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RP-HPLC法测定狼毒中岩大戟内酯A和B的含量 被引量:23
1
作者 乔春峰 韩全斌 +2 位作者 贺震旦 宋景政 徐宏喜 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1204-1206,共3页
目的:建立测定狼毒药材中2个二萜内酯类成分岩大戟内酯A和B的HPLC定量分析方法。方法:采用C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-水(75:25)洗脱,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为250nm。结果:狼毒大戟和月腺大戟中普遍含有岩大戟... 目的:建立测定狼毒药材中2个二萜内酯类成分岩大戟内酯A和B的HPLC定量分析方法。方法:采用C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-水(75:25)洗脱,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为250nm。结果:狼毒大戟和月腺大戟中普遍含有岩大戟内酯A和B,2个成分的含量范围分别为0.007%~0.043%和0.012%~0.204%。瑞香狼毒和海芋中不含有这2个成分。结论:本方法专属性强,结果准确,简便可行,适用于狼毒药材中岩大戟内酯A和B的含量测定。 展开更多
关键词 狼毒 岩大戟内酯A 岩大戟内酯b 高效液相色谱法 含量测定
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反相高效液相色谱法测定狼毒中岩大戟内酯B的含量 被引量:10
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作者 王灿坚 严小红 +3 位作者 谢演晖 江英桥 刘东辉 马双成 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期521-524,共4页
目的建立狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法。方法狼毒药材经粉碎后利用乙醇超声提取,采用高效液相色谱法对岩大戟内酯B的含量进行测定,色谱条件如下:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(65:35),流速:1.0mL/min,检测波长为... 目的建立狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法。方法狼毒药材经粉碎后利用乙醇超声提取,采用高效液相色谱法对岩大戟内酯B的含量进行测定,色谱条件如下:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(65:35),流速:1.0mL/min,检测波长为238nm,进样量10μL,外标法定量。结果岩大戟内酯B在4.070~32.560μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.02%,RSD为1.02%。结论该方法专属性强,快速简便,可作为狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法,可为狼毒质量标准的制定提供相关依据。 展开更多
关键词 狼毒 岩大戟内酯b 高效液相色谱法 含量测定
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岩大戟内酯B对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响 被引量:9
3
作者 林宇 崔红霞 +3 位作者 许惠玉 周丽 牛英才 刘吉成 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期780-783,共4页
目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡及其可能机制。方法:分别应用MTT和AnnexinV-FITC/PI双染法检测jolkinolide B对Bcap37细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;用流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内游离Ca2+浓... 目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡及其可能机制。方法:分别应用MTT和AnnexinV-FITC/PI双染法检测jolkinolide B对Bcap37细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;用流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内游离Ca2+浓度的变化;RT-PCR检测jolkinolide B对Bcap37细胞caspase-3mRNA表达的影响。结果:jolkinolide B可显著抑制Bcap37细胞的增殖,呈剂量和时间效应关系;随jolkinolide B剂量增加,细胞凋亡率明显增加;线粒体膜电位下降,并伴有细胞内游离钙浓度增加,与对照组相比差异显著(P<0.01),同时caspase-3mRNA表达水平明显增高。结论:jolkinolide B可通过提高细胞游离Ca2+水平,激活内源性线粒体信号转导途径而诱导Bcap37细胞凋亡。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b bCAP37 凋亡 线粒体膜电位 钙离子
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JAK2/STAT3信号转导通路在岩大戟内酯B诱导的前列腺癌细胞PC-3凋亡中的作用 被引量:8
