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人脑胶质瘤组织中分离与培养肿瘤干细胞 被引量:53
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作者 黄强 董军 +4 位作者 朱玉德 张全斌 季晓燕 王爱东 兰青 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期331-333,共3页
目的从胶质瘤组织中培养、分离肿瘤干细胞,并初步探讨其生物学特性。方法采集8例人脑胶质瘤手术标本,剪碎、胰酶消化,滤网过滤收集细胞。淋巴细胞分离液除去其中的红细胞,用含EGF、LIF和bFGF的无血清培养液培养,形成细胞球体后经免疫磁... 目的从胶质瘤组织中培养、分离肿瘤干细胞,并初步探讨其生物学特性。方法采集8例人脑胶质瘤手术标本,剪碎、胰酶消化,滤网过滤收集细胞。淋巴细胞分离液除去其中的红细胞,用含EGF、LIF和bFGF的无血清培养液培养,形成细胞球体后经免疫磁珠分离获取CD133+细胞, 用有限稀释法继续在上述无血清培养基中培养得到肿瘤细胞球后连续传代培养。取第5代肿瘤干细胞,用含10%FBS培养液诱导分化。分化前后用Nestin、MAP2、GFAP免疫细胞化学染色检测肿瘤干细胞及其分化细胞的相应标志物。结果在1例间变性星形细胞、室管膜细胞混合瘤中克隆到了 CD133+细胞,这些细胞在体外培养时,能稳定维持于球形生长状态(3个月,14代),在适合的环境中随时能自我更新和增殖,并分化成MAP2+的瘤性神经元和GFAP+的瘤性胶质细胞,而CD133-细胞则无此特性。结论在胶质瘤组织中有肿瘤干细胞存在,这些细胞在体外能长期培养和传代,可为进一步研究胶质瘤的细胞生物学和分子生物学特征开拓新途径。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 胶质瘤 免疫细胞化学 体外培养 脑胶质瘤
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性类固醇激素及其受体在文昌鱼性腺和神经系统中的分布 被引量:30
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作者 方永强 翁幼竹 胡晓霞 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期398-403,共6页
首次用雌二醇、睾酮和孕酮受体的多克隆抗体在文昌鱼性腺、脑泡和神经管中进行免疫细胞化学定位研究。结果表明 ,不同发育时期的卵原细胞和卵母细胞中都存在雌激素、雄激素和孕激素受体。在小生长期 ,3种受体通常定位在卵原细胞和早期... 首次用雌二醇、睾酮和孕酮受体的多克隆抗体在文昌鱼性腺、脑泡和神经管中进行免疫细胞化学定位研究。结果表明 ,不同发育时期的卵原细胞和卵母细胞中都存在雌激素、雄激素和孕激素受体。在小生长期 ,3种受体通常定位在卵原细胞和早期初级卵母细胞的胞质或核膜 ;在大生长期和成熟期 ,则定位在胞质和核质。在雄性 ,3种类固醇激素受体分布在不同发育时期的精原细胞、精母细胞和精子细胞 (雌激素受体例外 )中 ,受体阳性物定位在胞质和核。另外 ,用免疫细胞化学方法和性类固醇激素抗体对文昌鱼不同发育时期的性腺和神经系统进行研究 ,结果揭示 ,免疫阳性物存在于不同发育时期的卵巢和精巢中。在卵巢发育早期 ,卵原细胞和卵母细胞的胞质和核仁膜对雌二醇、睾酮和孕酮抗体显示强或中等强度免疫阳性反应 ;在大生长期和成熟期 ,卵母细胞胞质和核仁膜对睾酮和孕酮抗体的免疫阳性反应明显减弱 ,而对雌二醇则显著增强。在雄性 ,随着精巢发育成熟 ,精原细胞、精母细胞和精子细胞对睾酮抗体的免疫阳性反应逐渐增强。在大生长期和成熟期 ,精原细胞和精母细胞对孕酮抗体发生强的免疫阳性反应。在成熟期则对雌二醇抗体发生免疫阴性反应。精子始终为免疫阴性。本文研究还首次发现 ,文昌鱼脑泡和神经管中存在哺乳动物神经? 展开更多
关键词 文昌鱼 类固醇激素 受体 免疫细胞化学 性腺 神经系统
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人肝脏星形细胞培养激活及其c-fos,c-jun的表达 被引量:32
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作者 朱永红 胡大荣 +2 位作者 聂青和 刘国栋 谭朝霞 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第3期299-302,共4页
目的 观察体外培养过程中人肝脏星形细胞(HSCs)表型及其c-fos和c-jun表达的改变。 方法 将分离的正常人HSCs进行原代及传代培养,倒置显微镜下动态观察培养细胞形态改变,对原代及传代培养细胞铺展片进行PCNA、Ⅰ型前胶原、α-SMA,c-fos及... 目的 观察体外培养过程中人肝脏星形细胞(HSCs)表型及其c-fos和c-jun表达的改变。 方法 将分离的正常人HSCs进行原代及传代培养,倒置显微镜下动态观察培养细胞形态改变,对原代及传代培养细胞铺展片进行PCNA、Ⅰ型前胶原、α-SMA,c-fos及c-jun免疫细胞化学染色。 结果 正常人HSCs在含100mL/L小牛血清中培养时,其表型由原代培养初期的静息型转变为原代培养后期及传代后的激活型,激活的人HSCs呈现典型的成纤维细胞形态特征,其表达PCNA、工型前胶原及a-SMA明显阳性,刚分离的正常人HSCs在不含血清的培养液中培养24h后,其c-fos及c-jun表达均为阴性,而在含100mL/L小牛血清的培养液中继续培养24h后,c-fos及c-jun表达为阳性,原代培养d10及传代培养d3的HSCs其c-fos及c-jun表达持续阳性。 结论 在含小牛血清的DMEM培养液中培养时,人HSCs自发地激活,这种激活可能与c-fos及c-jun表达增加有关。 展开更多
