富血小板血浆联合髓芯减压调控激素性股骨头坏死模型兔氧化应激反应 被引量：15

1

作者 王哲 李炎 +4 位作者 娄理想 陆川 丁启龙 顾锡龙 李泽清 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第11期1677-1682,共6页

背景:氧化应激在股骨头坏死损伤中发挥重要作用,富血小板血浆富含生长因子,可以加快骨折愈合,配合髓芯减压术能促进非创伤性股骨头坏死的恢复。目的:探讨富血小板血浆联合髓芯减压术能否通过Keap1/Nrf2/HO-1信号通路抑制兔激素性股骨头... 背景:氧化应激在股骨头坏死损伤中发挥重要作用,富血小板血浆富含生长因子,可以加快骨折愈合,配合髓芯减压术能促进非创伤性股骨头坏死的恢复。目的:探讨富血小板血浆联合髓芯减压术能否通过Keap1/Nrf2/HO-1信号通路抑制兔激素性股骨头坏死模型氧化应激反应。方法:将40只实验新西兰兔随机分为正常组、模型组、对照组和富血小板血浆组,每组10只。除正常组外其他3组兔在无菌环境下建立激素性股骨头坏死模型,术后4周向富血小板血浆组动物股骨头内髓芯减压后注射植入0.4 mL 3%的富血小板血浆,对照组兔只进行髓芯减压术治疗,对照组与模型组兔正常饲养。14周后苏木精-伊红染色观察各组兔股骨头骨髓腔内病理学变化和骨陷窝空缺率,检测各组兔血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、还原型谷胱甘肽及丙二醛等氧化应激指标活性,TUNEL检测股骨头组织内骨细胞凋亡情况,免疫荧光检测股骨头组织内Keap1、Nrf2分布,Western Blot检测股骨头组织内Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达。实验方案经青海大学附属医院动物实验伦理委员会批准(批准号为qhdx-201908374)。结果与结论:①与正常组相比,模型组骨组织内骨小梁变细,结构紊乱;对照组较模型组有所改善,骨小梁结构得到恢复,空骨陷窝减少(P<0.05),富血小板血浆组经富血小板血浆联合髓芯减压治疗较对照组得到进一步改善,骨小梁结构更加完善,空骨陷窝进一步减少(P<0.05),与正常组无显著差异(P>0.05);②模型组血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和还原型谷胱甘肽的含量均显著低于正常组(P<0.05),而丙二醛浓度显著高于正常组(P<0.05);对照组以上指标稍有改善,但与模型组比较差异不显著(P>0.05);富血小板血浆以上氧化应激指标较模型组和对照组明显改善(P<0.05);③模型组股� 展开更多

关键词 富血小板血浆 股骨头坏死 氧化应激 keap1/nrf2/ho-1信号通路

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白藜芦醇通过调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路抑制大鼠肾草酸钙结石的形成 被引量：14

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作者 邸彦橙 王志龙 +6 位作者 张智慧 宋静 高强 吴影 南锡浩 郭振海 田河 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期70-74,共5页

目的探讨白藜芦醇(Res)对大鼠肾草酸钙结石形成的影响及与全蛋白Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路的关系。方法将60只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组、Res低剂量组(L-Res组)、Res高... 目的探讨白藜芦醇(Res)对大鼠肾草酸钙结石形成的影响及与全蛋白Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路的关系。方法将60只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组、Res低剂量组(L-Res组)、Res高剂量组(H-Res组)和Res高剂量联合Nrf2抑制剂ML385组(H-Res+ML385组),每组12只。除对照组外,其他各组均采用1%乙二醇+2%氯化铵诱导法制备肾草酸钙结石模型,连续造模4周。造模的同时分别给予Res或联合ML385处理,连续给药4周。实验结束时,测定各组大鼠24 h尿量、尿pH值,尿Ca^2+浓度、尿草酸(Ox)含量以及血清尿氮素(BUN)、肌酐(Cr)、Ca^2+含量;取肾脏组织,检测肾脏组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及活性氧(ROS)水平;Von Kossa染色观察大鼠肾脏组织草酸钙晶体形成情况;Western blot检测大鼠肾脏组织中核蛋白Nrf2及全蛋白Keap1、HO-1等表达。结果 Res可抑制模型大鼠肾脏组织中草酸钙晶体的形成,改善大鼠尿液、血液相关指标,降低肾脏组织中ROS水平和MDA含量,同时提高SOD活性,并可上调肾脏组织细胞核蛋白Nrf2及全蛋白Keap1和NO-1等蛋白的表达水平。然而,联合Nrf2抑制剂ML385处理则可抑制Res的作用效果。结论 Res可能通过激活Keap1-Nrf2/HO-1信号通路改善肾脏组织的氧化损伤,从而抑制大鼠肾脏组织草酸钙晶体的形成,具有预防肾结石的作用。 展开更多

