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慢性颞叶癫大鼠海马内向整流钾通道Kir2.3 mRNA的动态变化
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作者 徐岚 吴洵昳 洪震 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期427-430,共4页
目的探讨慢性颞叶癫大鼠海马不同时间点内向整流钾通道Kir2.3mRNA的表达变化及Kir2.3通道与颞叶癫发病机制之间的关系。方法匹罗卡品诱发大鼠产生癫持续状态(statusepilepticus,SE),经过2周成模为慢性颞叶癫大鼠。以SE终止后0h... 目的探讨慢性颞叶癫大鼠海马不同时间点内向整流钾通道Kir2.3mRNA的表达变化及Kir2.3通道与颞叶癫发病机制之间的关系。方法匹罗卡品诱发大鼠产生癫持续状态(statusepilepticus,SE),经过2周成模为慢性颞叶癫大鼠。以SE终止后0h、6h、72h和2周作为时间点,分别用RT-PCR方法检测致痫大鼠海马中Kir2.3通道mRNA的表达变化。结果正常对照组、SE终止后0h、6h、72h、2周各时间点Kir2.3mRNA与β-actin比值分别为0.080±0.030、0.103±0.045、0.164±0.026、0.132±0.024和0.011±0.008,其中6h组比值增高,和对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);2周组比值的降低,和对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论离子通道的改变可能是一个动态变化的慢性过程。在致痫大鼠SE发生2周后,即转入慢性自发性癫发作时,可能是Kir2.3通道表达发生变化的转折点,从而成为痫性发作的基础。 展开更多
关键词 颞叶癫 内向整流钾通道 kir2.3
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大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达 被引量:1
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作者 王刚 曾洁 +5 位作者 盛呈雨 任汝静 周海燕 陆国强 丁健青 陈生弟 《蚌埠医学院学报》 CAS 2008年第3期253-255,380,共4页
目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶... 目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果:Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论:成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 基因表达调节 PC12细胞株 kir2.3基因 质粒 转染 大鼠
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帕金森氏综合症发病机理研究:weaver基因研究
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作者 魏小斌 史克珊 +1 位作者 方立 伍燕 《中国航天医药杂志》 2003年第4期7-12,共6页
目的研究帕金森氏综合症的发病机理,评估wvGirk2对神经细胞生长发育和生命力的影响。方法给一类酪氨酸脱氢酶阳性的神经细胞(一种中枢神经源细胞),又称CAD细胞,引入由DNA编码的野生型和突变型离子通道。采用DNA克隆、免疫组化、WesternB... 目的研究帕金森氏综合症的发病机理,评估wvGirk2对神经细胞生长发育和生命力的影响。方法给一类酪氨酸脱氢酶阳性的神经细胞(一种中枢神经源细胞),又称CAD细胞,引入由DNA编码的野生型和突变型离子通道。采用DNA克隆、免疫组化、WesternBlots免疫印迹等技术进行检测分析。用不同浓度(0.25μg/ml,0.5μg/ml,1.0μg/ml)的Girk2cDNA(对照组)和wvGirk2cDNA(观察组)质粒转染CAD细胞后,观察两组基因对转染CAD细胞的数目、蛋白质合成、神经突生长等指标的影响作用;并且观察MK801和Kir2.3对wvGirk2的抑制作用。结果高浓度wvGirk2转染的CAD细胞存活数目减少到约60%的单纯Girk2转染细胞数目;低浓度wvGirk2没有引起细胞死亡但是减少转染基因的蛋白质产物,且神经突生长也受wvGirk2影响;MK801和Kir2.3对wvGirk2有抑制作用。结论wvGirk2基因在weaver动物中有一种特殊功能,阻断wvGirk2通道能够防止细胞死亡。离子通道的存在和wvGirk2的转染可能对wvGirk2细胞的命运有显著影响。 展开更多
关键词 帕金森氏综合症 发病机理 weaver基因 神经细胞 生长发育
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