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KLF5基因表达下调促进宫颈癌细胞线粒体中细胞色素C释放并诱导凋亡的实验研究 被引量：3
1
作者 滕菲 魏敏 +1 位作者 刘畅 杨永秀 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2020年第1期28-30,共3页
目的探讨下调转录因子Krüppel样因子5(KLF5)通过促进线粒体中细胞色素C的释放诱导人宫颈癌细胞凋亡的机制。方法将KLF5 siRNA干扰质粒转染至人宫颈癌HeLa细胞中。采用qRT-PCR和Western blot检测转染效果,CCK-8实验检测细胞生长情况... 目的探讨下调转录因子Krüppel样因子5(KLF5)通过促进线粒体中细胞色素C的释放诱导人宫颈癌细胞凋亡的机制。方法将KLF5 siRNA干扰质粒转染至人宫颈癌HeLa细胞中。采用qRT-PCR和Western blot检测转染效果,CCK-8实验检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,比色法检测细胞中Caspase3和Caspase-9活性,Western blot检测细胞质和线粒体中Cytc蛋白含量。结果KLF5 siRNA质粒转染HeLa细胞后能够明显抑制KLF5 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。KLF5下调可抑制HeLa细胞生长(P<0.05),诱导细胞凋亡(P<0.05),上调Caspase-3和Caspase-9活性(P<0.05)。提高细胞质Cytc蛋白含量,降低线粒体Cytc蛋白含量(P<0.05)。结论下调KLF5能够促进HeLa细胞凋亡,其作用机制可能与促进线粒体中Cytc的释放有关。 展开更多
关键词 klf5基因 HeLa细胞 凋亡 细胞色素C
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麝鼠香腺Klf5基因的差异表达及进化分析 被引量：1
2
作者 满欣 王辰 +2 位作者 李天峰 雷行 白素英 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第23期109-114,120,137,共8页
为了了解麝鼠Klf5基因结构、生物学功能及在麝鼠香腺中的表达差异,探究Klf5基因在香腺发育过程中的作用,试验自2019年开始于2月末选购约10月龄、体况相近的麝鼠若干只,于2—9月份每月月末各随机挑选3只,适应性饲养2 d后取两侧香腺,进行... 为了了解麝鼠Klf5基因结构、生物学功能及在麝鼠香腺中的表达差异,探究Klf5基因在香腺发育过程中的作用,试验自2019年开始于2月末选购约10月龄、体况相近的麝鼠若干只,于2—9月份每月月末各随机挑选3只,适应性饲养2 d后取两侧香腺,进行RNA提取与反转录并对Klf5基因进行测序,对Klf5基因编码序列(CDS)的编码蛋白进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术分析成年雄性麝鼠繁殖周期内香腺组织中Klf5基因转录水平的差异表达,同时探讨不同物种间Klf5基因的进化关系。结果表明:麝鼠Klf5基因CDS全长1 353 bp,可编码450个氨基酸,为不稳定的、亲水性、非分泌、非跨膜蛋白,主要定位于细胞核,有3个典型的锌指结构域。Klf5基因在麝鼠香腺中相对表达量自2—9月份整体呈上调—下调—上调—下调的双峰表达趋势。麝鼠Klf5基因与仓鼠科缓行田鼠、草原田鼠和水鼠平遗传距离最近。说明在麝鼠香腺发育和泌香周期变化过程中,Klf5基因与麝鼠香分泌相关并参与香腺细胞发育调控,在进化上较为保守。 展开更多
关键词 麝鼠 香腺 klf5基因 生物信息学分析 表达
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山羊KLF5基因生物学特征与时空表达分析 被引量：1
3
作者 谢光杰 杜宇 +3 位作者 许晴 马洁琼 邱翔 林亚秋 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期225-232,共8页
