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苦豆子总碱降血糖作用及其机制研究 被引量:7
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作者 刘伟 张扬星 +2 位作者 杨新洲 欧阳艳 赵平 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第12期1991-1997,共7页
本文探究苦豆子地上部分提取的苦豆子总碱对L6骨骼肌细胞降血糖的分子机制。利用葡萄糖检测试剂盒发现苦豆子总碱(total alkaloids of Sophora alopecuroides L.,TASA)能增加L6细胞的葡萄糖摄取,且MTT结果显示TASA对L6细胞没有药物毒性... 本文探究苦豆子地上部分提取的苦豆子总碱对L6骨骼肌细胞降血糖的分子机制。利用葡萄糖检测试剂盒发现苦豆子总碱(total alkaloids of Sophora alopecuroides L.,TASA)能增加L6细胞的葡萄糖摄取,且MTT结果显示TASA对L6细胞没有药物毒性;利用激光共聚焦显微镜监测到TASA能促进GLUT4的转位;Western blot结果显示TASA对L6细胞内GLUT4的表达有一定促进作用,且能增强AMPK和PKC的磷酸化水平。这些结果表明TASA通过AMPK和PKC两种信号通路来促进GLUT4的表达和转运继而促进葡萄糖的摄取,说明TASA可能具有开发成新型降糖药的潜力。 展开更多
关键词 苦豆子总碱 2型糖尿病 l6骨骼肌细胞 葡萄糖转运蛋白4 信号通路
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利拉鲁肽通过调节Sestrin2改善棕榈酸诱导的L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗 被引量:3
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作者 田雪 高宇 +6 位作者 邢恩鸿 赵丽华 孔莫维 卢亚男 郭晓宇 孙启天 刘晓燕 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1075-1080,共6页
目的探讨应激诱导蛋白Sestrin2(Sesn2)在利拉鲁肽改善大鼠L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗中的作用。方法采用棕榈酸诱导法建立大鼠L6骨骼肌细胞的胰岛素抵抗,将实验细胞分为对照组(Con组)、棕榈酸0.6 mmol/L处理组(PA组)、棕榈酸0.6 mmol/L+利... 目的探讨应激诱导蛋白Sestrin2(Sesn2)在利拉鲁肽改善大鼠L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗中的作用。方法采用棕榈酸诱导法建立大鼠L6骨骼肌细胞的胰岛素抵抗,将实验细胞分为对照组(Con组)、棕榈酸0.6 mmol/L处理组(PA组)、棕榈酸0.6 mmol/L+利拉鲁肽10 nmol/L处理组(PA+Lir10组)、棕榈酸0.6 mmol/L+利拉鲁肽100 nmol/L处理组(PA+Lir100组)和棕榈酸0.6 mmol/L+利拉鲁肽1000 nmol/L处理组(PA+Lir1000组)。细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测各组细胞活性,Western印迹法检测各组葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)和Sesn2蛋白的表达。小干扰RNA(siRNA)转染L6细胞,抑制Sesn2的表达后,用棕榈酸0.6 mmol/L和利拉鲁肽100 nmol/L干预细胞,采用Western印迹法检测细胞中Sesn2、Akt、p-Akt、GLUT4蛋白表达水平。结果与Con组相比,PA组细胞存活率明显下降(P<0.05),p-Akt/Akt比值、Sesn2、GLUT4蛋白表达水平下降(P<0.05)。给予利拉鲁肽干预后,PA+Lir100、PA+Lir1000组细胞活性升高(P<0.05),p-Akt/Akt比值、Sesn2、GLUT4蛋白表达水平升高(P<0.05)。抑制Sesn2的表达后,转染si-Sesn2后给予棕榈酸0.6 mmol/L组(PA+si-Sesn2组)和转染si-Sesn2后给予棕榈酸0.6 mmol/L+利拉鲁肽100 nmol/L组(Lir100+PA+si-Sesn2组)的p-Akt/Akt比值及GLUT4蛋白表达水平均明显低于转染阴性组(si-Con组;P<0.05);即使给予利拉鲁肽干预后,与PA+si-Sesn2组相比,Lir100+PA+si-Sesn2组的p-Akt/Akt比值及GLUT4蛋白表达水平无明显升高(P>0.05)。结论棕榈酸可诱导L6细胞p-Akt/Akt比值及GLUT4蛋白表达水平下降。利拉鲁肽通过上调Sesn2表达,使p-Akt/Akt比值、GLUT4蛋白表达水平升高。这一过程可能参与了利拉鲁肽改善棕榈酸引起的L6细胞的胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 胰岛素抵抗 l6骨骼肌细胞 棕榈酸 Sestrin2
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蓝刺头多糖B对胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量及AMPK表达的影响 被引量:4
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作者 李旭东 任书男 +2 位作者 青格尔 高珍珍 杨英 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第2期67-72,共6页