关键词 细胞学 星形细胞 蛋白表达 免疫细胞化学
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几种常见野菜的药用与食疗 被引量:35
4
作者 王新生 《中国野生植物资源》 1995年第3期56-59,共4页
几种常见野菜的药用与食疗王新生(南京中医药大学南京210029)祖国传统医学关于“药食同源”的理论,反映了食物的起源与药物发现是密切相关的。我国人民早在史前时期就在实践中发现了许多可供食用的野生植物,同时也认识到食物... 几种常见野菜的药用与食疗王新生(南京中医药大学南京210029)祖国传统医学关于“药食同源”的理论,反映了食物的起源与药物发现是密切相关的。我国人民早在史前时期就在实践中发现了许多可供食用的野生植物,同时也认识到食物就是最好的良药,积累了不少食疗保健... 展开更多
关键词 野菜 药用价值 食疗价值
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人脐带间充质干细胞生物学特性及向类肝细胞的分化 被引量:28
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作者 闫俊卿 韩涛 朱争艳 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第15期1639-1644,共6页
目的:研究脐带间充质干细胞(umbilical cord-mesenchymal stem cells,UC-MSCs)生物学的特性及向肝细胞分化的可能性.方法:从脐带中分离间充质干细胞,体外行传代培养,检测脐带间充质干细胞表面免疫标志、细胞周期和生长活性等,利用肝细... 目的:研究脐带间充质干细胞(umbilical cord-mesenchymal stem cells,UC-MSCs)生物学的特性及向肝细胞分化的可能性.方法:从脐带中分离间充质干细胞,体外行传代培养,检测脐带间充质干细胞表面免疫标志、细胞周期和生长活性等,利用肝细胞生长因子、成纤维生长因子4和抑瘤素等细胞因子诱导脐带间充质干细胞向肝细胞分化,用免疫细胞方法对诱导和未诱导的细胞进行免疫学检测,糖原染色进行功能鉴定.结果:从人脐带中可分离到贴壁生长的间充质干细胞,细胞形态类似成纤维细胞,可在体外进行长期稳定培养;CD29、CD105和Vimentin表达阳性,基本不表达CD34、CD31,经加入细胞因子可成功将间充质干细胞向肝细胞诱导分化,分化的细胞表达肝细胞表面标志物ALB、AFP、CK18和CK19,糖原染色呈现阳性.结论:人脐带中可成功分离到间充质干细胞,细胞可实现体外长期培养,表达脐带间充质干细胞的表面标志,在体外脐带间充质干细胞诱导分化为肝细胞,有望成为细胞替代治疗的理想来源之一. 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 肝细胞 分化 免疫细胞化学 流式细胞术
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脑膜淋巴瘤的临床脑脊液细胞学研究 被引量:32
6
作者 关鸿志 陈琳 +5 位作者 郭玉璞 崔巍 任海涛 赵燕环 高晶 王长华 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期113-117,共5页
目的探讨脑脊液细胞学、免疫细胞化学和流式细胞分析在脑膜淋巴瘤诊断中的灵敏性和特异性。方法13例诊断为脑膜淋巴瘤的患者,其中原发性中枢神经系统淋巴瘤5例,均为非霍奇金淋巴瘤B细胞型(NHL-B);继发性8例,包括NHL-B6例,非霍奇... 目的探讨脑脊液细胞学、免疫细胞化学和流式细胞分析在脑膜淋巴瘤诊断中的灵敏性和特异性。方法13例诊断为脑膜淋巴瘤的患者,其中原发性中枢神经系统淋巴瘤5例,均为非霍奇金淋巴瘤B细胞型(NHL-B);继发性8例,包括NHL-B6例,非霍奇金淋巴瘤T细胞型(NHL-T)1例,mantle型1例。神经系统表现为头痛、视乳头水肿、脑脊膜刺激征、脊髓腰骶神经根受累和多脑神经麻痹等。腰穿脑脊液压力升高,细胞计数、蛋白均升高,糖减低。所有患者均采用沉淀池法,免疫细胞化学单克隆抗体CD19、CD20、CD79a、CD34和免疫球蛋白轻链等;其中3例脑脊液进行淋巴细胞亚群流式细胞分析。以4例病毒性脑炎和5例炎性脱髓鞘病患者的脑脊液为对照。结果脑脊液细胞学发现每例患者均有淋巴瘤细胞或异型淋巴细胞。免疫细胞化学发现5例患者多数细胞B细胞标记物阳性;例6多数细胞CD34阳性;例8CD20阳性细胞比例升高;例7CD19、CD20阴性。除例8外,其余脑脊液中细胞呈CD4和CD8阴性或极少数阳性。对照组CD4阳性细胞为主,伴有少量CD8阳性细胞,CD19和CD20阴性或极少数阳性。脑脊液流式细胞分析发现例9和例11的B淋巴细胞占85.9%~97.4%,提示异常的B细胞克隆。对照组以CD4、CD8阳性细胞为主,CD19阳性细胞低于4.0%。结论脑脊液细胞学和免疫细胞化学是诊断脑膜淋巴瘤的重要方法,脑脊液淋巴细胞亚群的流式分析能够对诊断脑膜淋巴瘤有所帮助。 展开更多
关键词 脑膜肿瘤 淋巴瘤 B细胞 脑脊髓液 免疫组织化学 流式细胞术
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人脑胶质瘤干细胞初步研究 被引量:30
7
作者 朱玉德 季晓燕 +5 位作者 黄强 张全斌 董军 王金鹏 王爱东 兰青 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2007年第2期127-130,共4页
