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血小板第四因子对CD34^+白血病细胞系KG1a粘附功能的影响
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作者 张晶 马月霞 韩忠朝 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期160-164,共5页
目的研究血小板第四因子(PF4)对CD34+白血病细胞系KG1a细胞与人脐静脉内皮细胞系ECV-304细胞之间粘附性及对多种粘附分子表达的影响。方法采用粘附实验、粘附阻断实验、MTT染色、半定量RT-PCR、免疫标记流式细胞仪测定等方法。结果穴1雪... 目的研究血小板第四因子(PF4)对CD34+白血病细胞系KG1a细胞与人脐静脉内皮细胞系ECV-304细胞之间粘附性及对多种粘附分子表达的影响。方法采用粘附实验、粘附阻断实验、MTT染色、半定量RT-PCR、免疫标记流式细胞仪测定等方法。结果穴1雪PF4可以增加KG1a细胞与ECV-304细胞之间的粘附作用。PF4与KG1a及ECV-304细胞同时孵育或与KG1a或ECV-304细胞单独孵育,均使KG1a细胞粘附能力增加。穴2雪抗粘附分子CD49d、CD106、CD54单克隆抗体可显著减少PF4对KG1a粘附的增加作用,而抗粘附分子CD62L、CD62E、CD62P单抗则对PF4的这种增加粘附的作用没有影响。穴3雪在PF4作用的3h内,半定量RT-PCR检测粘附分子CD49d、CD106、CD54mRNA表达水平有不同程度的上调。(4)PF4作用2h后,流式细胞仪分析显示KG1a细胞上的CD49d、ECV-304细胞上的CD54蛋白表达水平显著增加。结论PF4通过上调粘附分子的表达促进KG1a细胞的粘附功能。 展开更多
关键词 血小板第四因子 kg1a细胞系 ECV-304细胞系 粘附 CD34^+白血病细胞系 影响
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人白血病细胞系KG1a中P2X_7受体的表达和功能研究
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作者 张秀军 孟丽君 《唐山师范学院学报》 2005年第5期33-36,53,共5页
用半定量RT-PCR和流式细胞术,研究了白血病细胞系KG1a中P2X7受体在基因和蛋白水平的表达。用荧光分光光度计,测定了用激动剂三磷酸腺苷(ATP)和苯甲酰苯甲酸ATP(BzATP)刺激前后细胞内钙离子浓度的变化,证明P2X7受体的功能。结果表明:KG1... 用半定量RT-PCR和流式细胞术,研究了白血病细胞系KG1a中P2X7受体在基因和蛋白水平的表达。用荧光分光光度计,测定了用激动剂三磷酸腺苷(ATP)和苯甲酰苯甲酸ATP(BzATP)刺激前后细胞内钙离子浓度的变化,证明P2X7受体的功能。结果表明:KG1a细胞表达P2X7受体,且在激动剂的刺激下能引起KG1a细胞通过P2X_7受体的胞外钙内流;去除胞外钙离子时,激动剂不能引起胞内钙浓度的升高;提示KG1a细胞表达P2X7受体的基因和功能蛋白,激活该受体引起胞外钙离子的内流。 展开更多
关键词 P2X7 kg1a细胞系 离子通道
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八种化疗药物对MUTZ-1和KG1a细胞系增生抑制作用的研究
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作者 冯敏 周学慧 +1 位作者 杨琳 孙娟 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2006年第6期416-418,共3页
目的探讨骨髓增生异常综合征急性髓系白血病变的患者对现今常用化疗药物的敏感谱。方法应用MTT法观察Ara-C,DNR,MTZ,VP16,AMSA,HHT,IDA和TPT等8种化疗药物体外对MDS细胞系MUTZ-1及人AML细胞系KG1a的增生抑制作用。结果两种细胞系同一种... 目的探讨骨髓增生异常综合征急性髓系白血病变的患者对现今常用化疗药物的敏感谱。方法应用MTT法观察Ara-C,DNR,MTZ,VP16,AMSA,HHT,IDA和TPT等8种化疗药物体外对MDS细胞系MUTZ-1及人AML细胞系KG1a的增生抑制作用。结果两种细胞系同一种药物之间IC50值差异无统计学意义,发现HHT的两种细胞系IC50值较小,并且是8种药物中起效最快的药物,MUTZ-1和KG1a细胞24h细胞活力分别为59.6%和81.5%。结论HHT有可能是MDS-AML的有效治疗药物,值得进一步研究。MUTZ-1细胞系可能作为研究HHT作用机制的体外模型。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 急性髓白血病变 MUTZ-1 kg1a细胞系增生
