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CⅡTA锤头状核酶抑制Jukart细胞MHCⅡ类抗原的表达
1
作者
郭荣
邹萍
+4 位作者
宋永平
马军
陆华中
曹谊林
童允洁
《中华儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第12期925-928,共4页
目的 针对同种异体细胞移植的免疫反应主要是由主要组织相容性复合物Ⅱ (majorhistocompatibilitycomplex ,MHC Ⅱ ,人类中亦称HLA Ⅱ )类抗原介导 ,而MHCⅡ类分子转录激活因子 (MHCclassⅡtransactivator ,CⅡTA)对MHCⅡ分子的表达起...
目的 针对同种异体细胞移植的免疫反应主要是由主要组织相容性复合物Ⅱ (majorhistocompatibilitycomplex ,MHC Ⅱ ,人类中亦称HLA Ⅱ )类抗原介导 ,而MHCⅡ类分子转录激活因子 (MHCclassⅡtransactivator ,CⅡTA)对MHCⅡ分子的表达起严格且专一性的调控作用 ,拟通过抗CⅡTA锤头状核酶 (ribozyme,Rz)抑制细胞表面MHCⅡ分子的表达。 方法 设计并合成针对人类CⅡTA基因第 134、2 18、4 6 4位点的一组核酶 ,分别命名为Rz134、Rz2 18、Rz4 6 4。通过体外制备和活性鉴定 ,筛选出活性较高的核酶———Rz4 6 4。将Rz4 6 4克隆到含有核糖体内进入位点及增强型绿色荧光蛋白的表达载体 (internalribosomeentrysite enhancedgreenfluorescentprotein ,pIRES2 EGFP) ,简称为 pRz4 6 4 ,并稳定转染Jukart细胞株 (pRz4 6 4 J) ,流式细胞术检测经典的MHCⅡ (HLA DR、DP、DQ)抗原表达 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测CⅡTAmRNA水平。结果 pRz4 6 4 J与无关核酶组比较 ,HLA DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了 73 2 7%、88 93%、5 8 82 % ;同时CⅡTA的诱导性mRNA含量明显减少 (P <0 0 1)。结论 抗CⅡTA锤头状核酶可抑制CⅡ ATmRNA的表达 ,从而阻止其调控的相应基因———MHCⅡ分子的表达 ,为进一步探讨免疫?
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关键词
CⅡTA锤头状核酶
抑制
jukait
细胞
MHCⅡ类抗原
表达
免疫反应
种异体
细胞
移植
原文传递
题名
CⅡTA锤头状核酶抑制Jukart细胞MHCⅡ类抗原的表达
1
作者
郭荣
邹萍
宋永平
马军
陆华中
曹谊林
童允洁
机构
华中科技大学附属协和医院血液病研究所
河南省肿瘤医院血液病研究所
哈尔滨市第一医院血液病研究所
上海市血液中心血液工程研究室
上海第二医科大学组织工程重点实验室
出处
《中华儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第12期925-928,共4页
基金
上海市科技发展基金资助项目 (0 14 3nm0 68)
上海市科技发展基金 /重大项目子课题资助项目 (0 0DJ14 0 0 1 8)
文摘
目的 针对同种异体细胞移植的免疫反应主要是由主要组织相容性复合物Ⅱ (majorhistocompatibilitycomplex ,MHC Ⅱ ,人类中亦称HLA Ⅱ )类抗原介导 ,而MHCⅡ类分子转录激活因子 (MHCclassⅡtransactivator ,CⅡTA)对MHCⅡ分子的表达起严格且专一性的调控作用 ,拟通过抗CⅡTA锤头状核酶 (ribozyme,Rz)抑制细胞表面MHCⅡ分子的表达。 方法 设计并合成针对人类CⅡTA基因第 134、2 18、4 6 4位点的一组核酶 ,分别命名为Rz134、Rz2 18、Rz4 6 4。通过体外制备和活性鉴定 ,筛选出活性较高的核酶———Rz4 6 4。将Rz4 6 4克隆到含有核糖体内进入位点及增强型绿色荧光蛋白的表达载体 (internalribosomeentrysite enhancedgreenfluorescentprotein ,pIRES2 EGFP) ,简称为 pRz4 6 4 ,并稳定转染Jukart细胞株 (pRz4 6 4 J) ,流式细胞术检测经典的MHCⅡ (HLA DR、DP、DQ)抗原表达 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测CⅡTAmRNA水平。结果 pRz4 6 4 J与无关核酶组比较 ,HLA DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了 73 2 7%、88 93%、5 8 82 % ;同时CⅡTA的诱导性mRNA含量明显减少 (P <0 0 1)。结论 抗CⅡTA锤头状核酶可抑制CⅡ ATmRNA的表达 ,从而阻止其调控的相应基因———MHCⅡ分子的表达 ,为进一步探讨免疫?
关键词
CⅡTA锤头状核酶
抑制
jukait
细胞
MHCⅡ类抗原
表达
免疫反应
种异体
细胞
移植
Keywords
Histocompatibility antigens class Ⅱ
DNA, catatytic
Genes, MHC class Ⅱ
Graft versus-host disease
Jurkat cells
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
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1
CⅡTA锤头状核酶抑制Jukart细胞MHCⅡ类抗原的表达
郭荣
邹萍
宋永平
马军
陆华中
曹谊林
童允洁
《中华儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
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