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玻璃化冷冻卵巢原位移植技术介导胰岛素/IGF-1信号通路易感糖代谢紊乱风险的实验研究
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作者 周雪 王贺颖 王红燕 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期394-400,共7页
目的初探玻璃化冷冻后卵巢原位移植技术对其子代小鼠糖代谢水平的影响和机制。方法建立卵巢玻璃化冷冻后原位移植出生子代小鼠模型,实验分为新鲜卵巢原位移植出生子代(新鲜组)和玻璃化冷冻卵巢原位移植出生子代(玻璃化冷冻组),另设自然... 目的初探玻璃化冷冻后卵巢原位移植技术对其子代小鼠糖代谢水平的影响和机制。方法建立卵巢玻璃化冷冻后原位移植出生子代小鼠模型,实验分为新鲜卵巢原位移植出生子代(新鲜组)和玻璃化冷冻卵巢原位移植出生子代(玻璃化冷冻组),另设自然交配出生子代为对照组,每组16只小鼠,检测子代小鼠出生到6月龄时各阶段体质量及6月龄成年子代鼠的空腹血糖、空腹胰岛素、糖耐量水平;取材6月龄子代小鼠肝脏组织,qRT-PCR检测生长因子受体结合蛋白10(growth factor receptor-bound protein 10,Grb10)mRNA的表达;Western blotting检测Grb10、磷酸化蛋白激酶B(phosphate-protein kinase B,p-AKT)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphate-mitogen-activated protein kinase,p-MAPK)蛋白的表达。结果玻璃化冷冻组2周龄和3周龄子代小鼠的体质量均低于对照组(P=0.007,P<0.001),差异均具有统计学意义;新鲜组4月、5月龄子代小鼠的体质量均低于对照组(P=0.023,P=0.013),差异均具有统计学意义。6月龄子代鼠新鲜组和玻璃化冷冻组小鼠空腹血糖均较对照组升高(P<0.001,P=0.002),差异均具有统计学意义;玻璃化冷冻组小鼠空腹胰岛素水平较对照组升高,差异具有统计学意义(P=0.017),但玻璃化冷冻组与新鲜组之间差异均无统计学意义(均P>0.05)。葡萄糖注射后30 min时,新鲜组子代小鼠血糖水平显著高于玻璃化冷冻组(P<0.001),120 min时,新鲜组和玻璃化冷冻组子代小鼠血糖水平显著高于对照组(P=0.034,P=0.018),差异均具有统计学意义。新鲜组和玻璃化冷冻组子代肝脏内Grb10 mRNA和蛋白的表达显著高于对照组(均P<0.001),差异均具有统计学意义;玻璃化冷冻组和新鲜组子代肝脏内p-AKT(均P=0.024)和p-MAPK(P=0.019,P=0.002)蛋白的表达较对照组显著性降低,差异均具有统计学意义,玻璃化冷冻组与新鲜组之间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论卵巢玻璃化冷冻后 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 卵巢组织 生长因子受体结合蛋白10 胰岛素/igf-1信号通路
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绿原酸对昆虫病原线虫卡森斯氏线虫寿命及抗氧化活性的调控
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作者 陈红 李茜童 +1 位作者 王兴铎 钱秀娟 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期108-116,共9页
为观察绿原酸(CGA)对昆虫病原线虫寿命及抗氧化活性的影响,探究绿原酸对线虫生命活动的调控机制,本文以卡森斯氏线虫作为抗衰老模型,用不同浓度的绿原酸(0、50、100、500、1000μmol/L)处理,探究其对卡森斯氏线虫寿命、抗氧化活性、脂... 为观察绿原酸(CGA)对昆虫病原线虫寿命及抗氧化活性的影响,探究绿原酸对线虫生命活动的调控机制,本文以卡森斯氏线虫作为抗衰老模型,用不同浓度的绿原酸(0、50、100、500、1000μmol/L)处理,探究其对卡森斯氏线虫寿命、抗氧化活性、脂褐素水平、相关基因m RNA表达水平的调控作用,初步探讨绿原酸的潜在作用机理。结果表明,与空白对照组相比,用100μmol/L绿原酸刺激线虫后使处理组最长寿命增加了36.36%,显著抑制体内脂褐素的积累;且该浓度刺激线虫体内的SOD和CAT酶活力,分别提高了1.97倍和2.47倍;此外,q RT-PCR结果显示,100μmol/L CGA喂养线虫后,daf-16、gst-4基因转录水平相比对照分别提高了1.78、3.51,而daf-2基因转录水平呈下降的趋势,降低了0.13。综上可知,绿原酸通过胰岛素/IGF-1信号通路提高昆虫病原线虫卡森斯氏线虫机体的抗氧化能力并延长昆虫病原线虫的寿命。 展开更多
关键词 绿原酸 昆虫病原线虫 寿命 抗氧化 胰岛素/igf-1信号通路
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二苯乙烯苷调控胰岛素/IGF-1信号通路延缓大鼠睾丸间质细胞衰老的作用机制 被引量:4
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作者 李少华 姜丽萍 +3 位作者 牛佳瑶 王乐 牛嗣云 齐峰 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第3期297-303,共7页
