人甲床来源的脱细胞支架搭载骨髓间充质干细胞向指甲干细胞分化的研究

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作者 薛鑫鑫 刘士波 +3 位作者 刘飞 姜洪涛 王培 李小东 《临床和实验医学杂志》 2024年第6期604-607,共4页

目的探究人甲床来源的脱细胞支架搭载骨髓间充质干细胞向指甲干细胞分化的作用。方法收集2022年至2023年在承德医学院附属医院手足外科进行截指术的15例患者的临床废弃甲床组织,制备成脱细胞甲床支架,使用试剂盒检测参照组(未脱细胞组)... 目的探究人甲床来源的脱细胞支架搭载骨髓间充质干细胞向指甲干细胞分化的作用。方法收集2022年至2023年在承德医学院附属医院手足外科进行截指术的15例患者的临床废弃甲床组织,制备成脱细胞甲床支架,使用试剂盒检测参照组(未脱细胞组)与脱细胞组(脱细胞甲床支架组)中总胶原蛋白含量、残留DNA含量;将脱细胞甲床支架与人骨髓间充质干细胞(hMSCs)进行共培养14 d。比较对照组(hMSCs组)与共培养组(脱细胞甲床支架+hMSCs组)体外细胞分化能力及指甲干细胞标志物[角蛋白15,角蛋白17,G蛋白偶联受体6(Lgr6)以及β-联蛋白(β-catenin)蛋白]含量。结果脱细胞组总胶原蛋白含量为(189.62±45.45)μg/mg,低于参照组[(196.02±41.93)μg/mg],但两组相比差异无统计学意义(P>0.05);脱细胞组中DNA含量为(0.41±0.15)μg/mg,明显低于参照组[(0.87±0.13)μg/mg],差异有统计学意义(P<0.05)。培养14 d后,共培养组吸光度值为1.09±0.07,对照组吸光度值为1.10±0.5,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。培养14 d后,共培养组角蛋白15、角蛋白17、Lgr6、β-catenin含量分别为(39.56±5.09)、(45.83±4.01)、(5.74±0.99)、(146.79±5.34)pg/mL,均明显高于对照组[(12.10±4.28)、(10.47±3.19)、(0.93±0.67)、(67.28±7.41)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脱细胞甲床支架中的DNA有被清除、保留胶原蛋白,与hMSCs共培养后细胞增殖能力正常,且可诱导hMSCs向指甲干细胞分化,为临床上治疗甲床缺损提供新思路。 展开更多

关键词 角蛋白15 角蛋白17 人甲床 脱细胞支架 骨髓间充质干细胞 指甲干细胞

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MiR-486-3p在银屑病皮损的表达及对角蛋白17表达的影响 被引量：6

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作者 孙中斌 晋亮 +3 位作者 党二乐 郭森 李春英 王刚 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期160-163,共4页

目的探讨银屑病患者皮损与健康人皮肤中miR-486-3p表达情况及其对角蛋白17（K17）表达的调控作用。方法采用生物信息学方法预测出调节K17表达的微RNA（microRNA），选取lO例银屑病患者皮损和10例健康人皮肤提取RNA，用加PolyA尾法逆转录... 目的探讨银屑病患者皮损与健康人皮肤中miR-486-3p表达情况及其对角蛋白17（K17）表达的调控作用。方法采用生物信息学方法预测出调节K17表达的微RNA（microRNA），选取lO例银屑病患者皮损和10例健康人皮肤提取RNA，用加PolyA尾法逆转录为cDNA，实时荧光定量PCR（qRT—PCR）进行荧光定量。用miR-486-3p模拟物（mimics）和阴性对照物（NC）转染人永生化角质形成细胞（HacaT细胞），Western印迹检测K17表达情况；构建双荧光素酶报告系统，其中包括含有K173’UTR的片段，突变1组为将种子序列删除的片段，突变2组为将种子序列间隔突变的片段，突变3组为将种子序列重复2次的片段，并检测miR-486-3p是否与K173UTR种子序列结合而抑制K17表达。结果银屑病皮损中miR-486-3P表达水平为0．211±0．120，低于健康对照的0．555±0．425，银屑病皮损为健康对照的0．380，两组比较，t=2．62，u=9，P〈0．05。Western印迹结果显示，miR-486-3p类似物转染HaCaT细胞后，K17表达水平明显降低。双荧光素酶报告系统检测结果，含有K173’UTR种子序列组与突变3组荧光强度分别为65．31±6．32和54．18±10．01，均低于对照组（P〈0．05）；突变1组和突变2组荧光强度分别为114．77±16．14和110．214-12．99，与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论miR-486-3p在银屑病皮损中的表达水平低于健康人皮肤，miR-486-3p通过与K173’UTR种子序列结合抑制K17表达，提示其表达水平降低及对K17调控作用的改变可能与银屑病的发生与发展相关。 展开更多