4
作者 王贻兵 刘丹 王佳贺 《实用药物与临床》 CAS 2016年第9期1065-1068,共4页
目的探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin V-... 目的探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡率;Western blot分析检测岩大戟内酯B作用不同时间后JAK2/STAT3信号转导通路的表达;预先用不同浓度的JSI-124(选择性STAT3途径抑制剂)处理PC-3细胞60 min,观察岩大戟内酯B作用不同时间后PC-3细胞的凋亡情况。结果岩大戟内酯B能够诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡,降低磷酸化-JAK2/STAT3的表达,JSI-124可以提高岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。结论 JAK2/STAT3信号转导通路参与了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡过程。JSI-124通过特异性地抑制STAT3活性提高了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b 前列腺癌 PC-3细胞 细胞凋亡
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岩大戟内酯B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响 被引量:8
5
作者 林宇 岳丽玲 蒋丽艳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期132-136,共5页
目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及生长周期的影响。方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内酯B对MD... 目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及生长周期的影响。方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的生长抑制率。另设10,20,40,80 mg·L-1组的JB,采用流式检测技术分析岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的细胞周期,RT-PCR及Western blot检测真核细胞翻译起始因子(e IF4E),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因mRNA表达及蛋白水平。结果:随着岩大戟内酯B浓度增加可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,G1期细胞阻滞。与空白组比较,20,40μmol·L-1的岩大戟内酯B可抑制Cyclin D1和e IF4E的mRNA表达,转染e IF4E-siRNA组Cyclin D1的mRNA表达及蛋白水平也被抑制,同时细胞周期阻滞在G1期(P<0.05,P<0.01)。结论:岩大戟内酯B可通过下调e IF4E及Cyclin D1的表达而阻滞细胞周期于G1期。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b 真核细胞翻译起始因子 细胞周期
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RP-HPLC法测定狼毒中狼毒乙素和岩大戟内酯B的含量 被引量:7
6
作者 王灿坚 江英桥 +3 位作者 毕福钧 林彤 严小红 刘东辉 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期839-842,共4页
目的:建立同时测定狼毒药材中狼毒乙素和岩大戟内酯B的HPLC定量分析方法。方法:采用Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0-5 min,40%A;5-10 min,40%A→50%A;10-30 min,50%A→55%... 目的:建立同时测定狼毒药材中狼毒乙素和岩大戟内酯B的HPLC定量分析方法。方法:采用Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0-5 min,40%A;5-10 min,40%A→50%A;10-30 min,50%A→55%A;30-40 min,55%A→60%A;40-45 min,60%A→70%A),流速1.0 mL·min^-1;检测波长226 nm,柱温30℃。结果:狼毒乙素线性范围为0.005-0.863μg(r=0.9999),平均回收率为96.4%(RSD=1.4%,n=6);岩大戟内酯B线性范围为0.003-0.496μg(r=0.9999),平均回收率为96.0%(RSD=2.1%,n=6)。结论:本方法专属性强,结果准确,简便可行,可用于狼毒药材的质量控制。 展开更多
关键词 狼毒 狼毒乙素 岩大戟内酯b 高效液相色谱法 含量测定
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超声波辅助提取狼毒大戟中二萜类物质Jolkinolide B 被引量:4
7
作者 简丽 贾慧凯 +2 位作者 庞丽纹 丁立军 张前程 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期972-974,共3页
