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慢性颞叶癫大鼠海马内向整流钾通道Kir2.3 mRNA的动态变化
1
作者
徐岚
吴洵昳
洪震
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期427-430,共4页
目的探讨慢性颞叶癫大鼠海马不同时间点内向整流钾通道Kir2.3mRNA的表达变化及Kir2.3通道与颞叶癫发病机制之间的关系。方法匹罗卡品诱发大鼠产生癫持续状态(statusepilepticus,SE),经过2周成模为慢性颞叶癫大鼠。以SE终止后0h...
目的探讨慢性颞叶癫大鼠海马不同时间点内向整流钾通道Kir2.3mRNA的表达变化及Kir2.3通道与颞叶癫发病机制之间的关系。方法匹罗卡品诱发大鼠产生癫持续状态(statusepilepticus,SE),经过2周成模为慢性颞叶癫大鼠。以SE终止后0h、6h、72h和2周作为时间点,分别用RT-PCR方法检测致痫大鼠海马中Kir2.3通道mRNA的表达变化。结果正常对照组、SE终止后0h、6h、72h、2周各时间点Kir2.3mRNA与β-actin比值分别为0.080±0.030、0.103±0.045、0.164±0.026、0.132±0.024和0.011±0.008,其中6h组比值增高,和对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);2周组比值的降低,和对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论离子通道的改变可能是一个动态变化的慢性过程。在致痫大鼠SE发生2周后,即转入慢性自发性癫发作时,可能是Kir2.3通道表达发生变化的转折点,从而成为痫性发作的基础。
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关键词
颞叶癫
内向整流钾通道
kir
2.3
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职称材料
大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达
被引量:
1
2
作者
王刚
曾洁
+5 位作者
盛呈雨
任汝静
周海燕
陆国强
丁健青
陈生弟
《蚌埠医学院学报》
CAS
2008年第3期253-255,380,共4页
目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶...
目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果:Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论:成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。
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关键词
基因表达调节
PC12细胞株
kir
2.3
基因
质粒
转染
大鼠
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职称材料
帕金森氏综合症发病机理研究:weaver基因研究
3
作者
魏小斌
史克珊
+1 位作者
方立
伍燕
《中国航天医药杂志》
2003年第4期7-12,共6页
目的研究帕金森氏综合症的发病机理,评估wvGirk2对神经细胞生长发育和生命力的影响。方法给一类酪氨酸脱氢酶阳性的神经细胞(一种中枢神经源细胞),又称CAD细胞,引入由DNA编码的野生型和突变型离子通道。采用DNA克隆、免疫组化、WesternB...
目的研究帕金森氏综合症的发病机理,评估wvGirk2对神经细胞生长发育和生命力的影响。方法给一类酪氨酸脱氢酶阳性的神经细胞(一种中枢神经源细胞),又称CAD细胞,引入由DNA编码的野生型和突变型离子通道。采用DNA克隆、免疫组化、WesternBlots免疫印迹等技术进行检测分析。用不同浓度(0.25μg/ml,0.5μg/ml,1.0μg/ml)的Girk2cDNA(对照组)和wvGirk2cDNA(观察组)质粒转染CAD细胞后,观察两组基因对转染CAD细胞的数目、蛋白质合成、神经突生长等指标的影响作用;并且观察MK801和Kir2.3对wvGirk2的抑制作用。结果高浓度wvGirk2转染的CAD细胞存活数目减少到约60%的单纯Girk2转染细胞数目;低浓度wvGirk2没有引起细胞死亡但是减少转染基因的蛋白质产物,且神经突生长也受wvGirk2影响;MK801和Kir2.3对wvGirk2有抑制作用。结论wvGirk2基因在weaver动物中有一种特殊功能,阻断wvGirk2通道能够防止细胞死亡。离子通道的存在和wvGirk2的转染可能对wvGirk2细胞的命运有显著影响。
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关键词
帕金森氏综合症
发病机理
weaver基因
神经细胞
生长发育
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职称材料
题名
慢性颞叶癫大鼠海马内向整流钾通道Kir2.3 mRNA的动态变化
1
作者
徐岚
吴洵昳
洪震
机构
复旦大学附属华山医院神经内科
出处
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期427-430,共4页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金--新教师基金课题项目(20070246074)
文摘