目的 从人脑胶质瘤体外细胞系和胶质瘤组织中分离、鉴定肿瘤干细胞,为进一步研究其生物学特性奠定基础。方法 将人胶质瘤SHG44细胞和手术标本制成的单细胞,分别用含血清培养基(DMEM+10%FBS)和无血清培养基(DMEM/F12,添加bFGF、... 目的 从人脑胶质瘤体外细胞系和胶质瘤组织中分离、鉴定肿瘤干细胞,为进一步研究其生物学特性奠定基础。方法 将人胶质瘤SHG44细胞和手术标本制成的单细胞,分别用含血清培养基(DMEM+10%FBS)和无血清培养基(DMEM/F12,添加bFGF、LIF和EGF)培养。用CD133免疫磁珠筛选,流式细胞仪和免疫荧光共聚焦显微镜检测干细胞、祖细胞和分化细胞特异性标志物。结果 SHG44细胞培养1周,用CD133磁珠分离得到的CD133^+细胞的比例:血清组为0.021%,无血清组为1.2%。流式细胞仪检测:(1)Hoeehst33342一细胞比例:血清组为1.5%,无血清组为16.4%;(2)nestin^+细胞比例:血清组为7.2%,无血清组为51.05%;(3)免疫磁珠分离的CD133^+细胞再用流式细胞仪测得的CD133^+细胞为83.02%,CD133^+细胞群中有3.32%的CD133^+细胞。标本源肿瘤细胞在无血清条件下培养两天后CD133^+磁珠分离CD133^+细胞比例为4%。CD133^+细胞在分化不同阶段共表达或分别表达祖细胞标志物nestin、神经元和胶质细胞特异性标志蛋白MAP2和GFAP。结论 在胶质瘤细胞系和胶质瘤组织中均存在CD133^+的脑肿瘤干细胞,具有自我更新和多向分化潜能、在无血清培养下细胞球体中CD133^+细胞仍占少数,而nestin^+细胞占多数,可作为进一步研究脑肿瘤干细胞生物学特性的实验材料在相关领域中的应用。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 神经胶质瘤 免疫细胞化学 体外研究
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脑膜癌病的脑脊液细胞学与临床观察 被引量:32
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作者 关鸿志 陈琳 +3 位作者 管宇宙 朱以诚 王长华 郭玉璞 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2005年第2期111-113,i002,共4页
目的研究脑膜癌病(LC)的脑脊液(CSF)细胞学、临床及神经影像学特点. 方法回顾分析16例LC.结果 16例LC患者中,男6例、女10例,年龄29~69岁.亚急性起病,头痛14例,伴恶心、呕吐、眼底视乳头水肿;出现脑膜刺激征12例;双下肢无力5例,排尿困难... 目的研究脑膜癌病(LC)的脑脊液(CSF)细胞学、临床及神经影像学特点. 方法回顾分析16例LC.结果 16例LC患者中,男6例、女10例,年龄29~69岁.亚急性起病,头痛14例,伴恶心、呕吐、眼底视乳头水肿;出现脑膜刺激征12例;双下肢无力5例,排尿困难3例;意识丧失、抽搐7例;视力减退5例,眼肌麻痹4例,听力下降1例,吞咽困难2例,偏瘫1例,多饮多尿1例.消瘦10例,低热5例.7例有癌症病史.CSF压力升高13例, CSF常规计数白细胞升高10例,蛋白均升高,糖减低9例.CSF细胞学均见癌细胞, 4例行免疫组化检查示,肿瘤细胞上皮膜抗原和细胞角蛋白阳性.临床及病理学确定来源肺癌6例、乳腺癌3例、胃癌2例、卵巢癌1例,来源未明4例.结论 LC可作为首发症状和主要症状而缺少肿瘤原发灶表现.表现为亚急性脑膜炎,进行性颅内压升高,常合并多脑神经和脊髓神经根损害.CSF细胞学是确诊LC主要方法,结合免疫细胞化学方法对确诊有重要帮助. 展开更多
关键词 肿瘤 脑膜 脑脊液 细胞学 免疫细胞化学
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人骨髓间充质干细胞的培养及性质鉴定 被引量:17
9
作者 路艳蒙 傅文玉 朴英杰 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第8期571-573,F002,共4页
目的 分离培养并鉴定人胚胎骨髓间充质干细胞。方法 抽取流产胎儿股骨骨髓,梯度离心,取含有骨髓间充质干细胞的低密度血小板层进行培养;免疫细胞化学法鉴定细胞膜抗原和细胞基质中的蛋白属性;酶细胞化学法测定细胞碱性磷酸酶活性。... 目的 分离培养并鉴定人胚胎骨髓间充质干细胞。方法 抽取流产胎儿股骨骨髓,梯度离心,取含有骨髓间充质干细胞的低密度血小板层进行培养;免疫细胞化学法鉴定细胞膜抗原和细胞基质中的蛋白属性;酶细胞化学法测定细胞碱性磷酸酶活性。结果 培养的细胞呈现纺锤形外观;细胞膜抗原 PDGFR、CD29、CD44有阳性表达,IGF-1R、CD34、CD45呈阴性表达,细胞基质中纤维粘连蛋白、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ有表达,而胶原蛋白Ⅱ和层粘蛋白没有表达;碱性磷酸酶检测呈阴性反应。结论 培养的细胞不是骨髓中的造血干细胞或骨髓基质中的成纤维细胞,是处于未分化阶段的骨髓间充质干细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 免疫细胞化学 酶细胞化学 造血干细胞
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人慢性胃炎与神经内分泌G、D细胞关系的研究 被引量:26
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作者 周凡 唐福康 +3 位作者 武一曼 周维湛 王若愚 葛振华 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期161-163,W003,共4页
