天然蒙脱石防治烧伤后肠道细菌移位的实验研究 被引量：17

1

作者 苏海涛 李宜姝 +8 位作者 陆树良 孙曼 青春 李宗瑜 邵铁滨 黄丽滨 曲滨 杨心波 张秀英 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期89-92,共4页

目的　探讨天然蒙脱石对烧伤大鼠肠道细菌移位的防治作用。　方法　SD大鼠54只,分为正常对照组6只、烧伤对照组与烧伤治疗组各24只。后两组大鼠预先喂服转染了质粒pUC19的示踪菌JM109,证实质粒已定植于其肠道后,制成30%TBSAⅢ度烫伤(以... 目的　探讨天然蒙脱石对烧伤大鼠肠道细菌移位的防治作用。　方法　SD大鼠54只,分为正常对照组6只、烧伤对照组与烧伤治疗组各24只。后两组大鼠预先喂服转染了质粒pUC19的示踪菌JM109,证实质粒已定植于其肠道后,制成30%TBSAⅢ度烫伤(以下称烧伤)模型。烧伤治疗组大鼠伤后立即喂服天然蒙脱石0. 6g d-1 kg-1,烧伤对照组大鼠不喂服药物。观察正常对照组大鼠以及烧伤对照组、烧伤治疗组大鼠伤后12h和1、3、5d血液、肠系膜淋巴结细菌移位情况,并行酶切鉴定;检测大鼠肠组织丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量;用病理学方法观察整段小肠的损伤情况,测量空肠黏膜绒毛高度并计算基底膜细胞核分裂相。　结果　血液细菌培养:伤后1、5d,烧伤对照组阳性鼠数多于正常对照组,烧伤治疗组阳性鼠数少于烧伤对照组(P<0 05).肠系膜淋巴结细菌定量:烧伤治疗组伤后1、5d为(38±16)、(68±20)集落形成单位(CFU) /g;烧伤对照组伤后1、5d为( 228±67 )、( 183±29 )CFU/g,明显高于前者(P<0. 01 ).MDA、SOD含量:烧伤治疗组与烧伤对照组伤后各时相点比较,差异有统计学意义(P<0. 05).烧伤治疗组大鼠伤后各时相点空肠绒毛高度及基底膜细胞核分裂相明显高于或多于烧伤对照组(P<0. 05或0. 01)。 展开更多

关键词 肠道细菌移位 蒙脱石 烧伤后 天然 实验研究 超氧化物歧化酶(SOD) 丙二醛(MDA) 肠系膜淋巴结 正常对照组 基底膜细胞 血液细菌培养 集落形成单位 核分裂相 治疗组 jm109 肠黏膜屏障 防治作用 SD大鼠 Ⅲ度烫伤 TBSA 酶切鉴定

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翅碱蓬CMO cDNA基因克隆、测序及重组植物表达载体的构建 被引量：8

2

作者 仲崇斌 刘长江 +2 位作者 费腾 袁晓东 孙丽慧 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期80-83,共4页

从翅碱蓬叶片中提取总RNA,根据相关同源序列设计引物,使用反转录试剂盒进行RT- PCR,扩增得到翅碱蓬胆碱单加氧酶(CMO)cDNA,进行PCR产物测序;然后将CMO cDNA T-A克隆至pMD18-T-simple载体上,经测序正确后亚克隆至pBI121植物表达载体,进... 从翅碱蓬叶片中提取总RNA,根据相关同源序列设计引物,使用反转录试剂盒进行RT- PCR,扩增得到翅碱蓬胆碱单加氧酶(CMO)cDNA,进行PCR产物测序;然后将CMO cDNA T-A克隆至pMD18-T-simple载体上,经测序正确后亚克隆至pBI121植物表达载体,进行酶切及克隆测序鉴定。 展开更多

