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牙龈卟啉单胞菌抵抗固有免疫防御的研究进展 被引量：13
1
作者 李雨阳 孟维艳 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第2期113-115,共3页
牙龈卟啉单胞菌是牙周炎的主要致病菌,其菌体结构和毒力因子可以对牙周组织造成严重的破坏。研究发现,牙龈卟啉单胞菌能逃避固有免疫系统的防御,突破黏膜屏障,抵抗吞噬细胞吞噬作用,破坏补体系统,在牙周炎的发生发展中起到了重要的作用... 牙龈卟啉单胞菌是牙周炎的主要致病菌,其菌体结构和毒力因子可以对牙周组织造成严重的破坏。研究发现,牙龈卟啉单胞菌能逃避固有免疫系统的防御,突破黏膜屏障,抵抗吞噬细胞吞噬作用,破坏补体系统,在牙周炎的发生发展中起到了重要的作用。本文就牙龈卟啉单胞菌导致牙周炎的发生发展及其逃避固有免疫的机制进行综述。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 固有免疫 牙周炎 毒力因子
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血清4型禽腺病毒Ⅷ蛋白真核表达及其对LMH细胞天然免疫相关基因的影响
2
作者 李小凤 阮志华 +6 位作者 石勇丽 武晓倩 韦悠 万丽军 谢志勤 任红玉 谢芝勋 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第4期861-867,共7页
【目的】分析血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Ⅷ蛋白(ProteinⅧ,pⅧ)对宿主天然免疫相关基因表达的影响,为进一步研究FAdV-4的致病机理提供参考依据。【方法】通过PCR扩增FAdV-4Ⅷ基因编码区序列,与pEF1α-HA载体连接,构建重组表达质粒pEF1α-... 【目的】分析血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Ⅷ蛋白(ProteinⅧ,pⅧ)对宿主天然免疫相关基因表达的影响,为进一步研究FAdV-4的致病机理提供参考依据。【方法】通过PCR扩增FAdV-4Ⅷ基因编码区序列,与pEF1α-HA载体连接,构建重组表达质粒pEF1α-HA-Ⅷ。用pEF1α-HA-Ⅷ重组表达质粒(试验组)和pEF1α-HA空质粒(对照组)转染LMH细胞,利用Western blotting和间接免疫荧光验证Ⅷ蛋白表达情况,实时荧光定量PCR测定STING、MDA5、TBK1、MAVS、NF-κB、IRF7、IFN-α、INF-β、IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β基因的表达水平。【结果】Ⅷ基因开放阅读框(ORF)全长744 bp,共编码247个氨基酸残基,真核表达获得的Ⅷ重组蛋白与鼠源HA标签单克隆抗体产生特异性反应,在34 kD处得到单一条带;间接免疫荧光检测可见绿色荧光,说明Ⅷ重组蛋白在LMH细胞中得到良好表达。与对照组相比,Ⅷ重组蛋白在LMH细胞中表达后,模式受体STING基因的表达水平显著提高5.6倍(P<0.05,下同),MDA5基因的表达水平提高30%;接头蛋白TBK1和MAVS基因表达水平分别较对照组显著提高1.5和2.4倍;转录因子IRF7的表达水平显著提高3.4倍,而NF-κB基因被抑制表达。同时,干扰素(IFN-α和IFN-β)和白介素(IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β)的表达水平均上调,IFN-α和IFN-β分别极显著上调19.2和14.4倍(P<0.01),而IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β分别显著上调4.1、2.1、6.0和7.9倍。【结论】在LMH细胞中过表达FAdV-4 pⅧ,STING、MDA5、TBK1、MAVS、IRF7、IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β等天然免疫相关基因呈上调表达,表明Ⅷ蛋白对FAdV-4激发宿主的天然免疫具有一定促进作用。 展开更多
关键词 FAdV-4 Ⅷ蛋白 真核表达 天然免疫因子 实时荧光定量PCR
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血管紧张素Ⅱ和高糖环境对大鼠肾小球系膜细胞Toll样受体4信号通路及炎性因子表达的影响 被引量：2
3
作者 王瑜 刘思逸 +4 位作者 程玉花 张莉 江磊 吕金雷 陈钦开 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期253-257,270,共6页