探讨神经内分泌 G、D细胞与慢性胃炎的关系。用免疫细胞化学方法对 5 2例慢性胃炎及 9例对照者进行胃窦粘膜内 G、D细胞密度计数。结果显示慢性胃炎病人的 G、 D细胞数均低于对照组 ,特别是萎缩性胃炎 G、 D细胞显著减少 ,同时还发现不... 探讨神经内分泌 G、D细胞与慢性胃炎的关系。用免疫细胞化学方法对 5 2例慢性胃炎及 9例对照者进行胃窦粘膜内 G、D细胞密度计数。结果显示慢性胃炎病人的 G、 D细胞数均低于对照组 ,特别是萎缩性胃炎 G、 D细胞显著减少 ,同时还发现不同组别、不同程度的萎缩性胃炎 ,其 G细胞的数量均大于 D细胞 ,G/ D细胞的比值在中、重度萎缩性胃炎与其它组相比有显著性差异 (P<0 .0 1)。资料还显示 G、D细胞的计数不仅可以判断胃窦粘膜的萎缩程度 ,而且可作为观察临床疗效的一项重要指标。 展开更多
关键词 神经内分泌 慢性胃炎 G细胞 D细胞 免疫细胞化学
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Immunocytochemical identification and localization of APUD cells in the gut of seven stomachless teleost fishes 被引量:25
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作者 Pan QS Fang ZP Zhao YX 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2000年第1期96-101,共6页
AIM To study the cell types,localization,distribution density and morphology of APUDcells in the intestinal mucosa of stomachlessteleost fishes.METHOD By using the peroxidase-antiperoxidase complex(PAP)immunocytochemi... AIM To study the cell types,localization,distribution density and morphology of APUDcells in the intestinal mucosa of stomachlessteleost fishes.METHOD By using the peroxidase-antiperoxidase complex(PAP)immunocytochemical staining technique theidentification,localization and morphology ofimmunoreactive(IR)endocrine cells seattered inthe intestinal mucosa of grass carp(Cyenopharyngodon idellus),black carp(Mylopharyngodon piceus)and common carp(Cyprinus carpio)were investigated with 20kinds of antisera prepared against mammalianpeptide hormones of APUD cells,and likewise byusing avidin-biotin-peroxidase complex(ABC)method those of silver carp(Hypophthalmichthys molitrix),bighead(Aristichthys nobilis),silver crucian carp(Carassius gibelio)and bluntnose black bream(Megalobrama amblyocephala)were alsostudied with 5 different antisera.Thereplacement of the first antiserum by phosphatebuffered saline(PBS)was employed as a control.IR endocrine cells were counted with asquare-mesh ocular micrometer from 10 fieldsselected randomly in every section of each partof the intestine specimen.The average numberof IR endocrine cells per mm2 was counted toquantify their distribution density.RESULT Gastrin(GAS)-,Gastric inhibitorypeptide(GIP)-,glucagon(GLU)-,glucagon-likeimmunoreactants(GLI)-,bovine pancreaticpolypeptide(BPP)-,leucine-enkephalin(ENK)-and substance P(SP)-IR endocrine cells werefound in the gut of grass carp,black carp andcommon carp,and somatostatin(SOM)-IRendocrine cells were only seen in common carp.GAS-,GIP-and GLU-IR endocrine cells werefound in the