血清亲环素A水平与SLE活动相关机制的初步探讨 被引量：9

1

作者 任义乐 张缪佳 +5 位作者 刘晓华 柯瑶 谈文峰 吕成银 刘婷 吴剑莎 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期621-623,共3页

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清亲环素A(CyPA)水平,探讨CyPA参与SLE活动的病因机制。方法应用ELISA检测57例SLE患者和30例正常人血清CyPA水平;应用重组人CyPA(rhCyPA)和/或植物血凝素(PHA)刺激培养Jurkat细胞株,24h后收集细胞上清... 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清亲环素A(CyPA)水平,探讨CyPA参与SLE活动的病因机制。方法应用ELISA检测57例SLE患者和30例正常人血清CyPA水平;应用重组人CyPA(rhCyPA)和/或植物血凝素(PHA)刺激培养Jurkat细胞株,24h后收集细胞上清,再用ELISA检测上清中干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果SLE活动期患者血清CyPA水平明显高于稳定期患者及正常人(P<0.05);Jurkat细胞株仅在rhCyPA和PHA共刺激下,IFN-γ的分泌才明显增加(P<0.05)。结论rhCyPA和PHA能协同刺激Jurkat细胞株分泌IFN-γ;SLE患者外周血CyPA异常升高可能参与刺激T细胞分泌IFN-γ,促进SLE活动,可作为评价SLE活动的参考指标。 展开更多

关键词 亲环素A 系统性红斑狼疮 jurkat细胞株 Γ干扰素 植物血凝素

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膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系 被引量：9

2

作者 杨长永 谢大兴 +2 位作者 周毅 黄丹 龚建平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期576-581,共6页

背景与目的:线粒体介导的细胞凋亡大部分与细胞周期相关,但膜受体介导的细胞凋亡是否与细胞周期有关尚不清楚。本研究旨在观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞周期特异性,阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。方法:用肿瘤坏死因... 背景与目的:线粒体介导的细胞凋亡大部分与细胞周期相关,但膜受体介导的细胞凋亡是否与细胞周期有关尚不清楚。本研究旨在观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞周期特异性,阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。方法:用肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体分别处理指数生长期的Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞;应用AnnexinV/PI和API等方法,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期特异性。结果:处于静止期的外周血淋巴细胞对凋亡诱导剂不敏感,凋亡率是6%～8%。Molt-4、Jurkat细胞以及加入植物血凝素刺激的外周血淋巴细胞经肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导后出现了明显的细胞凋亡,凋亡率是15%～28%。膜受体介导的细胞凋亡主要发生在细胞周期的早G1期。结论:膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期相关,具有细胞周期特异性。 展开更多

关键词 膜受体 细胞周期 凋亡 白血病 Molt-4细胞株 jurkat细胞株 外周血淋巴细胞 增殖

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华蟾素对Jurkat细胞株的体外作用和动物实验研究 被引量：8

3

作者 王焰 李军民 +1 位作者 张莉 沈志祥 《诊断学理论与实践》 2005年第4期308-312,共5页

目的:通过体外实验和动物实验,探索华蟾素对白血病细胞株的作用。方法:通过四氮唑蓝(MTT)比色法、Hoechst荧光染色法、原位末端标记(TUNEL)法、DNA凝胶电泳及流式细胞术(FCM)观察华蟾素对人白血病细胞株Jurkat的增殖、细胞凋亡、bcl-2... 目的:通过体外实验和动物实验,探索华蟾素对白血病细胞株的作用。方法:通过四氮唑蓝(MTT)比色法、Hoechst荧光染色法、原位末端标记(TUNEL)法、DNA凝胶电泳及流式细胞术(FCM)观察华蟾素对人白血病细胞株Jurkat的增殖、细胞凋亡、bcl-2表达的影响;在DBA/2小鼠的腹腔中注射L1210细胞,比较治疗组和对照组小鼠的生存期,评价药物疗效。结果:与对照组相比,1∶100～1∶25浓度的华蟾素能明显抑制Jurkat细胞生长,Hoechst荧光染色可见典型的凋亡形态学改变,TUNEL可见深棕色凋亡细胞,DNA电泳出现凋亡特有的“梯子”式条带,AnnexinV/PI双染色的FCM也证实凋亡的存在。在经1∶100、1∶50、1∶25浓度的华蟾素处理2d后,细胞凋亡率分别为18.78%、24.40%和40.29%。凋亡细胞的bcl-2表达由44.07%下调至16.30%。动物实验中,L1210白血病腹水瘤小鼠经华蟾素治疗后,生存期延长35.90%。结论:华蟾素能抑制Jurkat细胞生长并诱导凋亡,可能是通过下调bcl-2的表达来实现。动物实验证实,华蟾素能延长L1210白血病腹水瘤小鼠的生存期。 展开更多