为阐明KLF5在山羊不同组织和不同诱导分化阶段的肌内脂肪细胞中的表达特性,利用降落PCR克隆山羊KLF5基因cDNA序列,通过各种在线工具分析山羊KLF5基因的生物学特征,利用实时荧光定量PCR技术分析KLF5基因在山羊不同组织和不同诱导分化阶... 为阐明KLF5在山羊不同组织和不同诱导分化阶段的肌内脂肪细胞中的表达特性,利用降落PCR克隆山羊KLF5基因cDNA序列,通过各种在线工具分析山羊KLF5基因的生物学特征,利用实时荧光定量PCR技术分析KLF5基因在山羊不同组织和不同诱导分化阶段的肌内脂肪细胞中的表达水平。结果表明,克隆获得山羊KLF5基因序列1 735 bp,其中包括1 365 bp完整的开放阅读框(ORF)、8 bp的5′非翻译区(UTR)和362 bp的3′UTR。蛋白预测显示,山羊KLF5编码454个氨基酸,合成不具有跨膜结构和信号肽的不稳定的亲水性蛋白。组织表达谱显示KLF5基因在山羊心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、皮下脂肪和腹间脂肪等组织中均有表达,但在肺组织中的表达量较高,显著高于除腹间脂肪外的其他组织中的表达(P<0.05)。同时,细胞时序表达谱表明KLF5在分化的山羊肌内脂肪细胞中的表达水平均高于肌内前体脂肪细胞中的表达水平,且在诱导分化第5天时的表达量最高,显著高于第0天的表达量(P<0.05)。研究结果发现,具有3个锌指结构域等复杂结构的KLF5蛋白可能在山羊肌内脂肪细胞分化后期发挥正向的调控作用,并促进山羊肌内脂肪沉积。 展开更多
关键词 山羊 klf5基因 克隆 生物学特征 表达特性
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髓系KLF5基因缺失小鼠腹主动脉瘤形成的生物信息学分析
4
作者 常全 张娜娜 马冬 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2020年第6期692-698,共7页
背景腹主动脉瘤(AAA)是一种老年常见高死亡率的心血管系统疾病,发病机制不明确,临床上无有效治疗药物。本课题组前期研究发现,KLF5基因在人和小鼠AAA组织中表达升高,但是对于详细的KLF5基因调控炎症相关基因表达的网络分析未见报道。目... 背景腹主动脉瘤(AAA)是一种老年常见高死亡率的心血管系统疾病,发病机制不明确,临床上无有效治疗药物。本课题组前期研究发现,KLF5基因在人和小鼠AAA组织中表达升高,但是对于详细的KLF5基因调控炎症相关基因表达的网络分析未见报道。目的利用基因芯片技术对髓系KLF5基因表达缺失(LyKLF5-/-)小鼠AAA的差异表达基因进行生物信息学分析,探讨KLF5基因在AAA中的调控机制。方法研究时间为2015年1月-2019年4月。将SPF级KLF5-flox小鼠和SPF级LysM-cre小鼠杂交培育的雄性髓系遗传性LyKLF5-/-小鼠与同笼野生型(WT)C57BL/6小鼠各3只作为实验动物。通过CaPO4诱导小鼠AAA模型,并提取肾下腹主动脉组织总RNA行m RNA芯片筛查。对于筛选出的差异表达基因,利用在线数据库Metascape进行GO功能富集分析和KEGG富集分析,再利用STRING在线数据库进行蛋白互作网络分析。结果 mRNA芯片共筛选到上调表达基因646个,下调表达基因1 410个(|FC|≥2,P<0.05)。与WT小鼠比较,抑制炎症的基因在LyKLF5-/-小鼠表达增加,Bcas3、Hck基因表达分别上调3.96、3.14倍;促进炎症的基因在LyKLF5-/-小鼠表达降低,Retnla、Olig1、Tnfrsf11a分别下调7.68、5.07、3.66倍。GO功能富集分析显示上调差异基因主要参与多肽抗原合成和表达的调控、核苷二磷酸代谢过程、肌节组织的正向调节等过程;下调差异基因主要参与生长发育、细胞对葡萄糖刺激反应的胰岛素分泌调节、平滑肌细胞迁移的正调控等过程。KEGG富集分析显示上调差异基因主要影响破骨细胞分化、吞噬小体、氨基酸的生物合成等通路;下调差异基因主要影响血管平滑肌收缩、泛素介导的蛋白水解作用以及肌动蛋白细胞骨架的调控等通路。蛋白互作网络分析证实,小鼠髓系LyKLF5-/-导致参与血管炎症相关基因Bcas3、Hck表达上调和Retnla、Olig1、Tnfrsf11a表达下调。结论 Bcas3、Hck、Retnla 展开更多
关键词 主动脉瘤 腹 髓系细胞 klf5基因 表达谱芯片 小鼠
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