为了探究蓝刺头多糖B(ETPB)对棕榈酸(PA)诱导的胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达的影响,体外培养大鼠L6成肌细胞,诱导分化为骨骼肌细胞并进行分化鉴定;采用CCK8法检测细胞存活率,筛选PA和ETPB的安全浓度;葡... 为了探究蓝刺头多糖B(ETPB)对棕榈酸(PA)诱导的胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达的影响,体外培养大鼠L6成肌细胞,诱导分化为骨骼肌细胞并进行分化鉴定;采用CCK8法检测细胞存活率,筛选PA和ETPB的安全浓度;葡萄糖氧化酶法检测各组细胞耗糖量;实时荧光定量PCR法检测AMPK mRNA基因表达水平,Western blot法检测AMPK蛋白表达量。结果显示:PA诱导L6骨骼肌细胞发生胰岛素抵抗的最适造模浓度为0.4 mmol/L,ETPB的最大安全浓度为200 mg/mL;ETPB可显著提高胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量(P<0.05),上调AMPK mRNA表达水平,增加AMPK蛋白表达量。提示:ETPB可以通过提高AMPK基因及蛋白表达而促进胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖,这可能是ETPB改善骨骼肌胰岛素抵抗的作用机制之一。 展开更多
关键词 蓝刺头多糖B l6骨骼肌细胞 棕榈酸 胰岛素抵抗 腺苷酸活化蛋白激酶
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海南蒲桃提取物对L6细胞砷中毒缓解作用的体外实验(英文) 被引量:3
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作者 Asmita Samadder Jayeeta Das +2 位作者 Sreemanti Das Raktim Biswas Anisur Rahman Khuda-Bukhsh 《中西医结合学报》 CAS 2012年第11期1293-1302,共10页
目的:研究海南蒲桃提取物对砷酸盐引起的L6骨骼肌细胞葡萄糖内稳态破坏及线粒体功能异常的缓解作用。方法:通过测量多个指标如丙酮酸激酶活性、葡糖激酶、线粒体膜电位等衡量细胞内葡萄糖水平及线粒体功能,并测量相关标志物的蛋白质及m... 目的:研究海南蒲桃提取物对砷酸盐引起的L6骨骼肌细胞葡萄糖内稳态破坏及线粒体功能异常的缓解作用。方法:通过测量多个指标如丙酮酸激酶活性、葡糖激酶、线粒体膜电位等衡量细胞内葡萄糖水平及线粒体功能,并测量相关标志物的蛋白质及mRNA表达情况,如葡萄糖转运体4、胰岛素受体基质1、胰岛素受体基质2、葡糖激酶等以分析可能有关的信号通路。结果:海南蒲桃提取物能够通过葡萄糖转运体4通路改善砷中毒的L6细胞内诸多标志物的表达,使其正常化,与模型组相比差异有统计学意义。结论:海南蒲桃提取物对细胞砷中毒有明显的缓解作用,未来可考虑将其用于治疗砷中毒相关疾病如高血糖症等。 展开更多
关键词 蒲桃属 植物提取物 砷酸盐类 葡萄糖转运蛋白质类 易化性 l6骨骼肌细胞 体外研究
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委陵菜提取物对L6肌细胞糖代谢影响的研究 被引量:1
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作者 李瑾 何计国 +2 位作者 陆璐 刘宗林 韩兴谦 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期299-302,共4页
研究了委陵菜中醇提物和氯仿碱性提物组分对L6肌肉细胞糖代谢的影响。结果表明:委陵菜的醇提物和氯仿碱性粗提物均有促进L6肌肉细胞糖代谢的作用,其中的氯仿碱性粗提物作用更为明显,随着浓度的增加作用效果增强。氯仿碱性提取物的体外... 研究了委陵菜中醇提物和氯仿碱性提物组分对L6肌肉细胞糖代谢的影响。结果表明:委陵菜的醇提物和氯仿碱性粗提物均有促进L6肌肉细胞糖代谢的作用,其中的氯仿碱性粗提物作用更为明显,随着浓度的增加作用效果增强。氯仿碱性提取物的体外代谢液对L6肌肉细胞的糖代谢有明显的促进作用,但作用效果与该提取物本身无显著差异。 展开更多
关键词 委陵菜 l6肌细胞 糖代谢
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nesfatin-1在胰岛素抵抗骨骼肌细胞中对PI3K/AKT信号通路的影响 被引量:1
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作者 王茜 李明泽 +8 位作者 张晗 张琳 章莹 程峣 袁燕 李思成 赵宇 廖鑫 高琳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期330-334,共5页
目的探讨过表达新型饱食分子蛋白(nesfatin-1)对L6骨骼肌胰岛素抵抗及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路和下游糖原合成酶激酶(GSK)-3β、葡萄糖转运蛋白(GLUT)-4表达的影响。方法建立L6细胞胰岛素抵抗模型后,用过表达nesfa... 目的探讨过表达新型饱食分子蛋白(nesfatin-1)对L6骨骼肌胰岛素抵抗及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路和下游糖原合成酶激酶(GSK)-3β、葡萄糖转运蛋白(GLUT)-4表达的影响。