intestinal mucosa of silver carp,bighead,silver crucian carp and bluntnose blackbream.Most of IR endocrine cells had the higherdistribution density in the foregut and midgut,and were longer in shape.They had a long apicalcytoplasmic process extended to the gut lumenand a basal process extended to adjacent cellsor basement membrane and touched with it.Sometimes,the basal cytoplasmic processformed an enlarged synapse-like structure in thecontiguous part with basement memb 展开更多
关键词 Subject headings stomachless TELEOST FISHES APUD cells intestinal MUCOSA immunocytochemistry
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过氧化物酶体增殖物活化的受体γ特异配体罗格列酮对肝星状细胞生物学特性的影响 被引量:26
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作者 郭晏同 冷希圣 +3 位作者 李涛 宋盛晗 秦致中 熊亮发 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期150-153,共4页
目的 研究过氧化物酶体增殖物活化的受体γ(PPARγ)特异配体罗格列酮对肝星状细胞(HSC)PPARγ 表达以及对HSC生物学特性的影响。 方法 设立空白对照组、3μmol L罗格列酮组、10μmol L罗格列酮组;分别 用RT PCR、Western印迹、... 目的 研究过氧化物酶体增殖物活化的受体γ(PPARγ)特异配体罗格列酮对肝星状细胞(HSC)PPARγ 表达以及对HSC生物学特性的影响。 方法 设立空白对照组、3μmol L罗格列酮组、10μmol L罗格列酮组;分别 用RT PCR、Western印迹、免疫细胞化学方法检测PPARγ的表达;用Western印迹和免疫细胞化学方法检测α 平滑肌 肌动蛋白(α SMA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;四甲基偶氮唑盐(methythiazolyltetrazolium,MTT)法检测细胞增殖;流式细胞 仪分析细胞凋亡。 结果 10μmol L罗格列酮组HSC的PPARγmRNA表达明显高于对照组(t=10.87,P<0.01), PPARγ蛋白表达也明显高于对照组(t=4.627,P<0.01);10μmol L罗格列酮组HSC的增殖活性显著低于对照组(t ≥5.542,P<0.01),其α SMA及Ⅰ型胶原表达明显低于对照组(t≥4.627,P<0.01),其凋亡发生率显著高于对照组 (χ2=16.682,P<0.01)。 结论 PPARγ特异配体罗格列酮通过增加PPARγ的表达,能够抑制激活的HSC表达α SMA及Ⅰ胶原,抑制激活的HSC增殖,诱导激活的HSC凋亡。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物 罗格列酮 细胞生物学特性 配体 特异 WESTERN印迹 受体 活化 免疫细胞化学方法 星状细胞(HSC) α-平滑肌肌动蛋白 PPARγ mol/L 四甲基偶氮唑盐 流式细胞仪分析 α-SMA RT-PCR mRNA表达 对照组
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液基细胞学及细胞蜡块联合免疫细胞化学检测在胸腹水细胞病理诊断中的临床价值 被引量:29
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作者 傅春玲 刘定荣 +6 位作者 吴彤 卫惠杰 张世琼 李伟 方静 杨艳 刘凤 《重庆医学》 CAS 2018年第8期1058-1060,共3页
目的探讨液基细胞学、细胞蜡块联合免疫细胞化学检测在胸腹水细胞病理学诊断中的临床价值。方法收集114例胸腹水标本,比较液基细胞学和细胞蜡块联合免疫细胞化学两种方法的阳性检出率,对可疑阳性和阳性的病例做免疫细胞化学检测,进一步... 目的探讨液基细胞学、细胞蜡块联合免疫细胞化学检测在胸腹水细胞病理学诊断中的临床价值。方法收集114例胸腹水标本,比较液基细胞学和细胞蜡块联合免疫细胞化学两种方法的阳性检出率,对可疑阳性和阳性的病例做免疫细胞化学检测,进一步判断细胞的良恶性及组织来源。结果 114例胸腹水标本中,液基细胞学诊断阳性36例(31.58%),细胞蜡块联合免疫细胞化学诊断阳性55例(48.24%),差异有统计学意义(P<0.01)。55例恶性胸腹水,胸水45例,腹水10例;胸水中肺腺癌32例,小细胞肺癌3例,乳腺癌4例,子宫内膜癌1例,淋巴造血系统肿瘤1例,来源不明4例;腹水中卵巢癌2例,消化系统肿瘤1例,子宫内膜癌1例,淋巴造血系统肿瘤1例,来源不明5例。结论细胞蜡块联合免疫细胞化学可以明显提高胸腹水阳性检出率,并帮助判断组织来源。 展开更多
关键词 胸水 腹水 液基细胞学 细胞蜡块 免疫细胞化学
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大鼠脑微血管内皮细胞与周细胞、星形胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型 被引量:28
