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胃黏膜特异表达JC病毒T抗原质粒构建及表达鉴定
被引量:
3
1
作者
夏蒲
徐小燕
+4 位作者
贾宝萍
王薇
关一夫
高野康雄
郑华川
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期18-21,共4页
目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。...
目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。利用酶切和DNA测序确认其DNA序列。免疫组化筛选细胞角蛋白19阳性胃癌细胞,对细胞角蛋白19表达阳性的胃癌细胞系AGS进行K19-JCVT抗原质粒转染,用Western blot方法检测JCVT抗原的表达情况。结果K19-JCVT抗原表达质粒成功构建,AGS胃癌细胞系高表达细胞角蛋白19并用于K19-JCVT抗原表达质粒转染,转染K19-T抗原质粒的AGS细胞系有T抗原表达。结论同义突变和相似连接在质粒构建中起到关键作用,酶切位点的甲基化也是值得注意的问题。
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关键词
jc
病毒
T抗原
真核表达
载体构建
下载PDF
职称材料
题名
胃黏膜特异表达JC病毒T抗原质粒构建及表达鉴定
被引量:
3
1
作者
夏蒲
徐小燕
贾宝萍
王薇
关一夫
高野康雄
郑华川
机构
中国医科大学基础医学院生物化学研究室
中国医科大学基础医学院病理生理学教研室
中国医科大学档案馆
日本富山大学医学部病理诊断教室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期18-21,共4页
基金
沈阳人才资源开发基金项目
辽宁省百千万人才工程资助项目
+2 种基金
教育部归国人员科研启动基金项目
人事部留学人员科技活动择优资助项目
2009年沈阳市科学技术计划资助项目(1091175-1-00)
文摘
目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。利用酶切和DNA测序确认其DNA序列。免疫组化筛选细胞角蛋白19阳性胃癌细胞,对细胞角蛋白19表达阳性的胃癌细胞系AGS进行K19-JCVT抗原质粒转染,用Western blot方法检测JCVT抗原的表达情况。结果K19-JCVT抗原表达质粒成功构建,AGS胃癌细胞系高表达细胞角蛋白19并用于K19-JCVT抗原表达质粒转染,转染K19-T抗原质粒的AGS细胞系有T抗原表达。结论同义突变和相似连接在质粒构建中起到关键作用,酶切位点的甲基化也是值得注意的问题。
关键词
jc
病毒
T抗原
真核表达
载体构建
Keywords
jc
vires
T
antigen
eukaryotic
expression
vector
construction
分类号
R446.5 [医药卫生—诊断学]
R394 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胃黏膜特异表达JC病毒T抗原质粒构建及表达鉴定
夏蒲
徐小燕
贾宝萍
王薇
关一夫
高野康雄
郑华川
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
3
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