以w(C2H5OH)=95%的乙醇为提取剂,HPLC法测定的Jolkinolide B提取率为指标,考察了利用超声波辅助技术提取狼毒大戟中二萜类物质的适宜提取条件。测定出狼毒大戟中w(Jolkinolide B)=0.0216%。考察了提取时间、提取温度、料液质量比等因素... 以w(C2H5OH)=95%的乙醇为提取剂,HPLC法测定的Jolkinolide B提取率为指标,考察了利用超声波辅助技术提取狼毒大戟中二萜类物质的适宜提取条件。测定出狼毒大戟中w(Jolkinolide B)=0.0216%。考察了提取时间、提取温度、料液质量比等因素对Jolkinolide B提取率的影响。室温下,提取时间从10 min到60 min,Jolkinolide B的提取率由0.014%提高至0.0149%;温度从室温到85℃,提取率从0.014%提高到0.020 5%;超声波辅助提取10 min,提取率与浸泡提取200 h的提取率相当;超声波辅助提取中适宜的m(狼毒大戟)∶m(提取剂)=1∶8。该文报告工作的新颖性已为内蒙古自治区科学技术信息技术研究所2007年3月12日出具的第20071500100031号《科技查新报告》所证实。 展开更多
关键词 狼毒大戟 超声辅助提取 二萜 jolkinolide b 中药现代化技术
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岩大戟内酯B诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 被引量:6
8
作者 林宇 田华 《齐齐哈尔医学院学报》 2015年第30期4527-4528,共2页
目的探讨岩大戟内酯B对乳腺癌细胞MDA-MB-435S凋亡的影响。方法将不同浓度的岩大戟内酯B作用于MDA-MB-435S细胞,采用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果随着岩大戟内酯B浓度增加,细胞凋亡率明显增加;电镜显示... 目的探讨岩大戟内酯B对乳腺癌细胞MDA-MB-435S凋亡的影响。方法将不同浓度的岩大戟内酯B作用于MDA-MB-435S细胞,采用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果随着岩大戟内酯B浓度增加,细胞凋亡率明显增加;电镜显示药物处理后细胞出现核固缩,细胞器空泡变性,出现凋亡小体,甚至坏死。结论岩大戟内酯B可诱导乳腺癌细胞凋亡,为临床开发新药提供理论依据。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b MDA-Mb-435S 细胞凋亡
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基于网络药理学和实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制
9
作者 高文分 吴凡 +5 位作者 朱朋艳 乔妙 张洲 杨会菊 王晶 袁文娟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第3期497-508,共12页
通过网络药理学方法及生物学实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制。通过TCMSP等数据库预测Jolkinolide B作用靶点,并通过靶点富集分析及分子对接预测其防治结肠肿瘤的作用机制,基于预测结果,体内生物学实验初步验证Jolkinolid... 通过网络药理学方法及生物学实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制。通过TCMSP等数据库预测Jolkinolide B作用靶点,并通过靶点富集分析及分子对接预测其防治结肠肿瘤的作用机制,基于预测结果,体内生物学实验初步验证Jolkinolide B对移植瘤小鼠肿瘤的抑制作用,MTT法检测不同浓度的Jolkinolide B对HCT116细胞的增殖抑制活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验观察其对HCT116细胞迁移能力的影响。Western blot检测相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、金属基质蛋白酶MMP3和MMP12的表达。网络靶点分析结果显示Jolkinolide B与结肠癌(CRC)匹配后得到78个靶点,富集信号通路主要有IL-17信号通路、PD-1/PD-L1信号通路等。分子对接结果显示Jolkinolide B以氢键与STAT3、MAPK8、JUN核心蛋白结合,结合构象较稳定。体内实验结果表明,Jolkinolide B能有效抑制移植瘤小鼠肿瘤体积;细胞水平验证实验结果表明,Jolkinolide B能够有效地抑制结肠肿瘤细胞HCT116的增殖,促进细胞的凋亡,抑制细胞的迁移;Western blot结果表明Jolkinolide B明显上调Bax/Bcl-2蛋白的表达,诱导了HCT116细胞的凋亡;同时,Jolkinolide B明显下调金属基质蛋白酶MMP3、MMP12的表达,抑制肿瘤细胞侵袭和转移。综上,Jolkinolide B可通过多靶点、多途径实现干预CRC的作用,其抗肿瘤活性可能与影响凋亡基因Bax及Bcl-2、金属基质蛋白酶MMP3、MMP12的表达有关。本研究为Jolkinolide B的临床用药和防治的作用机制研究提供了参考。 展开更多
关键词 jolkinolide b 结肠肿瘤 分子对接 网络药理学 体内外实验
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岩大戟内酯B通过阻断PI3K/Akt/NF-κB通路抑制结肠癌细胞的增殖和转移 被引量:4
10
作者 陈林俊 陈文斌 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2021年第3期250-257,共8页
