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L型滑液囊支原体实时荧光定量PCR方法的建立与应用
1
作者
刘子卿
任豆豆
+5 位作者
孙丽红
王娟娟
孟晨晨
周守长
刘冠慧
许金朋
《中国家禽》
北大核心
2024年第7期44-50,共7页
为建立一种快速、灵敏的检测我国优势基因型(L型)滑液囊支原体(MS)的方法,试验针对L型MS vlh A基因核苷酸序列保守区设计引物及Taq Man-MGB探针,将PCR扩增的vlh A基因克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒vlh A-L作为阳性质粒标准品,建立实...
为建立一种快速、灵敏的检测我国优势基因型(L型)滑液囊支原体(MS)的方法,试验针对L型MS vlh A基因核苷酸序列保守区设计引物及Taq Man-MGB探针,将PCR扩增的vlh A基因克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒vlh A-L作为阳性质粒标准品,建立实时荧光定量PCR(q PCR)方法,并检验该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示:该方法特异性良好,与C型MS-H株及其他鸡常见病原不发生交叉反应;重组质粒vlh A-L最小检出浓度为1.94×10^(1) copies/μL;组内和组间重复性变异系数均小于1%;临床样品检测结果与PCR测序结果吻合。研究表明,建立的q PCR方法特异性强、灵敏性高、重复性好,适用于检测我国L型MS感染情况,还可满足监测免疫MS-H株疫苗鸡群L型MS感染的要求。
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关键词
滑液囊支原体
v
l
hA基因
l
型
TAQMAN-MGB探针
实时荧光定量PCR
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职称材料
题名
L型滑液囊支原体实时荧光定量PCR方法的建立与应用
1
作者
刘子卿
任豆豆
孙丽红
王娟娟
孟晨晨
周守长
刘冠慧
许金朋
机构
河北工程大学生命科学与食品工程学院
华裕农业科技有限公司
河北省蛋鸡产业技术研究院
出处
《中国家禽》
北大核心
2024年第7期44-50,共7页
基金
河北省教育厅科学研究项目(BJK2024031)
河北省创新能力提升计划项目(225676150H)
邯郸市科学技术研究与发展计划项目(22313014017)。
文摘
为建立一种快速、灵敏的检测我国优势基因型(L型)滑液囊支原体(MS)的方法,试验针对L型MS vlh A基因核苷酸序列保守区设计引物及Taq Man-MGB探针,将PCR扩增的vlh A基因克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒vlh A-L作为阳性质粒标准品,建立实时荧光定量PCR(q PCR)方法,并检验该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示:该方法特异性良好,与C型MS-H株及其他鸡常见病原不发生交叉反应;重组质粒vlh A-L最小检出浓度为1.94×10^(1) copies/μL;组内和组间重复性变异系数均小于1%;临床样品检测结果与PCR测序结果吻合。研究表明,建立的q PCR方法特异性强、灵敏性高、重复性好,适用于检测我国L型MS感染情况,还可满足监测免疫MS-H株疫苗鸡群L型MS感染的要求。
关键词
滑液囊支原体
v
l
hA基因
l
型
TAQMAN-MGB探针
实时荧光定量PCR
Keywords
Mycop
l
asma
synoviae
v
l
hA
gene
l
genetype
TaqMan-MGB
probe
quantitative
rea
l
-time
PCR
分类号
S855.1 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
L型滑液囊支原体实时荧光定量PCR方法的建立与应用
刘子卿
任豆豆
孙丽红
王娟娟
孟晨晨
周守长
刘冠慧
许金朋
《中国家禽》
北大核心
2024
0
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