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川芎嗪对急性髓性白血病KG-1a细胞表面标志物的影响 被引量:5
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作者 张宇 田劭丹 +2 位作者 侯丽 许亚梅 陈信义 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第5期844-848,共5页
目的:探讨川芎嗪对急性髓性白血病KG-1a细胞表面标志物的影响。方法:通过体外细胞培养技术,利用中药有效成分单体干预细胞生长,运用MTT法及流式细胞术检测了经川芎嗪干预后的KG-1a细胞表面标志物CD34、CD33、CD123与CD7、CD56、CD44表... 目的:探讨川芎嗪对急性髓性白血病KG-1a细胞表面标志物的影响。方法:通过体外细胞培养技术,利用中药有效成分单体干预细胞生长,运用MTT法及流式细胞术检测了经川芎嗪干预后的KG-1a细胞表面标志物CD34、CD33、CD123与CD7、CD56、CD44表达。结果:川芎嗪干预KG-1a细胞48小时后,细胞表面标志物CD34+CD33+、CD34+CD123+、CD33+CD123+表达率较对照组明显减少(P<0.05),但是对于CD34+表达率无明显作用,同时,川芎嗪干预KG-1a细胞48小时后,KG-1a细胞表面标志物CD7、CD56、CD44荧光强度与对照组比较明显降低(P<0.05),但是对KG-1a细胞表面标志物CD7、CD56、CD44表达率无明显影响,与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:川芎嗪逆转白血病耐药作用,除能够降低MDR、P-gp高表达外,能够降低白血病干细胞特异性表面标志物CD34+CD123+、CD34+CD33+、CD33+CD123+、CD7、CD56、CD44表达水平,从白血病干细胞水平逆转多药耐药。 展开更多
关键词 川芎嗪 kg-1a细胞系 分子标志物
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人白血病细胞系KG-1a中肿瘤干细胞样亚群细胞的初步研究 被引量:3
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作者 杨松 钟晓明 +3 位作者 张伶 骆展鹏 何鹏 高玉洁 《细胞生物学杂志》 CSCD 2008年第4期527-531,共5页
探讨人白血病细胞系KG-1a中是否存在具有肿瘤干细胞样生物学特性的亚群细胞。瑞氏染色和吖啶橙染色分别观察白血病细胞系KG-1a细胞形态和RNA含量;流式细胞术检测细胞周期分布;免疫组化和流式细胞术检测KG-1a细胞CD34的表达;流式细胞术检... 探讨人白血病细胞系KG-1a中是否存在具有肿瘤干细胞样生物学特性的亚群细胞。瑞氏染色和吖啶橙染色分别观察白血病细胞系KG-1a细胞形态和RNA含量;流式细胞术检测细胞周期分布;免疫组化和流式细胞术检测KG-1a细胞CD34的表达;流式细胞术检测CD34+CD38–亚群细胞;烟酸己可碱Hoechst33342染色后用荧光显微镜观察KG-1a细胞中侧群(side population,SP)样细胞所占比例。结果显示,白血病细胞系KG-1a细胞核仁易见,形态原始;部分细胞RNA含量低,细胞处于G0/G1期的比例占15.5%。绝大多数细胞的胞浆和胞膜皆表达CD34抗原,KG-1a中CD34+细胞占96.3%,CD34+CD38–亚群细胞占7.02%;SP样细胞大致比例为7.60%。本研究表明,人白血病细胞系KG-1a中存在具有肿瘤干细胞样生物学特性的亚群细胞。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 kg-1a细胞系 免疫表型 侧群细胞
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5-FU富集人白血病细胞系KG-1a中肿瘤干细胞样亚群细胞 被引量:2
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作者 杨松 钟晓明 +3 位作者 张伶 高玉洁 骆展鹏 何鹏 《细胞生物学杂志》 CSCD 2008年第6期786-790,共5页
