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Moxibustion combined with acupuncture increases tight junction protein expression in Crohn's disease patients 被引量:24
1
作者 Hai-Xia Shang An-Qi Wang +6 位作者 Chun-Hui Bao Huan-Gan Wu Wei-Feng Chen Lu-Yi Wu Rong Ji Ji-Meng Zhao Yin Shi 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2015年第16期4986-4996,共11页
AIM:To investigate the effect of herb-partitioned moxibustion combined with acupuncture on the expression of intestinal epithelial tight junction(TJ) proteins.METHODS:Sixty patients diagnosed with mild to moderate Cr... AIM:To investigate the effect of herb-partitioned moxibustion combined with acupuncture on the expression of intestinal epithelial tight junction(TJ) proteins.METHODS:Sixty patients diagnosed with mild to moderate Crohn’s disease(CD)were allocated into the herb-partitioned moxibustion combined with acupuncture(HMA)group(n=30)or the mesalazine(MESA)group(n=30)using a parallel control method.There were 2 sets of acupoints used alternately for HMA treatment.The following points were included in Set A:ST25(Tianshu),RN6(Qihai),and RN9(Shuifen)for herb-partitioned moxibustion and ST36(Zusanli),ST37(Shangjuxu),LI11(Quchi),and LI4(Hegu)for acupuncture.The points for Set B included BL23(Shenshu)and BL25(Dachangshu)for herb-partitioned moxibustion and EX-B2 of T6-T1(Jiajixue)fo r acupuncture.The patients received the same treatment6 times a week for 12 consecutive weeks.The MESA group received 1 g of mesalazine enteric coated tablets4 times daily for 12 consecutive weeks.Intestinaltissues were stained and examined to compare the morphological and ultrastructural changes before and after the treatment session.Immunohistochemistry and in situ hybridization assays were used to detect the expression of intestinal epithelial TJ proteins zonula occludens-1(ZO-1),occludin,and claudin-1.The m RNA levels were also evaluated.RESULTS:After the treatment,both herb-partitioned moxibustion combined with acupuncture and mesalazine improved intestinal morphology and ultrastructure of CD patients;the patients treated with HMA showed better improvement.HMA significantly increased the expression of ZO-1(P=0.000),occludin(P=0.021),and claudin-1(P=0.016).MESA significantly increased the expression of ZO-1(P=0.016)and occludin(P=0.026).However,there was no significant increase in the expression of claudin-1(P=0.935).There was no statistically significant difference between the two groups for the expression of occludin and claudin-1(P>0.05).The HMA group showed a significant improvement in ZO-1 expression compared to the MESA group(2333.34±35 展开更多
关键词 Crohn's disease Herb-partitioned MOXIBUSTION ACUPUNCTURE intestinal epithelial cells tight junctionproteins
