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荧光高效液相色谱法测定三种失眠模型大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量 被引量：15
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作者 涂星 郜红利 +1 位作者 卢映 吴俊洪 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2013年第5期74-77,共4页
目的测定睡眠剥夺大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量。方法复制药物诱导失眠动物模型、平台水环境诱导失眠动物模型、刺激诱导失眠动物模型,以Agilent 1100荧光检测器高效液相系统为检测工具,Agilent ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5... 目的测定睡眠剥夺大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量。方法复制药物诱导失眠动物模型、平台水环境诱导失眠动物模型、刺激诱导失眠动物模型,以Agilent 1100荧光检测器高效液相系统为检测工具,Agilent ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,柱温25℃,激发波长λex=357 nm,发射波长λem=455 nm,甲醇-50 mmoL/L醋酸钠缓冲液(pH=6.5)为流动相,采取梯度洗脱,测定正常组及模型组大鼠脑组织中谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)、牛磺酸(Tau)的含量。结果谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺酸分别在10.06～0.0503、10.13～0.0506、10.05～0.0502、10.03～0.0501μg/mL范围内,其浓度与峰面积呈良好的线性关系(r分别为0.99995、0.99995、0.99985、0.99990)。测得药物诱导失眠大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.2042±0.0145)、(0.0086±0.0005)、(0.0919±0.0024)、(0.0421±0.0011)μg;平台水环境诱导失眠大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.2144±0.0159)、(0.0085±0.0004)、(0.0966±0.0035)、(0.0433±0.0012)μg;刺激诱导失眠大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.1818±0.0043)、(0.0084±0.0005)、(0.0824±0.0033)、(0.0414±0.0018)μg;正常大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.1744±0.0038)、(0.0085±0.0004)、(0.0791±0.0022)、(0.0406±0.0012)μg。结论本实验建立的方法能满足同时测定大鼠脑组织中谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺酸的含量测定的需要,Glu、Tau、γ-GABA与失眠可能存在一定的量效关系,三种失眠动物模型均能较好的反映出脑内氨基酸类神经递质的变化。 展开更多
关键词 失眠动物模型 氨基酸类神经递质 含量测定 荧光高效液相色谱
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探讨半夏-薏苡仁对PCPA失眠模型大鼠海马食欲素及其受体和血清细胞因子的调控作用 被引量：4
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作者 王亮 王学林 +6 位作者 王鹏 李晨 谌盈帆 陈旸 张印 李绍旦 杨明会 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2022年第4期472-478,496,共8页
背景失眠症的发病率逐年增加,对人类身心健康造成严重危害。半夏-薏苡仁(BX-YYR)主要有效成分包括黄芩素、β-谷甾醇、豆甾醇等,但其治疗失眠症的具体作用机制尚不明确。目的 研究BX-YYR干预对氯苯丙氨酸(4-Chloro-DLphenylalanine,PCPA... 背景失眠症的发病率逐年增加,对人类身心健康造成严重危害。半夏-薏苡仁(BX-YYR)主要有效成分包括黄芩素、β-谷甾醇、豆甾醇等,但其治疗失眠症的具体作用机制尚不明确。目的 研究BX-YYR干预对氯苯丙氨酸(4-Chloro-DLphenylalanine,PCPA)失眠模型大鼠的食欲素(Orexin)及其受体、细胞相关因子的调控作用。方法 采用PCPA诱导失眠大鼠模型,将实验大鼠分为6组,每组15只,分别为正常组(N)、模型组(M)、地西泮组(D)和BX-YYR低(ZL)、中(ZM)、高(ZH)剂量组,各组按10 mL/kg进行对应灌胃处理,连续7 d。进行戊巴比妥钠翻正实验和旷场实验。HE染色观察海马结构,免疫组化观察海马B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)、IL-2、IL-6和Orexin含量,RT-PCR法检测OX1R和OX2R mRNA表达;Western blot法检测OX1R和OX2R表达。结果 戊巴比妥钠翻正实验显示失眠模型大鼠睡眠潜伏期显著延长、睡眠持续时间显著缩短(P均<0.01);旷场实验中模型大鼠总活动距离减少、进入中央格距离和修饰次数增加(P均<0.01)。HE染色显示,M组海马CA1区神经元形态和结构损伤比较严重,BX-YYR各剂量组则相对减轻。免疫组化显示,与M组比较,ZH组大鼠海马Bcl-2阳性信号面积占比升高(P<0.01)。ELISA显示,与M组比较,D组和ZL、ZM、ZH组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6显著降低(P均<0.05),D组和ZM、ZH组大鼠血清和海马Orexin水平显著降低(P均<0.01)。RT-PCR显示,与M组比较,ZL、ZM、ZH组海马OX1R mRNA表达降低(P均<0.05)。Western blot检测显示,与M组比较,ZL、ZM、ZH组大鼠海马OX1R表达降低(P均<0.01),D组和ZL组大鼠海马OX2R表达升高(P均<0.05)。结论 BX-YYR能够改善PCPA失眠模型大鼠的睡眠情况,同时调控血清TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6水平,其作用机制可能与调节海马Orexin、 展开更多
关键词 半夏 薏苡仁 失眠动物模型 对氯苯丙氨酸 海马 食欲素 细胞因子 细胞凋亡
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