关键词 银屑病 微RNAS 角蛋白17 miR^486~3p

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ck17和ck19在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义 被引量：3

3

作者 储德强 颜雨春 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第7期675-677,共3页

目的研究细胞角蛋白17(ck17)、19(ck19)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测10例正常口腔黏膜、78例OSCC根治标本中ck17和ck19的表达水平,并分析其与组织分化程度和临床病理分期之间的关系。结果正... 目的研究细胞角蛋白17(ck17)、19(ck19)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测10例正常口腔黏膜、78例OSCC根治标本中ck17和ck19的表达水平,并分析其与组织分化程度和临床病理分期之间的关系。结果正常口腔黏膜中ck17、ck19均未见阳性表达;OSCC中ck17、ck19的阳性表达率分别为47.4%、61.5%。ck17、ck19在OSCC组织中的表达与组织分化程度和临床分期明显相关(P<0.05)。结论 ck17、ck19在OSCC的高表达可能对OSCC的发生发展过程中起促进作用。 展开更多

关键词 口腔肿瘤 角蛋白17 角蛋白19 癌 鳞状细胞 免疫组织化学

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角蛋白17、19在银屑病皮损中的表达及意义 被引量：2

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作者 郝小军 高顺强 +2 位作者 李真 邢文晓 李文素 《中国医师进修杂志》 2011年第36期20-22,共3页

目的通过研究角蛋白17、19在银屑病皮损中表达水平的变化，探讨角蛋白17、19在银屑病病理改变中的意义。方法用免疫组织化学方法检测30例银屑病皮损和10例正常皮肤中角蛋白17、19的表达情况。结果银屑病皮损中基底层和棘细胞层角蛋白17... 目的通过研究角蛋白17、19在银屑病皮损中表达水平的变化，探讨角蛋白17、19在银屑病病理改变中的意义。方法用免疫组织化学方法检测30例银屑病皮损和10例正常皮肤中角蛋白17、19的表达情况。结果银屑病皮损中基底层和棘细胞层角蛋白17的表达水平增强，基底层角蛋白19的表达水平减弱，与正常皮肤比较差异有统计学意义（P〈0．05）。银屑病皮损中角蛋白17表达的吸光度值高于正常皮肤（5．81±1．42比0，P〈0．01）；角蛋白19表达的吸光度值低于正常皮肤（0．49±0．03比2．03±1．08，P〈0．05）；在银屑病皮损中角蛋白17的吸光度值与角蛋白19的吸光度值呈负相关（r=-0．479，P〈0．01）。结论银屑病皮损中角蛋白17、19的异常表达与角质形成细胞在分化过程中存在异常角化有关。 展开更多

关键词 银屑病 免疫组织化学 角蛋白17 角蛋白19

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窄谱中波紫外线对角质形成细胞角蛋白17表达的影响 被引量：3

5

作者 韩昌旭 党二乐 +3 位作者 晋亮 李冰 张楠 王刚 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期271-274,共4页

目的探讨窄谱中波紫外线（NB—UVB）对角质形成细胞角蛋白17（K17）表达的影响。方法不同剂量NB—UVB照射角质形成细胞后，培养6、12、24h，分别用CCK8法检测细胞增殖情况，实时PCR、Western印迹检测K17mRNA和蛋白表达以及Erk1／2、磷酸... 目的探讨窄谱中波紫外线（NB—UVB）对角质形成细胞角蛋白17（K17）表达的影响。方法不同剂量NB—UVB照射角质形成细胞后，培养6、12、24h，分别用CCK8法检测细胞增殖情况，实时PCR、Western印迹检测K17mRNA和蛋白表达以及Erk1／2、磷酸化Erk1／2的表达水平。结果低剂量（50、100mJ／cm2）NB—UVB照射可刺激角质形成细胞增殖和K17表达，而较高剂量（200、400mJ／cm2）NB—UVB照射则抑制细胞增殖和K17表达，其差异有统计学意义（P〈0．05或0．01）。通过对NB—UVB照射后相关信号通路进行筛查，发现100mJ／cm2NB—UVB照射可以上调角质形成细胞Erk1／2的磷酸化水平，而400mJ／cm2 NB—UVB照射后Erk1／2的磷酸化水平明显下降，阻断这一信号通路可以抑制低剂量NB—UVB对K17的上调。结论NB—UVB对K17表达的影响受Erk1／2通路的调控。 展开更多

关键词 紫外线 角质形成细胞 角蛋白17 细胞增殖 磷酸化酶类

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葫芦素I对HaCaT细胞体外增殖及对角蛋白17、STAT3、VEGF表达的影响 被引量：2