目的:研究岩大戟内酯B(JB)对结肠癌HT-29细胞增殖和转移的抑制作用及其作用机制。方法:用不同浓度JB处理HT-29细胞,采用MTT法检测细胞增殖率;平板克隆实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞周期变化;划痕实验分析细胞的迁移能力;Tr... 目的:研究岩大戟内酯B(JB)对结肠癌HT-29细胞增殖和转移的抑制作用及其作用机制。方法:用不同浓度JB处理HT-29细胞,采用MTT法检测细胞增殖率;平板克隆实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞周期变化;划痕实验分析细胞的迁移能力;Transwell小室实验研究细胞的侵袭能力;免疫荧光法和Western blotting法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白vimentin、锌指蛋白(Snail)1、Snail2、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白的表达;Western blotting法检测p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、NF-κB P65、p-NF-κB P65蛋白表达水平。100μg/L IGF-1组和100μg/L IGF-1+20μmol/L JB组分别处理HT-29细胞,Western blotting法检测PI3K/Akt/NF-κB通路相关蛋白表达变化。结果:JB抑制HT-29细胞增殖作用浓度依赖性,其作用24 h的IC 50为52.68μmol/L;JB呈浓度依赖性地降低HT-29细胞的克隆形成率(P<0.05);与对照组相比,JB处理后的HT-29细胞G0/G1期比例显著增高,S期细胞比例明显下降;JB可显著抑制HT-29细胞的体外迁移、侵袭能力(P<0.05);JB作用后的HT-29细胞E-cadherin蛋白水平升高,vimentin、Snail1、Snail2、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB P65蛋白表达水平显著降低(P<0.05);IGF-1+JB组p-PI3K、p-Akt、与p-NF-κB P65蛋白的表达水平较IGF-1组显著下降(P<0.05)。结论:JB在体外能抑制HT-29细胞增殖,诱导细胞在G0/G1期阻滞,抑制HT-29迁移和侵袭,调控上皮-间质转化(EMT)及MMPs,其机制可能与阻断PI3K/Akt/NF-κB通路有关。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b HT-29细胞 增殖 迁移 上皮-间质转化 PI3K/Akt/NF-κb通路
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狼毒类生药Jolkinolide B的HPLC分析 被引量:5
11
作者 赵奎君 徐国钧 +2 位作者 金蓉鸾 徐珞珊 丛晓东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期332-334,共3页
用HPLC法对大戟属的8种狼毒中的Jolkinolide B进行了定性定量分析。结果表明,Jolkinolide B只分布于狼毒大戟(0.017%~0.17%)、大狼毒(0.0046%)和鸡肠狼毒(0.0004%)中... 用HPLC法对大戟属的8种狼毒中的Jolkinolide B进行了定性定量分析。结果表明,Jolkinolide B只分布于狼毒大戟(0.017%~0.17%)、大狼毒(0.0046%)和鸡肠狼毒(0.0004%)中。同时,对狼毒大戟不同产地及不同商品来源的药材亦做了含量测定。 展开更多
关键词 狼毒类 生药 狼毒大戟 jolkinolidel 二萜内酯类
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细胞自噬对岩大戟内酯B诱导的白血病细胞HL-60凋亡的影响 被引量:4
12
作者 王佳贺 王超 《中国医药导报》 CAS 2018年第28期13-16,共4页
目的探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)对岩大戟内酯B诱导的人白血病细胞系HL-60细胞凋亡的影响。方法采用Western blot分析检测不同浓度的岩大戟内酯B作用不同时间后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬调节因子Becli... 目的探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)对岩大戟内酯B诱导的人白血病细胞系HL-60细胞凋亡的影响。方法采用Western blot分析检测不同浓度的岩大戟内酯B作用不同时间后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬调节因子Beclin-1等的表达;将HL-60细胞分为空白对照组、岩大戟内酯B组、岩大戟内酯B联合5 mmol/L 3-MA组、岩大戟内酯B联合10 mmol/L 3-MA组、岩大戟内酯B联合10 nmol/L RAPA组和岩大戟内酯B联合20 nmol/L RAPA组。采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测人白血病细胞系HL-60细胞的凋亡情况;检测Caspase-3蛋白酶的活性。结果岩大戟内酯B能够诱导白血病细胞HL-60自噬,增加LC3-Ⅱ和自噬调节因子Beclin-1的表达(P<0.05);3-MA可降低岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡和Caspase-3的活性(P<0.05),而RAPA则提高了岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡率及Caspase-3的活性(P<0.05)。结论岩大戟内酯B可诱导HL-60细胞自噬,细胞自噬在岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡中起到了非常重要的作用。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b 白血病 HL-60细胞 细胞凋亡 自噬
