斜带石斑鱼L-氨基酸氧化酶基因克隆及表达分析 被引量：1

1

作者 杜贾贾 江飚 +1 位作者 唐嘉嘉 李安兴 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期303-309,共7页

鱼类的L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)具有广泛的抑菌杀虫效果,为了解斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)LAAO基因序列特征及其在刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)感染后的表达变化,该试验克隆得到2个石斑鱼LAAO基因:EcLAA... 鱼类的L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)具有广泛的抑菌杀虫效果,为了解斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)LAAO基因序列特征及其在刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)感染后的表达变化,该试验克隆得到2个石斑鱼LAAO基因:EcLAAO-1和EcLAAO-2,它们的ORF长度分别为1536和1569 bp,编码511和522个氨基酸,均含有氨基酸氧化酶(Amino_oxidase)结构域以及LAAO保守序列:DBM和GG motif。多重序列比对显示石斑鱼LAAO与其他鱼类LAAO具有较高的相似性。系统进化树分析表明,斜带石斑鱼的LAAO与硬骨鱼类亲缘关系较近。实时荧光定量PCR检测结果显示EcLAAO-1和EcLAAO-2在石斑鱼各组织均有表达,其中皮肤、鳃、胸腺、肝脏和肌肉中含量较丰富;在感染刺激隐核虫后,鳃和脾脏EcLAAO-1,EcLAAO-2表达量显著升高(P<0.05),这些结果暗示了石斑鱼LAAO参与先天性免疫,并在抗御刺激隐核虫感染中发挥重要作用。 展开更多

关键词 斜带石斑鱼 l氨基酸氧化酶 刺激隐核虫 基因克隆 表达模式

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眼镜王蛇毒L-氨基酸氧化酶诱导NACC细胞凋亡作用的研究 被引量：6

2

作者 黄红坤 黎肇炎 +1 位作者 李佳荃 黄爱民 《广西医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第1期22-25,共4页

目的:研究眼镜王蛇毒L-氨基酸氧化酶(LAAO)诱导人类腭部小涎腺腺样囊性癌细胞系(NACC)细胞凋亡的作用。方法:采用倒置相差显微镜、H·E染色及透射电镜定性的方法,观察LAAO引起NACC细胞凋亡形态学改变,采用TUNEL半定量计算凋亡指数(... 目的:研究眼镜王蛇毒L-氨基酸氧化酶(LAAO)诱导人类腭部小涎腺腺样囊性癌细胞系(NACC)细胞凋亡的作用。方法:采用倒置相差显微镜、H·E染色及透射电镜定性的方法,观察LAAO引起NACC细胞凋亡形态学改变,采用TUNEL半定量计算凋亡指数(AI)方法观察NACC细胞经不同浓度LAAO处理后引起细胞凋亡的情况。结果:倒置相差显微镜及H·E染色光镜观察、透射电镜观察可见典型细胞凋亡形态学改变,并可见凋亡小体形成。TUNEL半定量计算AI值,LAAO处理组与对照组比较差异有统计学意义(P<0·01),且AI值高低与LAAO浓度高低有关。结论:眼镜王蛇毒LAAO能诱导NACC细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 小涎腺腺样囊性癌 蛇毒 l-氨基酸氧化酶 细胞凋亡

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天然来源具有抗HIV活性的多肽和蛋白类化合物 被引量：6

3

作者 王建华 郑永唐 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2004年第6期321-327,共7页

从天然药物中寻找高效低毒的抗HIV/AIDS活性化合物和先导化合物是国内外新药研制中非常活跃的领域之一 ,也应该是我国近期创制新药的一条捷径。来源于动植物、海洋生物、微生物以及人体等中的许多天然化合物具有抗HIV活性。本文仅对天... 从天然药物中寻找高效低毒的抗HIV/AIDS活性化合物和先导化合物是国内外新药研制中非常活跃的领域之一 ,也应该是我国近期创制新药的一条捷径。来源于动植物、海洋生物、微生物以及人体等中的许多天然化合物具有抗HIV活性。本文仅对天然来源的多肽和蛋白类化合物抗HIV的研究简要综述。 展开更多

关键词 抗HIV活性 多肽 蛋白类化合物 艾滋病 抗菌肽 l-氨基酸氧化酶

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竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶的纯化、诱导细胞凋亡和抗菌作用 被引量：6

4

作者 张玉洁 陈克平 +1 位作者 李文辉 张云 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2006年第1期33-37,共5页