6

作者 姚秋楠 魏志平 刘彦群 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期431-435,共5页

目的探讨葫芦素I对HaCaT细胞体外增殖及角蛋白17（K17）、信号转导及转录激活子3（STAT3）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法采用不同浓度葫芦素I（0．0125、0．025、0．05、0．1μmol／L）、含与0．1μmol／L葫芦素I等体积D... 目的探讨葫芦素I对HaCaT细胞体外增殖及角蛋白17（K17）、信号转导及转录激活子3（STAT3）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法采用不同浓度葫芦素I（0．0125、0．025、0．05、0．1μmol／L）、含与0．1μmol／L葫芦素I等体积DMSO的DMEM培养液（溶媒组）、DMEM培养液（阴性对照组）、10nmol／L卡泊三醇（阳性对照组）分别作用于HaCaT细胞。采用CCK8法检测葫芦素I作用12、24、36h后对HaCaT细胞体外增殖的影响，RT．PCR法检测葫芦素I作用24h对HaCaT细胞K17和VEGFmRNA表达的影响，Western印迹法检测葫芦素I作用24h对HaCaT细胞K17、STAT3、磷酸化STAT3（P-STAT3）和VEGF蛋白表达的影响。结果0．0125μmol／L葫芦素I作用12h即开始表现出对HacaT细胞体外增殖的抑制作用，当葫芦素I浓度增加到0．1μmol／L时，24h和36h的抑制率分别为43．00％4-2．11％和48．98％±2．27％。与阴性对照组相比，各浓度葫芦素I组对HaCaT细胞体外增殖均有抑制作用（均P〈0．05），且该抑制作用随葫芦素I浓度的增加及作用时间的延长逐渐增强。不同浓度葫芦素I作用于HaCaT细胞24h后，K17mRNA及其蛋白、P-STAT3蛋白、VEGFmRNA及其蛋白表达量均随葫芦素I浓度的增加而降低，差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论葫芦素I可抑制HaCaT细胞的体外增殖，并可在mRNA水平下调K17、VEGF的表达，在蛋白水平下调K17、P，STAT3、VEGF的表达。 展开更多

关键词 葫芦素类 角蛋白17 STAT3转录因子 血管内皮生长因子类 HACAT细胞

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多发性皮脂腺囊肿一家系角蛋白17基因突变检测 被引量：1

7

作者 李明 朱小红 +2 位作者 蒋屏东 翟建新 杨莉佳 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期714-715,共2页

目的研究多发性皮脂腺囊肿一家系中角蛋白17的基因突变情况。方法收集1个多发性皮脂腺囊肿家系中3例患者及3例表型正常者和50例无亲缘关系健康个体的外周血标本，采用PCR结合DNA直接测序检测角蛋白17基因突变。结果该家系患者角蛋白17... 目的研究多发性皮脂腺囊肿一家系中角蛋白17的基因突变情况。方法收集1个多发性皮脂腺囊肿家系中3例患者及3例表型正常者和50例无亲缘关系健康个体的外周血标本，采用PCR结合DNA直接测序检测角蛋白17基因突变。结果该家系患者角蛋白17基因上第428位碱基胞嘧啶（C）突变为胸腺嘧啶（T），使角蛋白17基因的第1号外显子94位密码子由CGC突变成TGC，第94位精氨酸被组氨酸取代，即R94C突变，而该家系的正常人对照及无亲缘关系健康个体不存在此突变。结论本多发性皮脂腺囊肿家系患者角蛋白17基因存在错义突变（428C→T），这可能是导致多发性皮脂腺囊肿发病的分子机制之一。 展开更多

关键词 皮脂腺 囊肿 突变 角蛋白17

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瘦素调节HaCaT细胞角蛋白17的表达

8

作者 张敏苗 叶薛柯 李承新 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期400-403,共4页

目的探讨瘦素对HaCaT细胞角蛋白17（K17）表达的影响。方法体外培养HaCaT细胞，给予100ng／ml的瘦素作用24h，应用实时PCR检On,0K17mRNA表达水平、Western印迹及免疫荧光染色法检测K17蛋白表达水平变化。结果与阴性对照组（1．0000... 目的探讨瘦素对HaCaT细胞角蛋白17（K17）表达的影响。方法体外培养HaCaT细胞，给予100ng／ml的瘦素作用24h，应用实时PCR检On,0K17mRNA表达水平、Western印迹及免疫荧光染色法检测K17蛋白表达水平变化。结果与阴性对照组（1．0000±0．0000）相比较，瘦素组（3．0867±0．1861）K17mRNA表达显著升高，差异有统计学意义（P〈0．01）。Western印迹结果表明，瘦素组K17蛋白较阴性对照组显著上调，细胞免疫荧光染色结果与RT-PCR、Western印迹结果相符。与单纯使用瘦素组（2．2427±0．1887）相比较，STAT3抑制剂组和Erk1／2抑制剂组K17mRNA分别为0．6741±0．0600、0．8550±0．3903，Western印迹和细胞免疫荧光染色显示，两个抑制剂组的K17蛋白较瘦素组均显著下调，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论瘦素可以诱导HaCaT细胞表达K17，其机制可能与激活STAT3、Erk1／2信号转导途径有关。 展开更多