关键词 白藜芦醇 草酸钙 结石 keap1-nrf2/ho-1信号通路

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益气活血托毒方对慢性非细菌性前列腺炎大鼠Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响 被引量：4

3

作者 唐益文 王雄 +7 位作者 陈豪特 周艳艳 丁家森 魏永强 刘建刚 高庆和 高瞻 徐峰 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第1期72-77,共6页

目的观察益气活血托毒方对慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响,探讨其治疗CNP作用机制。方法采用去势结合雌激素诱导法制备CNP大鼠模型。48只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、塞来昔布组和益气活... 目的观察益气活血托毒方对慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响,探讨其治疗CNP作用机制。方法采用去势结合雌激素诱导法制备CNP大鼠模型。48只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、塞来昔布组和益气活血托毒方组,每组12只。塞来昔布组予塞来昔布混悬液0.035 g/kg灌胃,益气活血托毒方组予益气活血托毒方水煎剂8.64 g/kg灌胃,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续28 d。Von Frey纤维丝测痛仪测定大鼠机械痛阈值,HE染色观察前列腺组织病理变化并进行病理评分,化学荧光法检测前列腺组织活性氧(ROS)含量,比色法测定前列腺组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,Western blot检测前列腺组织Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠机械痛阈值、前列腺指数显著降低(P<0.01);前列腺组织腺腔大小不一,腔内分泌物消失,间质疏松、水肿,有大量纤维组织增生和炎性细胞浸润,病理评分显著升高(P<0.01);前列腺组织ROS、MDA含量显著升高,GSH-Px活性显著降低(P<0.01),Keap1、Nrf2蛋白表达显著降低,HO-1蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,益气活血托毒方组大鼠机械痛阈值显著升高(P<0.01);前列腺组织轻微损伤,有少量纤维增生和炎性细胞浸润,病理评分显著降低(P<0.01,P<0.05);前列腺组织ROS、MDA含量显著降低,GSH-Px活性显著升高(P<0.01),Keap1、Nrf2蛋白表达显著升高,HO-1蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论益气活血托毒方可有效改善CNP大鼠前列腺组织病理形态,提高痛阈值,其作用机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,降低大鼠前列腺组织氧化应激损伤有关。 展开更多

关键词 益气活血托毒方 慢性非细菌性前列腺炎 氧化应激 keap1/nrf2/ho-1信号通路 细胞凋亡

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基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路研究当归醇提物对多囊卵巢综合征大鼠的保护作用 被引量：3

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作者 莫思懿 曹后康 +4 位作者 张可锋 晋玲 钟明利 韦日明 高雅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期740-747,共8页

目的使用来曲唑联合高脂饮食建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型,探讨当归醇提物(ethanol extract of Angelicae Sinensis Radix,EEA)对PCOS大鼠的保护作用及其作用机制。方法来曲唑联合高脂饮食诱导雌性SD... 目的使用来曲唑联合高脂饮食建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型,探讨当归醇提物(ethanol extract of Angelicae Sinensis Radix,EEA)对PCOS大鼠的保护作用及其作用机制。方法来曲唑联合高脂饮食诱导雌性SD大鼠建立PCOS模型,并用EEA干预。阴道涂片染色、HE染色、酶联免疫吸附法(ELISA)和生化指标检测评价EEA对PCOS大鼠的治疗作用,并通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测EEA对Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响。结果阴道涂片和HE染色结果表明,EEA改善了PCOS大鼠动情周期紊乱和卵巢组织病变,ELISA和生化指标检测结果表明EEA可以调节激素紊乱,改善血脂异常;且在模型组中Keap1蛋白和mRNA表达明显上调,Nrf2和HO-1蛋白和mRNA表达明显下调而经过EEA治疗后Keap1蛋白和mRNA表达明显下调,Nrf2和HO-1蛋白和mRNA表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论EEA可以减轻大鼠PCOS,其机制可能是通过促进Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,从而抑制氧化应激。 展开更多

关键词 当归醇提物 多囊卵巢综合征(PCOS) keap1/nrf2/ho-1信号通路 氧化应激 性激素 血脂

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基于Keap1/Nrf2/HO-1通路汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷体外抗氧化应激作用研究 被引量：5