关键词 华蟾素 jurkat细胞株 凋亡 bcl-2 DBA/2 L1210

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PI3K/Akt/mTOR在表阿霉素抑制Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用 被引量：9

4

作者 赵陈琛 顾康生 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2012年第9期780-784,共5页

目的探讨PI3K/Akt/mTOR信号通路在表阿霉素抑制人T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法用0、1.25、2.5、5、10μmol/L表阿霉素和0、0.25、0.5、1、2μmol/L PI3K/mTOR双重抑制剂(NVP-BEZ235)对Jurkat细胞作用48h后,... 目的探讨PI3K/Akt/mTOR信号通路在表阿霉素抑制人T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法用0、1.25、2.5、5、10μmol/L表阿霉素和0、0.25、0.5、1、2μmol/L PI3K/mTOR双重抑制剂(NVP-BEZ235)对Jurkat细胞作用48h后,CCK-8试剂盒检测Jurkat细胞株增殖抑制情况;采用AnnexinⅤ/PE双染法流式细胞术检测上述药物作用Jurkat细胞48h的凋亡率以及5μmol/L表阿霉素和2μmol/L NVP-BEZ235单独及联合作用Jurkat细胞0、12、24、36、48h的凋亡率;Western blotting法检测5、10μmol/L的表阿霉素作用Jurkat细胞0、6、12、24、48h,以及5μmol/L表阿霉素与2μmol/LNVP-BEZ235单独及联合作用Jurkat细胞24、48h的PI3K/Akt/mTOR信号通路中Akt、mTOR、p70s6k等表达变化。结果表阿霉素能够抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡,且凋亡作用呈浓度依赖性,5μmol/L表阿霉素作用Jurkat细胞48h的凋亡率为57.72%。在表阿霉素诱导Jurkat细胞凋亡过程中伴随Akt、mTOR、p70s6k的表达变化,NVP-BEZ235能够降低Jurkat细胞Akt、p70s6k的磷酸化水平,显著提高表阿霉素诱导Jurkat细胞凋亡的作用,5μmol/L表阿霉素和2μmol/L NVP-BEZ235联合作用Jurkat细胞48h的凋亡率达78.31%,明显高于5μmol/L表阿霉素的57.72%。结论表阿霉素抑制Jurkat细胞增殖和诱导凋亡与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关,当该通路抑制剂与表阿霉素联用时,Jurkat细胞对于表阿霉素敏感性有一定程度的提高。 展开更多

关键词 表阿霉素 NVP—BEZ235 jurkat细胞株 细胞凋亡

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IL-12逆转顺铂对人NK细胞免疫功能的抑制及其机制 被引量：8

5

作者 沈娟 吴琼丽 +1 位作者 杨滨燕 吴长有 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期872-877,共6页