关键词 HACAT细胞 瘦素 角蛋白17

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当归多糖通过抑制角蛋白17表达抑制角质形成细胞的增殖活性 被引量：9

9

作者 朱自荣 王飞苗 +3 位作者 潘萍 赵生魁 金小雅 雷德军 《中国性科学》 2018年第12期135-138,共4页

目的:探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对角蛋白17(K17)介导的人角质形成细胞生长和增殖影响。方法:用不同浓度(1,0. 5,0. 1,0. 05 mg/m L) ASP处理人乳头瘤病毒(HPV)11型基因组的HaCaT细胞(HPV11. HaCaT) 24 h,qRT... 目的:探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对角蛋白17(K17)介导的人角质形成细胞生长和增殖影响。方法:用不同浓度(1,0. 5,0. 1,0. 05 mg/m L) ASP处理人乳头瘤病毒(HPV)11型基因组的HaCaT细胞(HPV11. HaCaT) 24 h,qRT-PCR与Western blot检测K17水平变化,1 mg/m L ASP处理HPV11. HaCaT细胞Western blot检测ki-67和PNCA的表达; MMT试剂盒检测1 mg/m L ASP处理下HPV11. HaCaT细胞增殖活性变化。构建K17过表达(pcDNA3. 1 (+)/K17)载体并转染KC细胞48 h继续用ASP (1 mg/m L)处理24 h;检测K17的水平变化及细胞增殖活性变化。结果:使用1 mg/m L ASP抑制HPV11. HaCaT细胞中K17表达,差异具有统计学意义(P <0. 05),呈浓度依赖趋势。qRT-PCR及Western blot检测发现1 mg/m L ASP使K17、Ki67及PNCA的表达显著下调,差异具有统计学意义(P <0. 05)。ASP作用下,HPV11. HaCaT细胞增殖率均下调(P <0. 01)。pc DNA3. 1(+)/K17对HPV11. HaCaT细胞增殖率的促进作用被ASP阻断,差异具有统计学意义(P <0. 01)。结论:ASP通过抑制K17抑制角质形成细胞增殖,为银屑病和尖锐湿疣基础研究与临床治疗提供前期研究基础。 展开更多

关键词 当归多糖 角蛋白17 角质细胞 增殖活性

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Keratin17联合HPV E6/E7 mRNA对宫颈低度鳞状上皮内病变转归的预测价值

10

作者 吴莹 李媛 王晓燕 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第5期470-474,共5页

目的研究Keratin17(Krt17)联合人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA对宫颈低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL)转归的预测价值。方法选择2020年1月~2021年9月期间诊断为LSIL并完成24个... 目的研究Keratin17(Krt17)联合人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA对宫颈低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL)转归的预测价值。方法选择2020年1月~2021年9月期间诊断为LSIL并完成24个月随访的患者,根据第24个月复诊时病变组织学检查结果进行分组,LSIL消退或维持的患者为病变未进展组,LSIL进展至更高级别的患者为病变进展组。比较2组患者首次确诊时临床资料、Krt17 mRNA表达水平、E6/E7拷贝数的差异,采用多因素logistic逐步回归分析LSIL病变进展的危险因素,采用ROC曲线分析Krt17联合E6/E7对LSIL病变进展的预测价值。结果98例LSIL患者中病变进展者19例、占19.39%,病变未进展者79例、占80.61%;病变进展组的LSIL患者年龄、吸烟比例、绝经比例、Krt17 mRNA表达水平、E6/E7拷贝数高于病变未进展组(P<0.05);多因素logistic逐步回归分析显示,年龄≥45岁、吸烟、Krt17 mRNA表达水平增加、E6/E7拷贝数增加是LSIL病变进展的危险因素;ROC曲线分析显示Krt17和E6/E7对LSIL病变进展具有预测价值,两指标联合预测的灵敏度和特异度分别为81.01%和94.74%。结论Krt17联合HPV E6/E7对LSIL病变进展具有一定预测价值。 展开更多

关键词 宫颈低度鳞状上皮内病变 病变进展 keratin17 人乳头瘤病毒E6/E7

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人角蛋白17的HLA-DR限制性T细胞表位区的确定 被引量：5

11

作者 沈柱 王刚 +2 位作者 樊建勇 李巍 刘玉峰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期769-772,共4页