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肠上皮细胞紧密连接的结构及功能研究进展 被引量:8
2
作者 张中伟 秦环龙 《肠外与肠内营养》 CAS 2005年第6期367-369,381,共4页
紧密连接(TJ)是维持肠黏膜上皮细胞间机械屏障的重要结构基础。除C laud in蛋白、occ lud in蛋白、ZO-1等重要组成蛋白外,目前已有40多种TJ相关蛋白分子陆续被发现。研究表明,TJ结构不但具有调节细胞间物质转运和维持上皮极性的功能,而... 紧密连接(TJ)是维持肠黏膜上皮细胞间机械屏障的重要结构基础。除C laud in蛋白、occ lud in蛋白、ZO-1等重要组成蛋白外,目前已有40多种TJ相关蛋白分子陆续被发现。研究表明,TJ结构不但具有调节细胞间物质转运和维持上皮极性的功能,而且其相关蛋白分子还参与细胞增殖分化、肿瘤抑制、基因转录等过程的信息传递和调控。本文作者就TJ蛋白分子的最新发现及其功能作一综述,旨在了解TJ在肠道屏障功能中的作用。 展开更多
关键词 肠上皮细胞 肠道屏障 紧密连接
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丙氨酰-谷氨酰胺二肽对仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin定位与表达的影响 被引量:12
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作者 邓宸玺 王自蕊 +4 位作者 游金明 瞿明仁 叶亚玲 辛向荣 潘珂 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期694-700,共7页
本试验以分离自仔猪空肠上皮的IPEC-1细胞为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin定位与表达的影响。试验选取同代IPEC-1细胞接种至6块6孔细胞培养板上,分别用含0(对照组)、0.25、0.50、1.00... 本试验以分离自仔猪空肠上皮的IPEC-1细胞为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin定位与表达的影响。试验选取同代IPEC-1细胞接种至6块6孔细胞培养板上,分别用含0(对照组)、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L Ala-Gln的DM EM高糖培养基进行培养,待细胞生长融合达70%以上时,对occludin进行免疫荧光定位和蛋白质印迹(Western Blot)检测。结果表明:1)对照组细胞可见其胞质内存在团状的阳性荧光染色,而细胞间连接处阳性荧光染色不明显;随着Ala-Gln浓度的升高,细胞间连接处荧光信号逐渐增强,细胞轮廓更加清晰,而胞质内荧光信号逐渐减弱。2)各添加组IPEC-1细胞间occludin的相对表达量均极显著高于对照组(P<0.01)。随着Ala-Gln浓度的升高,occludin的相对表达量呈先增后减的趋势,添加量为2.00 mmol/L时达到峰值,且极显著高于其他添加量(P<0.01)。由此可知,Ala-Gln可以上调仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin的表达,促进细胞间紧密连接结构的形成,进而增强仔猪小肠黏膜的屏障功能。 展开更多
关键词 仔猪 小肠上皮细胞 紧密连接 丙氨酰-谷氨酰胺二肽
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复合益生菌对肉仔鸡小肠形态和盲肠微生物菌群的影响 被引量:12
4
作者 梅文晴 冯宇妍 +2 位作者 姚志浩 倪迎冬 赵茹茜 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期144-150,共7页
[目的]本试验旨在研究早期饲喂复合益生菌对肉仔鸡盲肠微生物组成、小肠上皮组织结构及紧密连接相关基因表达的影响。[方法]将144只1日龄健康青脚麻鸡随机分为3组,分别为对照组(CON)、低剂量(50 mg·d^-1)益生菌组(LP)和高剂量(100 ... [目的]本试验旨在研究早期饲喂复合益生菌对肉仔鸡盲肠微生物组成、小肠上皮组织结构及紧密连接相关基因表达的影响。[方法]将144只1日龄健康青脚麻鸡随机分为3组,分别为对照组(CON)、低剂量(50 mg·d^-1)益生菌组(LP)和高剂量(100 mg·d^-1)益生菌组(HP),每组6个重复,每个重复8只鸡,从1日龄开始饮水中添加益生菌,试验期为2周。试验期间记录采食量和体重,于第14日龄采集小肠上皮组织,检测其形态结构及紧密连接相关基因表达,16S rRNA测序分析盲肠内容物微生物组成。[结果]试验期间HP组肉鸡体重高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,HP组肉鸡1~7日龄平均日采食量显著降低(P<0.05),但7~14日龄平均日采食量有升高的趋势(P>0.05);HP组肉鸡1~7日龄料重比极显著低于CON组(P<0.01)。LP组与CON组之间以上指标均无显著差异(P>0.05)。与CON组相比,添加益生菌显著降低隐窝深度,增加绒毛高度及绒毛高度与隐窝深度的比值;HP组回肠和盲肠上皮闭锁小带蛋白1基因(ZO 1)和回肠上皮闭合蛋白基因(OCLN)表达显著上调(P<0.05);LP组盲肠上皮黏蛋白2基因(MUC 2)表达显著上调(P<0.05)。16S rRNA高通量测序结果表明,与CON组相比,早期饲喂复合益生菌对肉鸡盲肠内容物中细菌多样性无显著影响(P>0.05),但LP组盲肠中Sellimonas和Intestinimonas属的丰度显著增加(P<0.05),HP组Akkermansiaceae科的丰度极显著增加(P<0.01)。[结论]早期饲喂复合益生菌对肉仔鸡盲肠内容物中细菌多样性无显著影响,但可升高某些有益菌的定殖丰度;上调小肠上皮组织中紧密连接相关基因的表达,促进绒毛生长,从而潜在影响肉鸡早期和后期的生长性能。 展开更多
关键词 复合益生菌 小肠上皮结构 紧密连接蛋白 盲肠微生物区系 肉仔鸡
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炎症性肠病中细胞因子对肠上皮紧密连接的影响及针灸效应机制研究概况 被引量:10