关键词 胆碱单加氧酶 pMD18-T-simple载体 pBI121植物表达载体 大肠杆菌 jm109

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人Leptin基因在大肠杆菌中的高效表达、纯化及其生物学活性研究 被引量：8

3

作者 赵跃然 王郡甫 +6 位作者 游力 高春义 田志刚 张捷 韩娜 尹进 孙汭 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期175-178,共4页

将人Leptin表达质粒pBV2 2 0 OB转化E .coliJM 10 9,经热诱导获得了目的蛋白的表达。经SDS PAGE鉴定分析 ,表达产物以包涵体形式存在 ,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 40 %以上。通过包涵体分离 ,SephacrylS2 0 0HR凝胶和DEAE5 2离子交... 将人Leptin表达质粒pBV2 2 0 OB转化E .coliJM 10 9,经热诱导获得了目的蛋白的表达。经SDS PAGE鉴定分析 ,表达产物以包涵体形式存在 ,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 40 %以上。通过包涵体分离 ,SephacrylS2 0 0HR凝胶和DEAE5 2离子交换层析及HypersilC18柱反相色谱纯化 ,获得纯度在 95 %以上 ,内毒素含量小于10EU/mg的高纯度的重组人Leptin。Western blot鉴定表明 ,纯化表达产物能和抗Leptin抗体特异性结合 ;蛋白质N端 15个氨基酸序列分析结果和预期的序列一致。纯化产物经复性处理 ,其分子中Cys96和Cys146形成二硫键。体内活性检测显示 ,纯化和复性的rh Leptin明显抑制BALB/c小鼠的进食和体重增长 ,提示其具有明显的生物学活性。 展开更多

关键词 LEPTIN 基因表达 大肠杆菌 jm109 蛋白纯化 肥胖基因

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肺炎链球菌不同菌株自溶酶基因的克隆、序列分析及重组表达 被引量：5

4

作者 袁竹青 吴忠道 +3 位作者 余新炳 张扣兴 郑焕钦 徐劲 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期87-90,共4页

目的克隆肺炎链球菌自溶酶(LytA)的基因序列,并进行重组表达。方法分别提取不同临床分离株的基因组DNA,根据已知肺炎链球菌野生R6株LytA基因序列设计引物,进行PCR扩增,将获得的目的基因片段克隆入原核表达质粒,然后测序;利用生物信息学... 目的克隆肺炎链球菌自溶酶(LytA)的基因序列,并进行重组表达。方法分别提取不同临床分离株的基因组DNA,根据已知肺炎链球菌野生R6株LytA基因序列设计引物,进行PCR扩增,将获得的目的基因片段克隆入原核表达质粒,然后测序;利用生物信息学方法,对不同临床分离株LytA基因序列进行比较分析,同时进行LytA基因的重组表达。结果从不同临床分离株的基因组中均扩增出完整的LytA基因片段,成功构建了重组质粒pGEX-4T-1-L-ytA。比较不同临床分离株LytA基因的DNA序列及推测的氨基酸序列,发现各株LytA基因序列及氨基酸序列间存在差异。通过异丙基巯基半乳糖(IPTG)诱导,LytA基因在大肠埃希菌JM109中得到高效表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)结果显示pGEX-4T-1-L-ytA融合蛋白相对分子质量约62000,与理论预测一致。结论序列分析发现各分离株的LytA基因序列及氨基酸序列间存在差异,但同源性极高,推测LytA基因序列保守,可用于疫苗研发。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 重组表达 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 酶基因 分析及 临床分离株 氨基酸序列 基因序列 自溶 菌株 基因组DNA 原核表达质粒 相对分子质量 基因片段 PCR扩增 生物信息学 DNA序列 jm109 大肠埃希菌 A基因

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高效JM109感受态细胞制备及转化条件的优化 被引量：2

5

作者 许彤 刘钦松 +1 位作者 张丛丛 刘孟刚 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第21期4902-4904,共3页