目的:探讨IL-12逆转化疗药物对NK细胞免疫功能的抑制及其机制。方法:纯化的NK细胞在PMA和Ionomycin刺激条件下、加或不加化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)和IL-12,用ELISA法检测培养上清中IFN-γ和TNF-α的分泌水平,流式细胞术检测IFN-γ和T... 目的:探讨IL-12逆转化疗药物对NK细胞免疫功能的抑制及其机制。方法:纯化的NK细胞在PMA和Ionomycin刺激条件下、加或不加化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)和IL-12,用ELISA法检测培养上清中IFN-γ和TNF-α的分泌水平,流式细胞术检测IFN-γ和TNF-α、肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand, TRAIL)和转录因子(T-bet和pSTAT-4)的表达百分率;纯化NK细胞加或不加化疗药物和IL-12预处理48 h,流式细胞术检测其对白血病Jurkat细胞株的杀伤效应。结果:化疗药物明显抑制NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α以及TRAIL的表达,IL-12可以明显逆转DDP对NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α和TRAIL的抑制(P<0.05或P<0.01)。DDP抑制IFN-γ和TNF-α的转录因子p-STAT-4的表达,而IL-12通过上调磷酸化STAT-4恢复了NK细胞的IFN-γ和TNF-α的分泌功能(P<0.01)。杀伤实验显示,DDP抑制NK细胞对白血病细胞Jurkat的杀伤,而IL-12通过上调TRAIL恢复NK细胞的杀伤功能(P<0.05或P<0.01)。结论:化疗药物DDP抑制NK细胞的杀伤功能以及细胞因子(IFN-γ和TNF-α)的分泌,IL-12通过上调TRAIL和转录因子STAT-4的磷酸化恢复NK细胞的免疫功能,为临床应用IL-12重建肿瘤化疗患者的免疫功能提供实验依据。 展开更多

关键词 NK细胞 顺铂 IL-12 免疫抑制 jurkat细胞株

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人参皂苷诱导人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的研究 被引量：6

6

作者 陈小红 高瑞兰 +1 位作者 钱煦岱 金锦梅 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2005年第4期217-219,共3页

目的通过观察人参皂苷(GS)诱导人T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)凋亡,探讨GS影响T淋巴白血病细胞增生作用的机制。方法选用人T淋巴细胞株(Jurkat细胞)作靶细胞,采用MTT法和半固体集落培养法观察不同浓度的GS对Jurkat细胞增生的抑制... 目的通过观察人参皂苷(GS)诱导人T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)凋亡,探讨GS影响T淋巴白血病细胞增生作用的机制。方法选用人T淋巴细胞株(Jurkat细胞)作靶细胞,采用MTT法和半固体集落培养法观察不同浓度的GS对Jurkat细胞增生的抑制效应;用An-nexinV-FITC试验法分析Jurkat细胞的凋亡百分率,并进行DNA片段分析(DNALadder)。结果MTT法和半固体集落培养法均显示GS在50μg/mL浓度下能够明显抑制Jurkat细胞增生,并随浓度增加抑制作用增强;流式细胞术显示GS在一定浓度和时间范围内可引起细胞凋亡。结论GS在一定浓度范围内可抑制Jurkat细胞增生,并能够诱导其凋亡,为临床应用提供理论依据。 展开更多

关键词 人参皂苷 细胞凋亡 jurkat细胞株

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环磷酰胺诱导白血病细胞株凋亡及FasL、FADD基因蛋白表达 被引量：4

7

作者 刘家浩 唐洪丽 +2 位作者 阮为勇 王伟 唐月华 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期710-712,共3页

目的研究环磷酰胺(CP)诱导白血病细胞株(Jurkat)凋亡的机制,进一步探讨FasL和FADD在CP诱导白血病细胞凋亡中的作用。方法CP刺激人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,分别培养12、24、48h,在相应的时间点收获细胞,碘化丙啶(PI)染色细胞DNA,流... 目的研究环磷酰胺(CP)诱导白血病细胞株(Jurkat)凋亡的机制,进一步探讨FasL和FADD在CP诱导白血病细胞凋亡中的作用。方法CP刺激人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,分别培养12、24、48h,在相应的时间点收获细胞,碘化丙啶(PI)染色细胞DNA,流式细胞术(FCM)检测DNA片段的亚二倍体峰(subG1)阳性的凋亡细胞;并用WesternBlot技术测定FasL和FADD的表达。结果CP3mg/L刺激Jurkat白血病细胞12h几乎未见细胞凋亡(P>0.05),在24h也只有26.40%的细胞出现凋亡;但随着时间的延长,CP诱导细胞凋亡明显增加,到48h则有74.95%的细胞发生凋亡(P<0.01)。CP也上调FasL和FADD的表达,并随CP刺激细胞时间的延长其表达量也逐渐增加。结论CP诱导白血病细胞株Jurkat凋亡的起效时间较晚,诱导细胞DNA片段形成,上调FasL和FADD的表达,表明CP诱导白血病细胞凋亡依赖于Fas/FasL通路。 展开更多