5
作者 商海霞 郑寒丹 +2 位作者 吴焕淦 季亚婕 施茵 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第10期2344-2347,共4页
肠上皮屏障通透性的改变是炎症性肠病发病的首要因素。TNF-α、IFN-γ、IL-1β等促炎细胞因子和IL-4、IL-10等抗炎细胞因子通过影响肠上皮紧密连接来间接调控肠上皮屏障,进而介导炎症性肠病的发生与发展。近年来,针灸治疗炎症性肠病疗... 肠上皮屏障通透性的改变是炎症性肠病发病的首要因素。TNF-α、IFN-γ、IL-1β等促炎细胞因子和IL-4、IL-10等抗炎细胞因子通过影响肠上皮紧密连接来间接调控肠上皮屏障,进而介导炎症性肠病的发生与发展。近年来,针灸治疗炎症性肠病疗效较好,而其主要效应机制之一是通过调节细胞因子来降低肠上皮屏障通透性、改善其肠上皮屏障功能。 展开更多
关键词 炎症性肠病 细胞因子 肠上皮紧密连接 针灸效应
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非侵入性方法检测肠黏膜屏障功能的研究进展 被引量:8
6
作者 周淑萍 路又可 汪芳裕 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第15期1312-1317,共6页
异常的肠道通透性在人类多种疾病中起着非常重要的作用,包括糖尿病、炎症性肠病、乳糜泻、多发性硬化、食物变态反应过敏症、肠易激综合征等.近年大量的研究发现:一些自身免疫性疾病伴有肠道通透性增加,这种现象发生在疾病之前,被认为... 异常的肠道通透性在人类多种疾病中起着非常重要的作用,包括糖尿病、炎症性肠病、乳糜泻、多发性硬化、食物变态反应过敏症、肠易激综合征等.近年大量的研究发现:一些自身免疫性疾病伴有肠道通透性增加,这种现象发生在疾病之前,被认为与疾病的发病机制相关.研究肠黏膜屏障的功能与结构,可以提高我们对疾病的病因及病理生理认识,并且对于早期检测疾病以及对疾病进行二级预防有重要意义.目前有多种试验方法评估肠黏膜上皮细胞受损、紧密连接功能以及肠黏膜屏障的完整性.本篇综述主要探讨目前评估肠黏膜屏障功能的检测方法. 展开更多
关键词 肠黏膜屏障 肠道通透性 紧密连接 检测
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芳香烃受体对肠道屏障的调控作用研究进展 被引量:2
7
作者 方懿 邓谭杰 +2 位作者 吴小妹 符清瑶 荀文娟 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期40-45,共6页
芳香烃受体(Aryl Hydrocarbon Receptor,AhR)是一种配体依赖性转录因子,与AhR相关的信号通路几乎影响每种动物的细胞类型与器官,并与发育、细胞周期调节、免疫等多种关键过程有关。近年研究发现,AhR的表达可以调节炎症和免疫相关疾病,... 芳香烃受体(Aryl Hydrocarbon Receptor,AhR)是一种配体依赖性转录因子,与AhR相关的信号通路几乎影响每种动物的细胞类型与器官,并与发育、细胞周期调节、免疫等多种关键过程有关。近年研究发现,AhR的表达可以调节炎症和免疫相关疾病,其中在肠道和肠道组织的有关疾病中尤为明显。肠黏膜屏障(Intestinal Epithelial Barrier,IEB)是肠道重要的结构基础和功能屏障,同时肠道也是机体最大的免疫器官,现有众多研究聚焦于阐明AhR在肠黏膜中作用的分子机制上。本文总结了AhR对IEB的调控作用研究进展,为分子水平上开展家畜肠道健康的营养调控研究提供科学依据。 展开更多
关键词 芳香烃受体 配体 肠道屏障 紧密连接 炎症性肠病
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肠上皮内淋巴细胞对肠上皮屏障功能的影响 被引量:5
8
作者 徐鹏辉 高杰英 +4 位作者 陈德蕙 陈洁 曾丽玲 何乐思 陈小章 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2005年第4期301-304,共4页
目的:研究在痢疾志贺菌F2a-12脂多糖刺激下,大鼠小肠上皮内淋巴细胞(IEL)对人结肠癌上皮细胞系Caco-2屏障功能的影响。方法:新鲜分离的大鼠小肠IEL与Caco-2共培养,并用F2a-12LPS刺激共培养细胞。通过检测短路电流、紧密连接相关蛋白表... 目的:研究在痢疾志贺菌F2a-12脂多糖刺激下,大鼠小肠上皮内淋巴细胞(IEL)对人结肠癌上皮细胞系Caco-2屏障功能的影响。方法:新鲜分离的大鼠小肠IEL与Caco-2共培养,并用F2a-12LPS刺激共培养细胞。通过检测短路电流、紧密连接相关蛋白表达及透射电镜来反映上皮屏障功能的变化。结果:共培养后跨上皮电阻增加,但在LPS刺激后显著降低;紧密连接相关蛋白ZO-2mRNA表达在共培养后增加,LPS刺激后共培养细胞ZO-1mRNA表达显著下降;透射电镜下可见共培养后细胞间紧密连接显著增强,但在LPS刺激后共培养细胞间的连接几乎消失。首次在电镜下发现上皮细胞与IEL间有连接样结构的存在,为其相互作用提供了形态学的证据。结论:IEL对上皮屏障功能具双向调节作用,在生理状态下增强,但在感染信号存在时降低。 展开更多
关键词 肠黏膜上皮细胞 上皮内淋巴细胞 共培养 跨上皮电阻 紧密连接 屏障功能
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茶树油对脂多糖诱导奶牛小肠上皮细胞损伤的影响
9
作者 陈明 蔡淑先 +2 位作者 杨红 张佳豪 赵国琦 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期3942-3951,共10页
