轮状病毒VP_6蛋白免疫学研究进展 被引量：8

1

作者 潘小霞 张顺 陈元鼎 《中国疫苗和免疫》 CAS 2011年第2期169-172,共4页

轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿急性胃肠炎的主要致病病原体之一。作为主要结构蛋白和组抗原蛋白的VP6,在病毒复制过程中具有重要的生物学意义。近年研究发现,VP6在免疫保护反应方面也发挥较重要的作用。现就VP6蛋白的生物学和免... 轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿急性胃肠炎的主要致病病原体之一。作为主要结构蛋白和组抗原蛋白的VP6,在病毒复制过程中具有重要的生物学意义。近年研究发现,VP6在免疫保护反应方面也发挥较重要的作用。现就VP6蛋白的生物学和免疫学研究最新进展,以及其在研制RV重组疫苗中的潜在应用价值作一简要评述。 展开更多

关键词 轮状病毒 VP6 免疫学性质 疫苗

原文传递

抗莱克多巴胺单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定 被引量：6

2

作者 张海棠 王自良 +2 位作者 邓瑞广 钟华 范国英 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期175-179,共5页

莱克多巴胺(RAC)经化学修饰引入功能基团羧基,合成半抗原RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA),用混合酸酐法(MA)将RAC-SA偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对其进行鉴定;用BSA-RAC免疫... 莱克多巴胺(RAC)经化学修饰引入功能基团羧基,合成半抗原RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA),用混合酸酐法(MA)将RAC-SA偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对其进行鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗RAC的单克隆抗体(RAC mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-RAC偶联成功,偶联率为24.5:1;筛选出3F10、3H12、4D8共3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1.28×103,腹水为1:6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为1.65×1010L/mol,对RAC的半数抑制浓度(IC50)为5.7ng/ml,与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR)为22.3%,与其他化合物无CR。 展开更多

关键词 莱克多巴胺 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性

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鸡传染性支气管炎病毒HN_(99)株血清学和免疫学特性的研究 被引量：4

3

作者 高文明 崔保安 +2 位作者 李新生 魏战勇 徐端红 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第9期81-83,共3页

在鸡胚肾细胞上对HN99株病毒进行了克隆纯化,经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBVHN99株的血清型,并用免疫保护试验进行了验证,结果证明HN99株与T株属同一血清型,与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫... 在鸡胚肾细胞上对HN99株病毒进行了克隆纯化,经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBVHN99株的血清型,并用免疫保护试验进行了验证,结果证明HN99株与T株属同一血清型,与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫剂量的效力试验结果表明用0.2 ml剂量的HN99灭活苗接种试验鸡,能够对HN99攻毒提供100%的保护,证明HN99株具有良好的免疫原性。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 HN99株 血清型 免疫原性

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泥蚶凝集素的抑菌作用和免疫学研究 被引量：4

4

作者 柯佳颖 陈寅山 戴聪杰 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期35-40,共6页

分别从泥蚶血淋巴液和肌肉中提取出凝集素,采用全血微量培养法进行淋巴细胞转化和抑菌实验。结果表明:两种凝集素都具有促进小鼠淋巴细胞转化的免疫调节功能;两种凝集素对供试的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),甘薯薯瘟病原细菌... 分别从泥蚶血淋巴液和肌肉中提取出凝集素,采用全血微量培养法进行淋巴细胞转化和抑菌实验。结果表明:两种凝集素都具有促进小鼠淋巴细胞转化的免疫调节功能;两种凝集素对供试的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),甘薯薯瘟病原细菌(Fasarium oxyssporam),大肠杆菌(Escherichia coli),普通变形杆菌(Proteas valgaris),八叠球菌(Sarcina lutea)5种细菌和啤酒酵母(Saccharomyces carlsbergensis),玉米大斑病菌(Helminthos porium turcicum),稻瘟病菌(Piricularia oryzae)3种真菌都有不同程度的抑制作用,且对真菌的抑制作用大于对细菌的抑制作用;由二者分别制备的抗血清通过免疫双扩散法并不能与对方发生交叉沉淀反应,说明它们不具有同源性。 展开更多

关键词 泥蚶(Tegillarcagranosa Linnaeus) 凝集素 免疫活性 抑菌作用

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抗重金属铜离子单克隆抗体的制备及其免疫学特性 被引量：4

5

作者 孙勇 付世杰 +3 位作者 秦保亮 王亚楠 姜金庆 王自良 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期836-840,共5页