关键词 环磷酰胺 细胞凋亡 FASL FADD jurkat细胞株

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γ-干扰素诱导Jurkat细胞表达B7.1/CD80、B7.2/CD86分子 被引量：2

8

作者 戴振声 陈勤奋 +1 位作者 谢弘 谢毅 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2001年第6期287-289,共3页

目的研究观察γ 干扰素 (γ IFN)诱导Jurkat细胞株表达B7.1、B7.2分子的作用。方法不同浓度的γ IFN体外孵育Jurkat细胞 48h后 ,流式细胞仪检测细胞表达B7.1、B7.2的百分率。结果与对照组相比 ,γ IFN在312 .5～ 10 0 0 0u/ml浓度下有... 目的研究观察γ 干扰素 (γ IFN)诱导Jurkat细胞株表达B7.1、B7.2分子的作用。方法不同浓度的γ IFN体外孵育Jurkat细胞 48h后 ,流式细胞仪检测细胞表达B7.1、B7.2的百分率。结果与对照组相比 ,γ IFN在312 .5～ 10 0 0 0u/ml浓度下有轻微提高Jurkat淋巴白血病细胞表达B7.1、B7.2分子的作用。在 2 5 0 0u/ml浓度时达到高峰 ,B7.1的表达比对照组提高 3.47% ,B7.2表达提高 2 .39% ,B7.1与B7.2双表达提高 1.85 %。结论γ IFN可轻度诱导Jurkat细胞表达B7.1、B7. 展开更多

关键词 Γ-干扰素 jurkat细胞株 B7.1 B7.2

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盐霉素增强长春新碱诱导急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡研究 被引量：4

9

作者 刘平平 朱锦灿 +2 位作者 刘革修 税朝祥 李小梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期653-657,共5页

目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检... 目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、caspase-3和caspase-8表达水平。结果:VCR、Sal单独及联合处理Jurkat细胞株均显示出明显的增殖抑制作用,两药联合使用的增殖抑制作用更显著(P<0.05),具有协同作用。联合用药组BCL-2蛋白水平较VCR和Sal单独处理组明显减少,而caspase-3和caspase-8水平明显增高;VCR和Sal联合用药组细胞凋亡率较VCR和Sal单独处理组明显提高(P<0.05)。结论:长春新碱联合盐霉素作用于Jurkat细胞具有协同抑制增殖及诱导凋亡的作用。 展开更多

关键词 长春新碱 盐霉素 急性T细胞白血病 jurkat细胞株 细胞凋亡

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独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体构建及体外表达 被引量：4

10

作者 李闯 吴秀丽 +4 位作者 李扬秋 周羽竝 陈少华 杨力建 朱康儿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期30-33,共4页

目的:构建Jurkat细胞株独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,转染后了解其体外表达情况。方法:根据聚合酶链反应-基因扫描(PCR-Genescan)检测Jurkat细胞株TCR Vα及Vβ亚家族表达情况,分别将其所表达的单克隆性的TCR Vα1及TCR Vβ8... 目的:构建Jurkat细胞株独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,转染后了解其体外表达情况。方法:根据聚合酶链反应-基因扫描(PCR-Genescan)检测Jurkat细胞株TCR Vα及Vβ亚家族表达情况,分别将其所表达的单克隆性的TCR Vα1及TCR Vβ8亚家族基因片段克隆至质粒pIRES的多克隆位点A(MCS A)和多克隆位点B(MCS B)中。通过限制性酶切分析、序列分析、RT-PCR、间接免疫荧光、流式细胞术(FCM)手段鉴定重组表达载体的正确性以及转染A549和Molt4细胞后基因及蛋白的表达情况。结果:构建了2组TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,该表达载体转染A549和Molt4细胞后,在mRNA和蛋白水平检测到了TCR Vα1和TCR Vβ8的表达。结论:成功构建了2种独特型Vα1-pIRES-TCR Vβ8真核表达载体,为利用特异性TCR基因修饰T细胞的研究提供方法学依据。 展开更多