本试验旨在研究茶树油(TTO)对脂多糖(LPS)诱导奶牛小肠上皮细胞(BIECs)损伤的影响。试验选取3头健康新生中国荷斯坦犊牛的空肠组织,分离并获得BIECs进行培养。通过使用不同浓度的LPS(0、1、2和4μg/mL)和不同浓度的TTO(0、0.00625%、0.0... 本试验旨在研究茶树油(TTO)对脂多糖(LPS)诱导奶牛小肠上皮细胞(BIECs)损伤的影响。试验选取3头健康新生中国荷斯坦犊牛的空肠组织,分离并获得BIECs进行培养。通过使用不同浓度的LPS(0、1、2和4μg/mL)和不同浓度的TTO(0、0.00625%、0.01250%、0.02500%、0.05000%和0.10000%),建立细胞炎症模型。然后,对照组以不含TTO和LPS的培养基处理细胞;LPS组以1μg/mL的LPS处理细胞12 h;LPS+TTO组采用0.01250%和0.02500%的TTO预处理细胞12 h,经水洗后,再暴露于LPS处理12 h。结果表明:1)与对照组(未添加TTO)相比,添加0.00625%、0.01250%、0.02500%和0.05000%TTO对BIECs细胞活力无显著影响(P>0.05),添加TTO显著提高跨膜电阻(TEER)(P<0.05)。与对照组相比,添加0.01250%TTO显著提高BIECs中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、封闭蛋白(occludin)、闭合蛋白-1(claudin-1)和闭合蛋白-4(claudin-4)的mRNA相对表达量(P<0.05),显著降低肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA相对表达量(P<0.05)。2)与LPS组相比,LPS+TTO组TEER以及ZO-1、occludin和claudin-1的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),TNF-α的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);LPS+TTO组ZO-1蛋白相对表达量显著提高(P<0.05)。综上可知,TTO可以通过上调紧密连接蛋白表达和下调炎性因子表达,缓解LPS诱导的犊牛小肠上皮细胞屏障功能障碍和炎症损伤。 展开更多
关键词 茶树油 奶牛小肠上皮细胞 炎症 紧密连接
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氧化应激对肠屏障功能障碍发病的影响 被引量:6
10
作者 刘洁 熊正国 顿耀艳 《生命的化学》 CAS CSCD 2020年第2期166-172,共7页
机体累积过量的活性氧自由基所导致的氧化应激是多种肠道疾病发生的共同病理生理基础。肠上皮细胞间的紧密连接是维持肠屏障功能的重要结构基础之一。近年来研究表明,氧化应激能通过多种途径破坏肠上皮细胞间的紧密连接,导致肠上皮屏障... 机体累积过量的活性氧自由基所导致的氧化应激是多种肠道疾病发生的共同病理生理基础。肠上皮细胞间的紧密连接是维持肠屏障功能的重要结构基础之一。近年来研究表明,氧化应激能通过多种途径破坏肠上皮细胞间的紧密连接,导致肠上皮屏障功能障碍。本文对蛋白激酶C、丝裂原活化蛋白激酶、蛋白质的修饰以及缺氧诱导因子-1(HIF-1)在肠屏障功能障碍中的作用机制进行简要概述,旨在为肠屏障功能障碍的治疗和预后提供新的思路。 展开更多
关键词 氧化应激 活性氧 肠上皮屏障功能 紧密连接
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冬凌草甲素缓解脂多糖诱导的Caco-2肠上皮细胞屏障损伤和SIRT1/eIF2α信号通路活性的抑制
11
作者 张福生 王胜文 +1 位作者 艾世鹏 李冬扬 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2023年第1期55-62,68,共9页
目的 探索冬凌草甲素对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的肠上皮屏障障碍的影响及其生物学机制。方法将Caco-2细胞进行单层培养21 d使其分化后,分为对照组、LPS组(2μg/mL LPS处理24 h)、LPS+低剂量冬凌草甲素组(10μg/mL冬凌草甲... 目的 探索冬凌草甲素对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的肠上皮屏障障碍的影响及其生物学机制。方法将Caco-2细胞进行单层培养21 d使其分化后,分为对照组、LPS组(2μg/mL LPS处理24 h)、LPS+低剂量冬凌草甲素组(10μg/mL冬凌草甲素预处理30 min,2μg/mL LPS处理24 h)和LPS+高剂量冬凌草甲素组(40μg/mL冬凌草甲素预处理30 min,2μg/mL LPS处理24 h)。采用跨上皮电阻法和FITC-dextran 4通量法评估细胞单层屏障功能;CCK-8法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)法检测LDH释放活性;DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧水平;ELISA法检测炎症因子IL-1β和TNF-α分泌水平;免疫荧光法检测细胞的屏障功能相关蛋白闭合蛋白(occludin)和闭锁小带蛋白1(zonula occludens protein 1, ZO-1)的表达分布情况;Western blot法检测SIRT1和p-eIF2α的相对表达水平。结果 与LPS组比较,冬凌草甲素能改善LPS诱导的肠上皮细胞单层屏障障碍,增加细胞活力并降低LDH的释放活性以及细胞中活性氧、IL-1β和TNF-α水平,还能促进闭合蛋白和ZO-1在细胞膜上的表达以及连续分布模式。Western blot检测显示,冬凌草甲素能增加SIRT1的表达,并降低e IF2α的磷酸化。以上作用以高剂量组更佳。结论 冬凌草甲素可缓解LPS导致的肠上皮细胞损伤和单层屏障障碍,SIRT1/eIF2α通路信号激活可能是冬凌草甲素发挥肠上皮细胞保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 脂多糖 肠上皮细胞 肠上皮屏障 紧密连接
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刺五加苷E对仔猪小肠上皮细胞屏障功能基因表达的影响 被引量:5
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作者 范越蠡 赵宝 车东升 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期471-476,共6页