采用不同的转化液制备大肠杆菌(Escherichia coli)JM109感受态细胞,并进行pUC18质粒的转化,考察细菌生长状态、转化液、转化的热激时间和转化后所用培养基对转化率的影响。结果表明,菌液A600 nm为0.705时采用TB转化液制备感受态细胞,在4... 采用不同的转化液制备大肠杆菌(Escherichia coli)JM109感受态细胞,并进行pUC18质粒的转化,考察细菌生长状态、转化液、转化的热激时间和转化后所用培养基对转化率的影响。结果表明,菌液A600 nm为0.705时采用TB转化液制备感受态细胞,在42℃热激45 s,转化后采用SOC培养基振荡培养,转化效率最高,可达8.59×108CFU/μg质粒。 展开更多

关键词 jm109 感受态细胞 转化效率

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内源性血管生成抑制因子A rresten在E.coli JM109中的表达及抗新生血管生成的药理学研究 被引量：1

6

作者 郑金平 唐海英 +1 位作者 解军 陈显久 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1229-1232,共4页

目的构建内源性血管生成抑制因子Arresten基因的原核表达载体，并进行表达，抑制新生血管的药理学实验中发现，该表达产物具有抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生长的功能。方法从健康产妇的胎盘组织中提取总RNA，经逆转录-聚合酶链式反应（RT-PC... 目的构建内源性血管生成抑制因子Arresten基因的原核表达载体，并进行表达，抑制新生血管的药理学实验中发现，该表达产物具有抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生长的功能。方法从健康产妇的胎盘组织中提取总RNA，经逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增出Arresten基因，构建重组质粒pBV220-Art转化E．coli JM109进行原核表达，大量表达提取Arresten蛋白，用鸡胚绒毛尿囊膜实验进行活性测定。结果成功构建的重组质粒pBV220-Arr在E．coli JM109菌株中2～8h均可获得表达，其中诱导4h表达效率最高，Arresten蛋白可明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生长，活性功能明显强于血管抑素。结论成功构建Arresten基因重组质粒pBV220-Arr，并可在E．coli JM109菌株中获得表达，Arresten蛋白具有明显的抑制血管生成的作用。 展开更多

关键词 ARRESTEN 原核表达载体 E.COLI jm109 基因表达 活性

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中国强毒赖型钩端螺旋体新基因OmpL17的表达及其免疫原性 被引量：2

7

作者 朱庆平 赵计林 +3 位作者 鲍朗 张会东 赵明才 黎光 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期250-253,共4页

将Omp L17基因克隆于p GEX- 1λT载体,在大肠杆菌JM10 9中表达分子量约为5 4 KDa的GST-Omp L17融合蛋白,凝血酶切割后得到了大小约2 8KDa的Omp L17蛋白。用纯化的Omp L17蛋白免疫大白兔,制备了高滴度的特异性抗体(1∶4 896 )。本研究获... 将Omp L17基因克隆于p GEX- 1λT载体,在大肠杆菌JM10 9中表达分子量约为5 4 KDa的GST-Omp L17融合蛋白,凝血酶切割后得到了大小约2 8KDa的Omp L17蛋白。用纯化的Omp L17蛋白免疫大白兔,制备了高滴度的特异性抗体(1∶4 896 )。本研究获得了纯化的Omp L17及其特异性抗体,为该外膜蛋白致病作用及免疫保护力研究奠定基础。 展开更多

关键词 OmpL17 钩体外膜蛋白 GST融合表达 免疫原性 赖型钩端螺旋体 新基因 特异性抗体 中国 融合蛋白 jm109

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人MAGE-3基因片段的克隆与测序 被引量：2

8

作者 彭培立 吕颖捷 +1 位作者 赵国强 董子明 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2005年第2期20-23,共4页