关键词 jurkat细胞株 T细胞受体 转基因

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哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的作用及机制的初步探讨 被引量：3

11

作者 李新萍 欧阳建 周敏 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第7期698-701,共4页

目的哇巴因是强心甾体类药物的一种,可诱导众多肿瘤细胞凋亡。观察哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡、hTERT、c-myc mRNA及蛋白表达的影响,探讨哇巴因抗肿瘤的作用机制。方法采用不同浓度和时间的哇巴因处理Jurkat细胞株,以加... 目的哇巴因是强心甾体类药物的一种,可诱导众多肿瘤细胞凋亡。观察哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡、hTERT、c-myc mRNA及蛋白表达的影响,探讨哇巴因抗肿瘤的作用机制。方法采用不同浓度和时间的哇巴因处理Jurkat细胞株,以加入等体积的1×PBS组作为对照组,分组为:对照组、哇巴因50nmol/L 24h组、100nmol/L 24h组及50 nmol/L 48 h组、100 nmol/L 48 h组,以流式细胞术检测凋亡率;RT-PCR法检测hTERT、c-myc mRNA水平;Western blot检测hTERT、c-myc蛋白的表达。结果药物作用于Jurkat细胞株24、48 h后,对照组、50 nmol/L 24 h组、100 nmol/L 24 h组及50nmol/L 48 h组、100 nmol/L 48 h组的细胞凋亡率分别为(4.23±1.01)%、(5.67±3.71)%、(9.63±4.83)%、(19.67±4.55)%、(37.60±11.89)%,哇巴因50 nmol/L 48 h组、100 nmol/L 48 h组的凋亡率与对照组相比差异有统计学意义(P﹤0.05);Jurkat细胞的hTERT、c-myc的mRNA水平较对照组显著下降了200%,其hTERT蛋白表达也较对照组下降了224%,c-myc蛋白表达较对照组下降400%(P﹤0.05),且hTERT与c-myc mRNA及蛋白表达的降低呈正相关(P﹤0.05)。结论哇巴因可诱导T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡。哇巴因也可引起hTERT、c-myc mRNA及蛋白表达的下调,这可能是哇巴因可诱导Jurkat细胞株凋亡的机理之一。 展开更多

关键词 哇巴因 jurkat细胞株 凋亡 HTERT C-MYC

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去甲斑蟊素诱导T淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡作用及其机制 被引量：3

12

作者 李晓辉 王亚君 +2 位作者 陈丽丽 宋飞飞 张剑白 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2016年第2期81-86,共6页

目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)在体外对急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞凋亡的作用及其机制。方法取对数生长期的Jurkat细胞分别加入不同浓度的NCTD和(或)10 mg/L的长春新碱(VCR),倒置显微镜下观察不同时间Jurkat细胞... 目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)在体外对急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞凋亡的作用及其机制。方法取对数生长期的Jurkat细胞分别加入不同浓度的NCTD和(或)10 mg/L的长春新碱(VCR),倒置显微镜下观察不同时间Jurkat细胞形态、密度及结构的变化;采用MTT比色法测定NCTD及VCR两种药物作用于细胞72 h后对细胞增殖抑制作用的影响;实时荧光定量RT-PCR法对p53及survivin基因表达量进行检测。结果 NCTD及VCR作用组细胞形态出现不规则,胀大、变形现象明显,分布稀疏,大量细胞死亡,两者在相同时间点上对细胞的影响无明显差别。MTT法检测结果表明:NCTD增殖抑制作用呈现时间-浓度依赖关系,最佳浓度及时间在20 mg/L,作用72 h时。NCTD与VCR两者对Jurkat细胞均有抑制作用(P<0.05),两者的抑制率相比无显著性差异(P>0.05),且两者联合可增加细胞增殖抑制率(P<0.05)。应用实时荧光定量RT-PCR技术定量表达p53及survivin基因,结果显示NCTD组p53基因表达较对照组细胞株明显上升(P<0.001),相反survivin基因较对照组明显下降(P<0.01)。结论(1)NCTD抑制Jurkat细胞株的增殖抑制作用具有时间-浓度依赖关系;(2)NCTD与VCR对细胞增殖均有抑制作用,两者的影响无显著性差异,且两者联合可增强对细胞的增殖抑制作用;(3)NCTD促进Jurkat细胞株细胞凋亡、抑制增殖的机制可能与上调p53基因表达量及下调survivin基因表达量有关。 展开更多