经过分子筛层析和离子交换层析,我们从竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒中纯化得到了竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶(TSV-LAO)。实验表明,TSV-LAO是一种糖蛋白,其分子由非共价连接的两个相同的亚基组成,SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳一个亚基... 经过分子筛层析和离子交换层析,我们从竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒中纯化得到了竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶(TSV-LAO)。实验表明,TSV-LAO是一种糖蛋白,其分子由非共价连接的两个相同的亚基组成,SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳一个亚基的表观分子量为58 kDa。TSV-LAO酶比活力为1100 U/mg,其分子脱掉糖基化成分后不影响酶活力。TSV-LAO在浓度为1.0μg/mL以上时可以诱导C8166细胞凋亡。TSV-LAO对实验病原微生物具有选择性抗生作用并具有明显的量效关系,对白色念珠菌(ATCC2002)、金黄色葡萄球菌(ATCC2592)和短小芽孢杆菌(CMCCB11207)的最小抑菌浓度分别是0.3,0.4和1.0μg/mL,即使在最高实验浓度10μg/mL,TSV-LAO对其它实验菌株也未显示抑菌作用。 展开更多

关键词 蛇毒 l-氨基酸氧化酶 纯化 生化性质 细胞凋亡 抗生作用

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白眉蝮蛇蛇毒中L-氨基酸氧化酶的分离及其诱导急性肺损伤的作用 被引量：5

5

作者 魏晓龙 魏继福 +3 位作者 黄阗 陈秋玉 刘岳宁 何韶衡 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第22期2096-2099,共4页

目的:从白眉蝮蛇蛇毒分离纯化L-氨基酸氧化酶,并研究其对肺组织的影响.方法:通过Heparin-Sepharose FF及Q-Sepharose HP从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化得到一个L-氨基酸氧化酶,命名为ABU-LAO.给Balb/c小鼠静脉注射50,5,0.5μg药物或生理盐水... 目的:从白眉蝮蛇蛇毒分离纯化L-氨基酸氧化酶,并研究其对肺组织的影响.方法:通过Heparin-Sepharose FF及Q-Sepharose HP从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化得到一个L-氨基酸氧化酶,命名为ABU-LAO.给Balb/c小鼠静脉注射50,5,0.5μg药物或生理盐水100μL,每组6只,6 h或24 h后取材,肺组织常规切片,HE染色.高倍镜视野下计算平均红细胞数(RBCs)、平均肺泡内多形核白细胞数(IAPLs)、平均肺泡隔多形核白细胞数(ASPLs);用图像分析仪测平均肺泡面积(MACA).结果:纯化ABU-LAO并在SDS-PAGE上测定其表观M r约为60000.与生理盐水组相比RBCs,IAPLs,ASPLs,MACA在注射ABU-LAO后有显著改变(P<0.0125).结论:通过两步层析法分离纯化得到ABU-LAO,它能诱导小鼠发生严重的急性肺损伤. 展开更多

关键词 l-氨基酸氧化酶 白眉蝮蛇 急性病 肺/损伤 小鼠 近交BAlBC

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蛇毒L-氨基酸氧化酶抗肿瘤作用研究进展 被引量：5

6

作者 李丽兰 黎肇炎 《蛇志》 2006年第2期127-130,共4页

关键词 l-氨基酸氧化酶 蛇毒 抗肿瘤

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马氏珠母贝L-氨基酸氧化酶基因克隆及表达分析

7

作者 罗贝 林海生 +4 位作者 王庆恒 秦小明 曹文红 高加龙 郑惠娜 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1074-1083,共10页

L-氨基酸氧化酶(LAAO)是一种广泛存在于自然界中的免疫蛋白酶,为探究马氏珠母贝LAAO(Pinctada fucata martensii LAAO,PmLAAO)基因序列的特征及其在副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)刺激后的表达变化,克隆得到了PmLAAO的cDNA全... L-氨基酸氧化酶(LAAO)是一种广泛存在于自然界中的免疫蛋白酶,为探究马氏珠母贝LAAO(Pinctada fucata martensii LAAO,PmLAAO)基因序列的特征及其在副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)刺激后的表达变化,克隆得到了PmLAAO的cDNA全长,其开放阅读框(ORF)长度为1767 bp,共编码588个氨基酸,具有FAD结合域和氨基酸氧化酶的结构域,是氨基酸氧化酶家族的一员。多序列比对结果和系统发育树显示,PmLAAO与双壳类动物的亲缘关系较近,其中,与加州贻贝的相似度最高。qRT-PCR结果显示PmLAAO在鳃、外套膜、闭壳肌、性腺、消化腺中均有表达,在鳃组织中表达水平最高;在Vp刺激后,PmLAAO在鳃组织中的表达水平显著升高,受刺激后48 h表达量最高。研究结果为新型免疫蛋白酶LAAO在双壳贝类中的功能活性提供了参考。 展开更多