目的克隆表达人MAGE-3基因片段(210～623位碱基),以便研究其对MAGE-3阳性恶性肿瘤的生物学作用。方法为选择靶基因,采用分子生物学软件分析MAGE-3基因抗原表位;并设计MAGE-3靶区域引物。从人肺癌组织标本中提取mRNA,用RT-PCR法从中扩增... 目的克隆表达人MAGE-3基因片段(210～623位碱基),以便研究其对MAGE-3阳性恶性肿瘤的生物学作用。方法为选择靶基因,采用分子生物学软件分析MAGE-3基因抗原表位;并设计MAGE-3靶区域引物。从人肺癌组织标本中提取mRNA,用RT-PCR法从中扩增出MAGE-3片段,对其进行XhoⅠⅡ酶切鉴定;将扩增片段克隆于pGEM-TEasy载体中,转化JM109,进行阳性筛选后,运用pGEM-TEasy质粒的T7/SP6作为引物对重组子鉴定,并进行DNA测序。结果抗原表位分析表明MAGE-3基因片段(210～623位碱基)为抗原决定簇丰富区段。RNA体外扩增得到的片段为414bp,并经XhoⅠⅡ酶切鉴定得到证实;pGEM-TEasy-MAGE-3经筛选鉴定正确,DNA测序结果与Genebank比较完全相同,表明靶基因成功插入pGEM-TEasy。结论该片段可用于真核及原核表达。 展开更多

关键词 基因片段 MAGE-3基因 DNA测序 抗原表位分析 酶切鉴定 生物学作用 分子生物学 癌组织标本 jm109 抗原决定簇 克隆表达 恶性肿瘤 软件分析 mRNA PCR法 扩增片段 体外扩增 原核表达 靶基因 重组子 碱基 阳性 引物 筛选

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稳定沉默Beclin1的人成神经瘤SH-SY5Y细胞系的构建

9

作者 魏传杰 肖双 +3 位作者 江岚 谭琰 黄波 龙鼎新 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1085-1089,共5页

为了构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体,并建立Beclin1稳定沉默的人成神经瘤SH-SY5Y细胞系,将合成的shRNA片段连接pGenesil-1质粒,构建成重组质粒pGenesil-1-Beclin1,转化其至感受态大肠杆菌JM109,挑取阳性克隆进行双酶切和DNA测序鉴... 为了构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体,并建立Beclin1稳定沉默的人成神经瘤SH-SY5Y细胞系,将合成的shRNA片段连接pGenesil-1质粒,构建成重组质粒pGenesil-1-Beclin1,转化其至感受态大肠杆菌JM109,挑取阳性克隆进行双酶切和DNA测序鉴定。常规培养SH-SY5Y细胞,将重组质粒pGenesil-1-Beclin1和空白对照质粒pGenesil-1转染SH-SY5Y细胞,G418抗性筛选,在荧光显微镜下挑取单细胞克隆并扩大培养至稳定细胞株,经RT-PCR和Western blot检测Beclin1基因的表达。经酶切和DNA测序鉴定重组真核表达载体构建正确,成功筛选出两株细胞系。和对照组转染pGenesil-1的细胞系相比,转染pGenesil-1-Beclin1细胞系的Beclin1mRNA表达下降71.28%±1.45%(P<0.05),Beclin1蛋白表达下降75.50%±2.63%(P<0.05)。提示已经成功构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体并建立了Beclin1基因稳定沉默的SH-SY5Y细胞系,为研究Beclin1功能提供了细胞模型。 展开更多

关键词 jm109 SH-SY5Y pGenesil-1-Beclin1 G418筛选 细胞克隆

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用重组大肠杆菌JM109(pKST11)转化苯生产顺-1,2-二羟基-3,5-环己二烯 被引量：1

10

作者 曲向华 陈金春 +2 位作者 马祺祥 孙世尧 陈国强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期74-80,共7页