关键词 T淋巴细胞白血病 jurkat细胞株 去甲斑蝥素 p53基因 SURVIVIN基因

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去甲斑蝥素对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞survivin及p53 mRNA表达的影响 被引量：2

13

作者 宋飞飞 张剑白 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2016年第5期427-429,共3页

目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)作用于体外急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat后survivin及p53 mRNA表达的变化,进一步明确NCTD抗白血病机制。方法采用悬浮培养对数生长期细胞,研究Jurkat细胞株在NTCD作用下的体外机制:实验分成... 目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)作用于体外急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat后survivin及p53 mRNA表达的变化,进一步明确NCTD抗白血病机制。方法采用悬浮培养对数生长期细胞,研究Jurkat细胞株在NTCD作用下的体外机制:实验分成两组:(1)对照组,培养液中不添加任何药物;(2)NCTD组,配制20 mg/L浓度的NTCD作用于Jurkat细胞系。两组细胞共同培养72 h。运用Real-time PCR技术分别对NTCD作用前后的Jurkat细胞株中的p53及survivin mRNA表达进行定量检测。应用t检验进行统计分析。结果 NCTD组p53 mRNA表达较对照组细胞株上升3%,相反survivin mRNA较对照组下降20%,应用统计学方法每两组进行比较均有统计学意义(P<0.01)。结论去甲斑蝥素上调抑癌基因p53 mRNA,下调癌基因survivin mRNA途径可能是NCTD抗白血病的主要机制之一。 展开更多

关键词 jurkat细胞株 去甲斑蝥素 P53基因 SURVIVIN基因

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shRNA干扰Jurkat细胞株MDM2表达对细胞生物特性的影响 被引量：3

14

作者 朱有凯 林汉良 +3 位作者 顾霞 张萌 吴红阳 许湘 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期347-350,共4页

目的研究MDM2基因与白血病细胞生物学特性的关系。方法应用pSilencer4.1CMVneo构建MDM2shRNA表达载体pMDM2shRNA,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RTPCR和Westernblot等技术检测细胞MDM2表达水平... 目的研究MDM2基因与白血病细胞生物学特性的关系。方法应用pSilencer4.1CMVneo构建MDM2shRNA表达载体pMDM2shRNA,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RTPCR和Westernblot等技术检测细胞MDM2表达水平、基础生长曲线、细胞周期变化以及UV照射后细胞生长变化。结果发现转染pMDM2shRNA的细胞MDM2mRNA及蛋白质的表达均下降>50%,细胞的生长减慢,出现一定程度的G1～S期阻滞,DNA损伤后细胞恢复较慢。结论MDM2基因表达下降后,可导致细胞增殖减慢以及降低损伤修复的能力;细胞内表达shRNA可长期敲低靶基因的表达,可作为较理想的基因功能研究细胞模型。 展开更多

关键词 jurkat细胞株 RNA干扰 生物特性 MDM2mRNA 细胞生物学特性 Western MDM2基因 RT-PCR 基因功能研究 DNA损伤 shRNA 细胞内表达 方法应用 表达载体 稳定表达 技术检测 blot 生长曲线 生长变化 uV照射 周期变化 基因表达 损伤修复

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CAG治疗方案药物对人Jurkat细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用

