结直肠癌中TXNIP和KLF9的表达对患者临床特征及预后的影响

1

作者 杨婕琳 王晓媛 武雪亮 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第11期1005-1011,共7页

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)和Krüppel样转录因子9(KLF9)的表达对患者临床特征及预后的影响。方法选取2017年1月至2020年12月在我院初诊为CRC并手术治疗的患者90例,收集手术切除的癌组织及配对癌旁... 目的探讨结直肠癌(CRC)组织中硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)和Krüppel样转录因子9(KLF9)的表达对患者临床特征及预后的影响。方法选取2017年1月至2020年12月在我院初诊为CRC并手术治疗的患者90例,收集手术切除的癌组织及配对癌旁组织。采用免疫组织化学法检测组织中TXNIP、KLF9蛋白表达水平,用Spearman法分析CRC组织中TXNIP、KLF9表达的相关性,分析CRC组织TXNIP、KLF9蛋白表达与患者临床特征的关系,用Kaplan-Meier生存曲线分析CRC组织TXNIP、KLF9蛋白表达与总生存率的相关性,用Cox回归分析CRC患者预后影响因素。结果直肠腺癌(READ)TXNIP、KLF9 mRNA表达水平明显低于正常组织(P<0.05),且TXNIP、KLF9不同表达水平与READ患者总生存率无关(P>0.05)。CRC癌组织TXNIP阳性表达率(32.22%)、KLF9阳性表达率(37.78%)明显低于癌旁组织(73.33%、76.67%)(P<0.05)。Spearman分析发现,CRC组织中TXNIP与KLF9阳性表达率显著相关(r=0.519,P<0.05);Spearman分析结果显示,TXNIP与KLF9表达呈正相关(P<0.05)。临床分期为Ⅲ期、淋巴结发生转移的患者TXNIP、KLF9阳性表达率低于Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结无转移者(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,TXNIP阳性表达患者总生存率(89.66%)高于阴性表达患者(67.21%),KLF9阳性表达患者总生存率(88.24%)高于阴性表达患者(66.07%)(P<0.05)。多因素Cox回归发现,TNM分期为Ⅲ期(HR=2.752,95%CI:1.531~4.944)、TXNIP表达阴性(HR=2.036,95%CI:1.254~3.302)、KLF9表达阴性(HR=1.862,95%CI:1.236~2.804)是预后危险因素(P<0.05)。结论TXNIP、KLF9在CRC组织中低表达,且与TNM分期、淋巴结转移及较差的生存率有关。 展开更多

关键词 结直肠癌 硫氧还蛋白相互作用蛋白 krüppel样转录因子9 临床特征 预后

下载PDF 职称材料

地奥司明片联合医用弹力袜对非手术下肢静脉曲张患者股静脉超声参数、凝血纤溶参数及预后的影响 被引量：6

2

作者 孙东辉 李治 +4 位作者 宋郁 张新漉 胡粉英 闫磊 田一童 《临床误诊误治》 CAS 2022年第11期22-26,共5页

目的探讨地奥司明片联合医用弹力袜对非手术下肢静脉曲张患者股静脉超声参数、凝血纤溶参数及预后的影响。方法选取2018年1月—2021年1月收治的126例非手术下肢静脉曲张为研究对象,根据治疗方法不同分为研究组和对照组,每组63例。对照... 目的探讨地奥司明片联合医用弹力袜对非手术下肢静脉曲张患者股静脉超声参数、凝血纤溶参数及预后的影响。方法选取2018年1月—2021年1月收治的126例非手术下肢静脉曲张为研究对象,根据治疗方法不同分为研究组和对照组,每组63例。对照组给予医用弹力袜,研究组给予地奥司明片联合医用弹力袜,均治疗3个月。统计2组临床表现-病因学-解剖学-病理生理学(CEAP)分级、不良反应、复发率,以及治疗前后股静脉超声参数[血流峰速度(Vp)、血流量(Bf)、血流平均速度(Va)]、凝血纤溶参数[纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)]、血管内皮功能指标[锌指Krüppel样转录因子2(KLF2)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)]、静脉临床严重程度评分(VCSS)及视觉模拟评分法(VAS)评分。结果治疗1、3个月时,研究组C0级、C1级所占比例高于对照组(P<0.05)。治疗1、3个月时,研究组股静脉Vp、Bf、Va高于对照组,VCSS和VAS评分低于对照组(P<0.05)。治疗1、3个月时,研究组D-D、FIB、ET-1水平低于对照组,t-PA、NO、KLF2水平高于对照组(P<0.05)。2组不良反应发生率及复发率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论地奥司明片联合医用弹力袜有利于控制非手术下肢静脉曲张患者症状,纠正凝血纤溶功能紊乱,改善股静脉超声参数及血管内皮功能,且安全性高。 展开更多

关键词 下肢静脉曲张 医用弹力袜 地奥司明 血流峰速度 血流量 纤维蛋白原 D-二聚体 锌指krüppel样转录因子2

下载PDF 职称材料

转录因子Klf2和Nrf2/Bach1调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在气道上皮细胞中的作用 被引量：3

3

作者 黄畅宇 戴爱国 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2012年第1期23-27,共5页