顺 1,2 二羟基 3,5 环己二烯 (简称DHCD)是航天业、电子工业、医药业以及精细化工业上重要的手性化合物。利用重组E coliJM10 9(pKST11) ,采用适时监测发酵过程中全细胞甲苯双加氧酶 (Toluenedioxygenase,TDO)活性的方法 ,研究了发... 顺 1,2 二羟基 3,5 环己二烯 (简称DHCD)是航天业、电子工业、医药业以及精细化工业上重要的手性化合物。利用重组E coliJM10 9(pKST11) ,采用适时监测发酵过程中全细胞甲苯双加氧酶 (Toluenedioxygenase,TDO)活性的方法 ,研究了发酵生产DHCD工艺中的重要影响因子IPTG以及底物苯的供给方式对DHCD产量的影响。研究结果表明 :(1)发酵初期利用IPTG诱导TDO的表达 ,不利于细胞生长 ,在对数生长中期 (6或 8h) ,采用 0 5mmol LIPTG即可诱导出TDO的最高表达。 (2 )发酵液中的苯对全细胞甲苯双加氧酶 (TDO)的活性有抑制作用 ,而利用液体石蜡作为缓释剂进行两相法发酵则降低了苯的毒害 ,明显提高了DHCD的产量。当采用传统的通气供苯方法 ,DHCD的产量仅有 7 5g L ;批式添加液体石蜡与苯的混溶物使DHCD的产量提高到 2 2 6g L ,是通气供苯法的 3倍 ;而采用流加的方式添加液体石蜡与苯的混溶物使DHCD的产量进一步提高到 36 8g L ,是通气供苯法的 5倍。证明通过发酵工艺的优化可以解决苯的毒害与苯作为反应底物在水相中需要有一定浓度之间的矛盾 ,获得较好的转化结果。 展开更多

关键词 重组大肠杆菌 jm109 pKST11 顺-1 2-二羧基-3 5-环己二烯 甲苯双加氧酶 生物转化 聚苯

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11

《中华医学信息导报》 2010年第19期14-16,共3页

鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因 影响高转移人前列腺癌细胞体外生物学行为的机制探讨 为了探讨鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白（PAG1）基因对高转移人前列腺癌细胞系PC-3M-1E8细胞体外生物学行为影响的机制，于文娟（北京大学医学... 鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因 影响高转移人前列腺癌细胞体外生物学行为的机制探讨 为了探讨鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白（PAG1）基因对高转移人前列腺癌细胞系PC-3M-1E8细胞体外生物学行为影响的机制，于文娟（北京大学医学部病理学系，现在青岛大学医学院附属医院病理科）等采用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导JM109细菌中GST—Rafl—Ra5结合域（GST—Rafl—RBD）融合蛋白的表达，其中Rafl—RBD能特异性地与活性Ras（GTP—Ras）结合， 展开更多

关键词 人前列腺癌细胞系 青岛大学医学院附属医院 北京大学医学部 生物学行为 磷酸化蛋白 导读 蛋白基因 jm109

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尿酸酶产生菌的筛选、基因克隆及表达 被引量：10

12

作者 刘广桢 陈建华 王旻 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期464-467,共4页

目的:构建表达尿酸酶的重组基因工程菌,提高尿酸酶的表达量。方法:从12株酵母菌中筛选得到1株产尿酸酶的产朊假丝酵母Cu2357菌株,应用DNA重组技术,将野生菌尿酸酶基因克隆到表达载体pKA中,获得重组尿酸酶基因工程菌E.colipKU/JM109。结... 目的:构建表达尿酸酶的重组基因工程菌,提高尿酸酶的表达量。方法:从12株酵母菌中筛选得到1株产尿酸酶的产朊假丝酵母Cu2357菌株,应用DNA重组技术,将野生菌尿酸酶基因克隆到表达载体pKA中,获得重组尿酸酶基因工程菌E.colipKU/JM109。结果:构建的表达载体中的目的基因序列正确。经SDS-PAGE检测表明,表达的蛋白质相对分子质量约为34 kDa,含量占细胞可溶性蛋白的49%。优化培养条件后,发酵液尿酸酶活力可达16 U/mL,是野生菌产尿酸酶量的240多倍。结论:尿酸酶基因在E.colipKU/JM109中实现了高效表达。 展开更多

