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混合砷对Keap1抑制细胞Keap1/Nrf2-ARE和MAPK/ERK信号通路的影响 被引量：3
1
作者 马瑶 白雪 +2 位作者 李煜 陈柔锦 吴军 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期999-1003,共5页
[目的]探究混合砷染毒对Keap1抑制的人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)Keap1/Nrf2-ARE和MAPK/ERK信号通路的影响及对NF-κB基因表达的影响。[方法]细胞培养72 h,分为空白对照组(正常HaCaT细胞未染砷组)、阴性对照组(Keap1基因抑制且未染... [目的]探究混合砷染毒对Keap1抑制的人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)Keap1/Nrf2-ARE和MAPK/ERK信号通路的影响及对NF-κB基因表达的影响。[方法]细胞培养72 h,分为空白对照组(正常HaCaT细胞未染砷组)、阴性对照组(Keap1基因抑制且未染砷组)和3个Keap1基因抑制且混合砷染毒组,混合砷染毒浓度为2.9、5.8、29.0μmol/L;采用MTT法测定细胞生长情况;采用实时荧光定量PCR法测定HaCaT细胞Keap1、Nrf2、ERK、NF-κB的mRNA表达水平。[结果]混合砷染毒组与阴性对照组的细胞活力相比,差异具有统计学意义(F=483.9,P<0.05)。中、高浓度砷染毒组细胞活性受抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。混合砷染毒组与阴性对照组的Keap1 mRNA、Nrf2 mRNA相比,差异具有统计学意义(F=5.73,P=0.012;F=318.56,P<0.05)。Nrf2 mRNA表达呈低浓度时促进(P=0.038),中、高浓度砷染毒时抑制(P=0.014、P=0.016)。混合砷染毒组与阴性对照组的ERK、NF-κB mRNA相比,差异具有统计学意义(F=39.88,P<0.05;F=2 619.41,P<0.05)。低砷浓度染毒促进ERK基因表达(P=0.020),高砷浓度染毒则抑制其表达(P=0.003),差异有统计学意义。NF-κB基因表达与阴性对照组相比,低、中砷浓度时促进(P=0.030、P=0.032),高砷浓度时抑制(P=0.013),差异有统计学意义。[结论]Keap1抑制状况下,砷对HaCaT细胞中Nrf2、ERK和NF-κB基因表达呈低浓度时促进、高浓度时抑制的双向调节作用。 展开更多
关键词 砷 keap1抑制 HaCaT细胞 MAPK/ERK 核转录因子ΚB
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砷对Keap1抑制HaCaT细胞凋亡及抗氧化水平的影响 被引量：1
2
作者 白雪 马瑶 +3 位作者 李煜 陈柔锦 吴军 郑玉建 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期386-389,410,共5页
目的基于抑制Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-assoicated protein 1,Keap1)基因,研究砷对人永生化角质形成细胞凋亡及抗氧化水平的影响。方法培养细胞72 h,分为5组:空白对照组、阴性对照(Keap1基因抑制未染砷)、Keap1基因抑... 目的基于抑制Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-assoicated protein 1,Keap1)基因,研究砷对人永生化角质形成细胞凋亡及抗氧化水平的影响。方法培养细胞72 h,分为5组:空白对照组、阴性对照(Keap1基因抑制未染砷)、Keap1基因抑制+低砷(2.9μmol/L)、Keap1基因抑制+中砷(5.8μmol/L)和Keap1基因抑制+高砷(29.0μmol/L)组;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用实时荧光定量聚合酶链式反应检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、Keap1 mRNA水平;采用酶联免疫吸附试验检测谷胱甘肽、血红素氧化酶、环氧化酶、S-腺苷甲硫氨酸与同型半胱氨酸蛋白水平。结果 Nrf2和Keap1 mRNA表达不全相等(均有P<0.05);与阴性对照组相比,低砷组S-腺苷甲硫氨酸和同型半胱氨酸蛋白表达上调(均有P<0.05),血红素氧化酶蛋白在低、中、高砷组均上调(均有P<0.05),环氧化酶蛋白在中、高砷组上调(均有P<0.05),谷胱甘肽蛋白在高砷组上调(F=7.24,P=0.001)。结论基于Keap1基因抑制,砷暴露上调抗氧化酶活性,提高抗氧化水平,细胞凋亡下降;随着砷剂量增加,Nrf2表达下调,抗氧化水平失衡,细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 砷暴露 keap1抑制 HA Ca T细胞 抗氧化
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