目的通过研究锌指Krüppel样转录因子2(Klf2)及红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)/BTB-CNC异体同源体1(Bach1)在经香烟烟雾提取物(CSE)刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达,了解其感受氧化应激对靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)的调... 目的通过研究锌指Krüppel样转录因子2(Klf2)及红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)/BTB-CNC异体同源体1(Bach1)在经香烟烟雾提取物(CSE)刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达,了解其感受氧化应激对靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)的调控作用。方法采用酶消化法提取大鼠原代气管-支气管上皮细胞,并用10%CSE干预细胞6 h,收集细胞,双酶法检测γ-GCS活性;通过免疫细胞化学法观察Nrf2/Bach1的核转位;采用Western blot和RT-PCR技术研究细胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表达。结果大鼠气管-支气管上皮细胞经CSE诱导后其γ-GCS活性明显增高。免疫细胞化学结果显示Nrf2经CSE刺激后出现由核外向核内的转位,Bach1经CSE刺激后出现由核内向核外的转位。Western blot结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白水平较对照组显著升高(P<0.05);RT-PCR结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS mRNA水平较对照组显著升高(P<0.05)。直线相关分析表明γ-GCS蛋白表达与Klf2、Nrf2、Bach1呈正相关(P<0.05)。结论 CSE可能通过转录因子Klf2、Nrf2、Bach1调节γ-GCS的表达。 展开更多

关键词 香烟烟雾提取物 锌指krüppel样转录因子2 红系衍生核因子相关因子2 BTB-CNC异体同源体1 Γ-谷氨酰半胱氨酸合酶

下载PDF 职称材料

苦参碱通过miR-25-3p介导Klf4途径抑制TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞炎症反应 被引量：2

4

作者 向紫萍 李妍洁 +3 位作者 马欢 王杏 张会欣 王超 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期4731-4737,共7页

研究苦参碱对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)炎症反应的影响,探讨其机制是否与miR-25-3p介导Krüppel样转录因子4(Krüppel like tr... 研究苦参碱对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)炎症反应的影响,探讨其机制是否与miR-25-3p介导Krüppel样转录因子4(Krüppel like transcription factor 4,Klf4)途径有关。以TNF-α诱导建立HUVECs炎症模型。不同浓度苦参碱(0.625、1.25、2.5 mmol·L^(-1))作用24、48 h后,CCK-8方法检测细胞增殖。2.5 mmol·L^(-1)苦参碱处理48 h后采用实时荧光定量PCR检测TNF-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、Klf4 mRNA表达和miR-25-3p表达,免疫印迹法检测TNF-α、IL-6、IL-1β、Klf4蛋白表达。转染anti-miR-25-3p至HUVECs,上述方法检测miR-25-3p对TNF-α诱导的细胞增殖及相关炎症因子的表达。进一步转染miR-25-3p至细胞,与苦参碱共同孵育,检测增殖及炎症因子、miR-25-3p和Klf4表达的变化。生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验验证miR-25-3p与Klf4靶向关系。结果显示,苦参碱能抑制TNF-α诱导的HUVECs增殖,降低TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA和蛋白表达,提高Klf4 mRNA和蛋白表达、降低miR-25-3p表达;生物信息学分析显示,miR-25-3p与Klf4的序列存在特异性互补结合位点,双荧光素酶活性报告实验证实miR-25-3p在HUVECs中靶向负调控Klf4表达;抑制miR-25-3p表达可降低TNF-α诱导的细胞增殖、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA和蛋白表达;过表达miR-25-3p能够逆转苦参碱对TNF-α诱导的细胞增殖及TNF-α、IL-6、IL-1β、Klf4 mRNA和蛋白表达的作用。实验结果表明苦参碱通过miR-25-3p介导Klf4途径抑制TNF-α诱导的HUVECs炎症反应。 展开更多

关键词 苦参碱 人脐静脉内皮细胞 炎症反应 miR-25-3p krüppel样转录因子4

原文传递

LncRNA XIST沉默对非酒精性脂肪肝小鼠T细胞免疫功能的作用机制

5

作者 方金鸣 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期769-776,共8页

目的探讨长链非编码RNA XIST(LncRNA XIST)调节微小RNA-137-3p(miR-137-3p)/Krüppel样转录因子2(KLF2)轴对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠T细胞免疫功能的影响。方法建立NAFLD小鼠模型,检测脾脏CD4+T、CD8+T细胞及细胞中LncRNA XIST表... 目的探讨长链非编码RNA XIST(LncRNA XIST)调节微小RNA-137-3p(miR-137-3p)/Krüppel样转录因子2(KLF2)轴对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠T细胞免疫功能的影响。方法建立NAFLD小鼠模型,检测脾脏CD4+T、CD8+T细胞及细胞中LncRNA XIST表达,将CD4+T细胞分为si-NC组、si-XIST组、si-XIST+anti-NC组及si-XIST+anti-miR-137-3p组,分别检测LncRNA XIST、miR-137-3p和KLF2表达水平、细胞增殖与凋亡;将各组转染的CD4+T细胞与人肝细胞HL-7702共培养,分别检测TGF-β1、IL-10、IFN-γ、IL-17水平及Th17、Treg细胞比例;双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA XIST、KLF2与miR-137-3p靶向关系。结果NAFLD组小鼠CD4+T细胞比例显著升高,CD8+T细胞比例显著降低(P<0.05),且LncRNA XIST在CD4+T细胞中表达水平显著升高(P<0.05);抑制LncRNA XIST表达可显著抑制CD4+T细胞增殖,诱导细胞凋亡,诱导CD4+T细胞TGF-β1、IL-10分泌,抑制IFN-γ、IL-17水平,升高Treg细胞比例,降低Th17细胞比例;抑制miR-137-3p表达可逆转抑制LncRNA XIST表达对CD4+T细胞的影响;双荧光素酶报告基因实验证实,LncRNA XIST可调控miR-137-3p表达,KLF2是miR-137-3p下游靶点。结论LncRNA XIST在NAFLD小鼠CD4+T细胞中表达水平升高,抑制LncRNA XIST表达可通过调节miR-137-3p/KLF2信号轴,调节炎性因子分泌,升高Treg细胞比例,降低Th17细胞比例。 展开更多