为制备抗Cu^(2+)的高效价、敏感、特异的单克隆抗体,采用已合成的铜离子人工抗原Cu^(2+)-ITCBEBSA免疫Balb/C小鼠,通过间接ELISA和阻断ELISA筛选备用小鼠,用细胞融合技术制备抗Cu^(2+)的单克隆抗体。结果筛选到4株特异性强、灵敏度高的... 为制备抗Cu^(2+)的高效价、敏感、特异的单克隆抗体,采用已合成的铜离子人工抗原Cu^(2+)-ITCBEBSA免疫Balb/C小鼠,通过间接ELISA和阻断ELISA筛选备用小鼠,用细胞融合技术制备抗Cu^(2+)的单克隆抗体。结果筛选到4株特异性强、灵敏度高的杂交瘤细胞,其中杂交瘤细胞株2B8培养上清中的抗体效价采用间接ELISA检测为1∶(1.28×10~3),用其制备的腹水中抗体效价为1∶(5.12×10~5),该单克隆抗体为IgG1/κ型,对Cu^(2+)-EDTA的半数抑制质量浓度(IC_(50))为29.78μg/L,与Zn^(2+)-EDTA的交叉反应率(CR)为26.0%,与其他金属螯合物没有交叉反应,表明获得特异性较好的抗Cu^(2+)的单克隆抗体,可用于铜离子的免疫学检测。 展开更多

关键词 铜离子 单克隆抗体 免疫学特性

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抗重金属Cr^(3+)单克隆抗体的研制及其免疫学特性分析 被引量：3

6

作者 王亚楠 丁菡 +3 位作者 王晓斐 雷壮 牛琳琳 王自良 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1597-1602,共6页

旨在研制敏感、特异、稳定的抗Cr^(3+)单克隆抗体(Cr^(3+)mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cr^(3+)形成Cr^(3+)-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备人工免疫原Cr^(3+)-ITCBE-BSA和检测抗原Cr^(3+)-ITCBE-OVA,紫外扫描法(UV)、凝胶... 旨在研制敏感、特异、稳定的抗Cr^(3+)单克隆抗体(Cr^(3+)mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cr^(3+)形成Cr^(3+)-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备人工免疫原Cr^(3+)-ITCBE-BSA和检测抗原Cr^(3+)-ITCBE-OVA,紫外扫描法(UV)、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICPAES)进行免疫原鉴定;用Cr^(3+)-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立Cr^(3+)mAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cr^(3+)mAb,并对其免疫学特性进行分析。结果表明,免疫原制备成功,Cr^(3+)-ITCBE-BSA中Cr^(3+)和BSA的质量浓度分别为140.8mg/L和5.81g/L,筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5 3株杂交瘤细胞,其中最好的2A11G5间接ELISA效价细胞培养上清为1∶(2.56×103)、腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,对Cr^(3+)的半数抑制质量浓度(IC50)为16.6μg/L,与其他重金属离子无交叉反应。表明成功研制亲和力高、特异性强、稳定性好的Cr^(3+)mAb,为铬离子残留免疫学检测方法的建立奠定基础。 展开更多

关键词 CR^3+ 人工免疫原 单克隆抗体 免疫学特性

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甲型肝炎病毒的提取及免疫学性质分析 被引量：3

7

作者 岳立广 徐艳玲 +8 位作者 李磊 张民 王影 夏青娟 王艺博 邵燕 常万柳 刘建华 刘令九 《微生物学免疫学进展》 2019年第4期27-32,共6页

目的建立甲型肝炎病毒(hepatitis A virus, HAV)的提取方法,了解和掌握HAV的免疫学性质。方法利用人胚肺二倍体细胞培养并收获HAV,用层析纯化等方法提取HAV,然后通过抗原检测、免疫电镜检查以及小鼠免疫试验对HAV的免疫学性质进行检测... 目的建立甲型肝炎病毒(hepatitis A virus, HAV)的提取方法,了解和掌握HAV的免疫学性质。方法利用人胚肺二倍体细胞培养并收获HAV,用层析纯化等方法提取HAV,然后通过抗原检测、免疫电镜检查以及小鼠免疫试验对HAV的免疫学性质进行检测和分析。结果利用层析纯化等方法提取HAV,抗原回收率达84%以上,蛋白去除率达97%以上,电镜及免疫电镜检查可以观测到典型的HAV以及HAV+IgM抗原抗体免疫复合物和HAV+IgG抗原抗体免疫复合物,免疫小鼠抗体阳转率为100%。结论利用层析纯化等方法可以对HAV进行有效提取,提取的HAV具有良好的免疫反应性和免疫原性。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 层析纯化 免疫电镜 免疫学性质