方法建立L6细胞胰岛素抵抗模型后,用过表达nesfatin-1的腺相关病毒(AAV)和空载对照腺相关病毒(PC)感染L6细胞,将细胞分为四组,分别为空载对照腺相关病毒组(PC组),PC+棕榈酸(PA)组,过表达nesfatin-1组,nesfatin-1+PA组,四组均加入100 nmol/L重组人胰岛素(Insulin),PC+PA组和nesfatin-1+PA组再加入250μmol/L PA处理24 h后收集培养基上清,用葡萄糖过氧化物酶方法测定上清液中葡萄糖含量,用Western印迹检测PI3K、AKT及其下游信号分子GSK-3β、GLUT-4的蛋白表达变化。结果与PC组比较,过表达nesfatin-1组p-AKT、GSK-3β、GLUT-4蛋白表达水平明显增高(P<0.05);与PC+PA组相比,nesfatin-1+PA组p-AKT、GSK-3β、GLUT-4蛋白表达水平明显增高(P<0.05);与nesfatin-1组相比,nesfatin-1+PA组p-AKT、GSK-3β、GLUT-4蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论过表达nesfatin-1可显著增加骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取,减轻胰岛素抵抗,并经PI3K-AKT通路上调下游GSK-3β、GLUT-4的表达。 展开更多
关键词 新型饱食分子蛋白-1 l6骨骼肌细胞 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路 糖原合成酶激酶-3Β 葡萄糖转运蛋白4
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Par6A cDNA的克隆与表达
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作者 刘晓军 孔星星 +4 位作者 朱镠娈 崔安芳 纪少伟 常永生 方福德 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第5期459-463,共5页
目的探讨Par6A基因的克隆表达及功能。方法用RT-PCR从大鼠L6骨骼肌细胞扩增出Par6A的cDNA,利用分子克隆的方法构建Par6A的克隆载体以及真核表达载体,在293细胞中进行表达,通过免疫共沉淀初步研究Par6A的功能。结果成功扩增出Par6AcDNA,... 目的探讨Par6A基因的克隆表达及功能。方法用RT-PCR从大鼠L6骨骼肌细胞扩增出Par6A的cDNA,利用分子克隆的方法构建Par6A的克隆载体以及真核表达载体,在293细胞中进行表达,通过免疫共沉淀初步研究Par6A的功能。结果成功扩增出Par6AcDNA,片断大小约1 kb,并构建了真核重组表达质粒pDsRed-Express-N1-Par6A。在转染293ET细胞24 h后,荧光显微镜下可见红色荧光的表达。免疫共沉淀实验表明Par6A与PKCζ存在相互作用。结论成功扩增出大鼠骨骼肌的Par6AcDNA,为研究Par6A的相关功能奠定了基础。 展开更多
关键词 Par6A CDNA l6大鼠骨骼肌细胞 免疫共沉淀
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表皮生长因子对缺氧缺糖模型大鼠骨骼肌细胞氧化损伤的保护作用 被引量:1
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作者 许雪梅 黄笑夏 +2 位作者 金瓯 张海邻 时洪雪 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期310-314,共5页
目的:构建体外骨骼肌L6细胞缺氧缺糖(OGD)模型,在体外水平上探讨表皮生长因子(EGF)对压疮深部组织损伤(DTI)的保护机制。方法:将对数生长期大鼠骨骼肌L6成肌细胞分为5组,即正常对照组、OGD组、5μg·L-1 EGF+OGD组、10μg·L-1 ... 目的:构建体外骨骼肌L6细胞缺氧缺糖(OGD)模型,在体外水平上探讨表皮生长因子(EGF)对压疮深部组织损伤(DTI)的保护机制。方法:将对数生长期大鼠骨骼肌L6成肌细胞分为5组,即正常对照组、OGD组、5μg·L-1 EGF+OGD组、10μg·L-1 EGF+OGD组和20μg·L-1 EGF+OGD组。MTT法检测各组细胞生存率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA法检测各组L6成肌骨骼肌细胞中活性氧(ROS)水平,Rhodamine 123检测线粒体膜电势,Western blotting法检测各组骨骼肌细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:与正常对照组比较,OGD组OGD 24h时骨骼肌细胞生存率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电势下降(P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显下降(P<0.01)。与OGD组比较,不同浓度EGF组细胞存活率明显升高,细胞凋亡率降低,其中10和20μg·L-1 EGF组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);不同浓度EGF组骨骼肌细胞中ROS水平呈浓度依赖性降低,线粒体膜电势明显增加,10和20μg·L-1 EGF组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);Bcl-2/Bax比值明显下降,并具有浓度依赖性,其中10和20μg·L-1 EGF组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:EGF通过降低细胞内ROS水平保护线粒体功能,改善OGD诱导的大鼠骨骼肌细胞损伤,并具有浓度依赖性。 展开更多
关键词 表皮生长因子 骨骼肌l6成肌细胞 缺氧缺糖 深部组织损伤 活性氧簇 线粒体
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