关键词 长链非编码RNA XIST 微小RNA-137-3p krüppel样转录因子2 非酒精性脂肪肝 细胞免疫

下载PDF 职称材料

Krüppel样转录因子8在肝细胞癌中经PI3K/Akt通路调控VEGFA的表达 被引量：19

6

作者 成撒诺 徐亚丽 +5 位作者 戴晓波 李英 张涛 陈晓品 李甲初 张幸平 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1075-1081,共7页

目的 :探讨肝细胞癌中Krüppel样转录因子8(Krüppel-like transcription factor 8,KLF8)对血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)表达的调控作用及其可能的分子机制。方法 :采用免疫组织化学染色法... 目的 :探讨肝细胞癌中Krüppel样转录因子8(Krüppel-like transcription factor 8,KLF8)对血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)表达的调控作用及其可能的分子机制。方法 :采用免疫组织化学染色法检测配对的肝细胞癌及癌旁组织中KLF8与VEGFA的表达,分析两蛋白表达水平之间的相关性。将重组质粒pc DNA3.1-KLF8及其对照质粒分别转染人肝癌SMMC7721细胞后,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测SMMC7721细胞中VEGFA及磷酯酰肌醇3激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)/Akt通路相关蛋白磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)、磷酸化磷酸肌醇依赖激酶1(phospho-phosphoinositide-dependent kinase 1,p-PDK1)和磷酸化染色体10缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(phospho-phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,p-PTEN)的表达水平;同时,蛋白质印迹法检测PI3K/Akt通路抑制剂LY294002对过表达KLF8的SMMC7721细胞中VEGFA蛋白表达的作用。采用鸡胚绒毛尿囊膜模型检测上调KLF8表达的SMMC7721细胞对鸡胚血管生成的诱导作用。结果 :与癌旁组织相比,KLF8与VEGFA蛋白在肝细胞癌组织中表达水平均明显升高(P<0.01)。肝癌组织中,KLF8与VEGFA蛋白表达之间具有正相关性(r=0.622,P<0.01)。与对照组相比,转染pc DNA3.1-KLF8的SMMC7721细胞中,KLF8、VEGFA、p-Akt、p-PDK1和p-PTEN蛋白的表达水平均升高(P<0.05);LY294002可抑制KLF8过表达的SMMC7721细胞中VEGFA的表达(P<0.05)。上调KLF8表达的SMMC7721细胞具有更强的诱导鸡胚血管生长的作用(P<0.01)。结论 :KLF8基因在肝细胞癌中可能通过PI3K/Akt信号通路诱导VEGFA的表达,进而调控肿瘤血管新生。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 krüppel样转录因子类 血管内皮生长因子A 新生血管化 病理性

原文传递

Kuippel样因子6经活化转录因子4通路对晶状体上皮细胞凋亡的调控作用 被引量：8

7

作者 田芳 赵今稚 +8 位作者 滕贺 黄亮瑜 刘勋 苏睿虹 高美子 张晓敏 李筱荣 东莉洁 张红 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期181-186,共6页

目的以活化转录因子4（ATF4）为靶点，探讨Krüppel样因子6（KLF6）调控紫外线B（UVB）诱导的晶状体上皮细胞（HLECs）凋亡的分子机制。方法HLECs系（HLE-B3）进行常规培养，采用脂质体转染法将构建的真核表达质粒pEGFP-C2-ATF4转染... 目的以活化转录因子4（ATF4）为靶点，探讨Krüppel样因子6（KLF6）调控紫外线B（UVB）诱导的晶状体上皮细胞（HLECs）凋亡的分子机制。方法HLECs系（HLE-B3）进行常规培养，采用脂质体转染法将构建的真核表达质粒pEGFP-C2-ATF4转染HLECs作为UVB＋ATF4转染组，并用能量密度为20 mJ/cm2的UVB照射细胞；未转染的ATF4细胞作为正常对照组。采用苏木精－伊红染色法和Hoechst染色法观察ATF4对HLECs细胞形态学的影响。将培养的细胞分为KLF6转染组及相应空质粒对照组，小干扰KLF6（siKLF6）组（转染pSilencer-KLF6质粒）及相应的空载体对照组（转染pSilencer空质粒），采用Western blot法检测细胞中ATF4蛋白的相对表达量。将培养的细胞分为4个组，联合空载体组HLECs联合转染pEGFP-C2空载体和pSilencer空载体；KLF6＋pSilencer空质粒组HLECs联合转染pEGFP-C2-KLF6和pSilencer空载体；小干扰ATF4（siATF4）＋pEGFP-C2组HLECs联合转染pEGFP-C2空载体和pSilencer-ATF4；KLF6＋siATF4组HLECs联合转染pEGFP-C2-KLF6和pSilencer-ATF4，各组细胞均暴露于UVB 200 s，采用ELISA法检测上述各组HLECs凋亡值。结果正常对照组培养的HLECs大小均匀，排列整齐，细胞核呈卵圆形，数量多且完整；UVB照射后部分细胞核固缩，细胞间隙增大，少数细胞出现核分裂；UCB＋ATF4转染组细胞数量减少，多数细胞出现核固缩和核分裂。UVB＋ATF4转染组细胞中ATF4蛋白表达条带灰度明显强于UVB＋空载体组，ATF4蛋白相对表达量分别为0.99±0.06和0.13±0.02，差异有统计学意义（t＝23.13，P〈0.01）。KLF6转染组细胞中KLF6和ATF4蛋白相对表达量均明显高于其空载体对照组，siKLF6组细胞中KLF6和ATF4蛋白相对表达量均明显低于其空载体对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。ELISA检测显示ATF4转染组HLECs凋亡值为1.37±0.11，明显高于正常对照组的0.31±0.11，差异有统计学意 展开更多