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抗重金属Cd^(2+)单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定 被引量：3

8

作者 王亚楠 王淑云 +1 位作者 张海棠 王自良 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期24-29,共6页

旨在制备抗Cd2+高效价、敏感、特异的单克隆抗体(Cd2+mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cd2+合成Cd-ITCBE半抗原、异硫氰酯法制备免疫抗原Cd-ITCBE-BSA和包被抗原CdITCBE-OVA,紫外分光光度法(UV)、SDS-PAGE和电感耦合等离子... 旨在制备抗Cd2+高效价、敏感、特异的单克隆抗体(Cd2+mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cd2+合成Cd-ITCBE半抗原、异硫氰酯法制备免疫抗原Cd-ITCBE-BSA和包被抗原CdITCBE-OVA,紫外分光光度法(UV)、SDS-PAGE和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)进行鉴定;用Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠细胞融合技术建立抗Cd2+的单克隆抗体(Cd2+mAb)杂交瘤细胞株、体内诱生腹水法制备Cd2+mAb并鉴定其免疫学特性。结果表明,人工抗原偶联成功,Cd-ITCBE-BSA和CdITCBE-OVA中载体蛋白与Cd2+的质量浓度分别为7.1g/L、191.7mg/L和6.7g/L、130.1mg/L;筛选出1A3、2B7、2E10、4F3 4株杂交瘤细胞,其中2E10株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶(1.28×103),腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为7.58×108 L/moL,对Cd2+的半数抑制质量浓度(IC50)为16.3μg/L,与Hg2+的交叉反应率(CR%)为18.6%,与其他化合物无交叉反应。 展开更多

关键词 CD^2+ 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性

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苦荞10kD过敏原的重组表达及部分性质分析 被引量：2

9

作者 陈鹏 封雪 +2 位作者 王磊 邓丹丹 李学俊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期128-133,共6页

以苦荞种子灌浆期cDNA文库中获得的苦荞10 kD过敏原基因序列TBAP10(tartary buckwheat 10 kD allergen protein,TBAP10;GenBank登录号JK729379.1)为基础,构建重组表达载体pET47b-TBAP10,重组蛋白在大肠杆菌BL21 Star(DE3)中以包涵体形... 以苦荞种子灌浆期cDNA文库中获得的苦荞10 kD过敏原基因序列TBAP10(tartary buckwheat 10 kD allergen protein,TBAP10;GenBank登录号JK729379.1)为基础,构建重组表达载体pET47b-TBAP10,重组蛋白在大肠杆菌BL21 Star(DE3)中以包涵体形式表达。经包涵体复性和钴离子螯合层析纯化目的蛋白,并对其过敏活性、热稳定性及在模拟胃肠环境中的稳定性进行了分析。Western blotting显示该蛋白与苦荞16 kD过敏蛋白Fag t2存在免疫交叉反应。竞争性ELISA证明重组蛋白TBAP10具有与荞麦过敏患者血清IgE特异的结合活性;TBAP10具有强的热稳定性,能耐受15 min的沸水浴;模拟胃肠环境的消化结果显示TBAP10对胃蛋白酶具有强的耐受性,但对胰蛋白酶无耐受性。 展开更多

关键词 原核表达 过敏蛋白 免疫性质 模拟胃肠消化

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抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 被引量：2

10

作者 吕娜 赵国坤 +4 位作者 孙强 张虹茜 殷晓平 张懋岚 张捷 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第10期64-67,共4页

为制备抗柱状黄杆菌多克隆抗体,本研究利用颗粒性抗原免疫新西兰白兔,收集的抗血清通过辛酸-硫酸铵法纯化,采用间接ELISA法检测纯化后多克隆抗体的效价和交叉反应性。结果显示,制备的多克隆抗体蛋白质浓度为29.28mg/mL,效价在1∶6.4... 为制备抗柱状黄杆菌多克隆抗体,本研究利用颗粒性抗原免疫新西兰白兔,收集的抗血清通过辛酸-硫酸铵法纯化,采用间接ELISA法检测纯化后多克隆抗体的效价和交叉反应性。结果显示,制备的多克隆抗体蛋白质浓度为29.28mg/mL,效价在1∶6.4×104以上,与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌及哈维氏弧菌等水生动物致病菌均无交叉反应。本研究成功建立了抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法,可用于柱状黄杆菌的快速检测。 展开更多