目的　对银屑病自身抗原———角蛋白 17的HLA DR限制性T细胞表位区进行确定。方法　借助相关软件和互联网服务器进行角蛋白 17的辅助性T细胞抗原表位区预测 ;从银屑病患者皮损组织中扩增出人角蛋白 17全长基因 ;根据预测结果 ,融合表... 目的　对银屑病自身抗原———角蛋白 17的HLA DR限制性T细胞表位区进行确定。方法　借助相关软件和互联网服务器进行角蛋白 17的辅助性T细胞抗原表位区预测 ;从银屑病患者皮损组织中扩增出人角蛋白 17全长基因 ;根据预测结果 ,融合表达、纯化相应的表位区 ;分离纯化外周血T淋巴细胞 ,将各表位区肽段分别与正常人和银屑病患者的T淋巴细胞体外作用 ,检测T细胞增殖程度和培养上清中IFN γ水平变化 ,从而筛选出特异性强反应性表位区。结果　角蛋白 17的 6 5～12 0肽段、30 5～ 374肽段能够显著促进银屑病患者T淋巴细胞增殖和IFN γ分泌 ,与正常对照组比较差异有非常显著性 (均为P <0 .0 0 1)。结论　人角蛋白 17的 6 5～ 12 0肽段和 30 5～ 374肽段是银屑病特异性强反应性HLA DR限制性T细胞表位区。本研究为以后研究银屑病的免疫发病机制和治疗打下了一定基础。 展开更多

关键词 角蛋白17 银屑病 T细胞表位 患者 HLA-DR HLA—DR 治疗 融合表达 分离纯化 限制性

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局部晚期宫颈癌患者血清KRT17蛋白表达水平对动脉介入新辅助化疗效果的影响

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作者 张晓峰 宋芳 朱林忠 《癌变．畸变．突变》 CAS 2024年第2期112-117,共6页

目的:检测局部晚期宫颈癌(LACC)患者血清角蛋白17(KRT17)的表达水平,及其对动脉介入新辅助化疗(NACT)效果的影响。方法:选取2017年1月—2018年6月就诊的70例LACC患者,采用动脉介入新辅助化疗联合手术治疗,治疗前通过酶联免疫吸附试验(EL... 目的:检测局部晚期宫颈癌(LACC)患者血清角蛋白17(KRT17)的表达水平,及其对动脉介入新辅助化疗(NACT)效果的影响。方法:选取2017年1月—2018年6月就诊的70例LACC患者,采用动脉介入新辅助化疗联合手术治疗,治疗前通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清KRT17蛋白的浓度,根据其中位数水平,分为低表达组及高表达组,比较两组患者的无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)、盆腔无进展生存期(PPFS)、无远处转移生存期(DMFS)的差异,以评价KRT17蛋白在采用新辅助化疗的LACC患者中的表达水平及其临床意义。结果:LACC患者血清KRT17蛋白浓度中位数为0.65μg/L,所有患者的KRT17蛋白浓度范围为0.49~1.26μg/L。34例患者为低表达组,36例患者为高表达组。血清KRT17蛋白浓度用于预测LACC患者的NACT疗效的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.897[95%CI(0.816,0.978)],敏感性和特异性分别为90.6%、81.6%。血清KRT17低表达组和高表达组患者中位PFS分别为57.23和48.75个月;中位OS分别为58.1和55.5个月;中位PPFS分别为56.9和49.9个月;中位DMFS分别为57.1和50.1个月。Kaplan-Meier生存曲线显示血清KRT17表达水平升高与LACC患者PFS、OS、PPFS、DMFS缩短呈现正相关(P<0.01)。结论:KRT17蛋白在LACC患者血清中表达升高,且其升高水平可作为NACT治疗LACC患者预后不良的预测因素。 展开更多

关键词 角蛋白17 局部晚期宫颈癌 新辅助化疗 动脉介入化疗 疗效

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乳腺癌抑癌基因KRT17过表达通过活化p53信号通路促进癌细胞凋亡并阻滞细胞周期

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作者 陈铎 胡明 +1 位作者 周海瑞 张雪松 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第17期3180-3189,共10页