5

作者 黎浩 胡蕴然 +2 位作者 杨慧 柳航 葛卫红 《药物评价研究》 CAS 2023年第4期772-780,共9页

目的探讨汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷(WODE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的抗氧化应激作用及机制。方法MTS法检测WODE(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0μmol·L^(−1))对RAW264.7细胞活力的影响;体外... 目的探讨汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷(WODE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的抗氧化应激作用及机制。方法MTS法检测WODE(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0μmol·L^(−1))对RAW264.7细胞活力的影响;体外培养RAW264.7细胞,WODE(10、20、40μmol·L^(−1))或地塞米松(1μmol·L^(−1),阳性药)预处理1 h,再给予LPS刺激24 h(造模过程不再加药),对照组不加LPS和受试物,模型组只给予LPS刺激;荧光探针检测胞内活性氧(ROS)水平;Griess反应测定细胞上清液中NO生成量;ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的分泌;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测细胞内诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、醌氧化还原酶1(NQO-1)、超氧化物歧化酶-1(SOD-1)的mRNA表达水平;Western blotting法检测细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平;免疫荧光染色法检测细胞内Kelch ECH相关蛋白1(Keap1)表达水平。结果与对照组比较,WODE浓度小于40μmol·L^(−1)时,细胞存活率没有明显变化;浓度大于80μmol·L^(−1)时,细胞存活率下降,但未见统计学差异。与模型组比较,WODE 10、20、40μmol·L^(−1)组ROS水平显著降低(P<0.01);20、40μmol·L^(−1)组NO释放显著降低(P<0.05、0.01);40μmol·L^(−1)组iNOS mRNA表达水平显著降低(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组COX-2和20、40μmol·L^(−1)组IL-1βmRNA表达水平显著降低(P<0.05、0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组TNF-α和IL-6的释放受到显著抑制(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组NQO-1 mRNA表达水平显著升高(P<0.01),40μmol·L^(−1)组SOD-1 mRNA表达水平显著升高(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组Keap1蛋白表达水平显著降低(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组HO-1蛋白和mRNA表达水平显著提高(P<0.05、0.01);20、40μmol·L^(−1)组Nrf2蛋白和40μmol·L^(−1)组Nrf2 mRNA表达水平显� 展开更多

关键词 汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷 抗氧化应激 RAW264.7细胞 keap1/nrf2/ho-1信号通路 活性氧

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葛花总黄酮通过调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用 被引量：5

6

作者 黄金玲 刘学政 《解剖科学进展》 CAS 2021年第5期541-544,共4页

目的探讨葛花总黄酮(total flavonoids of Pueraria lobate, TFF)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的影响及机制。方法雄性SD大鼠60只,利用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。糖尿病大鼠随机分成三组:糖尿病组(DM)、TFF组(200 mg/kg)及... 目的探讨葛花总黄酮(total flavonoids of Pueraria lobate, TFF)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的影响及机制。方法雄性SD大鼠60只,利用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。糖尿病大鼠随机分成三组:糖尿病组(DM)、TFF组(200 mg/kg)及二甲双胍组(Met, 75 mg/kg,阳性对照)灌胃治疗,另取15只正常大鼠作为对照组(CON)。12周后,检测各组大鼠血糖、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;HE染色检测大鼠RGC数量,免疫组织化学染色及Western blot检测大鼠视网膜ECH相关蛋白1(ECH-associated protein 1, Keap1)、核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor-2, Nrf2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)蛋白表达。结果与CON组相比,DM组血糖、MDA含量、Keap1及Nrf2表达明显增加,SOD活性及HO-1表达明显下降。而经过12周治疗后上述表现均有明显改善。结论 TFF通过降低血糖,增强大鼠视网膜的抗氧化能力,保护糖尿病状态下的RGC损伤,与调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路有关。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 葛花总黄酮 氧化应激 keap1-nrf2/ho-1信号通路 SD大鼠

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原儿茶醛对环磷酰胺所致急性肝损伤的保护作用及机制研究

7

作者 杨世瑜 高思齐 +6 位作者 肖雨 何继江 邱昌龙 李沙 齐亚娟 李继安 储金秀 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第22期7714-7723,共10页