关键词 柱状黄杆菌 多克隆抗体 免疫学特性

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A组轮状病毒非结构蛋白NSP2的研究进展 被引量：2

11

作者 范耀春 李传印 陈元鼎 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期214-216,共3页

A组轮状病毒非结构蛋白NSP2在病毒复制过程中起重要作用。本文就NSP2蛋白编码基因和基因型、蛋白的表达、结构、功能及其免疫学性质的研究进展作一综述。

关键词 轮状病毒 NSP2蛋白 表达 结构 功能 免疫学性质

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锡兰钩虫SLP-1基因的克隆表达与免疫学特性分析 被引量：1

12

作者 何龙 赵琪 +3 位作者 庄婷婷 朱诗兰 陈晓雨 李国清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期80-85,共6页

为了研究锡兰钩虫鞘脂激活蛋白样蛋白(Ace-SLP-1)的免疫学特性,本研究以锡兰钩虫成虫cDNA为模板,根据GenBank中Ace-SLP-1基因序列(DQ855414.1)设计特异性引物,采用RT-PCR扩增Ace-SLP-1基因,结果显示,PCR扩增了Ace-SLP-1基因,其ORF全长31... 为了研究锡兰钩虫鞘脂激活蛋白样蛋白(Ace-SLP-1)的免疫学特性,本研究以锡兰钩虫成虫cDNA为模板,根据GenBank中Ace-SLP-1基因序列(DQ855414.1)设计特异性引物,采用RT-PCR扩增Ace-SLP-1基因,结果显示,PCR扩增了Ace-SLP-1基因,其ORF全长315 bp,编码104个氨基酸;利用在线软件对其编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,结果显示该蛋白为疏水蛋白,前17个氨基酸为信号肽序列且有跨膜结构域等;根据AceSLP-1基因编码氨基酸序列信息将其成熟肽编码基因序列(Ace-XL-SLP-1)克隆至原核表达载体pET-28a中,构建的重组质粒鉴定正确后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示重组Ace-XL-SLP-1蛋白(r Ace-XL-SLP-1)以包涵体形式表达,分子质量为14.4 ku;Western blot结果显示,该重组蛋白可以分别被鼠His标签MAb及锡兰钩虫感染犬的阳性血清所识别,具有较好的反应原性。将r Ace-XL-SLP-1分别以0~40μg/mL体外刺激健康犬的外周血淋巴细胞(PBMC),采用CCK-8试剂盒检测其对PBMC增殖的影响,结果显示,与对照组相比,20μg/mL与40μg/mL的r Ace-XL-SLP-1均可显著刺激犬PBMC的增殖(P<0.05),表明该重组蛋白能够诱导宿主细胞产生免疫应答反应,免疫原性较好。本研究首次克隆表达了锡兰钩虫成虫Ace-XL-SLP-1基因,并对其免疫学特性做了初步研究,为锡兰钩虫血清学诊断方法的建立和疫苗的研制提供参考数据。 展开更多

关键词 锡兰钩虫 鞘脂激活蛋白样蛋白 原核表达 免疫学特性

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SARS-CoV-2核衣壳蛋白的生物信息学分析、纯化及多克隆抗体制备

13

作者 王巧 陈芝喜 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第6期829-833,共5页

目的分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白的生物学性质、纯化及多克隆抗体制备。方法NCBI检索感染人的冠状病毒N蛋白氨基酸序列,采用Clustal Omega软件对其进行序列比对。利用SOPMA软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的二级结构;应用Pondr... 目的分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白的生物学性质、纯化及多克隆抗体制备。方法NCBI检索感染人的冠状病毒N蛋白氨基酸序列,采用Clustal Omega软件对其进行序列比对。利用SOPMA软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的二级结构;应用Pondr和IUPred软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的固有无序结构域;运用MoRFchib软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的分子识别特征序列;利用IEDB网络分析其B细胞表位。纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,分离小鼠血清,制备多克隆抗体;ELISA法测定血清中多克隆抗体滴度;MTT法检测N蛋白刺激小鼠脾细胞增殖情况。结果SARS-CoV-2 N蛋白与SARS-CoV N蛋白的同源性高于97%。N蛋白二级结构的无规卷曲占55.13%,α螺旋占21.24%,β折叠占16.71%,β转角占6.92%。N蛋白含有大量固有无序样结构,具有4个分子识别特征序列和11个线性B细胞表位。全长为51.5 kDa N蛋白可诱导BALB/c小鼠分泌高滴度抗体,并能导致淋巴细胞增殖。结论SARS-CoV-2 N蛋白含有大量固有无序结构域并获得了高滴度多克隆抗体。 展开更多