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岩大戟内酯B诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的实验研究 被引量:4
13
作者 许惠玉 陈志伟 +2 位作者 郭洪英 徐浩 刘吉成 《中国医学创新》 CAS 2012年第13期1-3,共3页
目的:探讨岩大戟内酯B对MCF-7乳腺癌细胞生长抑制作用及其机理。方法:通过MTT法观察各组细胞增殖能力;采用流式检测技术分析细胞周期;利用AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果:随着岩大戟内酯B浓度增加对MCF-7的抑... 目的:探讨岩大戟内酯B对MCF-7乳腺癌细胞生长抑制作用及其机理。方法:通过MTT法观察各组细胞增殖能力;采用流式检测技术分析细胞周期;利用AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果:随着岩大戟内酯B浓度增加对MCF-7的抑瘤率增高;G2/M期细胞减少,S期细胞增多,出现S期阻滞;晚期凋亡和死亡的细胞增加;电镜显示加药后细胞出现核固缩,细胞器空泡变性,凋亡小体形成,甚至出现坏死。结论:岩大戟内酯B对乳腺癌MCF-7细胞生长明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,为临床开发新药提供理论依据。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b MCF-7 细胞凋亡
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岩大戟内酯B对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用 被引量:4
14
作者 周珊珊 许宗斌 鲁伟 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期567-570,共4页
目的探讨岩大戟内酯B(JB)对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用及可能机制。方法采用不同浓度的JB处理卵巢癌Skov3细胞48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Skov3细胞的增殖抑制率,Hoechst法检测Skov3细胞凋亡指数,Western blot检测Akt、P-... 目的探讨岩大戟内酯B(JB)对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用及可能机制。方法采用不同浓度的JB处理卵巢癌Skov3细胞48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Skov3细胞的增殖抑制率,Hoechst法检测Skov3细胞凋亡指数,Western blot检测Akt、P-Akt(Ser473)、Bax、Caspase-3和Bcl-2蛋白水平。结果 0.1,1.0,5.0,10.0,20.0,50.0μmol/L的JB可呈剂量依赖的方式抑制Skov3细胞的增殖,IC50为5.28μmol/L;20.0μmol/L JB和30.0μmol/L LY294002(PI3K抑制剂)均可增加Skov3细胞凋亡指数,降低P-Akt(Ser473)/Akt水平,增加促凋亡基因(Bax、Caspase-3)的蛋白水平,降低抑制凋亡基因(Bcl-2)的蛋白水平,且均与对照组有显著差异;而LY294002可增强JB的效应,且与JB组有显著差异。结论 JB可抑制人卵巢癌Skov3细胞的增殖,促进细胞凋亡,可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路和诱导死亡受体表达来发挥抗肿瘤作用的。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b 人卵巢癌SKOV3细胞 增殖抑制 PI3K/AKT途径
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岩大戟内酯B对耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡的影响及其机制 被引量:3
15
作者 白雪 赵鹤 何平 《新乡医学院学报》 CAS 2014年第12期990-993,共4页
目的探讨死亡受体通路在岩大戟内酯B诱导的耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡中的作用。方法采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术检测HL-60/ADR细胞凋亡;利用Western blot检测Fas/Fas L蛋白的表达;采用... 目的探讨死亡受体通路在岩大戟内酯B诱导的耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡中的作用。方法采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术检测HL-60/ADR细胞凋亡;利用Western blot检测Fas/Fas L蛋白的表达;采用荧光比色法测定细胞内caspase-8和caspase-3蛋白酶活性。结果 HL-60/ADR细胞的凋亡率随着岩大戟内酯B浓度的增加及作用时间的延长而逐渐增加。当岩大戟内酯B浓度为40 mg·L-1时,作用24、48及72 h后早期凋亡率和总凋亡率与0 h比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001);当浓度为20、40、80 mg·L-1时,作用48 h后早期凋亡率和总凋亡率与0 mg·L-1比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。Fas/Fas L蛋白的表达随着岩大戟内酯B作用时间的延长逐渐增加;caspase-8和caspase-3蛋白酶的活性亦逐渐增加。作用24、48及72 h后caspase-3和caspase-8蛋白酶活性与0 h比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。结论岩大戟内酯B能够诱导耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡,Fas/Fas L通路参与了岩大戟内酯B诱导的HL-60/ADR细胞凋亡过程。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b HL-60/ADR细胞 细胞凋亡
