膦酸钠 体外实验研究 重组 RAW264.7 laln 细胞抑制作用 颅骨成骨细胞 前体细胞 细胞数目 阳性细胞 吸收陷窝 IgG抗体 免疫球蛋白 骨细胞功能 酵母表达 融合蛋白 新生小鼠 酶消化法 96孔板
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致敏小鼠抗原激发后肺局部免疫反应的研究
2
作者 沈华浩 刘进 +5 位作者 刘富光 王选锭 林小莉 徐志豪 黄刚 原双晋 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期156-158,共3页
目的　探讨抗原致敏和激发后肺局部免疫反应的变化。方法　以抗原钥孔嘁血兰素(KLH)经气管内滴注致敏小鼠 ,2～ 4周后进行激发 ,期间分别收集支气管肺泡灌洗液 (BALF)和外周血 ,对肺、肺相关淋巴结 (LALN)和脾组织细胞悬液进行培养并收... 目的　探讨抗原致敏和激发后肺局部免疫反应的变化。方法　以抗原钥孔嘁血兰素(KLH)经气管内滴注致敏小鼠 ,2～ 4周后进行激发 ,期间分别收集支气管肺泡灌洗液 (BALF)和外周血 ,对肺、肺相关淋巴结 (LALN)和脾组织细胞悬液进行培养并收集上清液 ,以酶联免疫吸附试验(ELISA)测定总IgA、抗KLHIgA及白蛋白。结果　KLH致敏和激发均引起BALF中抗KLHIgA反应。抗原致敏和激发后BALF中抗KLHIgA/白蛋白比率明显高于血清 ;抗原致敏激发后肺和LALN细胞悬液在体外均可释放抗KLHIgA ,而脾细胞悬液仅释放低水平抗KLHIgA。结论　气管内滴注抗原致敏小鼠可诱导肺局部抗原特异IgA反应 ,抗原激发后反应加强。肺局部积聚的抗KLHIgA并非由血中渗漏而来 ,而是局部产生的结果。肺和LALN中的淋巴细胞是抗原特异IgA的主要来源。 展开更多
关键词 肺 抗原 免疫反应 动物实验 laln 淋巴细胞 IGA 呼吸道感染
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2010年北京住院腹泻患儿腺病毒感染的研究 被引量：8
3
作者 刘立颍 钱渊 +3 位作者 张又 贾立平 董慧瑾 邓洁 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期450-454,共5页
目的研究住院患儿中有腹泻症状者（包括社区获得性和院内获得性）腺病毒感染的情况。方法采用聚合酶链反应（PCR）对2010年北京地区有腹泻症状的住院患儿的粪便标本进行腺病毒的测定。结果519例标本中社区获得性腹泻为289例，院内获得... 目的研究住院患儿中有腹泻症状者（包括社区获得性和院内获得性）腺病毒感染的情况。方法采用聚合酶链反应（PCR）对2010年北京地区有腹泻症状的住院患儿的粪便标本进行腺病毒的测定。结果519例标本中社区获得性腹泻为289例，院内获得性腹泻为230例。所有标本中腺病毒阳性76例（76／519，14．6％）；其中社区获得性腹泻患儿43例（43／289，14．9％），有20例属于F组腺病毒（20／43，46．5％），均为41型；院内获得性腹泻患儿33例（33／230，14．3％），有13例属于F组腺病毒（13／33，39．4％），其中41型（Ad41）12例，40型1例。系统发育树分析本组检测到的Ad41分属于不同的分支。非F组的腺病毒总例数为43例，型别分别是1型（5例），2型（8例），3型（15例），7型（10例），12型（1例），31型（4例）。结论住院腹泻患儿中腺病毒的感染不容忽视。在本组住院患儿中，社区获得性和院内获得性腹泻中腺病毒感染阳性率相似。2010年度北京住院患儿腹泻中腺病毒的感染以F组腺病毒—肠道腺病毒为主，41型占绝对优势。 展开更多
关键词 儿童 腹泻 腺病毒科 聚合酶链反应
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