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多糖的提取、分离及结构分析 被引量：130
1
作者 盛家荣 曾令辉 +1 位作者 翟春 陈超球 《广西师院学报（自然科学版）》 1999年第4期49-54,共6页
本文介绍了多糖的提取，分离及结构分析方面的进展情况。
关键词 多糖 提取分离 结构分析 纯度鉴定 分子量测定
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国内首次从患肺炎的犊牛肺脏中分离到牛支原体 被引量：206
2
作者 辛九庆 李媛 +5 位作者 郭丹 宋念华 胡守萍 陈超 裴洁 曹培丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期661-664,共4页
牛支原体(Mycoplasma bovis)是引起犊牛肺炎、关节炎和成牛乳房炎的主要病原之一。本研究利用选择性培养基从2份患肺炎的犊牛肺脏病料中得到2株支原体,分别命名为Hubei-1和Hubei-2,并在固体培养基进行了3次克隆纯化。通过生化实验、特异... 牛支原体(Mycoplasma bovis)是引起犊牛肺炎、关节炎和成牛乳房炎的主要病原之一。本研究利用选择性培养基从2份患肺炎的犊牛肺脏病料中得到2株支原体,分别命名为Hubei-1和Hubei-2,并在固体培养基进行了3次克隆纯化。通过生化实验、特异性PCR鉴定和序列比较证明为牛支原体。其16SrRNA核酸序列与牛支原体国际标准株PG45同源性为99.3%。以该培养物作为包被抗原的ELISA检测方法对13份发病犊牛血清进行了检测,其中11份血清抗体OD值为阴性血清对照值的2倍以上。该结果首次证实,国内部分地区存在牛支原体的流行。 展开更多
关键词 牛支原体 分离 鉴定
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副猪嗜血杆菌的分离培养和血清型鉴定 被引量：188
3
作者 蔡旭旺 刘正飞 +3 位作者 陈焕春 吴斌 金梅林 Pat Blackall 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期55-58,共4页
　从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M7506... 　从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M75065 )中的序列进行比对,表明其与国外副猪嗜血杆菌菌株 16SrRNA序列的同源性为 97%以上,确定为副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis, Hps)。将其中的 15株按Kieletein Rapp Gabriedson(KRG)琼脂扩散血清分型方法进行血清型鉴定,结果为血清 5型 3株、血清 4型 4株、血清 13型2株、血清 12型 2株,另外有 4株不能进行分型。该结果表明副猪嗜血杆菌在我国广泛存在。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 分离 鉴定 PCR 血清型
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改良CTAB法用于多年生植物组织基因组DNA的大量提取 被引量：183
4
作者 陈昆松 李方 +2 位作者 徐昌杰 张上隆 傅承新 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期529-531,共3页
根据多年生植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对现有的DNA提取方法进行了改进。通过增加提取缓冲液中β 巯基乙醇用量,简化氯仿/异戊醇抽提液步骤,改用经-20℃预冷异丙醇沉淀DNA等,对CTAB法加以改进。改进后方法具有以下优点:(1)获得的... 根据多年生植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对现有的DNA提取方法进行了改进。通过增加提取缓冲液中β 巯基乙醇用量,简化氯仿/异戊醇抽提液步骤,改用经-20℃预冷异丙醇沉淀DNA等,对CTAB法加以改进。改进后方法具有以下优点:(1)获得的DNA质量良好,提取过程无明显的DNA降解,基本上排除了多酚物质的干扰;(2)用获得的DNA进行Southern杂交,可得到理想的杂交信号,可满足相关的分子研究要求;(3)操作简便。 展开更多
关键词 猕猴桃 DNA 提取 SOUTHERN杂交
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水平井分段压裂工艺技术现状及展望 被引量：176
5
作者 陈作 王振铎 曾华国 《天然气工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第9期78-80,共3页