关键词 Kuippel样因子6 kruppel样转录因子/代谢 活化转录因子4 晶状体上皮细胞 晶状体 细胞株 人 凋亡

下载PDF 职称材料

慢性阻塞性肺疾病大鼠转录因子KLF2对Nrf2调控γ-GCS表达的影响 被引量：4

8

作者 刘晓燕 戴爱国 +2 位作者 胡瑞成 朱黎明 谭双香 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期173-178,I0003,共7页

目的:研究肺Krüppel样转录因子(KLF2/LKLF)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中的表达,探讨KLF2与红系衍生因子2(Nrf2)之间的关系以及对抗氧化酶γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)表达的影响。方法:复制大鼠COPD模型,应用免疫组化、... 目的:研究肺Krüppel样转录因子(KLF2/LKLF)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中的表达,探讨KLF2与红系衍生因子2(Nrf2)之间的关系以及对抗氧化酶γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)表达的影响。方法:复制大鼠COPD模型,应用免疫组化、Western blot、原位杂交和RT-PCR方法检测KLF2、Nrf2、γ-GCS蛋白及mRNA的表达,并行相关分析。同时利用免疫共沉淀技术(CO-IP)研究KLF2与Nrf2蛋白之间的相互关系。结果:免疫组化及Western blot结果显示COPD组KLF2、Nrf2、γ-GCS蛋白水平较对照组明显升高(P<0.05);原位杂交及RT-PCR显示KLF2、γ-GCS mRNA水平在COPD组显著高于对照组(P<0.01),而Nrf2 mRNA在两组表达无明显差异(P>0.05);CO-IP结果显示在Nrf2抗体捕获的免疫沉淀中,KLF2抗体可杂交出明显的蛋白条带(P<0.01);直线相关分析发现KLF2蛋白与Nrf2蛋白呈正相关(P<0.05),KLF2、Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白及mRNA均呈正相关(均P<0.05)。结论:KLF2在COPD肺组织中表达上调,可能通过活化Nrf2,促进Nrf2核积聚上调γ-GCS的基因表达,在氧化失衡中发挥作用。 展开更多

关键词 肺疾病 慢性阻塞性 肺krüppel样转录因子 红系衍生核因子相关因子2 Γ-谷氨酰半胱氨酸合酶

下载PDF 职称材料

miR-216a-5p靶向KLF12对肝癌细胞放射敏感性的影响

9

作者 徐毅 黄远东 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期56-61,共6页

目的探究miR-216a-5p靶向Krüppel样转录因子12(KLF12)对肝癌细胞放射敏感性的影响。方法实时反转录PCR(RT-qPCR)检测人正常肝细胞L-02,人肝癌细胞Huh7、HepG2、Hep3B、MHCC-97H中miR-216a-5p、KLF12 mRNA水平并比较。采用0、2、4、... 目的探究miR-216a-5p靶向Krüppel样转录因子12(KLF12)对肝癌细胞放射敏感性的影响。方法实时反转录PCR(RT-qPCR)检测人正常肝细胞L-02,人肝癌细胞Huh7、HepG2、Hep3B、MHCC-97H中miR-216a-5p、KLF12 mRNA水平并比较。采用0、2、4、6、8 Gy X射线照射HepG2细胞2 h,比较不同剂量照射组间的miR-216a-5p、KLF12 mRNA水平。采用质粒转染构建miR-216a-5p和/或KLF12过表达的HepG2细胞,并给予4 Gy X射线照射2 h。相应的分组为miR-NC(对照)组、miR-216a-5p组、miR-216a-5p+NC组、miR-216a-5p+KLF12组、IR+miR-NC组、IR+miR-216a-5p组、IR+miR-216a-5p+NC组、IR+miR-216a-5p+KLF12组,比较分组间的miR-216a-5p、KLF12 mRNA水平。克隆形成实验检测细胞放射敏感性;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果与L-02细胞相比,肝癌细胞系中KLF12 mRNA水平升高,miR-216a-5p水平降低(P<0.05)。与0 Gy组相比,2、4、6、8 Gy组KLF12 mRNA水平降低,miR-216a-5p水平升高(P<0.05)。过表达miR-216a-5p或放射处理能够增强细胞放射敏感性和凋亡水平,并降低细胞增殖水平(P<0.05);且过表达miR-216a-5p同时放射处理对细胞上述效果更加明显(P<0.05)。过表达KLF12能部分逆转过表达miR-216a-5p对细胞的上述效果(P<0.05)。结论 miR-216a-5p通过调控KLF12降低细胞增殖能力,增强细胞放射敏感性和细胞凋亡。 展开更多