15

作者 邓禹 李金遥 +5 位作者 刘云篧 杜竺蔓 段宏基 洪静 马明义 赵矫 《泸州医学院学报》 2015年第5期461-464,共4页

目的:探讨CAG治疗方案药物阿糖胞苷(Ara-c)、阿克拉霉素(ACR)及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对人T细胞性急性淋巴细胞白血病细胞(Jurkat细胞)的生长抑制和诱导凋亡的情况。方法:用CAG治疗方案药物分别处理Jurkat细胞和缺铁性贫血患者骨髓... 目的:探讨CAG治疗方案药物阿糖胞苷(Ara-c)、阿克拉霉素(ACR)及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对人T细胞性急性淋巴细胞白血病细胞(Jurkat细胞)的生长抑制和诱导凋亡的情况。方法:用CAG治疗方案药物分别处理Jurkat细胞和缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:CAG治疗方案药物作用Jurkat细胞48 h后增殖抑制率为93.67%,与Jurkat细胞PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);与缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞CAG组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。CAG治疗方案药物作用缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞48 h后增殖抑制率为7.16%,与缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞PBS对照组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。CAG治疗方案作用Jurkat细胞株12 h后,细胞早期凋亡率为46.12%,晚期凋亡率为5.79%;作用24 h后,细胞早期凋亡率为55.21%,晚期凋亡率为28.31%,Jurkat细胞PBS对照组细胞凋亡率为0,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:CAG治疗方案对缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞的增殖抑制不明显,对缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞副作用小。CAG治疗方案药物能明显抑制Jurkat细胞的生长并杀伤Jurkat细胞,且能诱导较多细胞发生早期、晚期凋亡,凋亡在Jurkat细胞株死亡中起决定性作用,通过凋亡清除绝大多数细胞。 展开更多

关键词 CAG治疗方案 jurkat细胞株 增殖抑制 凋亡

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Jurkat细胞增殖过程中S期激酶相关蛋白2与p27^kip1的表达变化及意义

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作者 陆建新 王熵婵 +4 位作者 沈爱国 赵玥铭 孙承龙 张冬梅 程纯 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期330-334,共5页

目的探讨S期激酶相关蛋白2（skp2）与p27^kip1在淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖过程中的表达变化及意义。方法采用免疫沉淀法检测Jurkat细胞中p27^kip1与Skp2的结合情况；采用血清饥饿合并释放法同步化处理Jurkat细胞，再分别用Western blo... 目的探讨S期激酶相关蛋白2（skp2）与p27^kip1在淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖过程中的表达变化及意义。方法采用免疫沉淀法检测Jurkat细胞中p27^kip1与Skp2的结合情况；采用血清饥饿合并释放法同步化处理Jurkat细胞，再分别用Western blot技术、免疫荧光双标技术及核浆分离法检测p27^kip1和Skp2在Jurkat细胞中的表达变化及亚细胞定位。结果p27^kip1与Skp2能够相互结合。在Jurkat细胞增殖过程中，p27““蛋白表达减少，其中在细胞核内的减少更明显；Skp2蛋白表达增加，其中在细胞浆中的增加更明显。结论在Jurkat细胞增殖过程中，Skp2在细胞浆中的合成增加，并可能通过加快p27^kip1的泛素化降解使细胞核内p27^kip1显著减少，从而推动细胞周期的进程。 展开更多

关键词 jurkat细胞株 P27^KIP1 SKP2

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5-氟尿嘧啶诱导Jurkat细胞凋亡及Fas、FasL的表达

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作者 梁军兵 潘君素 +1 位作者 缪蕾蕾 陈琪 《海峡药学》 2010年第12期281-283,共3页

目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导Jurkat细胞株的凋亡和Fas、FasL的表达。方法不同浓度的5-FU分别处理Jurkat细胞12h和24h后,流式细胞仪检测细胞表达CD95、CD95L的百分率。结果与对照组相比,5-FU在10、20、40μg.mL-1浓度下明显促进Jurkat... 目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导Jurkat细胞株的凋亡和Fas、FasL的表达。方法不同浓度的5-FU分别处理Jurkat细胞12h和24h后,流式细胞仪检测细胞表达CD95、CD95L的百分率。结果与对照组相比,5-FU在10、20、40μg.mL-1浓度下明显促进Jurkat细胞表达Fas、FasL;且5-FU在24h比处理12h有更强的诱导效果。结论 5-FU可显著提高Jurkat细胞凋亡率,并增强Fas、FasL的表达率。 展开更多