水平井目前已成为提高油田勘探开发综合效益的重要途径,其技术已在中国石油塔里木、辽河、冀东、大庆、新疆、吉林等13个油田得到了广泛的应用。对于钻遇在低渗透油气藏的水平井和产量达不到经济开发要求的其他水平井,必然要面临增产改... 水平井目前已成为提高油田勘探开发综合效益的重要途径,其技术已在中国石油塔里木、辽河、冀东、大庆、新疆、吉林等13个油田得到了广泛的应用。对于钻遇在低渗透油气藏的水平井和产量达不到经济开发要求的其他水平井,必然要面临增产改造的问题。水平井水平段压裂与直井压裂改造的工作重点有所不同,为此,就国内外化学隔离分段压裂、机械封隔分段压裂、限流分段压裂、水力喷射分段压裂等水平井分段压裂改造工艺技术进行了论述,展望了水平井分段压裂改造技术的发展趋势,以期为国内水平井分段压裂改造技术攻关方向提供参考。 展开更多
关键词 水平井 压裂 隔离 水力喷射 封隔器 发展趋势
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天然药物——多糖的主要生物活性及分离纯化方法 被引量：147
6
作者 方积年 丁侃 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2007年第5期338-347,共10页
多糖具有复杂的多方面的生物活性和功能。本文综述了多糖的抗肿瘤、抗病毒、抗炎等方面的主要生物活性。多糖是大分子物质,且不同于蛋白质等大分子,它的分离纯化方法与手段有其特殊性,而通过分离纯化获得的均一的多糖组分又是进行结构... 多糖具有复杂的多方面的生物活性和功能。本文综述了多糖的抗肿瘤、抗病毒、抗炎等方面的主要生物活性。多糖是大分子物质,且不同于蛋白质等大分子,它的分离纯化方法与手段有其特殊性,而通过分离纯化获得的均一的多糖组分又是进行结构分析、药理和构效关系等研究的首要条件。本文根据文献报道并结合本实验室的工作经验对多糖的各种分离纯化方法进行了介绍。 展开更多
关键词 多糖 生物活性 分离纯化方法
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黄酮类化合物的提取·分离纯化和含量测定方法的研究进展 被引量：117
7
作者 郭雪峰 岳永德 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第26期8083-8086,共4页
综述了黄酮类化合物提取方法(溶剂法、微波法、酶解法、超临界流体萃取法、双水相萃取法、超声波提取法),分离纯化方法(柱层析法、薄层层析法、高效液相色谱法、纸层析法、超临界流体分离法、大孔树脂吸附法、液滴逆流层析法、梯度pH值... 综述了黄酮类化合物提取方法(溶剂法、微波法、酶解法、超临界流体萃取法、双水相萃取法、超声波提取法),分离纯化方法(柱层析法、薄层层析法、高效液相色谱法、纸层析法、超临界流体分离法、大孔树脂吸附法、液滴逆流层析法、梯度pH值萃取法、金属试剂络合沉淀法、膜分离法、活性炭吸附法),黄酮含量测定方法(分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、超临界流体色谱法、薄层扫描法),为黄酮类化合物研究工作者提供参考。 展开更多
关键词 黄酮类化合物 提取 分离 纯化 测定
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番鸭呼肠孤病毒的分离与鉴定 被引量：100
8
作者 吴宝成 陈家祥 +4 位作者 姚金水 陈枝华 陈文列 李国平 曾显成 《福建农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期227-230,共4页
从番鸭肝“白点病”患鸭的肝脾匀浆中分离到 7个病毒分离株 .在电镜下观察到病毒粒子呈球形 ,无囊膜 ,有可见的双层衣壳结构 ,外壳直径 75nm,内核直径 50 nm;病毒核酸型为 RNA;不凝集鸡、鸭、兔、豚鼠红细胞 ,与禽呼肠孤病毒有一定的抗... 从番鸭肝“白点病”患鸭的肝脾匀浆中分离到 7个病毒分离株 .在电镜下观察到病毒粒子呈球形 ,无囊膜 ,有可见的双层衣壳结构 ,外壳直径 75nm,内核直径 50 nm;病毒核酸型为 RNA;不凝集鸡、鸭、兔、豚鼠红细胞 ,与禽呼肠孤病毒有一定的抗原相关性 ;对番鸭胚和鸡胚成纤维细胞可致感染细胞圆缩、融合 ,出现多核细胞和巨细胞 ,胞浆内有近核包涵体 ;试验感染 1日龄敏感雏番鸭死亡率达 10 0 % ,临床及病理变化与自然感染发病的番鸭基本一致 ,并可回收到该病毒 .结果表明 ,目前国内流行的番鸭肝“白点病” 展开更多
关键词 番鸭 肝白点病 呼肠孤病毒 分离 鉴定
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大孔吸附树脂在药用植物有效成分分离中的应用 被引量：59
9
作者 王冬梅 尉芹 马希汉 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期60-63,共4页
对大孔吸附树脂的性能、分离原理、吸附作用的影响因素、树脂的预处理和再生方法进行了评述。
关键词 分离 有效成分 药用植物 大孔吸附树能 工作原理 影响因素 应用
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一种简易的昆虫基因组DNA提取方法 被引量：81
10
作者 田英芳 黄刚 +1 位作者 郑哲民 魏朝明 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期82-84,共3页
报道了一种改进的昆虫基因组DNA 的提取方法.结果表明,该方法可在常温条件下,对多种昆虫及人体组织进行酚/氯仿抽提,DNA 得率较高,OD260/280 的值在1.6～1.9 之间.