关键词 尿酸酶 E.COLI pKU/jm109 克隆 表达

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产胆固醇氧化酶重组大肠杆菌的发酵培养基和诱导条件的优化 被引量：8

13

作者 杨海麟 王长城 +4 位作者 张玲 孙艳 白洁 王武 杨建勋 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期670-674,共5页

在摇瓶中对产胆固醇氧化酶重组大肠杆菌的发酵培养基和诱导条件进行了优化,优化培养基为甘油10 g/L,胰蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,KH2PO42 g/L,K2HPO44 g/L,Na2HPO4.12 H2O7 g/L,(NH4)2SO41.2 g/L,NH4Cl 0.2 g/L,MgSO4.7 H2O1 g/L;优化... 在摇瓶中对产胆固醇氧化酶重组大肠杆菌的发酵培养基和诱导条件进行了优化,优化培养基为甘油10 g/L,胰蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,KH2PO42 g/L,K2HPO44 g/L,Na2HPO4.12 H2O7 g/L,(NH4)2SO41.2 g/L,NH4Cl 0.2 g/L,MgSO4.7 H2O1 g/L;优化的诱导条件为:对数生长中期诱导,IPTG浓度为0.3 mmol/L。在优化的培养基和优化的诱导条件下,单位菌体产酶量达745.86 U/g,菌体产酶水平达1 625.97 U/L,为优化前的700 U/L的2.3倍。 展开更多

关键词 重组E.coli jm109/pTrc99a—COD 胆固醇氧化酶 培养基优化 诱导条件优化

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大肠杆菌JM109感受态形成因素分析 被引量：6

14

作者 游雷鸣 翁海波 +2 位作者 韩绍印 席宇 孙春花 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第2期37-40,共4页

目的：分析大肠杆菌JM109感受态形成因素,提高转化效率。方法：采用不同生长状态、不同转化溶液、不同保存时间及热激处理时间的细菌制备感受态,分析转化效率。结果：以20mmol/L MgCl2＋80mmol/L CaCl2为处理液,经活化培养OD600为0.82... 目的：分析大肠杆菌JM109感受态形成因素,提高转化效率。方法：采用不同生长状态、不同转化溶液、不同保存时间及热激处理时间的细菌制备感受态,分析转化效率。结果：以20mmol/L MgCl2＋80mmol/L CaCl2为处理液,经活化培养OD600为0.82的菌液制备感受态细胞,4℃放置12-24h之内,42℃热激处理60s,转化效率最高,可达9.8×10^6-1.2×10^7cfu/μg DNA（pUC19）。随着质粒长度增加,转化效率下降。结论：感受态细胞形成与生长状态关系密切,金属离子、有机溶剂对感受态的形成影响显著。感受态形成过程中,细胞可能发生了一系列的生理变化。 展开更多

关键词 大肠杆菌jm109 感受态细胞 转化效率

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大肠杆菌JM109菌株高效电转化条件的研究 被引量：6

15

作者 冯建成 崔贞华 罗素兰 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2008年第1期79-81,共3页

通过感受态细胞的生长状态、转化温度及不同的电击杯内径、电压等影响电转化的重要条件,探讨索了大肠杆菌JM109菌株电转化的最优条件.在感受态细胞OD600值为0.5-0.7,转化环境温度为4℃,电容25μF、并联电阻200Ω、电压2.5 kV和0.2 cm电... 通过感受态细胞的生长状态、转化温度及不同的电击杯内径、电压等影响电转化的重要条件,探讨索了大肠杆菌JM109菌株电转化的最优条件.在感受态细胞OD600值为0.5-0.7,转化环境温度为4℃,电容25μF、并联电阻200Ω、电压2.5 kV和0.2 cm电击杯电转化效率最高,可达到9.12×108. 展开更多