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不同炮制方法对蒙古族药狼毒毒效的影响 被引量:3
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作者 李佟拉嘎 于欢 +2 位作者 龚千锋 奥.乌力吉 王秀兰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期27-31,共5页
目的:探讨蒙古族药狼毒炮制减毒药性理论的科学性,了解其炮制前后药效变化,并建立各样品中岩大戟内酯B和狼毒乙素含量测定的RP-HPLC。方法:采用HPLC-Q-TOF/MS技术比较蒙古族药狼毒炮制前后的成分差异;通过正常小鼠的急性毒性作用及泻下... 目的:探讨蒙古族药狼毒炮制减毒药性理论的科学性,了解其炮制前后药效变化,并建立各样品中岩大戟内酯B和狼毒乙素含量测定的RP-HPLC。方法:采用HPLC-Q-TOF/MS技术比较蒙古族药狼毒炮制前后的成分差异;通过正常小鼠的急性毒性作用及泻下作用比较炮制对该药材毒性和药效的影响,利用RP-HPLC测定蒙古族药狼毒及其炮制品中岩大戟内酯B和狼毒乙素的含量,流动相乙腈(A)-0.1%冰乙酸水溶液(B)梯度洗脱(0~5 min,40%A;5~10 min,40%~50%A;10~30 min,50%~55%A;30~40 min,55%~60%A;40~45 min,60%~70%A),检测波长250 nm,柱温30℃。结果:与生品相比,蒙古族药狼毒在炮制后奶制品、诃子汤制品、酒制品中分别有30,20,21个峰的含量降低。狼毒生品及奶、酒、诃子汤制品粉末的半数致死量分别为2.694,3.642,3.461,4.309 g·kg^(-1)。药效试验表明药物粉末给药剂量为0.53,0.133 g·kg^(-1)时,狼毒生品及其各炮制品均能明显提高小鼠小肠墨汁推进率。狼毒中狼毒乙素和岩大戟内酯B的线性范围分别为0.060 12~1.202 4,0.060 72~1.214 4μg,平均加样回收率分别为107.55%(RSD 4.7%)和103.03%(RSD 3.6%)。结论:蒙古族药狼毒不同方法炮制后其化学成分含量会不同程度降低,进而可能会降低部分刺激性成分含量或使其转化为毒性较小成分,从而降低了其毒性。蒙古族药狼毒炮制后的粉末较未经炮制的粉末毒性降低,炮制后对该药材的泻下作用无影响,即炮制可减毒保效。狼毒炮制机制可能与炮制后化学成分含量变化有关。建立的HPLC准确可靠、重复性好,可用于蒙古族药狼毒及其炮制品中岩大戟内B和狼毒乙素的含量测定。 展开更多
关键词 蒙古族药 狼毒 炮制 毒性 药效 岩大戟内酯b
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UPLC法同时测定狼毒大戟中岩大戟内酯A和B 被引量:1
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作者 刘雷 马玉坤 +3 位作者 郭丽娜 马德志 孙宇 刘吉成 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1547-1550,共4页
目的建立UPLC法同时测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A和B的含有量。方法狼毒大戟甲醇提取物的分析采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长2... 目的建立UPLC法同时测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A和B的含有量。方法狼毒大戟甲醇提取物的分析采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长250 nm;柱温35℃。结果岩大戟内酯A和B分别在1.804~54.12μg/mL(r=0.999 5)和9.663~209.8μg/mL(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.3%、98.6%,RSD分别为0.76%、0.77%。结论该方简便准确,重复性好,可用于狼毒大戟的质量控制。 展开更多
关键词 狼毒大戟 岩大戟内酯A 岩大戟内酯b UPLC
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岩大戟内酯A和岩大戟内酯B通过Akt信号通路影响MCF-7细胞的增殖和凋亡 被引量:1
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作者 沈雷 张善强 +3 位作者 刘雷 吴雨轩 刘树民 刘吉成 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1374-1379,共6页