为研究刺五加苷E(Eleutheroside E)对仔猪小肠上皮(IPEC-J2)细胞紧密连接蛋白及炎性细胞因子m RNA表达量的影响。在正常DMEM/F12培养基中分别添加0,0. 05,0. 1,0. 2 mg/m L的刺五加苷E,测定刺五加苷E对IPEC-J2细胞增殖活性的影响。选择... 为研究刺五加苷E(Eleutheroside E)对仔猪小肠上皮(IPEC-J2)细胞紧密连接蛋白及炎性细胞因子m RNA表达量的影响。在正常DMEM/F12培养基中分别添加0,0. 05,0. 1,0. 2 mg/m L的刺五加苷E,测定刺五加苷E对IPEC-J2细胞增殖活性的影响。选择对IPEC-J2有显著作用的刺五加苷E浓度为有效浓度,研究刺五加苷E对仔猪小肠上皮细胞的机械屏障和免疫屏障的影响。细胞增殖试验结果表明,0. 1 mg/m L的刺五加苷E对IPEC-J2有极显著的增殖作用(P<0. 01)。选择0. 1 mg/m L的刺五加苷E处理剂量对IPEC-J2的主要紧密连接蛋白和细胞因子进行基因表达水平测定,采用实时荧光定量PCR方法测定紧密连接Claudin-3、Occludin和ZO-1,抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β,炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的m RNA相对表达量。试验结果表明:刺五加苷E上调了仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Claudin-3和ZO-1的基因表达(P<0. 05),在细胞免疫方面下调炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的基因表达;上调了抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β的基因表达。这说明刺五加苷E能够改变细胞间紧密连接蛋白和细胞因子的基因表达,进而促进肠道机械和免疫屏障功能的完整性,有益于仔猪肠道的健康发育。 展开更多
关键词 刺五加苷 仔猪 小肠上皮细胞 紧密连接蛋白 细胞因子
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英夫利西单克隆抗体对克罗恩病患者肠黏膜屏障功能修复的研究 被引量:4
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作者 赵玉洁 王奕文 +2 位作者 王东 孙晓敏 刘占举 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期524-531,共8页
目的探讨英夫利西单克隆抗体(IFX)对CD患者肠黏膜屏障的修复作用。方法选择2018年1月至2019年10月于上海市第十人民医院就诊的CD患者382例,均行IFX治疗,另选择103名行结肠镜检查者作为健康对照组。收集CD患者和健康对照者的一般临床资... 目的探讨英夫利西单克隆抗体(IFX)对CD患者肠黏膜屏障的修复作用。方法选择2018年1月至2019年10月于上海市第十人民医院就诊的CD患者382例,均行IFX治疗,另选择103名行结肠镜检查者作为健康对照组。收集CD患者和健康对照者的一般临床资料、空腹血和肠黏膜组织样本,计算BMI,检测血红蛋白、白蛋白、ESR、CRP,以及相关炎症因子TNF-α、γ干扰素、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A表达水平及其mRNA水平。采用克罗恩病疾病活动指数(CDAI)和克罗恩病简化内镜评分(SES-CD)评价CD患者的疾病活动度。采用蛋白质印迹法分析闭锁蛋白、紧密连接蛋白-1、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和连接黏附分子-A(JAM-A)表达水平。通过透射电子显微镜观察肠黏膜上皮细胞。统计学分析采用t检验。结果CD患者治疗前BMI、血红蛋白、白蛋白水平均低于健康对照组[(18.3±1.8)kg/m^2比(20.2±1.2)kg/m^2、(95.3±8.4)g/L比(129.2±5.7)g/L、(33.2±5.4)g/L比(50.3±3.2)g/L],差异均有统计学意义(t=3.457、5.342、2.674,P均<0.05)。CD患者治疗后BMI和血红蛋白水平均高于治疗前[(19.5±2.1)kg/m^2比(18.3±1.8)kg/m^2、(117.2±10.3)g/L比(95.3±8.4)g/L],CRP水平、CDAI评分、SES-CD评分均低于治疗前[(16.3±2.3)mg/L比(47.2±9.3)mg/L、(113.2±12.5)分比(245.2±23.5)分、(5.0±2.1)分比(10.0±4.3)分],差异均有统计学意义(t=2.090、2.339、2.432、6.345、5.234,P均<0.05)。健康对照组促炎因子TNF-α、γ干扰素、IL-2、IL-6、IL-8、IL-17A表达水平及其mRNA水平均低于CD患者治疗前[分别为(1.1±0.4)ng/L比(158.2±38.3)ng/L、(3.2±0.8)ng/L比(28.3±13.4)ng/L、(2.7±1.3)ng/L比(3.3±2.4)ng/L、(5.2±0.3)ng/L比(16.3±7.4)ng/L、(16.3±6.3)ng/L比(18.9±10.2)ng/L、(10.5±2.3)ng/L比(38.5±11.2)ng/L;1.00±0.00比4.68±0.34、7.83±0.32、1.25±0.46、8.36±0.44、2.01±0.89、6.83±0.53],差异均有统计学意义(t=2.345、6.456、3.008、4.009、7.045、10.223,8.345、11.235、1.114、12 展开更多
关键词 CROHN病 英夫利西单抗 肠黏膜屏障 肠上皮紧密连接
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BBI阻断LPS对肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的抑制作用 被引量:4
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作者 古俊 刘金彪 霍文哲 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期185-190,共6页