目的探讨高糖条件下肾小球系膜细胞Toll样受体4(TLR4)及其信号通路中下游因子MyD88、核因子-κB(NF-κB)以及炎性因子的表达变化,论证高糖环境下血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与TLR4的对话关系,以期阐明TLR4信号通路在糖尿病肾病(DN)发病机制中... 目的探讨高糖条件下肾小球系膜细胞Toll样受体4(TLR4)及其信号通路中下游因子MyD88、核因子-κB(NF-κB)以及炎性因子的表达变化,论证高糖环境下血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与TLR4的对话关系,以期阐明TLR4信号通路在糖尿病肾病(DN)发病机制中的作用。方法设计3对针对大鼠TLR4基因的特异性siRNA片段以及带有绿色荧光的阴性对照,筛选出转染效率最高的siRNA,用于后续实验。第1部分实验在高糖的基础上分别加入AngⅡ、TLR4siRNA、血管紧张素Ⅱ受体阻断剂(ARB)、阴性对照siRNA,探讨高糖对各组细胞TLR4、MyD88及NF-κB表达的影响;第2部分实验在AngⅡ的基础上分别加入高糖、TLR4siRNA、ARB、阴性对照siRNA,探讨AngⅡ对各组细胞TLR4,MyD88及NF-κB表达的影响。采用荧光定量PCR检测各组TLR4、MyD88 mRNA的表达,Western blot检测TLR4、MyD88及NF-κB蛋白表达水平的变化,ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达情况。结果高糖及AngⅡ都可以上调TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及TLR4、MyD88mRNA的表达水平(均P<0.05),也可上调IL-6及MCP-1的表达(均P<0.01)且二者协同刺激情况下上调更明显。siRNA干扰及ARB可下调TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及TLR4、MyD88 mRNA的表达,下调IL-6及MCP-1的表达,与高糖及AngⅡ组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。结论高糖环境和AngⅡ刺激系膜细胞TLR4/MyD88信号通路激活,特异性TLR4siRNA基因可以部分阻断由高糖及AngⅡ诱导的TLR4信号的激活,厄贝沙坦也可部分阻断TLR4信号通路,高糖和AngⅡ共刺激增强由TLR4介导的天然免疫炎症效应,TLR4/MyD88信号通路在此效应中扮演重要角色;TLR4siRNA基因沉默技术为寻找DN的治疗方法提供了新思路,也为临床上使用ARB延缓DN进程提供了新的理论依据。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 高糖 血管紧张素Ⅱ 系膜细胞 TOLL样受体4 天然免疫应答 炎性因子
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舒筋活络方对Toll样受体介导的滑膜炎症调控作用
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作者 王欢 丁海涛 +6 位作者 舒峻 王瑞茵 史榕荇 杨帆 齐蕊涵 王洋 唐学章 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期469-472,共4页
目的:探讨舒筋活络方(SHC)对Toll样受体(TLRs)介导的滑膜炎症信号转导通路及其下游炎症因子的调节作用及其相关性。方法:将高、中、低浓度的SHC分别加入脂多糖(LPS)诱导的滑膜成纤维细胞(FLS),采用流式细胞术(FCM)对固有免疫代表性元件T... 目的:探讨舒筋活络方(SHC)对Toll样受体(TLRs)介导的滑膜炎症信号转导通路及其下游炎症因子的调节作用及其相关性。方法:将高、中、低浓度的SHC分别加入脂多糖(LPS)诱导的滑膜成纤维细胞(FLS),采用流式细胞术(FCM)对固有免疫代表性元件TLR2、TLR4的表达进行测定,一氧化氮(NO)一步法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法对下游炎症因子NO和白介素6(IL-6)浓度进行测定,采用SPSS 20.0软件进行相关性分析。结果:与空白组比较,模型组TLR2和TLR4表达显著增强(P<0.05),NO、IL-6释放量显著升高(P<0.05);与模型组比较,SHC各浓度组均不同程度抑制TLR2、TLR4表达及NO、IL-6释放(P<0.05),TLR2、TLR4阳性比例及NO、IL-6释放量随SHC浓度升高而降低;TLR2、TLR4和NO、IL-6之间均呈显著的正相关性(P<0.05)。结论:SHC通过调控固有免疫反应关联网络中互相紧密联系的各元件来调节骨关节炎(OA)进程,为中药复方影响OA病理机制的阐明提供了新的数据。 展开更多