关键词 冠状病毒 核衣壳蛋白 生物信息学 免疫学性质

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毕赤酵母分泌表达JEV prME蛋白及其形成病毒样颗粒的免疫原性鉴定

14

作者 赵鹏 江雅 +2 位作者 王经满 范浩杰 曹瑞兵 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期863-874,共12页

应用毕赤酵母分泌表达日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白,鉴定其表达效果与免疫原性,以期为JEV亚单位疫苗的研制奠定基础。RT-PCR扩增JEV SA14-14-2株prME基因,将其连接到毕赤酵母表达载体pPICZa-A,分别获得pPICZa... 应用毕赤酵母分泌表达日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白,鉴定其表达效果与免疫原性,以期为JEV亚单位疫苗的研制奠定基础。RT-PCR扩增JEV SA14-14-2株prME基因,将其连接到毕赤酵母表达载体pPICZa-A,分别获得pPICZa-prME和携带JEV Cap蛋白C末端19个Aa信号肽的pPICZa-SprME质粒。表达载体用PmeⅠ酶切线性化,通过电转化转入毕赤酵母X33并诱导发酵培养。利用SDS-PAGE和Western blotting鉴定酵母发酵上清中目的蛋白的表达情况。利用GE蛋白层析纯化柱纯化目的蛋白,利用电镜观察纯化前后的目的蛋白,将不同剂量纯化后的prME蛋白与弗氏佐剂混合以及定量纯化后的prME蛋白与不同剂量的核酸佐剂混合分别免疫4周龄小鼠,定期采血,ELISA检测被免小鼠血清的抗体水平,空斑减少试验测定抗体中和效价。SDS-PAGE结果表明毕赤酵母可以分泌表达完整的prME蛋白,目的蛋白在70–100 kDa之间;Western blotting结果显示分泌表达的prME蛋白具有良好的反应原性,进一步证明prME蛋白在酵母X33中以整体的形式分泌表达,没有发生水解切割。纯化目的蛋白,根据洗脱时间和体积表明其分子量大于1×10~6 Da,因此推断prME蛋白可能形成多聚化的颗粒。电镜观察发现直径30–50 nm的病毒样颗粒(Virus like particles,VLPs)。免疫试验结果表明,纯化后的重组蛋白10–15μg/只接种小鼠在3周后抗体达到高峰值,之后逐渐下降,免疫7周后小鼠血清仍可检测到JEV抗体。将prME VLPs以10μg/只的剂量与不同剂量的核酸佐剂配伍后接种小鼠,ELISA检测结果表明核酸佐剂可明显增强JEV prME VLPs免疫应答,免疫4周后小鼠血清的中和抗体效价为1∶80–1∶160。上述结果表明毕赤酵母表达JEV prME虽不能发生水解切割,但仍可形成VLP并诱导免疫小鼠产生较高水平中和抗体。 展开更多

关键词 日本脑炎病毒 prME蛋白 毕赤酵母 病毒样颗粒 免疫原性

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戊二醛聚合对猪、牛和人血红蛋白免疫学特性的影响

15

作者 朱晓丽 王童文 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期12-17,共6页

猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体分别经皮下或腹腔多次免疫小鼠,ELISA检测抗血清IgG滴度;免疫印迹法分别检测小鼠抗猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体IgG与猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体之间的交叉反应,... 猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体分别经皮下或腹腔多次免疫小鼠,ELISA检测抗血清IgG滴度;免疫印迹法分别检测小鼠抗猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体IgG与猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体之间的交叉反应,探讨戊二醛聚合对不同种类血红蛋白免疫学特性的影响。结果表明:猪、牛、人血红蛋白的免疫原性均很弱,其相应的戊二醛聚合体免疫原性明显增强;猪、牛、人血红蛋白具有明显的抗原性差异;戊二醛聚合对这三类血红蛋白免疫学性质的影响完全不同,戊二醛聚合猪血红蛋白没有产生新的抗原决定簇,戊二醛聚合牛血红蛋白某些抗原决定簇被封闭,戊二醛聚合人血红蛋白形成了某些新的抗原决定簇。 展开更多