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作者 查雨锋 傅晓钟 +5 位作者 张顺 罗敏 欧瑜 董永喜 王爱民 王永林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期730-735,共6页
目的应用原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovessel endothelial cells,BMECs)与脑微血管周细胞(brain-microvessel pericytes,BMPC)、星形胶质细胞(astrocytes,AS)共培养建立可模拟在体状态的体外血脑屏障(blood-brain barrier... 目的应用原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovessel endothelial cells,BMECs)与脑微血管周细胞(brain-microvessel pericytes,BMPC)、星形胶质细胞(astrocytes,AS)共培养建立可模拟在体状态的体外血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)模型。方法原代分离、纯化和培养大鼠BMECs、BMPC和AS,通过细胞形态学和免疫细胞化学染色方法鉴定原代培养的细胞,应用Millicell细胞培养插(孔径0.4μm)建立5种不同类型的体外BBB模型,经跨内皮电阻值(transendothelial electrical resistance,TEER)、荧光素钠通透性(sodium fluorescent,Na-FLU)、碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT1)的表达测定以及阳性药在体内和体外BBB通透量的相似性,比较评价其屏障功能。结果原代培养的BMECs呈典型的铺路卵石样结构,BMPC胞体较大且呈分枝状,AS有细长突触,胞质较浅;免疫细胞化学染色证实原代细胞为目标细胞;BMECs与BMPC、AS共培养后TEER值可达(478±25)Ω·cm2,Na-FLU的表观渗透系数为[(8.23±0.78)×10-6]cm·s-1,AKP和γ-GT1表达分别为(6.90±0.27)金氏单位·g-1Pro,(4.39±0.32)μg·g-1Pro;阳性药在体外BBB的表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp)与在体数据具有较好的相关性(R2=0.92)。结论原代培养的大鼠BMECs与BMPC、AS共培养建立的体外BBB模型在形态、结构及屏障功能方面具备BBB的基本特征,为研究BBB的生理学、病理学以及筛选化合物提供了一种有用工具。 展开更多
关键词 原代培养 脑微血管内皮细胞 周细胞 星形胶质细胞 血脑屏障 形态学 免疫细胞化学
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一氧化氮合酶同功异构酶在大鼠睾丸中的表达和定位 被引量:21
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作者 王世鄂 陈奕权 周瑞祥 《生殖医学杂志》 CAS 2001年第2期99-102,共4页
目的 :了解一氧化氮 ( NO)在睾丸中的作用。方法 :运用免疫组织化学方法观察 3种一氧化氮合酶 ( NOS)同功异构酶在大鼠生后 4、7、1 4、3 0、60 d睾丸中的分布。结果 :( 1 )生后 4、7、1 4d大鼠睾丸未见 3种 NOS免疫阳性反应 ;( 2 )生后... 目的 :了解一氧化氮 ( NO)在睾丸中的作用。方法 :运用免疫组织化学方法观察 3种一氧化氮合酶 ( NOS)同功异构酶在大鼠生后 4、7、1 4、3 0、60 d睾丸中的分布。结果 :( 1 )生后 4、7、1 4d大鼠睾丸未见 3种 NOS免疫阳性反应 ;( 2 )生后 3 0 d少数精母细胞及生后 60 d生精小管腔面精子和间质细胞呈 NOS1阳性 ;( 3 )生后 3 0 d少数精母细胞、支持细胞和管周类肌细胞呈 NOS2阳性 ,而生后 60 d NOS2阳性反应见于睾丸间质细胞、管周类肌细胞、支持细胞、极少数精母细胞和不成熟精子头部 ;( 4)生后 3 0 d睾丸内少数精母细胞和血管壁呈 NOS3阳性 ,生后 60 d NOS3阳性反应仅见于血管壁。结论 :NO可能参与精子发生、睾酮的分泌过程 ,并调节睾丸内的血流。 展开更多
关键词 一氧化氮合酶同功异构酶 免疫细胞化学 睾丸 大鼠 精子发生
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槲皮素对HL-60细胞中p53、bcl-2基因表达的影响 被引量:17
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作者 李岩松 康铁帮 梁念慈 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期255-257,共3页
目的探讨槲皮素对人早幼粒白血病细胞株(HL60)细胞中p53、bcl2基因表达的影响。方法采用台盼蓝排除法确定活细胞数和免疫细胞化学SP染色法分别检测细胞中p53、bcl2基因表达。结果槲皮素对HL60细胞的... 目的探讨槲皮素对人早幼粒白血病细胞株(HL60)细胞中p53、bcl2基因表达的影响。方法采用台盼蓝排除法确定活细胞数和免疫细胞化学SP染色法分别检测细胞中p53、bcl2基因表达。结果槲皮素对HL60细胞的增殖有明显的抑制作用,当其作用24h后,其IC50为466μmol·L-1,槲皮素对HL60细胞中p53、bcl2基因表达均有一定的抑制作用,且呈明显的剂量依赖关系。结论槲皮素抑制p53、bcl2的表达可能是其抑制HL60细胞增殖和生长的重要机制之一。 展开更多