探讨利用细胞周期特异性药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)从人白血病细胞系KG-1a中富集肿瘤干细胞样亚群细胞。体外药物敏感试验确定5-FU的最佳作用浓度和作用时间;KG-1a细胞经5-FU药物处理后,流式细胞术检测存活细胞群中CD34+CD38... 探讨利用细胞周期特异性药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)从人白血病细胞系KG-1a中富集肿瘤干细胞样亚群细胞。体外药物敏感试验确定5-FU的最佳作用浓度和作用时间;KG-1a细胞经5-FU药物处理后,流式细胞术检测存活细胞群中CD34+CD38-亚群细胞比例;吖啶橙染色观察细胞内的核酸组成;RT-PCR半定量检测细胞内三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily Gmember2,ABCG2)mRNA的表达;半固体培养观察细胞的集落形成能力。结果显示,50μg/ml5-FU作用KG-1a细胞4天后,CD34+CD38-亚群细胞比例提高10倍以上;吖啶橙染色可见大部分细胞核酸以发出绿色荧光的DNA为主,RNA含量低;此类细胞高表达ABCG2 mRNA水平;而药物处理后细胞集落形成数量较未处理细胞明显减少。研究结果表明,利用5-FU能够杀死增殖期细胞的性质,成功建立体外药物筛选富集人白血病细胞系KG-1a中肿瘤干细胞样亚群细胞的方法。 展开更多
关键词 白血病干细胞 5-氟尿嘧啶 kg-1a细胞系 集落形成 耐药
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传统的冷冻保存液中加入过氧化氢酶和海藻糖可提高人造血细胞体外迁移和黏附功能和增强防冻效果
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作者 Sasnoo LM 叶兵(摘译) 《国外医学(输血及血液学分册)》 2005年第5期F0003-F0003,共1页
背景 脐血造血细胞的冷冻保存是无血缘关系移植的重要步骤。有很多因素可引起冷冻过程中细胞的损伤,其中细胞膜损伤和氧自由基的产生是两个重要的因素。据早先的报道,在冷冻介质中,联合加入过氧化氢酶和海藻糖作为添加剂,在长期的培... 背景 脐血造血细胞的冷冻保存是无血缘关系移植的重要步骤。有很多因素可引起冷冻过程中细胞的损伤,其中细胞膜损伤和氧自由基的产生是两个重要的因素。据早先的报道,在冷冻介质中,联合加入过氧化氢酶和海藻糖作为添加剂,在长期的培养检测中可以得到较好的防冻效果。设计和方法从脐血中分离的单个核细胞和CD34+细胞作为造血细胞源,KG1a细胞系作为黏附功能检测中的模型系统。测试细胞在程控冰箱冷冻保存于-196℃,随后做不同的归巢相关检测。 展开更多
关键词 脐血造血细胞 冷冻保存液 过氧化氢酶 黏附功能 海藻糖 防冻 CD34+细胞 kg1a细胞系 细胞膜损伤
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甲基转移酶抑制剂对KG1a细胞系的增殖抑制作用 被引量:3
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作者 陈华 武淑兰 +3 位作者 朱强 石永进 徐国宾 王建中 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期289-293,共5页
为探讨甲基转移酶抑制剂通过干扰DNA甲基化发挥抗白血病作用的可能性,采用甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和细胞分化剂CDAⅡ体外处理因高甲基化致p15基因表达失活的髓系白血病细胞系KG1a,经细胞形态学,甲基化特异... 为探讨甲基转移酶抑制剂通过干扰DNA甲基化发挥抗白血病作用的可能性,采用甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和细胞分化剂CDAⅡ体外处理因高甲基化致p15基因表达失活的髓系白血病细胞系KG1a,经细胞形态学,甲基化特异性PCR(MSP)技术,^3H标记同位素微量分析法,限制性内切酶,流式细胞术及间接免疫荧光等技术对加药前后培养细胞的生物学特征进行观察分析。结果发现,两种药物对KG1a细胞均有时间和(或)浓度依赖性的增殖抑制作用,5-Aza-CdR和CDAⅡ对细胞分别表现了诱导凋亡和诱导分化的可能以及G2和G0/G1期阻滞,与此同时DNA甲基转移酶活性和基因组DNA甲基化程度下降,p15蛋白表达部分恢复,结论:通过抑制甲基转移酶活性,干扰DNA甲基化以发挥抗白血病作用的途径是可能的,值得进一步探讨。 展开更多
关键词 甲基转移酶抑制剂 5-氮杂-2′-脱氧胞苷 细胞分化剂Ⅱ kg1a白血病细胞系 细胞增殖抑制 DNA甲基化 白血病
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