关键词 基因组 DNA提取 昆虫
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隔离小生境遗传算法研究 被引量：61
11
作者 林焰 郝聚民 +1 位作者 纪卓尚 戴寅生 《系统工程学报》 CSCD 2000年第1期86-91,共6页
小生境 (niche)技术的引入 ,提高了遗传算法处理多峰函数 (m ultimodel function)优化问题的能力 .本文提出了基于隔离 (Isolation)机制的小生境技术 .隔离小生境技术具有生物学基础 ,不仅能够有效地保证群体中解的多样性 ,而且具有很... 小生境 (niche)技术的引入 ,提高了遗传算法处理多峰函数 (m ultimodel function)优化问题的能力 .本文提出了基于隔离 (Isolation)机制的小生境技术 .隔离小生境技术具有生物学基础 ,不仅能够有效地保证群体中解的多样性 ,而且具有很强的引导进化能力 .计算机模拟旅行商推销问题 (TSP)的结果表明 。 展开更多
关键词 遗传算法 多峰函数优化 隔离 小生境
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大枣多糖的提取与抗活性氧研究 被引量：79
12
作者 李雪华 龙盛京 《广西科学》 CAS 2000年第1期54-56,63,共4页
为了分析大枣多糖对各类活性氧的清除能力 ,建立了热水提取 -乙醇沉淀 -氯仿、正丁醇去蛋白的工艺以提取大枣多糖 (JPS) ,并作了糖的含量测定。用化学发光分析法分别测定提取的 JPS对全血化学发光法中的全血白细胞呼吸爆发中产生的活性... 为了分析大枣多糖对各类活性氧的清除能力 ,建立了热水提取 -乙醇沉淀 -氯仿、正丁醇去蛋白的工艺以提取大枣多糖 (JPS) ,并作了糖的含量测定。用化学发光分析法分别测定提取的 JPS对全血化学发光法中的全血白细胞呼吸爆发中产生的活性氧 (H2 O2 、O·2 、· OH)、连苯三酚自氧化法产生的 O·2 (超氧阴离子自由基 )、抗坏血酸 - Cu2 + - H2 O2 体系产生的 · OH (羟氧自由基 )以及 H2 O2 -鲁米诺发光体系中的 H2 O2 的清除作用。结果 :大枣多糖的得率为 0 .848% ,总糖含量为 37.7%。测定 JPS清除 · OH、O·2 、H2 O2 、白细胞呼吸爆发中产生的氧自由基活性的 AOV值分别为 10 9.48、 90 5 7.9、 312 .0 1、 5 .2 0 4。结论 :JPS具有清除氧自由基的作用 ,其活性大小与多糖的用量呈正相关。在全血生理环境下 ,对全血化学发光中活性氧的清除能力最强。 展开更多
关键词 大枣多糖 活性氧 化学发光分析 分离 提取
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层间隔震体系的理论研究 被引量：100
13
作者 周福霖 张颖 谭平 《土木工程学报》 EI CSCD 北大核心 2009年第8期1-8,共8页
通过建立层间隔震体系的两质点简化分析模型与多质点动力时程分析模型,提出层间隔震体系隔震层参数优化设计的方法,系统地研究了层间隔震体系当隔震层位置变化时其相应的减震工作机理,结果表明随着隔震层位置下移,层间隔震体系减震机理... 通过建立层间隔震体系的两质点简化分析模型与多质点动力时程分析模型,提出层间隔震体系隔震层参数优化设计的方法,系统地研究了层间隔震体系当隔震层位置变化时其相应的减震工作机理,结果表明随着隔震层位置下移,层间隔震体系减震机理由TMD调谐逐步过渡为隔震耗能,在结构动力特性上体现为前两阶模态质量参与系数的比例发生变化。最后通过某10层框架结构的仿真分析,验证了层间隔震体系在控制地震下反应的有效性,并发现隔震层位置越低减震效果越明显,隔震层的阻尼能够有效地抑制隔震层下部子结构的反应。 展开更多
关键词 隔震 层间隔震 减震控制 随机振动 参数优化
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免疫后发病仔猪中伪狂犬病毒的分离和鉴定 被引量：101
14
作者 童武 张青占 +5 位作者 郑浩 刘飞 姜一峰 单同领 周艳君 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第3期1-7,共7页
