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干扰Kinesin-12表达对星形胶质细胞周期和凋亡的影响 被引量：1
1
作者 冯杰 花娟 +3 位作者 胡遵鲁 严莹莹 巫荣华 刘梅 《南通大学学报（医学版）》 2015年第3期173-177,F0002,共6页
目的 :比较驱动蛋白家族成员Kinesin-12和Kinesin-5对星形胶质细胞周期和凋亡的影响差异,探讨Kinesin-12在细胞增殖中的作用机制。方法 :采用si RNA方法干扰Kinesin-12、Kinesin-5基因表达,通过实时定量PCR、Western Blot检测干扰表达效... 目的 :比较驱动蛋白家族成员Kinesin-12和Kinesin-5对星形胶质细胞周期和凋亡的影响差异,探讨Kinesin-12在细胞增殖中的作用机制。方法 :采用si RNA方法干扰Kinesin-12、Kinesin-5基因表达,通过实时定量PCR、Western Blot检测干扰表达效率;Hoechst33342染色观察细胞凋亡;经AnnexinⅤ/PI双染色检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期变化;细胞免疫化学染色观察Kinesin-12失功能后MyosinⅡB的分布改变。结果:Kinesin-12和Kinesin-5蛋白表达下调达65%以上;Hoechst33342染色和AnnexinⅤ/PI双染色法发现干扰Kinesin-12和Kinesin-5表达后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);流式细胞术检测发现Kinesin-12 si RNA处理后细胞周期被阻滞在G1期,而Kinesin-5si RNA处理后,细胞周期被阻滞在G2/M期。细胞免疫化学染色发现,抑制Kinesin-12表达后MyosinⅡB(即Myh 10)的分布发生改变。结论:抑制Kinesin-12或Kinesin-5表达,均可明显阻滞细胞分裂并诱导细胞凋亡,但作用机制与Kinesin-5不同,推测Kinesin-12可能与MyosinⅡB相互作用形成异源聚合体作用于微管微丝骨架重构。 展开更多
关键词 kinesin-12 kinesin-5 星形胶质细胞 凋亡 细胞周期 大鼠
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干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响
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作者 赵攀峰 巫荣华 +2 位作者 花娟 王萍 刘梅 《南通大学学报（医学版）》 2017年第1期1-5,F0002,共6页
目的:探讨干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响。方法:建立大鼠脊髓挫伤模型,通过实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测脊髓损伤后不同时间Kinesin-12基因表达,及... 目的:探讨干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响。方法:建立大鼠脊髓挫伤模型,通过实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测脊髓损伤后不同时间Kinesin-12基因表达,及胶质瘢痕相关基因硫酸软骨素蛋白聚醣(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)mRNA水平表达变化;脊髓损伤术后1周,在损伤处注射siRNA干扰Kinesin-12基因表达,并于干扰表达后不同时间进行运动功能(Basso Beattie Bresnahan,BBB)评分评估损伤后神经功能,磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)观察脊髓损伤修复程度,免疫组织化学法观察胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和CSPGs表达。结果:脊髓损伤后Kinesin-12基因表达显著升高,与胶质瘢痕CSPGs相关的基因表达也逐渐升高。在大鼠脊髓损伤模型中,与对照组相比,干扰Kinesin-12表达使大鼠脊髓损伤运动功能BBB评分增加,CSPGs表达下降,脊髓组织保存较多,空洞区减小。结论:在大鼠脊髓损伤后采用siRNA干扰Kinesin-12表达,可以减少空洞和胶质瘢痕的形成,利于脊髓形态和功能恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 kinesin-12 胶质纤维酸性蛋白 硫酸软骨素蛋白聚醣 实时定量聚合酶链式反应 大鼠
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