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昆虫防御素A的分子改造及其在噬菌体表面的展示 被引量：3
1
作者 赵安 薛沿宁 +5 位作者 冯健男 张杰 高波 刘农乐 王芳 王会信 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2002年第4期270-272,293,共4页
目的 :实现对昆虫防御素A的分子改造及改造后分子的噬菌体表面展示 ,为进一步设计构象型肽库 ,研究分子间相互作用奠定基础。方法 :分子改造包括以下内容 :分子截短 ,突变碱性氨基酸 ,减少半胱氨酸的数目等。利用InsightⅡHomology系统... 目的 :实现对昆虫防御素A的分子改造及改造后分子的噬菌体表面展示 ,为进一步设计构象型肽库 ,研究分子间相互作用奠定基础。方法 :分子改造包括以下内容 :分子截短 ,突变碱性氨基酸 ,减少半胱氨酸的数目等。利用InsightⅡHomology系统对改造后分子结构进行预测。然后再将合成的改造蛋白基因插入到pCANTAB 5E载体中 ,采用Western印迹鉴定该蛋白在噬菌体表面展示。结果与结论 :模建结果显示改造后蛋白仍保持原有三维结构不变 。 展开更多
关键词 昆虫防御素A 分子设计 噬菌体展示
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九香虫防卫素CcDef3基因的克隆与表达分析
2
作者 齐小浪 杜娟 李尚伟 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第11期2539-2546,共8页
【目的】探明九香虫防卫素基因CcDef 3的生物信息学特征及其在九香虫体内的表达模式,揭示CcDef 3基因的调控规律,为进一步研究该基因的功能及开发新型药物奠定基础。【方法】采用反转录PCR克隆CcDef 3基因并使用生物信息学软件和方法对... 【目的】探明九香虫防卫素基因CcDef 3的生物信息学特征及其在九香虫体内的表达模式,揭示CcDef 3基因的调控规律,为进一步研究该基因的功能及开发新型药物奠定基础。【方法】采用反转录PCR克隆CcDef 3基因并使用生物信息学软件和方法对其进行序列分析,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测其时空表达模式及细菌诱导后的表达模式。【结果】九香虫防卫素基因CcDef 3的cDNA长度为522 bp,包含一个长351 bp的开放阅读框,编码116个氨基酸残基;CcDef3多肽由1个信号肽、2个前肽及1个成熟肽组成,成熟肽形成1个α-螺旋,2个β-折叠片和3个二硫键的三维分子结构;九香虫防卫素CcDef 3与红尾碧蝽防卫素的亲缘关系最近;CcDef 3在九香虫不同发育时期均表达,其中在5龄若虫中表达水平最高,在所检测的组织中皆表达,在脂肪体中表达水平最高;用细菌诱导九香虫成虫后CcDef 3的表达水平上调,在12 h时达到峰值,而后下调至48 h时趋向于诱导前表达水平。【结论】该研究克隆了九香虫防卫素CcDef 3基因,并进行了特征分析,解析其表达模式。CcDef 3基因的表达受到自身免疫的调控,还可以被诱导而参与免疫应答反应。 展开更多
关键词 九香虫 昆虫防卫素 基因克隆 表达分析
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白纹伊蚊和埃及伊蚊defensin A基因克隆及序列分析 被引量：5
3
作者 刘先凯 赵彤言 +2 位作者 朱礼华 董言德 陆宝麟 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2002年第4期216-221,共6页
应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensinA基因 ,并与文献报道的defensinA的5个型的cDNA序列进行同源性比较 ,发现此两序列中存在内元 ;从埃及伊蚊体内扩增的片段为蚊虫defen sinAl的前体AaDefAl;从白纹伊蚊体内扩增的... 应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensinA基因 ,并与文献报道的defensinA的5个型的cDNA序列进行同源性比较 ,发现此两序列中存在内元 ;从埃及伊蚊体内扩增的片段为蚊虫defen sinAl的前体AaDefAl;从白纹伊蚊体内扩增的片段为defensinA的 1个新型 ,命名为DefA6。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 埃及伊蚊 defensin A 基因克隆 序列分析 昆虫防御素 CDNA序列
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白纹伊蚊和埃及伊蚊防御素(defensin)成熟肽基因克隆及结构推测 被引量：5
4
作者 刘先凯 赵彤言 +2 位作者 朱礼华 董言德 陆宝麟 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2003年第1期30-34,共5页
应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensin成熟肽基因并对其分子生物学特性进行分析 ,发现埃及伊蚊 (BoraBora株、海口株 )、白纹伊蚊 (成都株、宜兴株、广州株 )推导的氨基酸序列与埃及伊蚊defensinA相同 ;通过Chou Fas... 应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensin成熟肽基因并对其分子生物学特性进行分析 ,发现埃及伊蚊 (BoraBora株、海口株 )、白纹伊蚊 (成都株、宜兴株、广州株 )推导的氨基酸序列与埃及伊蚊defensinA相同 ;通过Chou Fasman预测法对defensinA成熟肽的二级结构进行预测 ,可以看出在defensin成熟肽氨基酸序列的 15～ 2 3位有一个α 螺旋 ,35～ 39位有一个 β 折叠 ,32～ 34位有一个转角 ; 展开更多
关键词 白纹伊蚊 埃及伊蚊 防御素 成熟肽基因 蚊虫 昆虫防御素 克隆 二级结构 三级结构
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