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白藜芦醇通过JAK2/STAT3信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、黏附、迁移、侵袭及上皮间质转化的影响
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作者 王勇 吴运桥 +1 位作者 邓任强 靳宜静 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第11期1327-1333,共7页
目的探讨白藜芦醇对人脑胶质瘤细胞T98G增殖、黏附、迁移、侵袭、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/信号转导和转录启动因子3(signal transducer and activator of transcription... 目的探讨白藜芦醇对人脑胶质瘤细胞T98G增殖、黏附、迁移、侵袭、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/信号转导和转录启动因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路的调控作用,为白藜芦醇治疗脑胶质瘤的相关研究提供理论依据。方法体外培养T98G细胞,分为对照组(不干预)、试验组(12.5、25、50μmol/L白藜芦醇)、阳性药物组(50 mg/L 5-氟尿嘧啶)、抑制剂组(50μmol/L白藜芦醇+50μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490)和激活剂组(50μmol/L白藜芦醇+0.5μmol/L JAK2/STAT3通路激活剂colivelin),干预24 h。采用活细胞计数(CCK-8)、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、黏附试验、划痕试验、Transwell小室及Western blot法对细胞活力、增殖率、黏附能力、迁移能力、侵袭能力、EMT及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达水平进行分析。结果与对照组比较,12.5、25μmol/L白藜芦醇组细胞活力无显著变化(t分别为1.501和2.167,P>0.05),50μmol/L白藜芦醇组和阳性药物组细胞活力显著降低(t分别为7.918和8.020,P<0.05),12.5、25μmol/L白藜芦醇组较阳性药物组细胞活力显著升高(t分别为6.519和5.853,P<0.05),50μmol/L白藜芦醇组细胞活力接近50%且与阳性药物组差异无统计学意义(t=0.102,P=0.921)。与对照组相比,50μmol/L白藜芦醇组和阳性药物组T98G细胞增殖率、黏附、迁移、侵袭能力及N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均显著降低(t=4.090~28.510,P<0.05),而E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平显著增加(t分别为16.782和17.291,P<0.05)。与50μmol/L白藜芦醇组相比,抑制剂组T98G细胞增殖率、黏附、迁移、侵袭能力、N-cadherin、Vimentin、FN及pJAK2和p-STAT3蛋白表达水平均显著下降(t=3.801~17.980,P<0.05),而E-cadherin蛋白表达水平显著升高(t=15.256,P<0.05);激活剂� 展开更多
关键词 脑胶质瘤 白藜芦醇 janus激酶2/信号转导转录启动因子3信号通路 增殖 黏附 迁移 侵袭 上皮间质转化
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黄芩苷通过抑制JAK2/STAT3信号通路减轻脂多糖诱导的心肌细胞凋亡
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作者 苏大为 刘玲 杨志龙 《西部医学》 2024年第3期357-364,共8页
目的 探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞凋亡及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)信号通路的调控作用。方法 体外培养大鼠心肌H9C2细胞,分为对照组(不做干预)、LPS组(1μg/mL LPS)和LPS+5、10、20、40μmol/L... 目的 探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞凋亡及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)信号通路的调控作用。方法 体外培养大鼠心肌H9C2细胞,分为对照组(不做干预)、LPS组(1μg/mL LPS)和LPS+5、10、20、40μmol/L黄芩苷组(1μg/mL LPS+5、10、20、40μmol/L黄芩苷);酶联免疫吸附试验(ELISA)和活细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]表达水平和细胞活力,筛选出最适浓度黄芩苷后,再次分组:对照组、LPS组、LPS+10μmol/L黄芩苷组、LPS+AG490组、LPS+10μmol/L黄芩苷+AG490组和LPS+10μmol/L黄芩苷+colivelin组。用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷、Hoechst33258染色法、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法分别检测细胞增殖、凋亡、mRNA[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)]表达及相关蛋白表达水平。结果 与对照组相比,LPS组细胞炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达水平显著升高,24和48 h细胞活力显著降低(P<0.05);与LPS组相比,LPS+10、20和40μmol/L黄芩苷组炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α显著降低(P<0.05),干预24 h LPS+10μmol/L黄芩苷组细胞活力显著升高(P<0.05),选择干预24 h的LPS+10μmol/L黄芩苷组进一步实验。与对照组相比,LPS组细胞增殖率、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Caspase-3 mRNA及蛋白表达、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05);与LPS组相比,LPS+10μmol/L黄芩苷组和LPS+AG490组显著逆转了上述指标的变化(P<0.05);与LPS+10μmol/L黄芩苷组相比,加入JAK2/STAT3通路抑制剂后,上述指标变化更为显著(P<0.05),LPS+10μmol/L黄芩苷+colivelin组则与LPS+10μmol/L黄芩苷+AG490组结果相反(P<0.05)。结论 黄芩苷可抑制LPS诱导的大鼠心肌H9C2细胞的凋亡及炎症,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3通路的信号转导相关。 展开更多
关键词 心肌损伤 黄芩苷 脂多糖 janus激酶2/信号转导转录启动因子3信号通路 增殖 凋亡
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黄芩苷对脑出血后小胶质细胞炎症反应的影响
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作者 刘志刚 张宪起 +1 位作者 张良君 李博 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2023年第12期755-761,共7页
目的探究黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠小胶质细胞HMC3炎症反应及酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养小鼠小胶质HMC3细胞,分为对照组(不做干预)、LPS组(1μg·mL^(-1)LPS)、... 目的探究黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠小胶质细胞HMC3炎症反应及酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养小鼠小胶质HMC3细胞,分为对照组(不做干预)、LPS组(1μg·mL^(-1)LPS)、实验组(1μg·mL^(-1)LPS+5、10、20、40μmol·L^(-1)黄芩苷)、抑制剂组(1μg·mL^(-1)LPS+20μmol·L^(-1)JAK2/STAT3通路抑制剂AG490)、黄芩苷+Y组(1μg·mL^(-1)LPS+10μmol·L^(-1)黄芩苷+20μmol·L^(-1)AG490)和黄芩苷+A组(1μg·mL^(-1)LPS+10μmol·L^(-1)黄芩苷+0.5μmol·L^(-1)JAK2/STAT3通路激活剂colivelin),干预24 h。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-10、IL-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞活力;用Hoechst 33258染色法检测细胞的凋亡率;Transwell小室测定细胞的迁移能力;蛋白印迹(Wb)法测定上皮间质转化(EMT)及JAK2/STAT3通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,LPS组IL-1β、TNF-α表达水平显著升高(P<0.05),IL-10表达水平与细胞活力显著降低(P<0.05);与LPS组相比,除LPS+5组外,其余实验组IL-1β和TNF-α表达水平均显著降低(P<0.05),IL-10表达显著升高(P<0.05),而细胞活力只有LPS+5和LPS+10组显著升高(P<0.05),因此选择细胞活力提升更高且抑炎效果综合更佳的LPS+10组进行后续实验。与对照组相比,LPS组细胞E-钙粘蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、迁移数、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)以及p-JAK2和p-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05);与LPS组相比,黄芩苷组和抑制剂组显著扭转了上述指标的变化(P<0.05);与黄芩苷组相比,黄芩苷+Y组细胞E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、迁移数、N-cadherin、Vimentin、FN以及p-JAK2和p-STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),黄芩苷+A组则显著扭转了上述指标的变化(P<0.05)。结论黄芩苷� 展开更多
关键词 脑出血 黄芩苷 脂多糖 janus激酶2/信号转导转录启动因子3信号通路 炎症 凋亡 迁移 上皮间质转化
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