目的:探讨乳腺癌中角蛋白17(keratin 17,KRT17)的表达、预后意义及其对癌细胞生长的影响与机制。方法:基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)收录的乳腺癌(breast cancer,BC)数据筛选差异表达基因和预后相关基因,取交集获... 目的:探讨乳腺癌中角蛋白17(keratin 17,KRT17)的表达、预后意义及其对癌细胞生长的影响与机制。方法:基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)收录的乳腺癌(breast cancer,BC)数据筛选差异表达基因和预后相关基因,取交集获得靶基因KRT17。分别利用UALCAN、人类蛋白质图谱(Human Protein Mapping,HPA)和TISCH2数据库分析各种癌症中KRT17 mRNA和蛋白水平的表达、BC组织芯片中KRT17的表达与定位以及肿瘤微环境中KRT17的表达,利用bc-GenExMiner v5.0数据库分析不同数据集中KRT17表达与预后的相关性。接下来,检测KRT17过表达对MDA-MB-231和MCF7细胞生长的影响,并用全基因组敲除和敲低文库筛选数据验证KRT17对BC细胞系生长的影响,裸鼠移植瘤实验验证KRT17对裸鼠异种移植瘤生长的调节作用。最后,利用流式细胞术检测过表达KRT17对细胞周期和凋亡的调控,GSEA富集分析KRT17功能,RT-qPCR和Western blotting揭示KRT17促癌生长的分子机制。结果:不同肿瘤中KRT17表达具有异质性;BC中KRT17mRNA和蛋白水平显著下调(P<0.001,P<0.001),KRT17蛋白主要定位于癌细胞的细胞质和细胞膜,且肿瘤微环境中各种细胞均表达KRT17;KRT17低表达是BC预后不良因素(均P<0.01),过表达KRT17可以显著抑制MDA-MB-231和MCF7细胞的生长(P<0.01,P<0.01),敲除或敲低KRT17可促进MDA-MB-231和MCF7等多种BC细胞系的生长,裸鼠异体移植瘤模型证实过表达KRT17可抑制肿瘤体积(P<0.001);过表达KRT17可显著促进细胞凋亡(P <0.001)并阻滞细胞周期G1期(P <0.01);分子实验结果显示p53信号通路部分介导了KRT17过表达对细胞凋亡和周期的调节作用。结论:KRT17在BC中低表达,不利于患者预后,过表达KRT17通过活化p53通路促进细胞凋亡并阻滞细胞周期,KRT17是一种潜在的抑癌基因。 展开更多

关键词 乳腺癌 角蛋白17 预后 p53信号通路 细胞生长

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角蛋白17在寻常性银屑病T淋巴细胞介导免疫机制中的作用研究 被引量：5

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作者 吴佳纹 肖生祥 +4 位作者 任建文 霍佳 安金刚 邹四新 周静 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2016年第10期33-36,共4页

目的探讨角蛋白17(keratin17,K17)在寻常性银屑病T淋巴细胞介导免疫机制中的作用。方法随机选取2014年6月至2015年4月本院收治的寻常性银屑病患者50例纳入寻常性银屑病组,将同期健康体检者50例纳入对照组,比较两组研究对象的蛋白激酶B(p... 目的探讨角蛋白17(keratin17,K17)在寻常性银屑病T淋巴细胞介导免疫机制中的作用。方法随机选取2014年6月至2015年4月本院收治的寻常性银屑病患者50例纳入寻常性银屑病组,将同期健康体检者50例纳入对照组,比较两组研究对象的蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、K17、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平,并比较寻常性银屑病组进行期与稳定期患者的Akt、K17、VEGF表达水平,研究K17表达水平对T淋巴细胞免疫反应和磷脂酰肌醇-3-羟基激酶/丝/苏氨酸激酶(phophatidylinsotitol-3-kinase/serine/threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路的影响,阐明K17通过PI3K/Akt信号通路促进寻常性银屑病发生的具体机制。结果寻常性银屑病组患者Akt、K17、VEGF表达水平均显著高于对照组(P<0.05);寻常性银屑病进行期患者的Akt、K17、VEGF表达水平均显著高于稳定期患者(P<0.05)。结论 K17在T淋巴细胞免疫调节下,通过PI3K/Akt信号转导通路调节细胞增殖及细胞周期,活化相关生长因子及趋化因子,在促进寻常性银屑病发生中具有重要作用,并提出K17→T细胞→细胞因子→PI3K/Akt信号通路→寻常性银屑病皮损这一具体信号机制。 展开更多

关键词 寻常性银屑病 T淋巴细胞 PI3K/AKT信号通路 角蛋白17

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靶向角蛋白17基因的小干涉RNA对角质形成细胞增生与凋亡的影响 被引量：4

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作者 王岩 王刚 +2 位作者 刘玉峰 孙林潮 沈柱 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期201-203,共3页