关键词 血红蛋白 戊二醛交联血红蛋白 免疫学特性酶联免疫检测 免疫印迹

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A组人轮状病毒NSP2基因的克隆、表达及免疫学性质研究(英文) 被引量：5

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作者 范耀春 文喻玲 +2 位作者 尹兴晓 李传印 陈元鼎 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期17-23,共7页

轮状病毒非结构蛋白NSP2在病毒基因组复制过程中起重要作用。在原核系统中重组表达了来自中国的第一株全基因组被克隆和研究了的轮状病毒NSP2,并进一步对其免疫学性质进行了研究。结果显示,在大肠杆菌中能够高效表达重组NSP2蛋白,而且... 轮状病毒非结构蛋白NSP2在病毒基因组复制过程中起重要作用。在原核系统中重组表达了来自中国的第一株全基因组被克隆和研究了的轮状病毒NSP2,并进一步对其免疫学性质进行了研究。结果显示,在大肠杆菌中能够高效表达重组NSP2蛋白,而且该蛋白能够诱发豚鼠产生特异性抗体。Western blot和免疫荧光检测表明所得抗体不仅能与该重组NSP2蛋白发生特异性反应,而且可以与轮状病毒SA11株或Wa株感染的MA104细胞中表达的NSP2发生反应。以上这些结果为进一步研究该重组NSP2蛋白的结构。 展开更多

关键词 轮状病毒 NSP2 重组表达 免疫学性质

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A组轮状病毒NSP1基因克隆表达及免疫学性质研究 被引量：4

17

作者 魏海涛 张艳 +3 位作者 范耀春 李传印 文喻玲 陈元鼎 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期15-21,共7页

轮状病毒(rotavirus,RV)非结构蛋白1(non structural protein1,NSP1)在病毒与宿主的相互作用中发挥着重要的功能。运用基因克隆和表达技术在大肠杆菌中表达了TB-Chen株RVNSP1蛋白,进行了NSP1的免疫学性质和RV感染细胞中NSP1蛋白的合成... 轮状病毒(rotavirus,RV)非结构蛋白1(non structural protein1,NSP1)在病毒与宿主的相互作用中发挥着重要的功能。运用基因克隆和表达技术在大肠杆菌中表达了TB-Chen株RVNSP1蛋白,进行了NSP1的免疫学性质和RV感染细胞中NSP1蛋白的合成与分布以及NSP1的系统进化和基因分型研究。结果表明,大肠杆菌BL21(DE3)能高效表达重组NSP1蛋白(rNSP1),rNSP1表达量约占菌体总蛋白的34.4%。rNSP1能诱导免疫豚鼠产生特异性血清抗体。Western blot及免疫荧光检测结果表明,抗rNSP1血清抗体能特异性识别自身蛋白,对SA11、Wa株的NSP1蛋白有交叉反应性;免疫荧光结果还表明,SA11感染的MA104细胞中合成的NSP1蛋白在细胞质中区域化聚集形成辐射状排列的颗粒状结构,而Wa株的NSP1不能形成此样结构。至今发现的A组RV至少可以分为16个不同的NSP1基因型,TB-Chen株NSP1为A2型。不同基因型有独特的敏感宿主范围,同一基因型可能感染不同种动物,同一种动物也可能感染不同基因型。基因型A4型和A16型仅在鸟类病毒株中出现;而且鸟类中只有A4型和A16型。研究结果为进一步研究NSP1蛋白质的结构功能及其应用开发奠定了很好的基础。 展开更多

关键词 轮状病毒 NSP1 重组表达 免疫学性质 基因分型

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A组轮状病毒NSP6蛋白表达及免疫学性质研究(英文) 被引量：1

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作者 李传印 范耀春 +3 位作者 文喻玲 张艳 魏海涛 陈元鼎 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期33-39,共7页