目的探讨大豆来源的蛋白酶抑制剂(BBI)是否能阻断脂多糖(LPS)对肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的下调作用及其机制。方法用CCK8试剂盒检测LPS和BBI对HT-29细胞的毒性作用。用BBI预处理HT-29细胞6 h,再用LPS刺激,分别用实时荧光定量PCR和蛋... 目的探讨大豆来源的蛋白酶抑制剂(BBI)是否能阻断脂多糖(LPS)对肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的下调作用及其机制。方法用CCK8试剂盒检测LPS和BBI对HT-29细胞的毒性作用。用BBI预处理HT-29细胞6 h,再用LPS刺激,分别用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞紧密连接蛋白(ZO-1,Occludin)、TLR4及MyDD8的表达;通过Western Blot检测NF-κB的激活。结果LPS 1 000 ng/mL和BBI1 000μg/mL对HT-29细胞均无毒性作用。LPS可显著地上调HT-29细胞TLR4表达,且上调作用具有时间与剂量效应;能明显下调紧密连接蛋白的表达,其下调作用与LPS浓度成正比;能明显激活NF-κB,且具有剂量效应;LPS对HT-29细胞的这种作用可被BBI显著地抑制。结论通过抑制LPS诱导的肠道上皮细胞TLR4的表达和NF-κB的活化,BBI能显著地阻断LPS对肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的抑制作用。 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂 BBI 肠道上皮细胞 紧密连接蛋白 TLR4 NF-ΚB
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富氢液对脂多糖刺激离体肠上皮屏障功能障碍的影响 被引量:4
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作者 杨涛 谢克亮 +4 位作者 陈红光 张红涛 于洋 王国林 于泳浩 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期230-234,共5页
目的:观察富氢液对脂多糖(LPS)刺激人肠上皮细胞(Caco2)单层模型细胞通透性的影响,探讨其对肠屏障功能障碍的保护作用机制。方法人结肠腺癌细胞株Caco2培养于含20%胎牛血清的DMEM培养基中,传代至第28~35代的细胞用于实验。采用... 目的:观察富氢液对脂多糖(LPS)刺激人肠上皮细胞(Caco2)单层模型细胞通透性的影响,探讨其对肠屏障功能障碍的保护作用机制。方法人结肠腺癌细胞株Caco2培养于含20%胎牛血清的DMEM培养基中,传代至第28~35代的细胞用于实验。采用随机数字表法将细胞分为空白组、富氢液组、LPS组和LPS+富氢液组。空白组和LPS组用正常培养基培养,富氢液组和LPS+富氢液组用含饱和氢气培养基培养;LPS组和LPS+富氢液组分别加入1g/L的LPS孵育,空白组和富氢液组加入等量生理盐水。建立Caco2细胞单层模型模拟离体肠上皮屏障,孵育0、3、6、12、24、48h测定其跨上皮细胞电阻(TEER)值来反映肠屏障通透性;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和乳酸脱氢酶(LDH)法分别测定细胞活性和损伤情况;孵育6、12、24h采用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)测定细胞紧密连接蛋白claudin-1与occludin的蛋白表达;孵育24h采用免疫荧光法观察claudin-1与occludin蛋白的分布。结果空白组与富氢液组各指标比较差异均无统计学意义。LPS组和LPS+富氢液组细胞孵育6h起TEER值即较空白组明显降低,且呈时间依赖性;而LPS+富氢液组细胞孵育6h起TEER值明显高于LPS组。与空白组相比,LPS组细胞活性明显降低〔(67.2±7.9)%比(100.0±0.0)%,P<0.05〕,细胞损伤明显〔LDH释放率:(38.5±2.1)%比(1.2±0.3)%, P<0.05〕,孵育6、12、24h时claudin-1和occludin蛋白表达明显下调〔claudin-1(灰度值):0.351±0.079、0.272±0.075、0.190±0.049比0.518±0.030,occludin(灰度值):0.416±0.044、0.290±0.062、0.226±0.019比0.602±0.038,均P<0.05〕,孵育24h时细胞claudin-1和occludin蛋白分布紊乱且连续性中断。与LPS组相比,LPS+富氢液组细胞活性部分恢复〔(88.8±7.4)%比(67.2±7.9)%,P<0.05〕,细胞损伤减轻〔LDH释放率:(16. 展开更多
关键词 富氢液 脓毒症 脂多糖 肠上皮细胞 肠屏障功能障碍 紧密连接蛋白
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维生素A对大豆7S球蛋白致仔猪肠上皮细胞屏障功能损伤的影响 被引量:4
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作者 杨菊 邓俊良 +3 位作者 夏江英 宋天浩 庞莲凤 任志华 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第11期2026-2033,共8页