关键词 马氏珠母贝 l-氨基酸氧化酶 基因克隆 实时荧光定量PCR

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氨基酸氧化酶催化合成非天然手性氨基酸研究进展 被引量：4

8

作者 夏仕文 熊文娟 +2 位作者 韦燕婵 何从林 徐红梅 《分子催化》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期288-298,196,共12页

非天然手性氨基酸是已经上市的和正在研发的手性药物、手性农药和手性食品添加剂的关键中间体[1-2].随着相关产业的发展,非天然手性氨基酸的市场需求与日俱增.非天然手性氨基酸不能像天然L-氨基酸一样采用发酵法生产,主要制备方法包括... 非天然手性氨基酸是已经上市的和正在研发的手性药物、手性农药和手性食品添加剂的关键中间体[1-2].随着相关产业的发展,非天然手性氨基酸的市场需求与日俱增.非天然手性氨基酸不能像天然L-氨基酸一样采用发酵法生产,主要制备方法包括化学法和生物法.化学法包括化学不对称合成法和化学拆分法.化学不对称合成法采用价格昂贵的手性源、手性助剂或手性金属催化剂.化学拆分法采用手性酸为拆分剂,经历与消旋氨基酸成盐。 展开更多

关键词 D-氨基酸氧化酶 l-氨基酸氧化酶 动力学拆分 去消旋化 非天然手性氨基酸

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聚吡咯固定L-氨基酸氧化酶手性电极的制作及其应用 被引量：3

9

作者 孙向英 刘斌 +1 位作者 李佳 徐金瑞 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第6期741-744,共4页

本方法将L·氨基酸氧化酶掺杂在毗咯溶液中用电化学聚合法制备手性电极，该电极对L一苯丙氨酸测定在2．0X10－’－1．4X10－‘。ilL的底物浓度范围内呈良好的线性关系，检测限为4．0X10－‘rnoliL对DL．苯丙氨酸的平均回收率102．8％。

关键词 手性电极 l-氨基酸氧化酶 聚吡咯 l-苯丙氨酸

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蛇毒L-氨基酸氧化酶酶学性质及对血小板功能的影响 被引量：3

10

作者 王辉 黎肇炎 廖共山 《蛇志》 2006年第1期36-39,共4页

关键词 蛇毒 l-氨基酸氧化酶 血小板

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L-氨基酸氧化酶的研究进展 被引量：5

11

作者 余志良 周宁 乔华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期125-135,共11页

L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)能特异性催化L-氨基酸氧化脱氨,生成α-酮酸、氨和H2O2。该酶分布较广,其中蛇毒源LAAO是该类酶中研究最为深入的一类,近年来,越来越多的非蛇毒源LAAO被发现和报道,现对蛇毒源和非蛇毒源LAAO... L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)能特异性催化L-氨基酸氧化脱氨,生成α-酮酸、氨和H2O2。该酶分布较广,其中蛇毒源LAAO是该类酶中研究最为深入的一类,近年来,越来越多的非蛇毒源LAAO被发现和报道,现对蛇毒源和非蛇毒源LAAO的研究进展进行了综述。现有研究表明,不同物种来源的LAAO,其底物选择性、等电点、稳定性等理化性质不尽相同;虽对其结构的研究还较少,但现有的研究表明蛇毒源和非蛇毒源LAAO的结构都含有FAD结合结构域、底物结构域和螺旋结构域;研究已发现不同来源的LAAO体外具有多种不同的生物学功能,而这些生物学功能多数是由于其产物H2O2作用的结果;对LAAO异源表达的研究较少且都不甚成功,可能是由于其需要进行翻译后修饰。 展开更多

关键词 l-氨基酸氧化酶 生理生化和结构特征 生物学功能 异源表达

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眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶诱导人胃癌细胞MGC-803细胞凋亡的实验研究 被引量：4

12

作者 齐元麟 张明芳 +1 位作者 赵蓉 林建银 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第2期121-125,共5页