目的利用RNA干涉技术诱导角蛋白17(K17)基因沉默,观察其对角质形成细胞(KC)增生和凋亡等生物学活性的影响。方法合成两条含有针对人K17mRNA序列的正义和反义寡核苷酸,退火后与表达载体psilencer3.1-H1neo相连接,经鉴定后转染人角质形成... 目的利用RNA干涉技术诱导角蛋白17(K17)基因沉默,观察其对角质形成细胞(KC)增生和凋亡等生物学活性的影响。方法合成两条含有针对人K17mRNA序列的正义和反义寡核苷酸,退火后与表达载体psilencer3.1-H1neo相连接,经鉴定后转染人角质形成细胞系HaCaT,分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(W est-ern b lot)检测转染细胞K17 mRNA与蛋白水平的改变,用流式细胞仪检测转染细胞的细胞周期及凋亡情况,并通过透射电镜观察细胞的凋亡。结果成功构建了靶向人K17基因的siRNA表达载体psilencer3.1/K17,检测到瞬时转染的HaCaT细胞中K17的蛋白水平及mRNA水平均明显下降。流式细胞仪检测表明转染细胞的细胞周期发生了明显的G1期阻滞并证实凋亡的存在,电镜下观察到凋亡小体。结论对于增生活跃的角质形成细胞,K17的表达对其增生、分化和凋亡等生物学活性具有重要影响。靶向K17的siRNA能够抑制角质形成细胞增生,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 角蛋白17 角质形成细胞 RNA 干涉 银屑病

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白介素22调控角质形成细胞表达角蛋白17的研究 被引量：5

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作者 张巍 史晓蔚 +1 位作者 呼蕾 王刚 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期199-202,共4页

目的:研究白介素(IL)-22对培养的人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)表达角蛋白(K)17的影响。方法:对体外培养的HaCaT细胞分别给予不同浓度的IL-22(0～100μg/L)作用24 h,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测K17mRNA表达水... 目的:研究白介素(IL)-22对培养的人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)表达角蛋白(K)17的影响。方法:对体外培养的HaCaT细胞分别给予不同浓度的IL-22(0～100μg/L)作用24 h,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测K17mRNA表达水平,以酶联免疫吸附测定技术(ELISA法)、蛋白质免疫印记法(Western blot)及免疫荧光染色法检测K17蛋白表达水平的变化。结果:HaCaT细胞经12.5、25.0、50.0、100.0μg/L的IL-22作用后,均出现不同程度的K17表达。与空白对照组的HaCaT细胞相比,12.5μg/L组的mRNA及蛋白表达无明显差异,而25.0、50.0、100.0μg/L组的mRNA及蛋白表达则明显上升(P<0.05),并且随着IL-22浓度增高,K17mRNA及蛋白表达量增多。免疫荧光染色图片显示,随着IL-22浓度的增高,HaCaT细胞胞质中K17蛋白荧光染色增强。结论:IL-22可以剂量依赖方式诱导HaCaT细胞表达K17。 展开更多

关键词 白介素22 角蛋白17 人永生化角质形成细胞

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IL-21在银屑病小鼠皮损中的表达及作用机制 被引量：3

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作者 王傲 李思彤 +1 位作者 白彦萍 王英 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期515-520,共6页

目的 了解白介素(interleukin, IL)-21在银屑病小鼠皮损中的表达特征及其在银屑病发病中的作用机制。方法 20只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、阿维A灌胃组、灭菌水灌胃组。5%咪喹莫特乳膏背部使用诱导小鼠银屑病模型,连续造模... 目的 了解白介素(interleukin, IL)-21在银屑病小鼠皮损中的表达特征及其在银屑病发病中的作用机制。方法 20只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、阿维A灌胃组、灭菌水灌胃组。5%咪喹莫特乳膏背部使用诱导小鼠银屑病模型,连续造模7 d后拍照计算各组小鼠PASI评分,取小鼠皮损观察组织病理学改变,利用免疫荧光及实时荧光定量PCR检测各组小鼠皮损内IL-21表达情况。随后另将10只雄性BALB/c小鼠随机分为IL-21注射组和灭菌水注射组,连续造模4 d。取小鼠注射部位皮损观察组织病理学改变,免疫荧光检测角蛋白(keratin, K)17和实时荧光定量PCR检测IL-17A表达。结果 咪喹莫特诱导小鼠出现典型的银屑病临床及组织病理表现,模型组小鼠PASI评分较对照组升高(P<0.000 1),小鼠皮损内IL-21表达水平上调(P<0.000 1),IL-21表达细胞数目增多;与灭菌水灌胃组相比,阿维A灌胃后小鼠组织病理改善,PASI评分下降(P<0.01),小鼠皮损内IL-21表达水平降低(P<0.000 1),IL-21表达细胞数目减少。相关性分析显示IL-21与小鼠PASI评分呈正相关(r=0.820 0,P<0.000 1)。与灭菌水注射组相比,IL-21注射导致小鼠表皮增厚,小鼠皮损内K17及IL-17A表达升高(P<0.01,P<0.000 1)。结论 IL-21在银屑病小鼠皮损中表达水平升高,与小鼠银屑病严重程度呈正相关;IL-21促进角质形成细胞角蛋白17表达水平升高,同时上调IL-17A表达,加重小鼠银屑病炎症反应。 展开更多

关键词 银屑病 IL-21 阿维A IL-17A 角蛋白17

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细胞分化标志分子在扁平苔藓皮损中异常表达的研究 被引量：3