关键词 肝肿瘤 krüppel样转录因子12 miR-216a-5p 放射敏感性

原文传递

携带小鼠KLF4基因重组慢病毒的构建及对RAW264.7细胞增殖的影响 被引量：1

10

作者 杨红艳 李鑫 +5 位作者 向国安 王如刚 蔡卫红 罗虎 梁婧 姬文婕 《天津医药》 CAS 北大核心 2018年第1期1-6,共6页

目的构建小鼠Krüppel样因子4(KLF4)慢病毒表达载体,并建立KLF4过表达小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7细胞株。方法采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因KLF4后,构建重组质粒p LVX-KLF4,并通过PCR、双酶切和测序方法对其进行鉴定。重... 目的构建小鼠Krüppel样因子4(KLF4)慢病毒表达载体,并建立KLF4过表达小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7细胞株。方法采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因KLF4后,构建重组质粒p LVX-KLF4,并通过PCR、双酶切和测序方法对其进行鉴定。重组质粒与p SPAX2、p MD2.G辅助质粒通过Lipofectamine~?3000共转染293T细胞,包装病毒并测定病毒滴度。将获得的慢病毒感染RAW264.7细胞,实时定量PCR法检测KLF4 m RNA的表达。分选流式细胞仪分选GFP阳性RAW264.7细胞。流式细胞术检测KLF4对RAW264.7细胞周期的影响。Ed U法检测KLF4对RAW264.7细胞增殖的影响。结果经PCR、双酶切鉴定和测序证实,成功构建了包含小鼠KLF4基因的慢病毒穿梭质粒,RT-PCR证实Lenti-KLF4感染的RAW264.7细胞中KLF4 m RNA表达高于未感染的对照组RAW264.7细胞(P<0.05)。初次浓缩后测定小鼠KLF4基因重组慢病毒的滴度为2.05×10~8TU/m L。分选出KLF4过表达的RAW264.7细胞。KLF4过表达的RAW264.7细胞周期变化显示为S期延长,G0/G1期缩短。Ed U检测显示KLF4过表达的RAW264.7细胞增殖活性增高。结论成功构建了KLF4的慢病毒表达载体,并建立KLF4过表达的RAW264.7细胞株,KLF4过表达促进了RAW264.7细胞的增殖。 展开更多

关键词 krüppel样转录因子类 慢病毒感染 遗传载体 细胞周期 细胞增殖 krüppel样因子4

下载PDF 职称材料

急性脑梗死患者血清C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1、锌指样转录因子2水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的分析

11

作者 仉达 费彦达 《心脑血管病防治》 2024年第6期17-20,34,共5页

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清中C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(CTRP1)、锌指样转录因子2(KLF2)的表达水平及其与颈动脉粥样硬化(CAS)斑块稳定性的关系。方法收集黑龙江省传染病防治院分院2021年6月至2023年1月期间进行治疗的128例ACI患... 目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清中C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(CTRP1)、锌指样转录因子2(KLF2)的表达水平及其与颈动脉粥样硬化(CAS)斑块稳定性的关系。方法收集黑龙江省传染病防治院分院2021年6月至2023年1月期间进行治疗的128例ACI患者作为ACI组,根据ACI患者CAS斑块的特性,将患者分为无斑块组19例,稳定斑块组45例和不稳定斑块组64例,另选取128例同期健康体检者作为对照组。比较各组血清CTRP1、KLF2水平;Spearman法分析ACI组患者血清CTRP1、KLF2水平与CAS斑块稳定性的相关性;多因素Logistic回归分析ACI患者CAS斑块稳定性的影响因素;受试者工作特征曲线分析血清CTRP1、KLF2水平对ACI患者CAS斑块不稳定性的预测价值。结果与对照组相比,ACI组血清CTRP1水平较高、KLF2水平较低(t=15.949、78.545,P<0.01)。无斑块组、稳定斑块组、不稳定斑块组血清CTRP1、中性粒细胞计数、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分依次升高(F=49.819、27.014、17.143、335.582,P<0.01);KLF2水平依次降低(F=127.385,P<0.01)。ACI组患者CTRP1水平与CAS斑块稳定性呈正相关(r=0.532,P<0.01);KLF2水平与CAS斑块稳定性呈负相关(r=-0.614,P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示CTRP1、KLF2、LDL-C、中性粒细胞计数、NIHSS评分是ACI患者CAS斑块稳定性的影响因素[OR(95%CI)=3.154(1.533~6.488)、0.763(0.648~0.898)、2.373(1.328~4.239)、2.148(1.278~3.611)、2.723(1.355~5.471),P<0.01]。CTRP1、KLF2两者联合预测ACI患者CAS斑块不稳定性的曲线下面积为0.897,敏感度为90.62%,特异度为75.56%,优于单独预测(Z=2.585、2.237,P<0.05)。结论ACI患者血清CTRP1水平较高,KLF2水平较低,两者均与ACI患者CAS斑块稳定性相关,且两者联合对ACI患者CAS斑块不稳定性具有较好的预测效能。 展开更多

关键词 C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1 锌指样转录因子2 急性脑梗死 颈动脉粥样硬化 斑块稳定性