采用自由基损伤的方法建立大鼠睾丸间质细胞衰老模型,用流式细胞术检测各组细胞周期的变化;应用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot技术检测睾丸间质细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平.结果显示:与正常组相比,衰老组β-半... 采用自由基损伤的方法建立大鼠睾丸间质细胞衰老模型,用流式细胞术检测各组细胞周期的变化;应用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot技术检测睾丸间质细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平.结果显示:与正常组相比,衰老组β-半乳糖苷酶阳性细胞率可达60%以上(P<0.05),G1期所占比重明显增加,S期所占比重明显减少(P<0.05).胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因表达变化:IRS1、IGF-1、IRS2、INSR在衰老组的表达水平明显低于正常组(P<0.05),IGFBP3在衰老组的mRNA表达水平明显高于正常组(P<0.05),二苯乙烯苷可逆转上述现象,上调IGF-1、INSR、IRS1、IRS2表达,下调IGFBP3的mRNA表达.结果表明二苯乙烯苷通过调控胰岛素/IGF-1信号传导通路延缓睾丸间质细胞衰老. 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 睾丸间质细胞 延缓衰老 胰岛素/igf-1信号传导通路 大鼠
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SIRT1基因对脂肪细胞中胰岛素受体表达的影响 被引量:3
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作者 陈立曙 宋敏 +1 位作者 朱志宏 陈慎仁 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2012年第1期75-79,共5页
目的本研究主要是从近年备受关注的SIRT1基因与胰岛素/胰岛素样生长因子-1(insulin/IGF-1)信号通路的调控关系中探讨SIRT1对胰岛素受体(INSR)表达的影响,在基因水平上探讨胰岛素抵抗发生发展的相关机制。方法本实验采用国际公认的前脂... 目的本研究主要是从近年备受关注的SIRT1基因与胰岛素/胰岛素样生长因子-1(insulin/IGF-1)信号通路的调控关系中探讨SIRT1对胰岛素受体(INSR)表达的影响,在基因水平上探讨胰岛素抵抗发生发展的相关机制。方法本实验采用国际公认的前脂肪细胞系3T3-L1细胞为研究对象,在一定条件下将其诱导其分化,经油红O染色鉴定为分化成熟的脂肪细胞。用Ad-mSirt1-IRES-eGFP腺病毒转染脂肪细胞,使其SIRT1基因高表达,用Q-PCR、Westernblot、免疫荧光等实验方法,检测SIRT1和INSR基因及蛋白的表达情况并与空白对照组比较。结果 (1)3T3-L1细胞经诱导后可分化为成熟脂肪细胞;(2)Q-PCR结果显示,与对照组相比,转染组SIRT1基因转录及蛋白表达均明显上调;(3)Westernblot及免疫荧光细胞化学染色结果均显示,与对照组相比,转染组(SIRT1高表达组)INSR蛋白表达明显增加。结论 SIRT1基因可影响脂肪细胞Insulin/IGF-1信号通路中最上游基因INSR的表达,SIRT1基因在胰岛素抵抗的发生发展中的作用机制复杂而且重要。 展开更多
关键词 受体 胰岛素 SIRT1 insulin/igf-1通路
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天麻石油醚提取部位对秀丽隐杆线虫Aβ蛋白毒性的抑制作用及其机制
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作者 师雄飞 杨丽萍 +2 位作者 普元柱 于兴志 段小花 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第11期3668-3677,共10页
目的探究天麻石油醚提取部位(Petroleum ether extract from Gastrodia elata,GEPEE)对秀丽隐杆线虫体内β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积的作用及可能机制。方法以秀丽线虫为模式生物,实验分为空白组(Control组)、GEPEE 0.5 mg·mL^(-1)组、... 目的探究天麻石油醚提取部位(Petroleum ether extract from Gastrodia elata,GEPEE)对秀丽隐杆线虫体内β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积的作用及可能机制。方法以秀丽线虫为模式生物,实验分为空白组(Control组)、GEPEE 0.5 mg·mL^(-1)组、GEPEE 1 mg·mL^(-1)组,研究GEPEE对线虫瘫痪、寿命、运动能力、氧化应激和热应激、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平、Aβ聚集实验的影响,用实时荧光定量PCR检测线虫体内与胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路(Insulin/IGF-1 signaling pathway,IIS)相关基因表达的变化,并结合高效液相色谱技术分析其主要成分。结果与Control组比较,GEPEE干预后,能明显改善线虫瘫痪表型(P<0.01),延长线虫寿命(P<0.01),增强线虫运动能力(P<0.01),并提高抵抗外界氧化胁迫(P<0.01)、高温的应激能力(P<0.01),改善Aβ在体内的沉积量(P<0.01),降低线虫体内ROS含量(P<0.01),降低Aβ、daf-2的表达水平(P<0.01),提高daf-16及其靶基因sod-3、gsh-px,hsf-1及其靶基因hsp-16.2,skn-1及其靶基因gst-4的表达水平(P<0.01),经高效液相色谱分析,其主要成分包括对羟基苯甲醇和对乙氧基苯甲醇。本实验表明GEPEE通过降低CL4176线虫体内的ROS水平,提机体抗氧化水平和调控IIS通路,从而降低CL4176线虫中Aβ诱导的毒性。结论GEPEE能抑制Aβ蛋白毒性,其机制与调控IIS信号通路有关。 展开更多
关键词 天麻 Β-淀粉样蛋白 阿尔茨海默病 秀丽隐杆线虫 胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路