轮状病毒(RV)NSP6与NSP5由同一基因片段编码,至今对NSP6性质了解很少。用基因重组表达和免疫学方法,重组表达了A组人RVNSP6蛋白,进行了NSP6的动物免疫及其抗原反应性、免疫原性研究以及RV感染细胞中NSP6的合成及亚细胞分布研究。研究结... 轮状病毒(RV)NSP6与NSP5由同一基因片段编码,至今对NSP6性质了解很少。用基因重组表达和免疫学方法,重组表达了A组人RVNSP6蛋白,进行了NSP6的动物免疫及其抗原反应性、免疫原性研究以及RV感染细胞中NSP6的合成及亚细胞分布研究。研究结果表明,NSP6可在原核系统中高效表达,表达蛋白占菌体总蛋白的34.2%;NSP6免疫豚鼠血清抗体可特异性识别菌体细胞中表达的NSP6和SA11及Wa病毒感染的MA104细胞中合成的NSP6蛋白;病毒感染细胞中合成的NSP6在感染后3h就可检测到,12h表达量达到最高;NSP6在病毒感染细胞质中呈弥散状分布,并主要积聚在细胞核的周围,未观察到毒质体样结构。研究结果对深入了解RVNSP6的结构与功能具有重要的意义,具有重要的潜在应用价值。 展开更多

关键词 轮状病毒 NSP6 重组表达 免疫学特性 细胞内分布

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冻干同种异体带鞘管肌腱移植的免疫学研究．

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作者 王顺义 刘志国 +1 位作者 李辉 李艳军 《浙江临床医学》 2009年第7期676-677,共2页

目的确定经冻干处理带鞘管同种异体移植肌腱移植的免疫学特性。方法将成年双A鸡40只随机均分为4组：带全鞘肌腱移植组、带部分鞘（包括A2-A4滑车）肌腱移植组、不带鞘肌腱移植组及对照组，各10只。分别于手术后3d、1周、2周、4周、6周... 目的确定经冻干处理带鞘管同种异体移植肌腱移植的免疫学特性。方法将成年双A鸡40只随机均分为4组：带全鞘肌腱移植组、带部分鞘（包括A2-A4滑车）肌腱移植组、不带鞘肌腱移植组及对照组，各10只。分别于手术后3d、1周、2周、4周、6周测血清免疫学指标（IL-2及sIL-2R）并进行比较。结果冻干处理的移植肌腱并未引起外周血中IL-2及sIL-2R的显著变化，提示移植肌腱很少表达组织相容性抗原，移植物最终能被受体良好接受。结论带鞘管异体肌腱有良好的组织相容性。 展开更多

关键词 部分鞘管 同种异体移植免疫学 冻干

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植物乳杆菌KLDS 1.0318产酸、耐酸、耐胆盐能力及其免疫特性研究 被引量：25

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作者 蒙月月 陆婧婧 +1 位作者 占萌 霍贵成 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第15期70-76,共7页

目的:通过体外实验,研究植物乳杆菌KLDS 1.0318的生长曲线、产酸能力、耐酸耐胆盐性能,在此基础上对其可能的免疫调节活性进行研究。方法:采用平板计数法和紫外-可见分光光度法测定菌株生长曲线,pH计测定其产酸能力,平板计数法测定该菌... 目的:通过体外实验,研究植物乳杆菌KLDS 1.0318的生长曲线、产酸能力、耐酸耐胆盐性能,在此基础上对其可能的免疫调节活性进行研究。方法:采用平板计数法和紫外-可见分光光度法测定菌株生长曲线,pH计测定其产酸能力,平板计数法测定该菌株在酸性及高胆盐环境作用后的活菌数及存活率。采用CCK-8法观察不同剂量的植物乳杆菌KLDS 1.0318对小鼠脾淋巴细胞增殖能力以及对小鼠腹腔巨噬细胞能量代谢水平的影响,采用巨噬细胞吞噬中性红法评估不同剂量的植物乳杆菌KLDS 1.0318对巨噬细胞吞噬作用的影响。结果:植物乳杆菌KLDS 1.0318在4 h后进入对数期,12 h后达到稳定期。其产酸能力较强,pH在12 h后降至4.16。菌株在pH为2.5、3.5条件下培养至3 h时,其存活率分别为91.20%、97.50%,在胆盐质量浓度分别为0.3、0.5 g/100 mL的培养基中作用4 h后,其存活率分别为95.40%、87.76%。一定剂量的植物乳杆菌KLDS 1.0318能够促进脾淋巴细胞和巨噬细胞活性,并呈现剂量依赖关系。结论:植物乳杆菌KLDS 1.0318生长较快,具有较强的产酸、耐酸、耐胆盐能力,并具有潜在免疫调节功能。 展开更多

关键词 植物乳杆菌KLDS 1.0318 产酸 耐酸 耐胆盐 免疫特性

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