目的探讨慢性颞叶癫大鼠海马不同时间点内向整流钾通道Kir2.3mRNA的表达变化及Kir2.3通道与颞叶癫发病机制之间的关系。方法匹罗卡品诱发大鼠产生癫持续状态(statusepilepticus,SE),经过2周成模为慢性颞叶癫大鼠。以SE终止后0h、6h、72h和2周作为时间点,分别用RT-PCR方法检测致痫大鼠海马中Kir2.3通道mRNA的表达变化。结果正常对照组、SE终止后0h、6h、72h、2周各时间点Kir2.3mRNA与β-actin比值分别为0.080±0.030、0.103±0.045、0.164±0.026、0.132±0.024和0.011±0.008,其中6h组比值增高,和对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);2周组比值的降低,和对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论离子通道的改变可能是一个动态变化的慢性过程。在致痫大鼠SE发生2周后,即转入慢性自发性癫发作时,可能是Kir2.3通道表达发生变化的转折点,从而成为痫性发作的基础。
关键词
颞叶癫
内向整流钾通道
kir
2.3
Keywords
temporal lobe epilepsy
inwardly rectifying potassium channel
kir
2.3
分类号
R742.1 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达
被引量:
1
2
作者
王刚
曾洁
盛呈雨
任汝静
周海燕
陆国强
丁健青
陈生弟
机构
上海交通大学医学院附属瑞金医院神经内科上海交通大学医学院神经病学研究所
出处
《蚌埠医学院学报》
CAS
2008年第3期253-255,380,共4页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)(2006CB500706)
上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金(18015)
上海交通大学医学院优秀青年教师基金(2007-2008)
文摘
目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果:Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论:成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。
关键词
基因表达调节
PC12细胞株
kir
2.3
基因
质粒
转染
大鼠
Keywords
gene expression vegulation
PC 12 cell line
kir
2.3
gene
plasmid
transfect
rats
分类号
Q344.13 [生物学—遗传学]
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
帕金森氏综合症发病机理研究:weaver基因研究
3
作者
魏小斌
史克珊
方立
伍燕
机构
海南省海口市人民医院
出处
《中国航天医药杂志》
2003年第4期7-12,共6页
文摘
目的研究帕金森氏综合症的发病机理,评估wvGirk2对神经细胞生长发育和生命力的影响。方法给一类酪氨酸脱氢酶阳性的神经细胞(一种中枢神经源细胞),又称CAD细胞,引入由DNA编码的野生型和突变型离子通道。采用DNA克隆、免疫组化、WesternBlots免疫印迹等技术进行检测分析。用不同浓度(0.25μg/ml,0.5μg/ml,1.0μg/ml)的Girk2cDNA(对照组)和wvGirk2cDNA(观察组)质粒转染CAD细胞后,观察两组基因对转染CAD细胞的数目、蛋白质合成、神经突生长等指标的影响作用;并且观察MK801和Kir2.3对wvGirk2的抑制作用。结果高浓度wvGirk2转染的CAD细胞存活数目减少到约60%的单纯Girk2转染细胞数目;低浓度wvGirk2没有引起细胞死亡但是减少转染基因的蛋白质产物,且神经突生长也受wvGirk2影响;MK801和Kir2.3对wvGirk2有抑制作用。结论wvGirk2基因在weaver动物中有一种特殊功能,阻断wvGirk2通道能够防止细胞死亡。离子通道的存在和wvGirk2的转染可能对wvGirk2细胞的命运有显著影响。
关键词
帕金森氏综合症
发病机理
weaver基因
神经细胞
生长发育
Keywords
Parkinson's Disease Weaver gene Wild- type Girk2 wvGirk2 CAD cell line
kir
2.3
分类号
R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
R394 [医药卫生—临床医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢性颞叶癫大鼠海马内向整流钾通道Kir2.3 mRNA的动态变化
徐岚
吴洵昳
洪震
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
下载PDF
职称材料
2
大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达
王刚
曾洁
盛呈雨
任汝静
周海燕
陆国强
丁健青
陈生弟
《蚌埠医学院学报》
CAS
2008
1
下载PDF
职称材料
3
帕金森氏综合症发病机理研究:weaver基因研究
魏小斌
史克珊
方立
伍燕
《中国航天医药杂志》
2003
0
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职称材料
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