从2011年开始,全国多个省份发生了新生仔猪疑似伪狂犬病的典型症状。2012年下半年,我们从江苏省某伪狂犬病疫苗免疫猪场中发病仔猪的脑组织中分离到一株伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV),并进行了部分生物学特性分析。从发病死亡仔... 从2011年开始,全国多个省份发生了新生仔猪疑似伪狂犬病的典型症状。2012年下半年,我们从江苏省某伪狂犬病疫苗免疫猪场中发病仔猪的脑组织中分离到一株伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV),并进行了部分生物学特性分析。从发病死亡仔猪脑组织中,利用PCR技术针对PRV的gB基因和gE基因分别扩增出了两条特异性片段,经序列分析初步确定为伪狂犬病毒感染。随后,将病料上清接种Vero细胞,24 h后细胞发生变圆、空泡、合胞体等典型的细胞病变,将分离的病毒经过6轮蚀斑纯化后,用PRV抗体IFA检测显示,感染细胞产生阳性荧光反应。分离的病毒在Vero细胞上的生长滴度可以达到107.43TCID50/mL。将病毒接种小鼠很快出现了奇痒并最终死亡等伪狂犬症状,且比经典的PRV(S株)对小鼠的LD50低。对gE毒力基因序列的比对分析表明,该毒株与经典PRV强毒和疫苗株有明显差异。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 分离 鉴定
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延胡索中生物碱成分的研究 被引量：84
15
作者 许翔鸿 王峥涛 +2 位作者 余国奠 阮碧芳 李军 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期483-486,共4页
目的　提取分离延胡索中的生物碱供延胡索种质评价使用。方法　运用色谱学和波谱学方法分离鉴定延胡索中的生物碱。结果　从延胡索总碱中分离得到了 13种生物碱 ,鉴定了其中 12种生物碱的结构 ,分别为 :d-紫堇碱、四氢巴马亭、脱氢紫堇... 目的　提取分离延胡索中的生物碱供延胡索种质评价使用。方法　运用色谱学和波谱学方法分离鉴定延胡索中的生物碱。结果　从延胡索总碱中分离得到了 13种生物碱 ,鉴定了其中 12种生物碱的结构 ,分别为 :d-紫堇碱、四氢巴马亭、脱氢紫堇碱、四氢黄连碱、四氢小檗碱、异紫堇球碱、原托品碱、四氢非洲防己胺、氯仿巴马亭、saulatine、海罂粟碱、脱氢海罂粟碱。结论　生物碱 saulatine为首次从罂粟科植物中分得 。 展开更多
关键词 延胡索 异喹啉生物碱 异喹啉苄咪唑啉型生物碱 分离 鉴定
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绿原酸及其提取分离方法评述 被引量：72
16
作者 尉芹 马希汉 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期135-138,共4页
对绿原酸的结构、药理作用及分离方法进行了评述 ,以期为绿原酸的研究和含绿原酸类药品的生产及开发提供参考。
关键词 绿原酸 药理作用 提取 分离 中药
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甲基对硫磷降解菌假单胞菌WBC-3的筛选及其降解性能的研究 被引量：65
17
作者 陈亚丽 张先恩 +2 位作者 刘虹 王银善 夏祥明 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期490-497,共8页
从农药污染土样中分离出的一株细菌具有彻底降解甲基对硫磷的能力。该菌经生理生化特性分析和 1 6SrDNA序列同源性分析 ,鉴定为假单胞菌属 ,命名为Pseudomonassp .WBC 3。该菌在pH7～ 8、温度 2 3℃～ 3 0℃范围内均生长良好 ,对甲基对... 从农药污染土样中分离出的一株细菌具有彻底降解甲基对硫磷的能力。该菌经生理生化特性分析和 1 6SrDNA序列同源性分析 ,鉴定为假单胞菌属 ,命名为Pseudomonassp .WBC 3。该菌在pH7～ 8、温度 2 3℃～ 3 0℃范围内均生长良好 ,对甲基对硫磷的耐受浓度在单纯无机盐培养基中可达到 80 0mg L ,在含有 0 1 %葡萄糖的培养基中可达到 2 0 0 0mg L。该菌能够以甲基对硫磷作为唯一碳源、氮源 ,将其彻底降解作为生长基质 ,对于 3 0 0mg L甲基对硫磷的降解速度达 1 5mg L·h ,于 2 2h后达到其稳定生长期。该菌对于多种有机磷农药及部分芳烃类化合物具有生化代谢能力。从该菌的细胞周质组分中纯化出的有机磷水解酶在SDS PAGE胶上显示为分子量约为 3 3 5× 1 0 3 的条带。 展开更多