目的:研究眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(NA-LAAO)对人胃癌细胞MGC-803的细胞毒性、诱导凋亡作用及可能机制。方法:采用CCK-8法测定细胞毒性;采用DNA倍体分析和An-nexin V/碘化丙啶染色测定细胞凋亡;采用发色底物法测定Caspase-3酶活性;采用We... 目的:研究眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(NA-LAAO)对人胃癌细胞MGC-803的细胞毒性、诱导凋亡作用及可能机制。方法:采用CCK-8法测定细胞毒性;采用DNA倍体分析和An-nexin V/碘化丙啶染色测定细胞凋亡;采用发色底物法测定Caspase-3酶活性;采用Western-blot方法测定聚二磷酸腺苷核糖多聚酸-1(PARP-1)切割。结果:NA-LAAO可抑制MGC-803细胞增殖,6、12、24h的IC50分别为(2.48±0.41)、(1.74±0.27)和(0.83±0.19)mg/L;NA-LAAO可使细胞DNA分布出现亚二倍体凋亡峰,并可促使细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻;NA-LAAO可激活Caspase-3并可促使其底物PARP-1降解。结论:NA-LAAO可能通过激活Caspase-3这一分子机制而诱导细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多

关键词 蛇毒 中华眼镜蛇 l-氨基酸氧化酶 细胞增殖 细胞凋亡

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蛇毒L-氨基酸氧化酶的生物学作用 被引量：4

13

作者 郭春梅 刘淑清 孙明忠 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2012年第B12期205-212,共8页

蛇毒(snake venom,SV)是天然的最丰富的蛋白(酶)源之一,而L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)是SV的主要蛋白(酶)组成成份,也是SV重要的活性和毒性蛋白成份,其生物学活性多样。近年来的研究表明,SV-LAAOs具有明显的影响血小板... 蛇毒(snake venom,SV)是天然的最丰富的蛋白(酶)源之一,而L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)是SV的主要蛋白(酶)组成成份,也是SV重要的活性和毒性蛋白成份,其生物学活性多样。近年来的研究表明,SV-LAAOs具有明显的影响血小板聚集、诱导细胞凋亡、细胞毒性、抑菌活性及抗病毒/HIV活性等生物功能。本文简述了SV-LAAO的酶学和结构特性,综述了SV-LAAO以上生物学作用及其相关作用机制,以期为今后深入研究SV-LAAO提供参考。 展开更多

关键词 蛇毒 l-氨基酸氧化酶 生物学活性

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眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶对人膀胱癌ECV304细胞增殖和细胞周期的影响及机制 被引量：4

14

作者 齐元麟 张明芳 +3 位作者 赵蓉 张旭 吴玲珊 林建银 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1660-1665,共6页

目的研究眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(Naja atra L-a-mino acid oxidase,NA-LAAO)对人膀胱癌细胞株ECV304的生长抑制作用,探讨其作用机制。方法 CCK-8法测定NA-LAAO的细胞毒性及对细胞增殖抑制能力;流式细胞术分析NA-LAAO对ECV304细胞周期... 目的研究眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(Naja atra L-a-mino acid oxidase,NA-LAAO)对人膀胱癌细胞株ECV304的生长抑制作用,探讨其作用机制。方法 CCK-8法测定NA-LAAO的细胞毒性及对细胞增殖抑制能力;流式细胞术分析NA-LAAO对ECV304细胞周期的影响;实时定量PCR和Western blot分析细胞周期相关基因mRNA和蛋白质表达。结果 NA-LAAO对ECV304细胞有强烈抑制作用,且呈剂量-效应和时间-效应关系。NA-LAAO处理6、12、24 h对ECV304的IC50分别为(1.54±0.23)、(1.09±0.15)和(0.48±0.14)mg.L-1;细胞生长曲线显示,0.156 mg.L-1的NA-LAAO作用4 d可明显抑制ECV304细胞增殖;0.313 mg.L-1从d 2起就有明显效果;0.625 mg.L-1处理后细胞多数死亡;流式细胞术分析提示NA-LAAO可使ECV304细胞阻滞在G1期,并呈量效关系;实时定量PCR结果显示,NA-LAAO可下调Cyclin A2、B1、D1、E1、CDK2、CDK6、Survivin、Skp2,上调p21、p16、p27的表达,Western blot结果显示NA-LAAO可下调Cyclin A、CDK2、CDK6,上调p21,与实时PCR结果一致。结论 NA-LAAO可通过调节细胞周期相关分子,使ECV304细胞阻滞在G1期,抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 蛇毒 中华眼镜蛇 l-氨基酸氧化酶 细胞增殖 细胞周期 膀胱癌