下载PDF 职称材料

检测miR-141和KLF9在非小细胞肺癌中的表达水平及对细胞的增殖和侵袭的影响 被引量：3

12

作者 马玲 李海明 +3 位作者 翟展艺 赵冲 李宁宁 年立全 《临床肺科杂志》 2021年第5期762-766,共5页

目的检测miR-141和Krüppel样转录因子9(Kruppel like transcription factor 9,KLF9)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达水平,及对NSCLC细胞增殖和侵袭的影响。方法收集2017年5月至2019年5月在我... 目的检测miR-141和Krüppel样转录因子9(Kruppel like transcription factor 9,KLF9)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达水平,及对NSCLC细胞增殖和侵袭的影响。方法收集2017年5月至2019年5月在我院接受手术治疗的62例NSCLC患者的肿瘤组织和癌旁组织;qRT-PCR检测miR-141和KLF9 mRNA相对表达水平;荧光素酶报告基因分析miR-141与KLF9的靶向关系;转染实验将对照质粒和KLF9质粒转染至H460细胞中;MTT实验检测对照组和KLF9组细胞的增殖情况;侵袭实验检测对照组和KLF9组细胞的侵袭情况。结果NSCLC组织中miR-141的表达水平2.21±0.26显著高于癌旁组织1.04±0.27(t=24.720,P<0.001),KLF9的表达水平0.56±0.14显著低于癌旁组织1.21±0.23(t=19.418,P<0.001),miR-141和KLF9 mRNA相对表达水平呈负相关(r=-0.318,P=0.012);miR-141可靶向结合KLF9;H460、H1650、H1299细胞中KLF9 mRNA的相对表达水平低于人正常支气管上皮细胞,且H460中KLF9 mRNA的表达水平最低;对照质粒和KLF9质粒成功转染至H460细胞中,KLF9组细胞中KLF9 mRNA的表达水平显著高于对照组;培养72h后KLF9组细胞OD值为0.80±0.07,显著低于对照组细胞OD值1.56±0.06(t=6.041,P<0.001)。细胞培养48h后KLF9组发生侵袭的细胞数为45.2±5.3,明显低于对照组发生侵袭的细胞数72.5±6.8(t=4.965,P=0.008)。结论miR-141可靶向结合KLF9,增加KLF9的表达水平后可显著抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-141 krüppel样转录因子9

下载PDF 职称材料

锌指样转录因子2在冠心病患者血清中的含量及意义 被引量：4

13

作者 周晓斌 刘莉 +2 位作者 李永光 孙俊 陈寅 《中国心血管杂志》 2018年第5期402-404,共3页

目的检测锌指样转录因子2(KLF2)在冠心病患者血清中的含量,并探讨其临床意义。方法入选2013—2016年武警云南总队医院和圣·约翰医院共79例住院患者,根据冠状动脉造影、颈动脉超声、急性冠状动脉综合征发作和他汀使用情况分为不稳... 目的检测锌指样转录因子2(KLF2)在冠心病患者血清中的含量,并探讨其临床意义。方法入选2013—2016年武警云南总队医院和圣·约翰医院共79例住院患者,根据冠状动脉造影、颈动脉超声、急性冠状动脉综合征发作和他汀使用情况分为不稳定斑块组45例、稳定斑块组15例和对照组19例。用ELISA法检测患者血清中KLF2含量。结果与对照组相比,不稳定斑块组+稳定斑块组的KLF2含量明显降低[(0. 88±0. 75) pg/ml比(5. 04±3. 07) pg/ml,P <0. 01]。KLF2在不稳定斑块组中的含量较稳定斑块组低[(0. 59±0. 22) pg/ml比(1. 77±1. 05) pg/ml,P <0. 01]。KLF2含量与斑块稳定性呈正相关(r=0. 534,P <0. 01)。结论血清KLF2含量的降低可能与冠心病及斑块稳定性有关。 展开更多

关键词 锌指样转录因子2 冠状动脉疾病 不稳定斑块

下载PDF 职称材料

血清KLF2、S1P1水平与川崎病患儿冠状动脉损伤的相关性研究

14

作者 夏琨 张勇 周丹 《中华全科医学》 2024年第10期1714-1717,共4页

目的探究锌指样转录因子2(KLF2)、1磷酸鞘氨醇受体1(S1P1)水平与川崎病患儿冠状动脉损伤的相关性,以及冠状动脉损伤发生的相关危险因素。方法选择华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院2021年12月—2023年12月收治的120例川崎病患儿... 目的探究锌指样转录因子2(KLF2)、1磷酸鞘氨醇受体1(S1P1)水平与川崎病患儿冠状动脉损伤的相关性,以及冠状动脉损伤发生的相关危险因素。方法选择华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院2021年12月—2023年12月收治的120例川崎病患儿作为研究对象,检测血清KLF2、S1P1水平,评估患儿是否存在冠状动脉损伤及其程度,分析血清KLF2、S1P1水平与冠状动脉损伤之间的关系。结果冠状动脉损伤患儿血清KLF2、S1P1水平低于无冠状动脉损伤[(2.48±0.72)pg/mL vs.(4.29±0.92)pg/mL;(287.65±42.88)ng/mL vs.(427.64±52.86)ng/mL,P<0.01];冠状动脉扩张组血清KLF2、S1P1水平高于小中型冠状动脉瘤组、巨大冠状动脉瘤组患儿,小中型冠状动脉瘤组血清KLF2、S1P1水平高于巨大冠状动脉瘤组患儿;血清KLF2、S1P1水平与冠状动脉损伤程度呈负相关关系(r=-0.522、-0.634,P=0.003、<0.001);多元logistic回归分析,结果显示发热病程、白细胞计数、KLF2、S1P1均为患儿冠状动脉损伤的影响因素(P<0.05)。结论川崎病冠状动脉损伤患儿血清KLF2、S1P1水平下降,且下降程度与冠状动脉损伤程度密切相关,发热病程、白细胞计数、KLF2、S1P1水平是患者冠状动脉损伤的影响因素。 展开更多

关键词 川崎病 冠状动脉损伤 锌指样转录因子2 1磷酸鞘氨醇受体1

原文传递

Krüppel样因子4在肿瘤发生、发展中的作用 被引量：2

15

作者 修英杰 张声 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2011年第2期172-176,共5页