目的 探讨原儿茶醛(protocatechuic aldehyde,PCA)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CPA)所致急性肝损伤的预防作用及其机制。方法 分别以PCA(15、30 mg/kg)和甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,DG,67.5 mg/kg)ig小鼠,1次/d,连续14 d后... 目的 探讨原儿茶醛(protocatechuic aldehyde,PCA)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CPA)所致急性肝损伤的预防作用及其机制。方法 分别以PCA(15、30 mg/kg)和甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,DG,67.5 mg/kg)ig小鼠,1次/d,连续14 d后,ip CPA(200 mg/kg)建立急性肝损伤小鼠模型,第2天收集小鼠血清和肝脏组织;采用生化法检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平以及肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;采用苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察各组小鼠肝组织病理变化;TUNEL染色检测小鼠肝脏细胞凋亡情况;采用超氧阴离子荧光探针检测小鼠肝细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的表达情况;采用免疫组织化学染色检测小鼠肝细胞中核因子-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的易位情况;采用蛋白质免疫印迹法检测小鼠肝组织凋亡淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine containing cysteinyl aspartate-3,Caspase-3)的表达,及氧化应激相关蛋白Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein1,Keap1)、Nrf2、血红素加氧酶(heme oxygenase,HO-1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(glutamate-cysteine ligase modifier subunit,GCLM)、醌氧化还原酶1 [NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]的表达情况。结果 PCA可以增加肝脏指数,降低血清ALT和AST水平,减少肝组织的细胞间隙和细胞肿胀,呈剂量相关性地减轻CPA诱导的肝损伤(P<0.05、0.01、0.001);PCA能明显降低肝组织TUNEL荧光染色强度(P<0.005)。此外,蛋白质免疫 展开更多

关键词 原儿茶醛 肝损伤 环磷酰胺 氧化应激 细胞凋亡 keap1/nrf2/ho-1信号通路

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基于网络药理学和UPLC-Q-TOF/MS结合动物实验探究蓍草预防急性肝损伤的作用机制 被引量：2

8

作者 王超 付瑞嘉 +3 位作者 左倩 徐顶巧 乐世俊 唐于平 《中南药学》 CAS 2023年第2期342-350,共9页

目的 通过UPLC-Q-TOF/MS定性分析和网络药理学预测并结合动物实验验证初步探究蓍草保护急性肝损伤(ALI)大鼠肝脏的作用机制。方法 采用UPLC-Q-TOF/MS法鉴定蓍草中的化学成分,利用TCMSP、CTD和Similarity Ensemble Approach等数据库筛选... 目的 通过UPLC-Q-TOF/MS定性分析和网络药理学预测并结合动物实验验证初步探究蓍草保护急性肝损伤(ALI)大鼠肝脏的作用机制。方法 采用UPLC-Q-TOF/MS法鉴定蓍草中的化学成分,利用TCMSP、CTD和Similarity Ensemble Approach等数据库筛选这些成分的作用靶点,同时在GeneCards、OMIM和NCBI数据库筛选ALI相关靶点,将成分作用靶点与疾病靶点的交集靶点导入STRING构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并使用Cytoscape3.8.2软件进行网络拓扑分析筛选核心靶点,通过DAVID数据库对关键靶点进行GO和KEGG富集分析。通过肝组织HE染色,大鼠血清中肝功能指标、炎症因子水平以及肝组织中氧化应激水平的测定对蓍草防治ALI的药效进行评价,并利用免疫组化的方法对预测的核心靶点及KEGG富集通路结果进行验证。结果 经UPLC-Q-TOF/MS法鉴定出20个成分,网络药理学方法筛选得到上述成分预防治疗ALI的核心靶点104个,GO功能主要与炎症反应、氧化还原酶活性和蛋白酶结合等生物过程相关,KEGG结果主要涉及IL-17、TNF及Toll样受体等信号通路;动物实验结果显示,蓍草预防性给药后能够缓解大鼠肝脏的损伤,显著降低模型组大鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-6、IL-1β水平和肝组织中MDA的含量,且SOD和CAT在肝组织中的活性显著增强;此外还发现蓍草给药后可上调大鼠肝脏组织中Nfr2蛋白的表达,下调TLR-4、NF-κBp65、keap1和HO-1蛋白的表达。结论 蓍草对四氯化碳诱导的ALI大鼠肝脏具有保护作用,该作用可能与其调节keap1/Nrf2/HO-1和Toll样受体信号通路有关。 展开更多

关键词 蓍草 急性肝损伤 网络药理学 keap1/nrf2/ho-1信号通路 TOLL样受体信号通路

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黄精提取物改善D-半乳糖所致衰老小鼠器官功能及机制研究 被引量：1

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作者 解小芬 胡光线 +7 位作者 潘露 伍徐娴 周丹 陈九琼 匡梦岚 叶兰 秦臻 许键炜 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第18期449-457,共9页