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麦洼牦牛初乳期乳腺中2个特异表达EST片段的克隆与分析 被引量：3

15

作者 江明锋 刘勇涛 +3 位作者 李生伟 陈艳 叶煜辉 陈敏 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第5期37-42,共6页

为研究牦牛初乳期乳腺特异表达的基因,采用抑制消减杂交和斑点杂交法对麦洼牦牛初乳期(产犊后2 d)和常乳期(产犊后18 d)特异表达的基因进行了分离鉴定。结果发现2个在初乳期间特异表达的EST片段,并命名为LAO和COL1α1。测序结果LAO片段... 为研究牦牛初乳期乳腺特异表达的基因,采用抑制消减杂交和斑点杂交法对麦洼牦牛初乳期(产犊后2 d)和常乳期(产犊后18 d)特异表达的基因进行了分离鉴定。结果发现2个在初乳期间特异表达的EST片段,并命名为LAO和COL1α1。测序结果LAO片段长698 bp,GenBank比对,其核苷酸序列与西藏黄牛(Bos taurus)、小家鼠(Mus musculus)、家犬(Canis familiaris)等的L-氨基酸氧化酶基因有较高的序列相似性,其序列一致性分别达到96%、73%、72%;COL1α1片段长337 bp,比对结果,其序列与Bos taurus、马鹿(Cervus elaphus)、家犬(Canis lupus fa-miliaris)等的Ⅰ型胶原蛋白α1有较高的序列相似性,其序列一致性分别为100%、100%、99%。2个序列与牛基因组的Blast分析表明,LAO片段定位于3号染色体LOC782545区,该区域编码1个L-氨基酸氧化酶基因;另一片段定位于19号染色体LOC615867区,该区域编码1个Ⅰ型胶原α1基因。研究表明,L-氨基酸氧化酶基因和Ⅰ型胶原蛋白α1基因是牦牛初乳期乳腺特异表达蛋白,这2个基因在牦牛初乳期乳腺组织中较高的表达水平可能与初乳期乳腺特殊的生理状态有关。 展开更多

关键词 麦洼牦牛 乳腺组织 l-氨基酸氧化酶 Ⅰ型胶原蛋白α1 抑制性削减杂交

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眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶的纯化、性质鉴定及细胞毒性测定 被引量：3

16

作者 张明芳 齐元麟 《海峡药学》 2009年第12期217-220,共4页

目的从眼镜蛇蛇毒中分离L-氨基酸氧化酶(LAAO),测定其理化性质及细胞毒性。方法采用Superdex75凝胶层析、Phenyl-SepharoseFF疏水层析、ResourceS离子交换层析分离纯化LAAO;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及C18反相色谱鉴定纯度并测定相对分子... 目的从眼镜蛇蛇毒中分离L-氨基酸氧化酶(LAAO),测定其理化性质及细胞毒性。方法采用Superdex75凝胶层析、Phenyl-SepharoseFF疏水层析、ResourceS离子交换层析分离纯化LAAO;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及C18反相色谱鉴定纯度并测定相对分子量;CCK8法测定细胞毒性。结果舟山眼镜蛇蛇毒经凝胶层析、疏水层析、离子交换层析及C18反相色谱后获得LAAO(暂定名NA-LAAO),在非还原和还原条件下相对分子质量均为58kD左右;具有明显的抑制人胃癌MGC-803细胞增殖作用。结论从眼镜蛇毒中纯化得到LAAO,其具有明显的细胞毒性。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒 l-氨基酸氧化酶 纯化 细胞毒性

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蛇毒L-氨基酸氧化酶的研究进展 被引量：2

17

作者 黄剑钧（综述） 许云禄（审校） 《世界肿瘤杂志》 2009年第2期91-95,共5页

L-氨基酸氧化酶（LAAO）作为蛇毒中的一个重要成分，有着多样的生物学活性，近年来许多文献报道LAAO的生化作用和药理作用，提供了许多关于其对血小板活性、诱导细胞凋亡、细胞毒性、抗菌等方面的资料，本文就蛇毒L-氨基酸氧化酶（SV-L... L-氨基酸氧化酶（LAAO）作为蛇毒中的一个重要成分，有着多样的生物学活性，近年来许多文献报道LAAO的生化作用和药理作用，提供了许多关于其对血小板活性、诱导细胞凋亡、细胞毒性、抗菌等方面的资料，本文就蛇毒L-氨基酸氧化酶（SV-LAAO）的理化性质、生物学特性及其可能的抗肿瘤作用及作用机制作一综述。 展开更多

