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肺炎支原体抗体三种血清学检测方法的对比分析 被引量:5
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作者 谢文俊 《中国医药科学》 2019年第11期90-92,共3页
目的比较电化学发光方法(CLIA)、间接免疫荧光抗体法(IFA)和被动凝集法(PPA)在肺炎支原体感染早期检测中的应用价值。方法选取我院2017年6月~2018年3月可疑肺炎支原体感染的患者153例,分别采用电化学发光方法、间接免疫荧光法和被动凝... 目的比较电化学发光方法(CLIA)、间接免疫荧光抗体法(IFA)和被动凝集法(PPA)在肺炎支原体感染早期检测中的应用价值。方法选取我院2017年6月~2018年3月可疑肺炎支原体感染的患者153例,分别采用电化学发光方法、间接免疫荧光法和被动凝集法检测患者血清中的肺炎支原体抗体,比较这三种检测方法阳性检出率的差异,以协助临床早期诊断肺炎支原体感染。结果 PA法检测出(IgM+IgG)阳性标本和阴性标本数分别为60(39.22%)和93(60.78%);CLIA检测出(IgM)阳性标本和阴性标本数分别为57(37.25%)和96(62.75%);IFA检测出(IgM)阳性标本和阴性标本数分别为54(35.29%)和99(64.71%);以上三种检测方法的阳性检出率差异均无统计学意义(P> 0.05)。对IFA/PA、IFA/CLIA和CLIA/PA进行一致性分析,CLIA/PA组、CLIA/IFA组和IFA/PA组的Kappa值分别0.903、0.929和0.867,三种检测方法一致性好(Kappa系数均> 0.75)。结论电化学发光方法(CLIA)、间接免疫荧光抗体法(IFA)和被动凝集法(PPA)均在检测肺炎支原体中有着较高的一致性,均可用于肺炎支原体抗体的检测,且CLIA法由于检测MP分型抗体具备精密度高、用时短、操作自动化等优势,有望替代IFA法和PA法应用于临床。 展开更多
关键词 肺炎支原体 化学发光免疫分析法 间接免疫荧光抗体法 被动凝集法
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辽宁省部分地区人群疱疹病毒-6型的抗体调查 被引量:1
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作者 赵玉坤 高文武 +4 位作者 侯继东 李颖 张会仁 侯美华 张彦泽 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期361-363,共3页
用间接免疫荧光试验在沈阳、阜新、本溪三地区进行了抗人疱疹病毒-6型(HHV-6)抗体的调查。结果,健康脐带血的阳性率为100%(30/30),幼儿急疹患儿急性期血与HHV-6抗原均无特异性阳性反应,恢复期血100%转... 用间接免疫荧光试验在沈阳、阜新、本溪三地区进行了抗人疱疹病毒-6型(HHV-6)抗体的调查。结果,健康脐带血的阳性率为100%(30/30),幼儿急疹患儿急性期血与HHV-6抗原均无特异性阳性反应,恢复期血100%转阳(12/12),其抗体IgG效价在1∶80~1∶320之间,健康人血清的总阳性率为72.4%(299/415)。6个月~2岁的婴幼儿抗体阳性率最高(84%~96%)。提示,这一新发现的幼儿急疹病原体人疱疹病毒-6型早已在我国人群之间广泛感染蔓延。新生儿从母体获得的被动免疫力逐渐下降,6个月以后抗体升高,阳性率也明显高于其他年龄组,表明HHV-6感染主要发生于婴幼儿时期。 展开更多
关键词 人疱疹病毒-6型 抗体 免疫荧光抗体法
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利用杆状病毒表达系统表达PRV/gE蛋白及间接免疫荧光抗体(IDF)检测方法的建立 被引量:8
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作者 朱和超 梁婉 +5 位作者 范桂芳 彭忠 华琳 汤细彪 陈焕春 吴斌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1428-1434,共7页
为了建立高效灵敏的伪狂犬病病毒(PRV) gE蛋白的间接免疫荧光抗体诊断方法,本研究将PRV/HN/SMX/2012毒株gE蛋白的自身信号肽及胞外域片段克隆到pFastBacHT B载体上,构建重组质粒pFastBacHTB-gE,并转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经... 为了建立高效灵敏的伪狂犬病病毒(PRV) gE蛋白的间接免疫荧光抗体诊断方法,本研究将PRV/HN/SMX/2012毒株gE蛋白的自身信号肽及胞外域片段克隆到pFastBacHT B载体上,构建重组质粒pFastBacHTB-gE,并转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经过3次蓝白斑筛选获得含有gE基因的重组杆粒rBacmid-gE。随后,将该杆粒转染至sf9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒rAcMNPV-gE。经Western blot和间接免疫荧光实验(IFA)进行鉴定分析,发现重组gE蛋白在sf9细胞中表达。利用该sf9细胞建立检测血清中gE抗体的间接免疫荧光抗体(IDF)方法,通过反应条件的优化发现,将血清和羊抗猪FITC-IgG分别进行1∶40和1∶2 000稀释时所建立的方法能针对血清中gE抗体产生较强的特异性荧光;通过与商业化的ELISA检测gI/gE试剂盒(IDEXX)比较,所建立的检测方法与商业化试剂盒的总符合率为93.18%(164/176),阳性结果符合率93.75%(120/128),阴性结果符合率91.67%(44/48),2种方法存在很强的一致性(Kappa=0.832,CI=95%);-20℃条件下保存2个月的稳定性和重复性良好。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒(PRV) GE基因 杆状病毒Bac to Bac表达系统 间接免疫荧光抗体法(IDF)
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