以仔猪肠上皮细胞(IPEC-J2)为研究对象,用大豆7S球蛋白作为诱导因素,通过检测细胞活力、细胞跨膜电阻(TEER)、荧光素钠渗透率、细胞膜完整性相关指标与紧密连接蛋白的mRNA表达情况,探究维生素A(V_(A))对大豆7S球蛋白致IPEC-J2细胞屏障... 以仔猪肠上皮细胞(IPEC-J2)为研究对象,用大豆7S球蛋白作为诱导因素,通过检测细胞活力、细胞跨膜电阻(TEER)、荧光素钠渗透率、细胞膜完整性相关指标与紧密连接蛋白的mRNA表达情况,探究维生素A(V_(A))对大豆7S球蛋白致IPEC-J2细胞屏障功能损伤的影响。结果显示:5.0 mg·mL^(-1)大豆7S球蛋白导致IPEC-J2活力、TEER与ZO-1、Claudin-1、Occludin的mRNA表达量极显著(P<0.01)降低,而荧光素钠渗透率和细胞培养液中碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、二胺氧化酶(DAO)、肠型脂肪酸结合蛋白1(IFABP1)的含量极显著(P<0.01)升高;添加0.1和1μmol·L^(-1)V_(A)极显著提高了细胞活力(P<0.01),0.1~10μmol·L^(-1)V_(A)显著(P<0.05)缓解了大豆7S球蛋白导致的TEER、荧光素钠渗透率、细胞膜完整性相关指标与紧密连接蛋白mRNA表达的变化;10000μmol·L^(-1)V_(A)反而加剧了这些影响。总体上,0.1~10μmol·L^(-1)V_(A)能通过保护细胞活力和细胞完整性、影响紧密连接蛋白的mRNA表达对大豆7S球蛋白导致的IPEC-J2细胞屏障功能损伤发挥保护作用,而10000μmol·L^(-1)V_(A)反而加重了这种损伤。 展开更多
关键词 大豆7S球蛋白 维生素A 仔猪空肠上皮细胞 通透性 紧密连接蛋白
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热射病对大鼠小肠上皮紧密连接occludin蛋白的影响 被引量:3
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作者 岳慧 周飞虎 宋青 《国际外科学杂志》 2011年第1期7-11,F0003,共6页
目的 观察热射病大鼠小肠上皮屏障通透性的改变,并通过观察肠上皮细胞紧密连接形态及肠上皮细胞紧密连接蛋白occludin蛋白表达的变化,初步探讨热射病对肠上皮屏障通透性的影响及机制.方法 将SD大鼠随机分为两组,每组10只(n=10),热射... 目的 观察热射病大鼠小肠上皮屏障通透性的改变,并通过观察肠上皮细胞紧密连接形态及肠上皮细胞紧密连接蛋白occludin蛋白表达的变化,初步探讨热射病对肠上皮屏障通透性的影响及机制.方法 将SD大鼠随机分为两组,每组10只(n=10),热射病组及常温对照组,制备热射病大鼠模型,动物麻醉后放入42 ℃恒温箱热暴露50 min后取出,室温(26 ℃)放置2 h时,处死动物取材,观察热射病大鼠肠上皮细胞屏障通透性的改变(血浆中荧光剂FD4、内毒素)及炎性细胞因子浓度变化,并通过光镜(HE染色)及透射电镜观察小肠组织的大体及微观形态学改变.应用免疫组化及蛋白印迹杂交(Western bloting)技术检测各组肠上皮细胞紧密连接蛋白occludin蛋白表达变化情况.结果 热射病大鼠小肠上皮细胞屏障通透性(FD4、内毒素)及细胞因子水平显著高于正常对照组(P<0.05).形态学方面,光镜观察空肠HE染色,与正常大鼠比较,热射病组出现肠上皮细胞从微绒毛顶端滑塌,从多个镜下视野观察(≥3个视野/片),此种表现不具有普遍性.透射电镜下,正常大鼠肠上皮细胞,紧密连接结构完整,呈致密的带状结构,热射病组紧密连接断裂,细胞间隙增宽,致密度减轻.免疫组织化学显示正常组大鼠肠上皮细胞,阳性信号沿细胞膜分布.热射病组荧光强度明显减弱.Western结果显示热射病组occludin蛋白表达明显低于对照组(P<0.05).结论 热射病引起紧密连接蛋白occludin的表达减少,紧密连接开放,从而破坏了肠上皮细胞间的紧密连接屏障,并因此引起肠上皮细胞屏障通透性的增高,导致内毒素血症及全身炎性介质反应. 展开更多
关键词 热射病 肠上皮屏障 紧密连接 OCCLUDIN
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二氢杨梅素通过SIRT3调节2型糖尿病小鼠肠上皮屏障功能作用
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作者 岳静 周杰 +4 位作者 荆金金 董妞 刘明华 易龙 糜漫天 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期192-201,共10页
目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导2型糖尿病小鼠肠上皮屏障功能的作用,并揭示SIRT3在介导DHM改善肠上皮屏障中的作用机制。方法选用7周龄的SPF级雄性野生型(WT)小鼠18只和SIRT3敲除(SIRT3 KO... 目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导2型糖尿病小鼠肠上皮屏障功能的作用,并揭示SIRT3在介导DHM改善肠上皮屏障中的作用机制。方法选用7周龄的SPF级雄性野生型(WT)小鼠18只和SIRT3敲除(SIRT3 KO)小鼠30只,分别按随机数字表法分为对照组(NC)、高脂组(HFD)、高脂加二氢杨梅素组(HFD+DHM),定期监测动物体质量、摄食量。干预12周,检测小鼠肠道通透性。小鼠处死后,检测血清生化指标和LPS水平及肠道组织病理学。利用分离的小鼠小肠上皮细胞和Caco-2细胞系,通过Western blot检测紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin)和qRT-PCR检测炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)表达。进一步利用慢病毒(LV-SIRT3)感染Caco-2细胞敲降SIRT3表达,DHM和LPS干预后检测相关炎症因子和紧密连接蛋白表达。结果HFD诱导WT和SIRT3 KO小鼠体质量明显增加、糖脂代谢异常、肠道通透性增加、肠上皮结构改变(小肠隐窝深度和上皮绒毛长度减少)、肠上皮细胞紧密连接蛋白表达降低和炎症因子表达增加,且与WT小鼠相比,HFD诱导的SIRT3 KO小鼠相关指标改变具有统计学意义(P<0.05)。DHM干预后WT小鼠上述检测指标改善具有统计学意义(P<0.05),但DHM的作用在SIRT3 KO小鼠中不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。体外实验发现,在LV-SIRT3感染的Caco-2细胞中,DHM对LPS诱导的炎症因子表达增加和紧密连接蛋白表达降低作用不明显,且差异无统计学意义(P>0.05)。结论SIRT3在DHM增加小肠上皮紧密连接蛋白表达、降低炎症因子表达、维持肠上皮屏障完整性和减少通透性、改善糖脂代谢和延缓T2DM发生中发挥重要作用。 展开更多