目的:旨在探讨黄精提取物(Polygonatum sibiricum extract,PSE)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致衰老小鼠重要脏器的保护作用及其潜在的分子机制。方法:将小鼠随机分为五组(n=10):对照组、D-gal(500 mg/kg)组、PSE低(0.5 g/kg)、中(1 g/... 目的:旨在探讨黄精提取物(Polygonatum sibiricum extract,PSE)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致衰老小鼠重要脏器的保护作用及其潜在的分子机制。方法:将小鼠随机分为五组(n=10):对照组、D-gal(500 mg/kg)组、PSE低(0.5 g/kg)、中(1 g/kg)、高(2 g/kg)剂量组。测定小鼠器官指数(胸腺、脾脏、肝脏、肾脏);测定血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿酸(UA)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、尿素肌酐比值(BUN/Scr)、肾小球滤过率(eGFR)活性;HE及Masson染色观察各组小鼠皮肤、肝脏、肾脏、心脏、大脑、肺等器官病理学变化;用Real-time PCR法检测各组小鼠肝脏、肾脏、心脏、大脑等组织中p53、p16、p21、RB、HO-1、Nrf2及Keap1 mRNA的表达水平。结果:与D-gal组相比,PSE各剂量组胸腺、脾脏、肝脏和肾脏指数均升高(P<0.05);此外,在各治疗组中,PSE降低了(P<0.05)小鼠血清中CK、CK-MB、ALT、AST、ALP、UA、UREA、CREA和BUN/Scr水平,升高了eGFR(P<0.05)水平;HE及Masson染色发现,PSE能减轻D-gal对小鼠重要器官造成的病理损伤;与对照组比较,模型组肝、肾、心、脑中p53、p16、p21、RB、Keap1 mRNA表达升高(P<0.05),HO-1、Nrf2 mRNA表达降低(P<0.05),与D-gal组比较,PSE各治疗组小鼠肝脏、肾脏、心脏、大脑组织中p53、p16、p21、RB、Keap1 mRNA降低(P<0.05),HO-1、Nrf2 mRNA升高(P<0.05)。结论:PSE具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制p53/p21和p16-RB通路以及Keap1/Nrf2/HO-1通路有关。 展开更多

关键词 黄精提取物 抗衰老 p53/p21 信号通路 p16-RB 信号通路 keap1/nrf2/ho-1 信号通路

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基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路探讨二十五味珊瑚丸对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的作用研究 被引量：2

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作者 张博宇 罗晓敏 +5 位作者 丁翼 杨斌 阙涵韵 谭睿 龚普阳 顾健 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2082-2089,共8页

该研究基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路研究藏族药二十五味珊瑚丸(Ershiwuwei Shanhu Pills,ESP)改善东莨菪碱(scopolamine,scop)致小鼠学习记忆障碍的作用机制。将ICR小鼠随机分为空白组、模型组、二十五味珊瑚丸低(200 mg·kg^(-1))... 该研究基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路研究藏族药二十五味珊瑚丸(Ershiwuwei Shanhu Pills,ESP)改善东莨菪碱(scopolamine,scop)致小鼠学习记忆障碍的作用机制。将ICR小鼠随机分为空白组、模型组、二十五味珊瑚丸低(200 mg·kg^(-1))、中(400 mg·kg^(-1))、高(800 mg·kg^(-1))剂量组和盐酸多奈哌齐组,采用腹腔注射东莨菪碱的方法建立学习记忆障碍模型。通过Morris水迷宫行为学实验检测小鼠学习和记忆能力,Nissl染色检测小鼠海马和皮质神经元损伤情况,免疫荧光检测小鼠海马和皮质中神经元特异核蛋白(NeuN)表达,采用生化试剂盒检测小鼠海马中乙酰胆碱(Ach)含量和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)含量,Western blot法检测海马中细胞质Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白含量。结果显示,与模型组相比,二十五味珊瑚丸给药组小鼠在Morris水迷宫行为学实验中潜伏期显著减少;Nissl染色结果显示,神经元数量显著增加;免疫荧光检测NeuN结果显示,NeuN表达显著提高;AchE活力和MDA水平显著降低,Ach含量和SOD、CAT、T-AOC水平显著提高;Western blot法检测结果显示,模型组小鼠Keap1表达显著提高,二十五味珊瑚丸给药组表达差异无统计学意义,与模型组小鼠相比,二十五味珊瑚丸给药组Nrf2和HO-1表达显著提高。结果表明,二十五味珊瑚丸对东莨菪碱导致的小鼠学习记忆障碍有保护作用,其作用机制可能是通过调节Keap1/Nrf2/HO-1信号通路发挥抗氧化作用。 展开更多

关键词 二十五味珊瑚丸 东莨菪碱 氧化应激 keap1/nrf2/ho-1信号通路

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热补针法对类风湿关节炎寒证家兔膝关节滑膜Keap1-Nrf2/ARE/HO-1信号通路的影响 被引量：1

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作者 张枫帆 郑欣 +7 位作者 余俊玲 年芳红 袁博 金芳梅 刘雪君 田雪梅 王海东 杜小正 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期650-657,共8页

