目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及分化相关基因表达的影响,探讨其可能的机制。方法:分离体外培养的SD大鼠胸腹主动脉VSMCs,分为空白对照组和不同浓度PDGF-BB处理组。分别采用MTT法、流式细胞术和...目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及分化相关基因表达的影响,探讨其可能的机制。方法:分离体外培养的SD大鼠胸腹主动脉VSMCs,分为空白对照组和不同浓度PDGF-BB处理组。分别采用MTT法、流式细胞术和伤口愈合实验检测PDGF-BB对VSMCs增殖、细胞周期和迁移活性的影响;用W estern b lotting分析检测VSMCs表型标志物的表达;用免疫沉淀和免疫共沉淀分析检测Krüppel样因子4(KLF4)磷酸化及与其它转录因子的相互作用。结果:PDGF-BB促进VSMCs增殖和迁移;上调增殖相关蛋白PCNA的表达,下调增殖抑制蛋白p27、分化相关蛋白SM22α的表达。PDGF-BB诱导KLF4的表达和磷酸化,促进KLF4与NF-κB的相互作用,抑制KLF4与Sm ad3、HDAC2的结合。结论:PDGF-BB可能通过影响KLF4磷酸化及其与不同转录调节因子的相互作用而诱导VSMCs表型转化。展开更多
目的探讨乳腺癌组织中miRNA-92a、KLF4 mRNA的表达及与临床病理参数、预后的关系。方法选取2014年1月—2016年9月长沙市第一医院乳甲外科收治的124例乳腺癌患者。qRT-PCR检测癌组织和距离>5 cm的癌旁组织中miR-92a、KLF4 m RNA表达;P...目的探讨乳腺癌组织中miRNA-92a、KLF4 mRNA的表达及与临床病理参数、预后的关系。方法选取2014年1月—2016年9月长沙市第一医院乳甲外科收治的124例乳腺癌患者。qRT-PCR检测癌组织和距离>5 cm的癌旁组织中miR-92a、KLF4 m RNA表达;Pearson相关性分析乳腺癌组织中miR-92amRNA表达与KLF4 m RNA表达的相关性;绘制不同miR-92a、KLF4 mRNA表达乳腺癌患者的生存曲线;多因素Cox回归分析乳腺癌患者预后不良影响因素。结果癌组织miR-92a、KLF4 mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,乳腺癌组织中miR-92a与KLF4 mRNA表达呈正相关(r=0.612,P<0.05)。临床分期Ⅲ、Ⅳ期和有淋巴结转移患者的miR-92a、KLF4 mRNA表达水平高于临床分期Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移患者(P<0.05)。不同年龄、肿瘤直径、分化程度、雌激素受体、孕激素受体患者miR-92a、KLF4 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-92a、KLF4 mRNA相对表达量高表达患者累积生存率低于低表达患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,临床分期Ⅲ、Ⅳ期[HR=3.716(95%CI:1.765,7.826)]、淋巴结转移[HR=3.021(95%CI:1.341,6.803)]、miR-92a≥1.627[HR=3.401(95%CI:1.358,8.515)]、KLF4 mRNA≥2.270[HR=2.059(95%CI:1.026,4.133)]是乳腺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论乳腺癌组织中miR-92a、KLF4 m RNA高表达与临床分期、淋巴结转移有关,可能成为乳腺癌预后的标志物。展开更多
文摘目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及分化相关基因表达的影响,探讨其可能的机制。方法:分离体外培养的SD大鼠胸腹主动脉VSMCs,分为空白对照组和不同浓度PDGF-BB处理组。分别采用MTT法、流式细胞术和伤口愈合实验检测PDGF-BB对VSMCs增殖、细胞周期和迁移活性的影响;用W estern b lotting分析检测VSMCs表型标志物的表达;用免疫沉淀和免疫共沉淀分析检测Krüppel样因子4(KLF4)磷酸化及与其它转录因子的相互作用。结果:PDGF-BB促进VSMCs增殖和迁移;上调增殖相关蛋白PCNA的表达,下调增殖抑制蛋白p27、分化相关蛋白SM22α的表达。PDGF-BB诱导KLF4的表达和磷酸化,促进KLF4与NF-κB的相互作用,抑制KLF4与Sm ad3、HDAC2的结合。结论:PDGF-BB可能通过影响KLF4磷酸化及其与不同转录调节因子的相互作用而诱导VSMCs表型转化。