关键词 电穿孔 转化效率 大肠杆菌jm109

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基因工程菌对偶氮染料脱色及生物强化作用 被引量：5

16

作者 金若菲 周集体 +1 位作者 王竞 张爱丽 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期646-650,共5页

研究了基因工程菌Escherichia(E.)coliJM109(pGEX-AZR)对偶氮染料的脱色及生物强化能力.实验表明,含有10%E.coliJM109(pGEX-AZR)的强化体系对酸冲击的耐受能力没有提高,脱色率仅为80%;而对碱度及盐度的冲击表现出较强的耐受能力,脱色率... 研究了基因工程菌Escherichia(E.)coliJM109(pGEX-AZR)对偶氮染料的脱色及生物强化能力.实验表明,含有10%E.coliJM109(pGEX-AZR)的强化体系对酸冲击的耐受能力没有提高,脱色率仅为80%;而对碱度及盐度的冲击表现出较强的耐受能力,脱色率超过90%.同时在AnSBRs中连续运行42 d,强化体系耐浓度冲击的能力和脱色率均高于对照体系.利用RISA测定微生物群落结构,E.coliJM109(pGEX-AZR)在强化体系中始终作为优势菌群存在并保持较高的代谢活性. 展开更多

关键词 ESCHERICHIA COLI jm109(pGEX-AZR) 偶氮染料 生物脱色 生物强化 RISA

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大肠杆菌JM109对废水中铀(Ⅵ)的吸附实验研究 被引量：5

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作者 邓钦文 王永东 +1 位作者 吕俊文 易敏涛 《南华大学学报（自然科学版）》 2014年第1期29-33,共5页

利用大肠杆菌JM109去除含铀废水,研究了在pH值、温度、吸附时间、铀离子的初始浓度、菌体浓度等,耐辐射奇球菌对铀的吸附效果.吸附试验结果表明耐辐射奇球菌有较高的吸附铀的能力,其中对低浓度的含铀废水处理潜力较大.当pH值为4.5时吸... 利用大肠杆菌JM109去除含铀废水,研究了在pH值、温度、吸附时间、铀离子的初始浓度、菌体浓度等,耐辐射奇球菌对铀的吸附效果.吸附试验结果表明耐辐射奇球菌有较高的吸附铀的能力,其中对低浓度的含铀废水处理潜力较大.当pH值为4.5时吸附效果最好,投加菌体浓度最佳为0.1 g/L,大约50 min左右达到吸附平衡,吸附量最高达到693.8 mg/g.吸附热力学研究其更符合Freundlich等温模型,吸附过程符合准二级动力学模型. 展开更多

关键词 大肠杆菌jm109 吸附 铀

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应用糖基化碳量子点研究甘露糖与致病菌之间的相互作用 被引量：4

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作者 赵斌 崔飞云 +2 位作者 徐溢 张晓凤 李泽全 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1318-1324,共7页