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知母须根总皂苷纯化工艺及其延长秀丽隐杆线虫寿命的作用机制研究 被引量:1
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作者 廖延武 黄琪 +5 位作者 王桐生 吴德玲 许凤清 金传山 马凯 邵志愿 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期559-565,共7页
目的考察知母须根总皂苷富集纯化的最佳工艺,并对其延长秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)寿命的作用及机制进行研究。方法以知母须根总皂苷得率、总皂苷含量等为指标,考察大孔树脂型号、上样液浓度、吸附流速、上样体积... 目的考察知母须根总皂苷富集纯化的最佳工艺,并对其延长秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)寿命的作用及机制进行研究。方法以知母须根总皂苷得率、总皂苷含量等为指标,考察大孔树脂型号、上样液浓度、吸附流速、上样体积、洗脱溶剂浓度及体积对富集结果的影响。以秀丽隐杆线虫为实验模型,以0.5、1.0、2.0 mg·mL^-1知母须根总皂苷进行干预,测定秀丽隐杆线虫寿命、后代数目、运动能力;采用qPCR法测定知母须根总皂苷(1.0 mg·mL^-1)干预后秀丽隐杆线虫体内daf-16、daf-2、sod-3、ctl-2等基因的表达情况。结果最佳树脂型号为AB-8,上样液浓度为0.2 g·mL^-1,吸附流速及洗脱流速均为1.0 mL·min-1,洗脱剂为70%乙醇,洗脱体积为3倍柱体积,所富集的总皂苷纯度>50%。与空白对照组比较,1.0 mg·mL^-1浓度的知母须根总皂苷可显著延长秀丽隐杆线虫的平均寿命,提高线虫的半数致死天数(P<0.05)、产卵数目及运动频率(P<0.01);显著提高线虫体内sod-3、daf-16和ctl-2基因的表达量(P<0.01,P<0.001),降低daf-2基因的表达量(P<0.05)。结论优选的工艺稳定可行,可用于知母须根总皂苷的富集纯化;知母须根总皂苷能延长秀丽隐杆线虫的寿命,其机制可能与Insulin/IGF-1信号通路有关。 展开更多
关键词 知母须根总皂苷 分离富集 纯化工艺 秀丽隐杆线虫 延缓衰老 作用机制 insulin/igf-1信号通路
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Effects of (–)-5-hydroxy-equol on the lifespan and stress resistance of Caenorhabditis elegans
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作者 张聪慧 王秀伶 +2 位作者 梁晓琳 张红蕾 郝庆红 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2014年第6期378-384,共7页
Caenorhabditis elegans (C. elegans) was used as an animal model to study the effect of (-)-5-hydroxy-equol, a microbialmetabolite of isoflavone genistein, on the lifespan, fecundity and resistance against thermal ... Caenorhabditis elegans (C. elegans) was used as an animal model to study the effect of (-)-5-hydroxy-equol, a microbialmetabolite of isoflavone genistein, on the lifespan, fecundity and resistance against thermal and oxidative stress. The resultsshowed that (-)-5-hydroxy-equol not only significantly increased the lifespan of C. elegans but also significantly enhancedthe resistance against thermal and oxidative stress at the concentrations of 0.1 mmol/L and 0.2 mmol/L. However, the fecundityof C. elegans was not obviously influenced after being exposed to the same concentrations of (-)-5-hydroxy-equol. Further studieson comparative transcriptome analyses and the lifespan ofdaf-16 (mu86) mutant and daf-2 (e1370) mutant indicated that(-)-5-hydroxy-equol prolonged the lifespan of C. elegans through DAF-2/DAF-16 Insulin/IGF-1 signaling pathway. This isthe first report that (-)-5-hydroxy-equol was able to increase the lifespan and improve the thermal and oxidative stress toleranceof C. elegans. 展开更多
关键词 (-)-5-Hydroxy-equol Caenorhabditis elegans LIFESPAN Thermal stress Oxidative stress FECUNDITY insulin/igf-1signaling pathway
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