关键词 二氢杨梅素 2型糖尿病 肠上皮屏障 SIRT3 紧密连接蛋白
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多系分化持续应激细胞保护肠上皮细胞间紧密连接蛋白研究
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作者 孙东 杨柳 +2 位作者 曹欢 吴龙龙 宋红丽 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期452-455,共4页
目的观察大鼠多系分化持续应激(Muse)细胞对肠上皮细胞间紧密连接结构的保护作用。方法贴壁筛选法自大鼠(6只,购自中国食品药品检定院)股骨内分离大骨髓间充质干细胞(BMMSCs),长时间胰蛋白酶孵育法(LTi)自BMMSCs中分离大鼠Muse细胞,流... 目的观察大鼠多系分化持续应激(Muse)细胞对肠上皮细胞间紧密连接结构的保护作用。方法贴壁筛选法自大鼠(6只,购自中国食品药品检定院)股骨内分离大骨髓间充质干细胞(BMMSCs),长时间胰蛋白酶孵育法(LTi)自BMMSCs中分离大鼠Muse细胞,流式细胞术标记如白细胞分化抗原(CD)29、CD34、CD90等及特异阶段胚胎抗原-3(SSEA-3)抗体;免疫组织化学法标记Nanog同框蛋白(NANOG)等抗体,定向诱导分化后标记α-甲胎蛋白(AFP)等鉴定其多能分化能力;重组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)建立体外肠上皮细胞损伤损伤模型;与Muse细胞共培养后检测细胞增殖能力及桥接蛋白-1(ZO-1)的表达水平及形态,组间比较采用t检验。结果LTi后,大鼠BMMSCs中(2.57±0.57)%能够形成特征性的Muse细胞簇;流式细胞术结果表明,Muse细胞保留了BMMSCs表面分子特征,SSEA-3的阳性细胞比例[(73.2±1.4)%]显著高于BMMSCs[(2.3±0.3)%];免疫荧光实验表明,培养的Muse细胞阳性表达NANOG等多能分化标记,定向诱导分化后分别能够表达AFP等分化标记;Muse细胞与TNF-α炎症损伤的肠上皮细胞共培养后,其增殖细胞比例[(40.06±1.04)%]高于损伤[(23.10±2.05)%]组的细胞(t=12.79,P<0.05)及ZO-1蛋白的相对表达水平(0.55±0.03、0.27±0.01,t=13.03,P<0.05)。结论大鼠Muse细胞具有更加理想的保护炎症损伤肠上皮细胞紧密连接结构的作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 多系分化持续应激细胞 肠上皮细胞 紧密连接 闭锁小带蛋白-1
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刺五加苷E对脂多糖介导的仔猪小肠上皮细胞屏障功能基因表达的影响
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作者 胡枭偲 赵宝 +1 位作者 范越蠡 车东升 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期213-220,共8页
通过脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导仔猪小肠组织上皮细胞(IPEC-J2)建立损伤模型,探讨刺五加苷E(Eleutheroside E,EE)对IPEC-J2屏障功能的保护作用。采用单因素试验方法,分为对照组C组(等量的完全培养基),E组(完全培养基+0.1 g/L E... 通过脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导仔猪小肠组织上皮细胞(IPEC-J2)建立损伤模型,探讨刺五加苷E(Eleutheroside E,EE)对IPEC-J2屏障功能的保护作用。采用单因素试验方法,分为对照组C组(等量的完全培养基),E组(完全培养基+0.1 g/L EE),L组(完全培养基+10 mg/L LPS),EL组(完全培养基添加0.1 g/L EE预处理6 h后再添加10 mg/L的LPS进行培养),采用RTCA及q-PCR方法对IPEC-J2细胞的增殖活性、炎症因子以及紧密连接蛋白mRNA表达量变化进行检测。EE对LPS介导的IPEC-J2的增殖活性试验结果显示:与C组相比,EE对IPEC-J2细胞增殖活性显著提高,LPS对IPEC-J2细胞有显著的抑制作用(P<0.05),且EL组IPEC-J2增殖活性与L组相比明显提高(P<0.05)。EE对LPS介导的IPEC-J2的免疫细胞因子影响的结果显示:与对照组相比,EE显著降低了炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的mRNA相对表达量(P<0.01),抗炎性细胞因子IL-10、TGF-β显著升高(P<0.01);L组的炎性细胞因子mRNA相对表达量显著升高(P<0.01),抗炎性细胞因子mRNA相对表达量显著降低(P<0.01)。EE预处理组相比于LPS损伤组,IL-6、TNF-α、INF-γmRNA相对表达量显著降低(P<0.01),IL-10 mRNA相对表达量显著升高(P<0.01),TGF-β的mRNA相对表达量上调,但差异不显著(P>0.05)。EE对LPS介导的IPEC-J2细胞紧密连接蛋白mRNA相对表达量的影响试验结果显示:与C组比,E组Occludin(P<0.05)、ZO-1和Claudin-3(P<0.01)的mRNA相对表达量显著升高,LPS显著下调Occludin、Claudin-3和ZO-1的mRNA相对表达量(P<0.01)。与LPS损伤组相比,EE预处理组显著上调了Occludin(P<0.05)、Claudin-3和ZO-1(P<0.01)的mRNA相对表达量。结果表明:添加EE能够缓解LPS诱导的IPEC-J2细胞增殖活性的降低,改变细胞因子和紧密连接蛋白的基因表达,进而起到保护肠道机械屏障和免疫屏障功能的作用。 展开更多
关键词 刺五加苷E 脂多糖 仔猪小肠上皮细胞 紧密连接蛋白 细胞因子
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