以柠檬酸为碳源,通过水热法制备得到荧光碳量子点(CQDs),基于其表面的—COOH,将4-氨基苯基-α-D-吡喃甘露糖苷以共价键的方式固定在CQDs表面,得到甘露糖基化碳量子点(Man-CQDs),并通过荧光竞争法,结合Scatchard方程计算了Man-CQDs与大... 以柠檬酸为碳源,通过水热法制备得到荧光碳量子点(CQDs),基于其表面的—COOH,将4-氨基苯基-α-D-吡喃甘露糖苷以共价键的方式固定在CQDs表面,得到甘露糖基化碳量子点(Man-CQDs),并通过荧光竞争法,结合Scatchard方程计算了Man-CQDs与大肠杆菌JM109、大肠杆菌DH5a和沙门氏菌S.123443的结合常数Ka。实验得到CQDs的粒径为26 nm,最大发射波长为445 nm,荧光产率相较于54%硫酸奎宁为76%,Man-CQDs荧光强度与CQDs相比基本保持不变,通过苯酚-硫酸法计算得到Man-CQDs浓度为2.832 mmol/L,Man-CQDs纳米颗粒中甘露糖含量约为40%。根据Man-CQDs、D-Mannose与致病菌竞争结合实验,结合Scatchard模型方程,计算得到Man-CQDs与大肠杆菌JM109的结合常数Ka=2.39×103L/mol,Man-CQDs与沙门氏菌S.123443的结合常数Ka=1.17×105L/mol,Man-CQDs与大肠杆菌DH5a无有效结合。研究结果显示,该方法可用于甘露糖与致病菌非共价结合的结合常数测定,为研究糖与致病菌相互作用提供了参考。 展开更多

关键词 甘露糖基化碳量子点(Man-CQDs) 大肠杆菌jm109 大肠杆菌DH5a 沙门氏菌S.123443 结合常数 相互作用 荧光光谱

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重组pQE30 tPAr质粒在JM109菌株中的稳定性研究 被引量：4

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作者 贺石汉 李宝宗 +4 位作者 郜金荣 叶林柏 郑永勋 佘应龙 吴正辉 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期497-500,共4页

将构建好的含有人变异tPA基因的重组pQE30tPAr质粒的JM10 9菌株原始种子库菌种 ,在含Amp的平板培养基划线法连续传代至 10 0代 ,其在固体培养基中生长速度、菌落形态和菌体形态、Amp抗性等方面与原始种子库无明显差异 ;每隔 10代提取质... 将构建好的含有人变异tPA基因的重组pQE30tPAr质粒的JM10 9菌株原始种子库菌种 ,在含Amp的平板培养基划线法连续传代至 10 0代 ,其在固体培养基中生长速度、菌落形态和菌体形态、Amp抗性等方面与原始种子库无明显差异 ;每隔 10代提取质粒DNA用HindⅢ和KpnⅠ限制性内切酶切割检查 ,酶切图谱没有改变 ;DNA测序未见tPAr基因变异 .用原代和第 10 0代培养诱导表达tPAr,表达水平和tPAr活性均无明显差异 .菌体的SDS pAGE图谱也完全相同 .以上结果表明所建立的JM 10 展开更多

关键词 基因重组 pQE30tPAr质粒 jm109菌株 遗传稳定性 纤溶酶原激活剂 传代培养

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绿色木霉葡聚糖内切酶Ⅰ基因的定点突变及酶学性质的研究 被引量：3

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作者 陈祺 韦宇拓 +2 位作者 杜丽琴 黄艳燕 黄日波 《广西农业生物科学》 CSCD 2008年第B06期1-7,共7页

将绿色木霉葡聚糖内切酶EGⅠ基因eg1亚克隆到表达载体pSE380,构建出重组质粒pSE380-eg1,转化到大肠杆菌JM109中表达,利用金属亲和层析对EGI进行纯化,纯化后的酶比活力达到3.8U/mg,其最适反应温度为48℃,最适pH为5.2。同时对EGⅠ的氨基... 将绿色木霉葡聚糖内切酶EGⅠ基因eg1亚克隆到表达载体pSE380,构建出重组质粒pSE380-eg1,转化到大肠杆菌JM109中表达,利用金属亲和层析对EGI进行纯化,纯化后的酶比活力达到3.8U/mg,其最适反应温度为48℃,最适pH为5.2。同时对EGⅠ的氨基酸残基G291位进行随机定点突变,筛选到一株突变酶G291S,其比活力为野生酶的2.2倍,Km值为野生酶的0.66倍,最适反应温度和最适反应pH值未发生改变。 展开更多

关键词 绿色木霉 葡聚糖内切酶Ⅰ 大肠杆菌 随机定点突变

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