目的:观察热补针法对类风湿关节炎(RA)寒证家兔膝关节滑膜组织Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化元件(ARE)/血红素加氧酶(HO-1)信号转导通路的影响,从氧化应激角度探讨热补针法治疗RA的机制。方法:新... 目的:观察热补针法对类风湿关节炎(RA)寒证家兔膝关节滑膜组织Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化元件(ARE)/血红素加氧酶(HO-1)信号转导通路的影响,从氧化应激角度探讨热补针法治疗RA的机制。方法:新西兰兔随机分为正常组、模型组、平补平泻组、捻转补法组、热补针法组,每组6只。通过卵蛋白诱导联合低温冷冻法复制RA寒证模型。平补平泻组、捻转补法组、热补针法组分别于双侧“足三里”施以平补平泻法、捻转补法及热补针法,每次30 min,1次/d,治疗7 d。治疗后观察各组家兔的一般情况;测定各组家兔膝关节周径、痛阈值;彩色超声诊断仪观察家兔膝关节滑膜变化并进行影像评级;HE染色观察各组家兔膝关节滑膜组织病理形态并评分;荧量定量PCR法检测各组家兔膝关节滑膜组织Keap1、Nrf2、HO-1、谷胱甘肽氧化酶(GSH-PX)1 mRNA表达水平;Western blot法检测各组家兔膝关节滑膜组织HO-1蛋白表达量。结果:正常组家兔摄食、饮水正常,活动灵敏,精神状态良好;模型组家兔肢体蜷缩,精神萎靡,脱毛严重,活动量小,饮食、饮水量少,皮肤青紫,双后腿蜷曲跛行,触之躲避行为明显。针刺后,各针刺组家兔较模型组一般情况均好转、活动量增大。与正常组比较,模型组家兔膝关节周径明显增大(P<0.05);与模型组比较,各针刺组膝关节周径缩小(P<0.05)。与正常组比较,模型组家兔的膝关节病理积分,滑膜组织Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),滑膜组织Keap1、GSH-PX1 mRNA表达量和痛阈降低(P<0.05)。与模型组比较,各针刺组痛阈,滑膜组织Nrf2、GSH-PX1、HO-1 mRNA及HO-1蛋白表达升高(P<0.05),膝关节周径、病理积分及滑膜组织Keap1 mRNA表达量降低(P<0.05)。热补针法组痛阈,Nrf2、GSH-PX1、HO-1 mRNA及HO-1蛋白表达高于平补平泻组和捻转补法组(P<0.05),膝关节病理积分及滑膜Kea 展开更多

关键词 类风湿关节炎 热补针法 氧化应激 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1-核因子E2相关因子2/抗氧化元件/血红素加氧酶信号转导通路

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扁塑藤素增强顺铂对条件性重编程原代肺癌细胞敏感性的机制 被引量：1

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作者 石艺 钟燕 +3 位作者 刘小虎 柯尊富 陈孝 唐欲博 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第7期841-847,共7页

目的 探究扁塑藤素是否能增强顺铂的抗肺癌作用及其作用机制。方法 利用条件性重编程技术建立患者肿瘤组织来源的肺癌细胞;用MTS检测细胞的增殖活力;用Calcein-AM/PI双染法检测细胞的状态;用Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;用An... 目的 探究扁塑藤素是否能增强顺铂的抗肺癌作用及其作用机制。方法 利用条件性重编程技术建立患者肿瘤组织来源的肺癌细胞;用MTS检测细胞的增殖活力;用Calcein-AM/PI双染法检测细胞的状态;用Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;用Annexin V-APC流式细胞凋亡实验检测细胞的凋亡情况;用DCFH-DA检测细胞内ROS的水平;用JC-1和DiOC6染色定性和定量检测细胞的线粒体膜电位;用qRT-PCR检测mRNA的水平;用Western Blot检测细胞蛋白表达水平。结果 与单一药物处理相比,扁塑藤素联合顺铂能显著抑制细胞活力(P <0.01);增强顺铂诱导的细胞迁移和侵袭抑制能力(P <0.01);提高细胞内ROS的水平(P <0.01);降低细胞线粒体膜电位(P<0.01);抑制NRF2和HO-1的表达,增加细胞凋亡(P <0.01)。结论 扁塑藤素可协同增强顺铂的抗肺癌能力,其机制可能与调控KEAP1-NRF2/HO-1信号通路蛋白表达有关。 展开更多