Krüppel样因子4(Krüppel-like factor4,KLF4)是含有3个锌指结构的转录因子,在细胞微环境中参与不同的细胞信号网络,调控靶基因的转录活化或抑制,与细胞的增殖分化、诱导型多能干细胞的生成有关,具有癌基因和抑癌基因、促炎和... Krüppel样因子4(Krüppel-like factor4,KLF4)是含有3个锌指结构的转录因子,在细胞微环境中参与不同的细胞信号网络,调控靶基因的转录活化或抑制,与细胞的增殖分化、诱导型多能干细胞的生成有关,具有癌基因和抑癌基因、促炎和抗炎等双向调节功能。KLF4的表达与肿瘤的预后相关,可作为肿瘤靶向治疗的一个靶位点。本文就KLF4的生化结构、生理调节功能及其在肿瘤中的作用作一综述。 展开更多

关键词 krüppel样因子4 基因 转录因子 肿瘤

下载PDF 职称材料

Krüppel样转录因子家族在阿尔茨海默病发病机制中的作用研究进展 被引量：1

16

作者 张译丹 伊然 +9 位作者 董齐 张歌 程雪娇 关爽 高青青 曹海玲 郑晓荣 陈本伟 赵静 唐晶 《中国临床神经科学》 2017年第4期458-464,480,共8页

阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,主要病理特征是脑内β淀粉样蛋白沉积形成的老年斑和tau蛋白异常磷酸化后形成的神经纤维缠结。近年研究发现,Krüppel样转录因子在AD病理生理中扮演着不可或缺的角色,这些转录因子家... 阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,主要病理特征是脑内β淀粉样蛋白沉积形成的老年斑和tau蛋白异常磷酸化后形成的神经纤维缠结。近年研究发现,Krüppel样转录因子在AD病理生理中扮演着不可或缺的角色,这些转录因子家族成员在细胞生长、分化、增殖、迁移、凋亡、代谢和炎症反应中具有多种调节功能。最新证据表明Krüppel样转录因子参与AD的发生发展。文中详细综述了Krüppel样转录因子家族在AD发病机制中的最新作用及其相关研究进展。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 krüppel样转录因子 转录因子 β淀粉样蛋白 TAU蛋白 神经轴突

原文传递

微小RNA-135a-5p和Krüppel样因子16在胃腺癌中的表达及靶向关系研究 被引量：1

17

作者 张鑫 田蕾 +2 位作者 朱金朋 史璇 李迪诺 《陕西医学杂志》 CAS 2022年第12期1597-1601,1606,共6页

目的:检测微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)和Krüppel样因子16(KLF16)在胃腺癌中的表达,分析两者的靶向关系。方法:收集胃腺癌并行手术治疗的患者45例,留取术后肿瘤组织和正常胃黏膜组织。选择胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901和正常胃细... 目的:检测微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)和Krüppel样因子16(KLF16)在胃腺癌中的表达,分析两者的靶向关系。方法:收集胃腺癌并行手术治疗的患者45例,留取术后肿瘤组织和正常胃黏膜组织。选择胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901和正常胃细胞株GES-1进行培养及相关实验。基于MGC-803细胞株建立si-KLF16组、miR-135a-5p mimic组,并设立无关序列组。应用免疫组化染色检测KLF16蛋白表达。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-135a-5p、KLF16 mRNA的表达。采用双荧光素酶报告基因实验,构建含有野生型KLF16的质粒(WT-KLF16)和突变型KLF16的质粒(MT-KLF16),分别与miR-135a-5p mimic、miR-135a-5p空白对照组(NC)进行共转染,验证miR-135a-5p和KLF16的靶向关系。结果:胃腺癌组织中miR-135a-5p表达量明显低于正常胃黏膜组织,KLF16阳性率明显高于正常胃黏膜组织(均P<0.05)。不同肿瘤最大径和浸润深度胃腺癌患者miR-135a-5p相对表达量及KLF16阳性率比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。线性相关分析显示,miR-135a-5p表达与KLF16阳性呈负相关(R=-0.623,P<0.05)。胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901细胞株miR-135a-5p表达明显低于正常胃GES-1细胞株,KLF16 mRNA表达明显高于GES-1细胞株(均P<0.05)。si-KLF16组中miR-135a-5p表达明显高于无关序列组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-135a-5p mimic+WT-KLF16与NC+WT-KLF16、miR-135a-5p mimic+MT-KLF16、NC+MT-KLF16比较,相对荧光素酶活性明显下降(均P<0.05),提示miR-135a-5p和KLF16具有靶向关系。结论:胃腺癌miR-135a-5p低表达,KLF16高表达,它们都参与肿瘤的形成和进展,且具有靶向关系。 展开更多