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作者 田燕 刘玮 +1 位作者 吴延芳 蔡瑞康 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期482-484,共3页

通过研究扁平苔藓皮损中角质形成细胞分化标志的表达情况,分析扁平苔藓的病理机制。本实验应用免疫组化方法以银屑病和正常皮肤为对照,检测扁平苔藓中TGk、Filaggrin、K17和K16的原位表达。结果显示TGk和Filaggrin在扁平苔藓皮损表皮中... 通过研究扁平苔藓皮损中角质形成细胞分化标志的表达情况,分析扁平苔藓的病理机制。本实验应用免疫组化方法以银屑病和正常皮肤为对照,检测扁平苔藓中TGk、Filaggrin、K17和K16的原位表达。结果显示TGk和Filaggrin在扁平苔藓皮损表皮中表达增强,K17和K16在扁平苔藓皮损表皮中出现阳性染色,银屑病皮损中上述标志分子有类似表达,而正常皮肤中则无此现象。提示扁平苔藓皮损中角质形成细胞存在着过度增生和异常分化,上述增生分化标志可能是其病理改变的分子基础。 展开更多

关键词 角质形成细胞转谷酰胺酶 细丝聚集素 角蛋白17 角蛋白16 扁平苔藓 皮肤损害 免疫组织化学 细胞分化

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先天性厚甲症2型一家系的基因突变研究 被引量：3

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作者 刘平 卢宁 +4 位作者 苏慧 李林丽 宋健文 杨荣丽 刘钰泽 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期118-122,共5页

目的研究先天性厚甲症的基因突变,从而探讨基因型与表现型之间的关系。方法提取1个先天性厚甲症家系中先证者及其家人的外周血基因组DNA,用聚合酶链反应扩增,产物测序检测。取先证者母亲的皮损做组织病理检查,观察皮损组织的角蛋白17的... 目的研究先天性厚甲症的基因突变,从而探讨基因型与表现型之间的关系。方法提取1个先天性厚甲症家系中先证者及其家人的外周血基因组DNA,用聚合酶链反应扩增,产物测序检测。取先证者母亲的皮损做组织病理检查,观察皮损组织的角蛋白17的表达。结果家系中两患者的角蛋白17的1号外显子第275位碱基发生A→G的杂合突变,其突变导致其编码角蛋白17的第92位氨基酸的密码子发生改变,使其编码的氨基酸由天冬酰胺变为丝氨酸(N92S)。先证者母亲皮损组织病理检查为多发性脂囊瘤,免疫组化显示角蛋白17阳性表达。结论验证了角蛋白17的1号外显子α螺旋1A区突变在先天性厚甲症发病机制中的重要作用。角蛋白17 1A区突变对脂囊瘤的早发可能存在一定影响,基因型与表型存在一定关联。 展开更多

关键词 角蛋白 基因突变 角蛋白17 先天性厚甲症 早发性多发性脂囊瘤 基因型 表现型

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角蛋白17上HLA-DRB1*07限制性T细胞表位的确定 被引量：4

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作者 沈柱 王刚 +3 位作者 刘玉峰 李巍 樊建勇 党育平 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期790-793,共4页

目的对银屑病自身抗原棗角蛋白17的HLA-DRB1*07限制性T细胞表位进行确定.方法在前期已确定角蛋白17的HLA-DRB1*07限制性T细胞表位区试验基础上,借助互联网服务器对其中的T细胞表位进行分析预测,人工合成T细胞表位DNA并进行GST融合表达... 目的对银屑病自身抗原棗角蛋白17的HLA-DRB1*07限制性T细胞表位进行确定.方法在前期已确定角蛋白17的HLA-DRB1*07限制性T细胞表位区试验基础上,借助互联网服务器对其中的T细胞表位进行分析预测,人工合成T细胞表位DNA并进行GST融合表达和纯化;分离纯化外周血T细胞,将各融合表位肽段分别与正常人和银屑病患者的T细胞体外作用,检测T细胞增殖程度和培养上清中1FN-γ水平变化,从而筛选出强反应性表位.结果角蛋白17的S1(118-132)、S2(169-183)、S4(323-337)和S4(348-362)表位能够显著地促进银屑病患者T细胞增殖和IFN-γ分沁,与正常对照组比较差异有统计学意义(P均＜0.001).结论 S1(118～132)(VRALEEANTELEVKI)、S2(169～183)(ANILLQIDNARLAAD)、S4(323～337)(MQALEIELQSOQLSMK)和S4(348～362)(ENRYCVQLSQIQGLI)是银屑病特异性强反应性HLA-DRB1*07限制性T细胞表位.本研究为以后研究银屑病的免疫发病机制和治疗打下了一定基础. 展开更多

关键词 银屑病 角蛋白17 T细胞表位 HLA—DRB1＊07

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