关键词 扁塑藤素 顺铂 条件性重编程肺癌细胞 氧化应激 keap1-nrf2/ho-1信号通路

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miR-19通过Keap-Nrf2/HO-1信号通路对卵巢癌细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 姜红云 邬琳 +2 位作者 葛俊丽 姚念玲 康锋 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第17期3217-3221,3211,共6页

目的:研究卵巢癌组织和细胞中mi R-19的表达,探讨其异常表达对卵巢癌细胞Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like epichlorohydrin-associated protein1,Keap1)--核因子E2相关因子2(nuclearfactor-E2-relatedfactor2,Nrf2)/血红素氧合... 目的:研究卵巢癌组织和细胞中mi R-19的表达,探讨其异常表达对卵巢癌细胞Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like epichlorohydrin-associated protein1,Keap1)--核因子E2相关因子2(nuclearfactor-E2-relatedfactor2,Nrf2)/血红素氧合酶-1(heme oxygenase1,HO-1)信号通路及卵巢癌细胞增殖的影响。方法:回顾性收集2019年1月至2020年12月于我院就诊的患者经病理切片诊断为卵巢癌上皮细胞的手术标本30例,卵巢良性肿瘤标本30例,正常卵巢组织标本30例。免疫组化检测不同标本中Keap1、Nrf2、HO-1的表达,检测卵巢组织及细胞中mi R-19、Keap1、Nrf2、HO-1的m RNA表达水平,及卵巢癌细胞中Keap1、Nrf2、HO-1的蛋白表达水平。在OVCAR-3细胞中沉默mi R-19后,Western Blot检测细胞内Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达水平,收集沉默mi R-19,对照组,沉默Nrf2、对照组的OVCAR-3细胞,继续培养0 h、24 h、48 h后,检测细胞增殖和凋亡。结果:Keap1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达显著低于良性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织;Nrf2和HO-1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达显著低于良性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织(P<0.05);沉默mi R-19抑制其表达后,细胞内Keap1 m RNA、蛋白表达水平明显升高,Nrf2、HO-1 m RNA表达水平无明显变化,蛋白表达水平明显降低(P<0.05);沉默mi R-19组、沉默Nrf2组与转染阴性对照组相比,增殖能力明显降低,凋亡能力明显升高(P<0.05)。结论:卵巢癌细胞中,mi R-19表达水平升高,可通过调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路影响卵巢癌细胞的增值、凋亡能力。 展开更多

关键词 miR-19 keap-nrf2/ho-1信号通路 卵巢癌 增殖

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紫檀芪调节Keap-1/Nrf2/HO-1信号通路对非酒精性脂肪肝大鼠氧化应激和细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 沈新辉 周晓玲 +3 位作者 刘琳 王月明 黄华萍 罗艺 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第23期4434-4440,共7页

目的:研究紫檀芪调节Kelch样ECH关联蛋白1(Keap-1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠氧化应激和细胞凋亡的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、紫檀芪低剂量组(30 mg/kg... 目的:研究紫檀芪调节Kelch样ECH关联蛋白1(Keap-1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠氧化应激和细胞凋亡的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、紫檀芪低剂量组(30 mg/kg)、紫檀芪高剂量组(60 mg/kg)、紫檀芪(60 mg/kg)+N-(4-(2,3-二氢-1-(2’-甲基苯甲酰)-1H-吲哚-5-基)-5-甲基-2-噻唑基)-1,3-苯并二氧唑-5-乙酰胺(ML385)(30 mg/kg)组,每组12只。模型组与药物干预组大鼠以高脂饲料饲养诱导NAFLD模型,对照组大鼠以普通饲料饲养,各组连续喂养12周。以紫檀芪和ML385分组处理14 d后(对照组以等剂量生理盐水处理),检测各组大鼠脂代谢指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)水平]、肝指数、肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)]水平、血清白细胞介素(IL)-17、IL-6、IL-10、氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)]水平;原位末端标记法(TUNEL)染色检测各组大鼠肝细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肝组织凋亡相关蛋白及Keap-1/Nrf2/HO-1通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠血清IL-10、SOD及CAT水平、肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05),TG、TC及FFA水平、肝指数、ALT及AST水平、血清IL-17、IL-6、MDA水平、肝细胞凋亡率、肝组织Keap-1及Bax表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,紫檀芪低、高剂量组大鼠血清IL-10、SOD及CAT水平、肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2表达水平均升高(P<0.05),TG、TC及FFA水平、肝指数、ALT及AST水平、血清IL-17、IL-6、MDA水平、肝细胞凋亡率、肝组织Keap-1、Bax表达水平均降低(P<0.05);与紫檀芪低剂量组相比,紫檀芪高剂量组大鼠血清IL-10、SOD及CAT水平、肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2表达水平升高(P<0.05),TG、TC及FFA水平、肝指数、ALT及AST水平、血清IL-17、IL-6、MDA水平、� 展开更多

