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以KRAS启动子G-四链体DNA为靶点的小檗碱对人结肠癌细胞SW620的作用及机制 被引量：5
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作者 温丽娜 韩宗强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期143-149,共7页
目的：通过研究小檗碱对结肠癌细胞增殖的影响以及小檗碱是否通过调控Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog（KRAS）启动子G-四链体结构抑制结肠癌细胞Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog（KRAS）mRNA的表达,探究以KRA... 目的：通过研究小檗碱对结肠癌细胞增殖的影响以及小檗碱是否通过调控Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog（KRAS）启动子G-四链体结构抑制结肠癌细胞Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog（KRAS）mRNA的表达,探究以KRAS启动子G-四链体DNA为靶点的小檗碱对人结肠癌细胞系SW620的作用及可能机制。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法检测小檗碱对SW620细胞的增殖抑制率。采用荧光光谱研究小檗碱和KRAS启动子G-四链体DNA的结合能力,采用阴离子淬灭实验和荧光各向异性及荧光偏振实验研究二者结合的结合模式,采用圆二色光谱方法研究小檗碱对KRAS启动子G-四链体DNA构型的影响,采用圆二色光谱变温实验研究小檗碱对KRAS启动子G-四链体DNA构型热稳定性的影响,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小檗碱对SW620细胞KRAS基因转录的影响。结果：小檗碱可以抑制SW620细胞的增殖,且呈剂量依赖性。KRAS启动子G-四链体与小檗碱以近1∶1计量比结合,二者的结合常数为（0.93±0.21）×10^6L·mol^-1,结合能力较强,结合模式为末端堆积和沟槽结合的复合模式。小檗碱可维持KRAS启动子的平行G-四链体构型及热稳定性。100μmol·L^-1小檗碱能抑制SW620细胞KRAS Mrna的表达。结论：小檗碱能够与KRAS启动子G-四链体DNA结合并维持其平行构型的稳定性,小檗碱可能通过调控KRAS启动子G-四链体结构下调SW620细胞KRAS基因转录,这可能是小檗碱抑制其细胞增殖的机制之一。KRAS启动子区域G-四链体结构可能成为结肠癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 kras启动子 G-四链体 小檗碱 结肠癌 作用机制
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以KRAS启动子G-四链体DNA为靶点的血根碱对人结肠癌细胞SW620作用及其机制
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作者 温丽娜 韩宗强 +3 位作者 冯琳琳 庸琦 杜艳林 王泽民 《肿瘤药学》 CAS 2017年第2期152-158,共7页
目的研究血根碱与KRAS启动子G-四链体DNA的相互作用,探究以KRAS G-四链体DNA为靶点的血根碱对人结肠癌细胞SW620的作用及机制。方法采用MTT法检测血根碱对人结肠癌细胞SW620增殖的影响。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱等方... 目的研究血根碱与KRAS启动子G-四链体DNA的相互作用,探究以KRAS G-四链体DNA为靶点的血根碱对人结肠癌细胞SW620的作用及机制。方法采用MTT法检测血根碱对人结肠癌细胞SW620增殖的影响。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱等方法研究血根碱与KRAS启动子G-四链体DNA的相互作用。采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)检测血根碱对SW620细胞KRAS mRNA表达的影响。结果血根碱能够抑制人结肠癌SW620细胞的增殖。血根碱与KRAS启动子G-四链体DNA的结合能力较强,结合计量比接近1∶1,结合分子机制为生成了不发光的复合物。血根碱可维持G-四链体DNA的平行构型及热稳定性。血根碱能抑制人结肠癌SW620细胞KRAS mRNA的表达。结论血根碱可能通过与KRAS启动子区域G-四链体结合并维持其结构的稳定,抑制KRAS mRNA表达,进而抑制人结肠癌细胞SW620的增殖,发挥抗癌作用。 展开更多
关键词 kras启动子 G-四链体 血根碱 人结肠癌 SW620细胞 作用机制
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