关键词 槲皮素 HL-60 P53 BCL-2 免疫细胞化学 白血病
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茶多酚对肿瘤细胞多药耐药性逆转作用的研究 被引量:17
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作者 朱爱芝 王祥云 +1 位作者 金山 郭振泉 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期496-501,共6页
用免疫组化法和流式细胞仪对肿瘤细胞系MCF 7和MCF 7 Adr的P 糖蛋白表达水平进行定性定量研究。用噻唑蓝比色法 (MTT)研究茶多酚的细胞毒性及其对耐药性的逆转作用 ,并与Pgp抑制剂———奎尼定进行了比较。免疫组化法检测P 糖蛋白表达水... 用免疫组化法和流式细胞仪对肿瘤细胞系MCF 7和MCF 7 Adr的P 糖蛋白表达水平进行定性定量研究。用噻唑蓝比色法 (MTT)研究茶多酚的细胞毒性及其对耐药性的逆转作用 ,并与Pgp抑制剂———奎尼定进行了比较。免疫组化法检测P 糖蛋白表达水平 ,MCF 7 Adr呈强阳性 ,而MCF 7呈阴性 ;流式细胞仪定量检测结果MCF 7 Adr细胞系细胞阳性率为 15 % ,MCF 7细胞系细胞阳性率为 1 8%。MCF 7 Adr细胞系存在Pgp的过度表达。噻唑蓝比色法 (MTT)检测结果茶多酚、奎尼定的加入对阿霉素对MCF 7的细胞毒性几乎没有影响。而茶多酚、奎尼定的加入明显增加了MCF 7 Adr对阿霉素的敏感性。免疫组化与流式细胞技术结合 ,可用于肿瘤细胞系P 糖蛋白表达水平的定性定量检测。茶多酚不仅具有一定的抗癌活性 ,还与奎尼定一样具有多药耐药性逆转作用。 展开更多
关键词 免疫组化 流式细胞仪 茶多酚 P-糖蛋白 肿瘤细胞 多药耐药性 逆转作用
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脑膜癌病的临床与病理特点 被引量:26
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作者 朱海青 王春宁 +3 位作者 沈静 周金宝 张巧全 梁为俭 《临床神经病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第5期355-357,共3页
目的探讨脑膜癌病的临床与病理特点。方法回顾性分析142例脑膜癌病患者的临床及脑脊液(CSF)细胞学资料和免疫细胞化学标记结果。结果本组患者临床特点:头痛123例(86.62%),头晕19例(13.38%),发热26例(18.31%),视物模糊10例(7.04%)。CSF... 目的探讨脑膜癌病的临床与病理特点。方法回顾性分析142例脑膜癌病患者的临床及脑脊液(CSF)细胞学资料和免疫细胞化学标记结果。结果本组患者临床特点:头痛123例(86.62%),头晕19例(13.38%),发热26例(18.31%),视物模糊10例(7.04%)。CSF检查及免疫标记:全部患者CSF中均发现癌细胞;癌细胞上皮膜抗原(EMA)(+),细胞角蛋白(CK)(+),CD14(-),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)(-)。其中99例(69.72%)CK低分子(+)、高分子(-),诊断为转移性腺癌;33例(23.24%)CK高分子(+)、CK低分子(-),诊断为转移性鳞癌;10例(7.04%)CK高分子(+)、CK低分子(+),考虑为腺鳞癌。105例找到原发灶,其中67例(47.18%)确诊为肺癌;23例(16.20%)在消化道内找到原发灶;9例(6.34%)为乳腺癌;子宫内膜癌、卵巢癌、肝癌各1例。另有37例(26.06%)未找到原发灶。诊断明确的患者中,15例失访,另90例中有82例(91.11%)于确诊后3~14个月死亡。未找到原发灶的患者中,有6例失访,另31例中有28例(90.32%)在确诊后2~13个月内死亡。结论脑膜癌病患者以头痛、头晕为主要临床表现,并可伴有发热及视物模糊。CSF细胞学检查是诊断脑膜癌病的主要依据,通过免疫细胞化学的方法,可以确定转移癌细胞。脑膜癌病患者预后较差。 展开更多
关键词 脑膜癌病 脑脊液 免疫细胞化学
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Identification,localization and morphology of APUD cells in gastroenteropancreatic system of stomach-containing teleosts 被引量:20
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作者 Qian Sheng Pan Zhi Ping Fang Feng Jie Huang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2000年第6期842-847,共6页