关键词 舒筋活络方 骨关节炎 TOLL样受体 滑膜炎症 流式细胞术 机制 固有免疫 炎症因子
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禽呼肠孤病毒σC蛋白对鸡胚成纤维传代细胞天然免疫相关因子的调控 被引量：1
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作者 万丽军 王盛 +10 位作者 谢芝勋 任红玉 谢丽基 范晴 罗思思 张艳芳 曾婷婷 黄娇玲 张民秀 谢志勤 邓显文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期625-632,共8页
为初步探究禽呼肠孤病毒(ARV)σC蛋白对天然免疫信号通路的影响,本研究将构建好的真核质粒pEF1α-HA-σC(实验组)及pEF1α-HA(对照组)转染DF1细胞进行表达,通过RT-qPCR检测不同时间点DF1细胞中天然免疫相关因子在转录水平的变化。检测... 为初步探究禽呼肠孤病毒(ARV)σC蛋白对天然免疫信号通路的影响,本研究将构建好的真核质粒pEF1α-HA-σC(实验组)及pEF1α-HA(对照组)转染DF1细胞进行表达,通过RT-qPCR检测不同时间点DF1细胞中天然免疫相关因子在转录水平的变化。检测后统计发现,TLR3、TLR7、MDA5、TLR15、TRIF、NF-κB、IRF7、MyD88、MAVS、IFN-α、IFN-β、IL-1β及IL-6天然免疫相关因子在转录水平上都发生了不同程度的上调或下调,提示这13种天然免疫相关因子在ARVσC蛋白引起的天然免疫中发挥着重要作用。研究结果及分析为进一步揭示ARVσC蛋白在宿主抗病毒的天然免疫反应中发挥的作用及ARV的致病机理提供了研究基础,为研制新型高效靶向抗ARV疫苗及疫苗佐剂提供了理论依据。 展开更多
关键词 σC蛋白 天然免疫信号通路 天然免疫相关因子 转录水平
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miR-146a调节原发性胆汁性肝硬化患者单核细胞对LPS以及PolyI：C的反应 被引量：2
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作者 黄元兰 陈燕 +2 位作者 孙懿 邓安梅 仲人前 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期339-345,共7页
目的分析原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者单核细胞对内毒素（LPS）和多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸（PolyI：C）刺激呈现出的高反应性是否与miR-146a有关。方法以10μg／rnl的LPS或PolyI：C分别刺激PBC患者和健康个体的外周血单核细胞，采用E... 目的分析原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者单核细胞对内毒素（LPS）和多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸（PolyI：C）刺激呈现出的高反应性是否与miR-146a有关。方法以10μg／rnl的LPS或PolyI：C分别刺激PBC患者和健康个体的外周血单核细胞，采用ELISA检测培养基内IL-1B、IL-6、TNF-d、IFN-a水平的变化，采用RT-PCR检测二者单核细胞内miR-146a、miR-21、let-7e、miR-155、miR-125b表达变化情况。同时通过改变单核细胞系THP-1细胞株内miR-146a的表达来研究miR-146a在单核细胞对LPS和PolyI：C刺激诱导活化中的调控作用。结果LPS或PolyI：C诱导PBC患者单核细胞释放炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-a和IFN-仅的能力显著强于健康个体单核细胞，但二者诱导PBC患者单核细胞表达miR-146a的能力弱于健康个体。在LPS或PolyI：C的刺激下，改变THP-1细胞内miR-146a可以调节部分炎症因子的释放。结论在接受到LPS或PolyI：C刺激后，PBC患者单核细胞内miR-146a表达受损是导致单核细胞过度活化的原因之一。 展开更多
关键词 MIR-146A 原发性胆汁性肝硬化 固有免疫 炎症因子
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