观察岩大戟内酯A(Jolkinolide A,JA)和岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)二萜类单体对MSC-7乳腺癌细胞的增殖、凋亡影响,并分析JA或JB的作用机制。若分别用40、60、80μg/m L浓度的JA(或JB)刺激MCF-7细胞,则为不同浓度的JA刺激组或JB刺激组... 观察岩大戟内酯A(Jolkinolide A,JA)和岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)二萜类单体对MSC-7乳腺癌细胞的增殖、凋亡影响,并分析JA或JB的作用机制。若分别用40、60、80μg/m L浓度的JA(或JB)刺激MCF-7细胞,则为不同浓度的JA刺激组或JB刺激组,正常培养的MCF-7为对照组。分别用CCK-8细胞增殖实验检测JA刺激组或JB刺激组的细胞增殖OD值,Western Blot实验检测JA刺激组或JB刺激组MCF-7细胞中Caspase 9蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染检测MCF-7细胞凋亡,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测JA刺激组或JB刺激组细胞中Akt、STAT3蛋白的含量。结果发现,与40、60、80μg/m L的JA刺激组MCF-7细胞分别相比,相应浓度JB刺激组的MCF-7细胞增殖OD值均明显降低,但是JB刺激组MCF-7细胞的Caspase 9蛋白相对吸光度、凋亡率显著升高;相对于40、60、80μg/m L JA刺激组,相应浓度的JB-刺激组MCF-7细胞上清液中的VEGF含量分别均降低,相应浓度JB刺激组MCF-7细胞的Akt、STAT3蛋白表达均降低。实验结果表明:岩大戟内酯B明显地通过抑制Akt-STAT3信号通路而抑制MCF-7细胞增殖,促进MCF-7凋亡。 展开更多
关键词 岩大戟内酯A 岩大戟内酯b MCF-7细胞 细胞增殖 AKT信号通路
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UPLC-Q-TOF/MS法分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物 被引量:2
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作者 马天成 孙宇 +4 位作者 马玉坤 刘雷 孙珈 郭丽娜 刘琦 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第20期2796-2801,共6页
目的:分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物,预测其代谢途径。方法:将大鼠随机分为空白组(灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液)和给药组(灌胃岩大戟内酯B,100mg/kg),每组8只。分别收集给药后0~12、>12~24、>24~36h的粪便,给药后0~2、>... 目的:分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物,预测其代谢途径。方法:将大鼠随机分为空白组(灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液)和给药组(灌胃岩大戟内酯B,100mg/kg),每组8只。分别收集给药后0~12、>12~24、>24~36h的粪便,给药后0~2、>2~8、>8~12、>12~24、>24~36、>36~48h的尿液以及给药后1、2、8、12、24、36h的血液样品,分别以超声提取法、固相萃取法、蛋白沉淀法处理后,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术和Analyst^■TF1.7.1、PeakView^■2.2等软件联合分析、鉴定各样品中的代谢产物。结果与结论:从大鼠粪便中共检测到原型药物和7个代谢产物,从尿液和血液样品中分别检测到1、2个代谢产物。岩大戟内酯B灌胃后在大鼠体内经Ⅰ相的开环、脱水、氧化、脱氧、加氢反应等途径代谢;未检测到Ⅱ相代谢产物。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术 代谢产物 鉴定 大鼠
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岩大戟内酯B平衡溶解度与油水分配系数的测定 被引量:2
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作者 周建文 佟瑶 +2 位作者 王皓 卜明 刘吉成 《广东化工》 CAS 2021年第12期196-197,188,共3页
目的:测定岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)在水及不同pH磷酸盐缓冲液(PBS)中的平衡溶解度与油水分配系数,为其制剂学研究提供理论依据。方法:采用高效液相色谱法测定JB在水及不同pH的PBS中的平衡溶解度;采用经典摇瓶法联合高效液相色谱... 目的:测定岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)在水及不同pH磷酸盐缓冲液(PBS)中的平衡溶解度与油水分配系数,为其制剂学研究提供理论依据。方法:采用高效液相色谱法测定JB在水及不同pH的PBS中的平衡溶解度;采用经典摇瓶法联合高效液相色谱法测定JB在不同pH条件下的油水分配系数。结果:37℃与25℃下,JB在水及不同pH缓冲液中的平衡溶解度均在4.80~30.37μg/mL范围内,均小于100μg/mL;37℃与25℃下,JB在水及不同pH缓冲液中的油水分配系数均在1.78~2.17之间,且在pH 1.2、pH 6.8、pH 7.4 PBS溶液中略高一些,在25℃和37℃条件下油水分配系数差别不大。结论:JB的水溶性属于几乎不溶或不溶,而油水分配系数log P值在1~3之间,推测其在体内具有较好的膜通透性便于吸收。 展开更多
关键词 岩大戟内酯b 高效液相色谱法 平衡溶解度 摇瓶法 油水分配系数
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