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利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选
被引量：
1
1
作者
韩志霞
刘芳
+3 位作者
蒋大伟
许兰菊
孔江南
李克宇
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期1869-1874,共6页
为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白，分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract？天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白；应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质；利...
为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白，分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract？天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白；应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质；利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34000～55000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC—MS／MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2，37000 Laminin receptor precursor，LIM and SH3 proteinl，ras—related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础，而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。
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关键词
鸡源志贺菌
ipac
蛋白
鸡肠上皮细胞
免疫沉淀
LC—MS/MS
受体
原文传递
鸡源志贺菌IpaC蛋白单抗制备及其受体的初步鉴定
2
作者
蒋大伟
张彬
+4 位作者
马金玉
韩志霞
王亚宾
许兰菊
苗银萍
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期2061-2066,共6页
为制备特异性的鸡源志贺菌IpaC蛋白单克隆抗体和鉴定其受体,以纯化的重组鸡源志贺菌IpaC蛋白制备多克隆抗体,Western blot和间接ELISA分析表明重组IpaC蛋白具有很好的免疫反应原性。将纯化的IpaC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤...
为制备特异性的鸡源志贺菌IpaC蛋白单克隆抗体和鉴定其受体,以纯化的重组鸡源志贺菌IpaC蛋白制备多克隆抗体,Western blot和间接ELISA分析表明重组IpaC蛋白具有很好的免疫反应原性。将纯化的IpaC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。经过杂交瘤细胞阳性孔的筛选、单克隆抗体效价测定、单克隆抗体亚型鉴定、单克隆抗体Western blot鉴定后,获得1株杂交瘤阳性细胞5A12B5。同时,通过鸡胚肠组织提取总蛋白,利用铺覆蛋白印迹技术,初步测定IpaC蛋白受体相对分子质量约为55 000。试验为IpaC蛋白检测和该蛋白与鸡肠上皮细胞之间的相互作用研究奠定基础,同时也为评估鸡源志贺菌在公共卫生等方面的重要性提供参考依据。
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关键词
鸡源志贺菌
ipac
蛋白
单克隆抗体
受体
原文传递
题名
利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选
被引量：
1
1
作者
韩志霞
刘芳
蒋大伟
许兰菊
孔江南
李克宇
机构
河南农业大学牧医工程学院
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期1869-1874,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(31272568)
文摘
为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白，分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract？天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白；应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质；利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34000～55000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC—MS／MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2，37000 Laminin receptor precursor，LIM and SH3 proteinl，ras—related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础，而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。
关键词
鸡源志贺菌
ipac
蛋白
鸡肠上皮细胞
免疫沉淀
LC—MS/MS
受体
Keywords
shigella from chicken
ipac
protein
intestinal epithelial cells
immunoprecipitation
LC-MS/MS
receptor
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
鸡源志贺菌IpaC蛋白单抗制备及其受体的初步鉴定
2
作者
蒋大伟
张彬
马金玉
韩志霞
王亚宾
许兰菊
苗银萍
机构
河南农业大学牧医工程学院
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期2061-2066,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(31272568)
文摘
为制备特异性的鸡源志贺菌IpaC蛋白单克隆抗体和鉴定其受体,以纯化的重组鸡源志贺菌IpaC蛋白制备多克隆抗体,Western blot和间接ELISA分析表明重组IpaC蛋白具有很好的免疫反应原性。将纯化的IpaC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。经过杂交瘤细胞阳性孔的筛选、单克隆抗体效价测定、单克隆抗体亚型鉴定、单克隆抗体Western blot鉴定后,获得1株杂交瘤阳性细胞5A12B5。同时,通过鸡胚肠组织提取总蛋白,利用铺覆蛋白印迹技术,初步测定IpaC蛋白受体相对分子质量约为55 000。试验为IpaC蛋白检测和该蛋白与鸡肠上皮细胞之间的相互作用研究奠定基础,同时也为评估鸡源志贺菌在公共卫生等方面的重要性提供参考依据。
关键词
鸡源志贺菌
ipac
蛋白
单克隆抗体
受体
Keywords
chicken Shigella
ipac
protein
monoclonal antibody
receptor
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
S855.99 [农业科学—兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选
韩志霞
刘芳
蒋大伟
许兰菊
孔江南
李克宇
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
原文传递
2
鸡源志贺菌IpaC蛋白单抗制备及其受体的初步鉴定
蒋大伟
张彬
马金玉
韩志霞
王亚宾
许兰菊
苗银萍
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
原文传递
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