关键词 胃腺癌 微小RNA-135a-5p krüppel样因子16 相关性 靶向关系

下载PDF 职称材料

Krüppel样转录因子2的表达调控 被引量：1

18

作者 荆堂堂 胡俊秀 +3 位作者 倪晋泽 穆靖洲 赵玉菲 朱亮 《医学综述》 2019年第21期4174-4179,共6页

Krüppel样转录因子(KLFs)指含有DNA结合区的锌指蛋白类转录因子,可参与多种基因表达的调控。KLF2作为Krüppel家族的重要成员,不仅广泛表达于血管内皮,还表达于心、肝、肾等重要器官,在正常生理和疾病过程中发挥至关重要的作... Krüppel样转录因子(KLFs)指含有DNA结合区的锌指蛋白类转录因子,可参与多种基因表达的调控。KLF2作为Krüppel家族的重要成员,不仅广泛表达于血管内皮,还表达于心、肝、肾等重要器官,在正常生理和疾病过程中发挥至关重要的作用。在正常生理状态下,血流剪切力通过促丝裂原活化的蛋白激酶5/胞外信号调节激酶5/肌细胞增强因子2通路,诱导血管内皮细胞以及重要脏器中KLF2的表达。除层流剪切力及组蛋白去乙酰化酶5等血流依赖性转录因子外,KLF2的表达还受他汀类药物等刺激性因素以及炎症因子等抑制性因素的多种非血流依赖性因素的调节。 展开更多

关键词 krüppel样转录因子2 内皮细胞 转录调节

下载PDF 职称材料

支气管哮喘豚鼠肺组织中KLF2的表达及意义 被引量：1

19

作者 彭文芳 戴爱国 +1 位作者 胡瑞成 朱黎明 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第7期1235-1240,共6页

目的:探讨锌指Krüppel样转录因2(KLF2)在豚鼠支气管哮喘肺组织中的表达及意义。方法:30只健康雄性豚鼠,按随机数字表法分为对照组(A组)、哮喘组(B组)及地塞米松治疗组(C组),每组10只。卵清蛋白致敏法复制哮喘模型。观察豚鼠肺组织... 目的:探讨锌指Krüppel样转录因2(KLF2)在豚鼠支气管哮喘肺组织中的表达及意义。方法:30只健康雄性豚鼠,按随机数字表法分为对照组(A组)、哮喘组(B组)及地塞米松治疗组(C组),每组10只。卵清蛋白致敏法复制哮喘模型。观察豚鼠肺组织病理学改变,BALF细胞总数及分类计数;采用原位杂交和RT-PCR检测肺组织中KLF2的mRNA表达情况,免疫组化和Westernblot检测肺组织中KLF2的蛋白表达水平。结果:(1)哮喘组豚鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)、中性粒细胞百分比(NEU%)显著高于对照组(P<0.01),哮喘组肺组织可见大量炎症细胞浸润,及明显气道重塑改变,而地塞米松治疗组BALF炎细胞浸润及肺组织病理改变较哮喘组明显减轻;(2)KLF2mRNA和蛋白在哮喘组表达显著低于对照组,在地塞米松治疗组中的表达明显高于哮喘组,3组差异均有统计学意义(P均<0.01);(3)KLF2蛋白以及mRNA与肺泡灌洗液炎细胞总数及EOS%,NEU%呈负相关。结论:KLF2在支气管哮喘急性发作期模型中表达明显下降,而地塞米松治疗后KLF2的表达上调,提示KLF2可能在支气管哮喘的发病机制与防治中起重要作用。 展开更多

关键词 支气管哮喘 锌指krüppel样转录因2

原文传递

脱氧胆酸通过KLF4上调CDX2的表达促进Barrett食管形成

20

作者 闫武 张昊翔 +8 位作者 沈才飞 夏一菊 王璞 张亚飞 李婧文 徐胤 邵顺子 于晓娜 房殿春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期702-707,共6页

目的探讨在脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)诱导Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)形成中,Krüppel样锌指转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)与同源异型框转录因子2(caudalrelated homeodomain transcription factor 2... 目的探讨在脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)诱导Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)形成中,Krüppel样锌指转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)与同源异型框转录因子2(caudalrelated homeodomain transcription factor 2,CDX2)的作用。方法采用免疫组化S-P法检测49例人正常食管组织和22例BE组织中KLF4、CDX2的表达;体外培养Het-1A细胞,依据DCA处理时间分为0 h组(未经DCA处理)、4 h组、8 h组、12 h组并进行DCA处理。分别设置空白对照组、阴性siRNA对照组、阴性siRNA+DCA处理12 h组、KLF4-siRNA干扰组、KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组,进行相应处理。设置空白对照组、阴性病毒对照组、阴性病毒+DCA处理12 h组、KLF4过表达病毒组,进行相应处理。待上述各实验组处理结束后,运用Real-time PCR、Western blot检测各组KLF4、CDX2、MUC2mRNA及蛋白的表达。结果免疫组化检测发现:在22例BE组织中,KLF4阳性表达15例,阳性率68.18%,阳性染色主要集中在细胞核;CDX2阳性表达16例,阳性率72.73%,阳性染色也主要集中在细胞核。与人正常食管鳞状上皮组织比较,BE组织中KLF4、CDX2表达均增高(χ2=18.642,P<0.05;χ2=23.678,P<0.05)。Real-time PCR及Western blot检测结果显示:随DCA处理时间的增加,Het-1A细胞KLF4、CDX2、MUC2的表达逐渐升高(P<0.05);KLF4-siRNA干扰组及KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组中,KLF4、CDX2、MUC2表达均下调,且不再随DCA处理的刺激而升高(P<0.05);此外,阴性病毒+DCA处理12 h组及KLF4过表达病毒组中,KLF4、CDX2、MUC2表达均上调,且KLF4过表达病毒组3个基因蛋白表达上调更为显著(P<0.05)。结论 DCA通过KLF4上调CDX2,间接引起BE标志性分子MUC2的表达上调,从而促进正常食管上皮向BE转化。 展开更多

关键词 BARRETT食管 Het-1A细胞 脱氧胆酸 krüppel样锌指转录因子4 同源异型框转录因子2

下载PDF 职称材料