关键词 5-氟尿嘧啶 jurkat细胞株 FAS FASL

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Jurkat细胞株TCRγ基因重排及多重引物扩增分析

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作者 韩西群 齐宗利 赵彤 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期738-741,共4页

目的分析Jurkat细胞株TCRγ基因重排特点,观察多重引物PCR扩增Jurkat细胞株TCRγ基因重排的效果。方法 TCRγ基因重排正向、反向引物配对组合,分别扩增Jurkat细胞株DNA,阳性PCR产物测序并比对分析;多重引物组合、降落式PCR扩增Jurkat细... 目的分析Jurkat细胞株TCRγ基因重排特点,观察多重引物PCR扩增Jurkat细胞株TCRγ基因重排的效果。方法 TCRγ基因重排正向、反向引物配对组合,分别扩增Jurkat细胞株DNA,阳性PCR产物测序并比对分析;多重引物组合、降落式PCR扩增Jurkat细胞株TCRγ基因重排,比较多重引物与单对引物扩增效果。结果两组单对引物扩增产物电泳出现强阳性条带,测序并比对证实为TCRγ基因重排;与胚系基因比对发现,重排后TCRγ基因存在删除和增加的碱基序列;多重引物扩增产物中出现阳性条带的组合,其引物与单对引物组合一致。结论 Jurkat细胞中存在两种不同的TCRγ基因重排,重排序列体现了基因重排多样性。多重引物结合降落式PCR扩增TCRγ基因重排,扩增效果与单对引物一致。 展开更多

关键词 jurkat细胞株 TCRγ基因 基因重排 多重引物PCR

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MSP扩增中3种DNA提取法的比较

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作者 张云 陈凯锋 +1 位作者 刘彬 张晓兵 《西南国防医药》 CAS 2010年第1期27-28,共2页

目的比较标准酚-氯仿、Tripure DNA提取法、强碱法3种DNA提取法,研究哪种方法更简单方便,更适合做DNA甲基化特异性PCR(MSP)。方法分别用标准酚-氯仿、Tripure DNA提取法、强碱法提取Jurkat细胞株中的DNA,并对3种方法提取的DNA含量、纯... 目的比较标准酚-氯仿、Tripure DNA提取法、强碱法3种DNA提取法,研究哪种方法更简单方便,更适合做DNA甲基化特异性PCR(MSP)。方法分别用标准酚-氯仿、Tripure DNA提取法、强碱法提取Jurkat细胞株中的DNA,并对3种方法提取的DNA含量、纯度及所需时间进行比较。结果3种方法提取DNA的纯度和完整性都较好,标准酚-氯仿法提取的DNA含量最低,且最费时;强碱法提取的DNA含量最高,并最省时。结论这3种DNA提取法提取的DNA都能够达到做MSP的要求,比较而言,强碱法更具优越性。 展开更多

关键词 DNA提取 DNA甲基化 jurkat细胞株

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HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及培养优化的研究 被引量：1

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作者 倪崖 谭卓 +4 位作者 黄云坚 房国坚 李坤 沈小琴 周富英 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第4期385-386,470,共3页

目的：研究HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及新生小牛血清对细胞生长及病毒产量质量的影响。方法：通过对HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度、细胞活力指数、活细胞密度、病毒比分泌速率和细胞比生长速率进行观察来评价其动... 目的：研究HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及新生小牛血清对细胞生长及病毒产量质量的影响。方法：通过对HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度、细胞活力指数、活细胞密度、病毒比分泌速率和细胞比生长速率进行观察来评价其动力学；通过对抗原纯度的变化来说明不同浓度的新生小牛血清对分泌的病毒质量的影响。结果：HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度与细胞活力指数、活细胞密度呈现正相关性；病毒滴度、病毒比分泌速率与细胞比生长速率不相关，随着小牛血清浓度的增加，抗原纯度有下降趋势。结论：细胞生长对数期几乎同步出现病毒分泌对数期，小牛血清浓度为9％～12％的培养基是最佳的培养条件。 展开更多

关键词 HIV-1VN jurkat细胞株 小牛血清 病毒分泌动力学 抗原纯度

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