关键词 紫檀芪 keap-1/nrf2/ho-1信号通路 非酒精性脂肪肝 氧化应激 细胞凋亡

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虎杖苷通过调控Keap1/Nrf2/HO⁃1抑制H_(2)O_(2)诱导的SH⁃SY5Y细胞氧化应激和线粒体损伤 被引量：1

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作者 朱萍 李嘉旗 +3 位作者 尹萌辰 王睿瑞 刘保成 任光为 《上海中医药大学学报》 CAS 2023年第4期28-35,共8页

目的:探讨虎杖苷(PD)对由过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的影响及其作用机制。方法:采用SH-SY5Y细胞进行实验,细胞用不同浓度的H2O2处理24 h,通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力,以确定H2O2的诱导浓... 目的:探讨虎杖苷(PD)对由过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的影响及其作用机制。方法:采用SH-SY5Y细胞进行实验,细胞用不同浓度的H2O2处理24 h,通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力,以确定H2O2的诱导浓度。PD预处理细胞2 h后,加入H2O2诱导22 h,CCK-8法检测细胞活力,以确定PD的浓度。将细胞分为二甲基亚砜(DMSO)组、H2O2组、H2O2+PD 20μmol/L组和H2O2+PD 40μmol/L组。膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)凋亡试剂盒检测细胞凋亡,流式细胞术测定细胞内总活性氧(ROS),酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,JC-1线粒体荧光探针检测线粒体膜电位,Western blot检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、剪切的多腺苷二磷酸核糖聚合酶(Cleaved-PARP)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白的含量。结果:①CCK-8实验结果显示,400μmol/L浓度H_(2)O_(2)处理后,SH-SY5Y细胞活力为60%,故选择400μmol/L H_(2)O_(2)作为后续SH-SY5Y细胞的刺激条件;20、40、50、80μmol/L PD可显著抑制H2O2诱导的SH-SY5Y细胞活力下降(P<0.05)。②Annexin V-FITC/PI凋亡实验结果显示,20、40μmol/L PD能够抑制H_(2)O_(2) 诱导的SH-SY5Y细胞凋亡(P<0.05)。Western blot结果显示,20、40μmol/L PD能够抑制H2O2诱导的SH-SY5Y细胞中凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达(P<0.05),并促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.05)。③20、40μmol/L PD能减少H_(2)O_(2) 诱导的SH-SY5Y细胞中ROS、MDA的含量(P<0.05),以及增加GSH、SOD含量(P<0.05)。④JC-1线粒体膜电位检测结果表明,20、40μmol/L PD能够缓解H_(2)O_(2) 诱导的SH-SY5Y细胞线粒体损伤。⑤Western blot结果显示,20、40μmol/L PD能够显著抑制H_(2)O_(2) 诱导的SH-SY5Y细胞中Keap1、Nrf2和HO-1蛋白水� 展开更多

关键词 虎杖苷 人神经母细胞瘤细胞 氧化应激 线粒体损伤 过氧化物 keap1/nrf2/ho-1信号通路

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2-羟基-3-甲基蒽醌抑制结直肠癌的作用及机制研究

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作者 谭佳妮 刘文豪 +2 位作者 沈卫星 孙东东 程海波 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第2期268-274,共7页

为观察2-羟基-3-甲基蒽醌(HMA)对结直肠癌细胞增殖的影响并探讨其作用机制,本研究采用CCK8法检测HMA对结直肠癌细胞增殖的影响;Heochst-33343/PI染色检测细胞凋亡情况;同时检测细胞内ROS及GSH含量变化并应用Western blot检测细胞凋亡相... 为观察2-羟基-3-甲基蒽醌(HMA)对结直肠癌细胞增殖的影响并探讨其作用机制,本研究采用CCK8法检测HMA对结直肠癌细胞增殖的影响;Heochst-33343/PI染色检测细胞凋亡情况;同时检测细胞内ROS及GSH含量变化并应用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白及Keap-1/Nrf-2/ARE信号途径相关蛋白的表达。实验结果显示,HMA给予结直肠癌细胞后,细胞内ROS含量升高,GSH含量减少;HMA通过抑制Keap-1/Nrf-2/HO-1通路,诱导细胞发生凋亡。综上表明HMA具有抑制结肠癌细胞增殖的作用,其机制可能与破坏细胞内氧化还原平衡,抑制Keap-1/Nrf-2/HO-1通路有关。 展开更多

关键词 HMA 结直肠癌 氧化应激 keap-1/nrf-2/ho-1通路

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