关键词 蛇毒 l-氨基酸氧化酶 理化性质 生物学活性 抗肿瘤 抗菌作用

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L-氨基酸氧化酶对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响研究 被引量：2

18

作者 张小润 张程 +4 位作者 王晓宇 张湘燕 李敏 叶贤伟 夏婧 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2011年第25期2325-2327,共3页

目的:探讨L-氨基酸氧化酶(LAAO)对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,为临床上寻找新的肺癌治疗方法提供参考。方法:将A549细胞制成浓度为5×104个/mL的细胞悬液,根据LAAO干预浓度的不同,将其分为4组:2.41、4.82、9.64、19.28mg... 目的:探讨L-氨基酸氧化酶(LAAO)对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,为临床上寻找新的肺癌治疗方法提供参考。方法:将A549细胞制成浓度为5×104个/mL的细胞悬液,根据LAAO干预浓度的不同,将其分为4组:2.41、4.82、9.64、19.28mg·mL-1干预组,各组均干预24、48、72h。镜下观察各组细胞形态学改变,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,原位末端标记法检测细胞凋亡指数,另设立阴性对照组进行比较。结果:LAAO对A549细胞增殖的抑制率随时间延长和浓度增加而增加(P<0.05),凋亡指数随时间延长和浓度增加而增加(P<0.05)。结论:LAAO可抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡,且呈时间、剂量依赖性。 展开更多

关键词 l-氨基酸氧化酶 肺腺癌 A549细胞 增殖 凋亡

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竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶(LAAO)基因的克隆及序列分析 被引量：2

19

作者 何光志 邓树轩 +5 位作者 田维毅 王安宇 王平 曹锋 黄高 王文佳 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第10期18-21,共4页

为进一步研制新型的抗肿瘤药物打基础,试验以竹叶青蛇毒毒腺的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增L-氨基酸氧化酶(LAAO)基因,经克隆和测序并通过Blast分析。结果表明:LAAO基因与GenBank中公布序列编码的竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶基因的序列(A... 为进一步研制新型的抗肿瘤药物打基础,试验以竹叶青蛇毒毒腺的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增L-氨基酸氧化酶(LAAO)基因,经克隆和测序并通过Blast分析。结果表明:LAAO基因与GenBank中公布序列编码的竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶基因的序列(AY277739)同源性达98.23%。 展开更多

关键词 竹叶青 l-氨基酸氧化酶(lAAO) 克隆 序列分析

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广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶的分离纯化及体外抗血小板聚集作用 被引量：1

20

作者 王辉 张文宇 +1 位作者 李玉媚 欧和生 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1294-1297,共4页

目的从广西眼镜蛇粗毒中分离纯化L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO),并对其物理、生化性质及体外抗血小板聚集作用进行研究。方法用Sephacryls-200凝胶过滤,DEAE-Sepharose CL-6B离子交换,CM-SepharoseCL-6B离子交换层析法分... 目的从广西眼镜蛇粗毒中分离纯化L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO),并对其物理、生化性质及体外抗血小板聚集作用进行研究。方法用Sephacryls-200凝胶过滤,DEAE-Sepharose CL-6B离子交换,CM-SepharoseCL-6B离子交换层析法分离纯化广西眼镜蛇毒中的LAAO,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳在还原与非还原条件下测定其蛋白分子量,等电聚焦法测定等电点,比浊法测定广西眼镜蛇LAAO对二磷酸腺苷、胶原、凝血酶、花生四烯酸引起的血小板聚集率的影响。结果从广西眼镜蛇毒中分离出的LAAO分子量约为55.2 KD,等电点为7.6;生物活性检测发现,该蛋白不具有磷脂酶A2和精氨酸酯酶活性,无纤溶及出血活性,能明显抑制二磷酸腺苷、胶原、凝血酶、花生四烯酸引起的血小板聚集,并呈明显的正相关。结论分离纯化的广西眼镜蛇毒LAAO为电泳纯,并具有较强的抑制体外血小板聚集作用。 展开更多

关键词 蛇毒 l-氨基酸氧化酶 分离纯化 血小板聚集

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