关键词 甲基对硫磷降解菌 假单胞菌 WBC-3 筛选 降解性能 有机磷水解酶 农药
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副猪嗜血杆菌的分离与鉴定 被引量：79
18
作者 尹秀凤 姜平 +1 位作者 邓雨修 汤景元 《畜牧与兽医》 北大核心 2004年第7期6-8,共3页
在通过对上海一发病猪群临床流行病学研究和病理学观察的基础上 ,从发病仔猪肺脏、气管和脾脏检出并分离到 1株革兰氏阴性细小杆菌 ,兼性厌氧。生化试验为 :接触酶阳性 ,氧化酶阴性 ,鸟氨酸脱羧酶、吲哚和脲酶阴性 ;生长需要NAD ,发酵... 在通过对上海一发病猪群临床流行病学研究和病理学观察的基础上 ,从发病仔猪肺脏、气管和脾脏检出并分离到 1株革兰氏阴性细小杆菌 ,兼性厌氧。生化试验为 :接触酶阳性 ,氧化酶阴性 ,鸟氨酸脱羧酶、吲哚和脲酶阴性 ;生长需要NAD ,发酵果糖、半乳糖、葡萄糖和蔗糖 ;不分解D 甘露醇、D 山梨醇和海藻糖。用副猪嗜血杆菌的 1 6S小亚单位rRNA和tbpA基因的特异性PCR引物 ,通过PCR技术分别从该分离菌株扩增出 82 2bp及 1 9kb的特异基因片段 。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 分离 鉴定
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大枣多糖的分离和纯化 被引量：64
19
作者 林勤保 高大维 +1 位作者 于淑娟 扶雄 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期20-21,共2页
对大枣的糖分组成、大枣多糖的提取、纯化、纯度鉴定等方面进行了研究。
关键词 大枣 多糖 分离 纯化
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2012―2013年猪繁殖与呼吸综合征病毒河南流行株的分离鉴定及分子流行病学调查 被引量：81
20
作者 周峰 常洪涛 +6 位作者 赵军 陈陆 王新卫 刘红英 姚慧霞 王川庆 杨霞 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1398-1404,1410,共8页
为了解河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)流行毒株的遗传变异情况和发展趋势。通过RT-PCR方法,对2012―2013年采自河南省各地疑似病料进行PRRSV检测,并对阳性病料进行病毒分... 为了解河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)流行毒株的遗传变异情况和发展趋势。通过RT-PCR方法,对2012―2013年采自河南省各地疑似病料进行PRRSV检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分子流行病学分析。结果显示:54份疑似病料中17份检测为阳性,阳性率为31.5%,并分离出3株PRRSV;通过完整的ORF5基因和部分NSP2基因序列遗传进化分析表明,河南地区流行毒株主要为美洲型PRRSV,且17份阳性样品中10份与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)高度同源、2份与经典PRRSV高度同源、另外5份与美洲流行毒株NADC30高度同源,该类毒株的NSP2基因在不同部位存在393个核苷酸缺失,国内尚未见相关报道。结果表明,2012―2013年河南地区PRRSV主要流行毒株为HP-PRRSV,同时出现了新的变异毒株,使河南地区乃至我国PRRSV变异种类更加多样化,提示加强PRRSV流行及变异的监测十分必要。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离 分子流行病学 系统进化分析
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