AIM To identify the type localization andmorphology of APUD endocrine cells in thegastroenteropancreatic(GEP)system ofstomach-containing teleosts,and study APUDendocrine system in the stomach,intestine andpancreas of ... AIM To identify the type localization andmorphology of APUD endocrine cells in thegastroenteropancreatic(GEP)system ofstomach-containing teleosts,and study APUDendocrine system in the stomach,intestine andpancreas of fish species.METHODS Two kinds of immunocytochemical(ICC)techniques of the streptavidin biotin-peroxidase complex(SABC)and streptavidin-peroxidase(S-P)method were used.Theidentification,localization and morphology ofAPUD endocrine cells scattered in the mucosa ofdigestive tract,intermuscular nerve plexus andglandular body of northern snakehead(Channaargus),ricefield eel(Monopterus albus),yellow catfish(Pelteobagrus fulvidraco),mandarinfish(Siniperca chuatsi),largemouthbass(Micropterus salmoides),orientalsheatfish(Silurus asotus),freshwater pomfret(Colossoma brachypomum)and nile tilapia(Tilapia nilotica)were investigated with 8 kindsof antisera.RESULTS The positive reaction of 5-hydroxytryptamine(5-HT)immunoreactiveendocrine(IRE)cells was found in the digestive tract and glandular body of 8 fish species indifferent degree.Only a few gastrin(GAS)-IREcells were seen in C.argus,M.albus and P.fulvidraco.Glucagon(GLU)-IRE cells were notfound in the digestive tract and glandular bodybut existed in pancreatic island of most fishspecies.The positive reaction of growthhormone(GH)-IRE cells was found only inpancreatic island of S.Chuatsi and S.Asotus,no positive reaction in the other 6 fish species.Somatostatin(SOM)-,calcitonin(CAL)-,neurofilament(NF)-and insulin(INS)-IRE cellsin the stomach,intestine and pancreas of 8 kindsof fish were different in distribution and types.The distribution of all 8 APUD cells was the mostin gastrointestinal epithelium mucosa and then indigestive glands.The positive reaction of SOM-and 5-HT-IRE cells was found in intermuscularnerve plexus of intestine of P.fulvidraco andS.chuatsi.Only GH-IRE cells were denselyscattered in the pancreatic islands of S.chuatsiand S.asotus,and odd distribution in thepancreas of S.asotus,SOM-IRE cells weredistributed in the pancreatic islands of S.aso 展开更多
关键词 stomach-containing TELEOSTS gastroenteropancreatic SYSTEM APUD cells immunocytochemistry
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PI3K/AKT信号转导通路在肝癌细胞生长和黏附中的作用 被引量:21
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作者 富翠芹 王沁 +1 位作者 尹蓉 武令启 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第14期1493-1498,共6页
目的:探讨PI3K/AKT(磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B)信号转导通路在人肝癌细胞株SMMC-7221生长和黏附中的作用机制.方法:应用LY294002作用于SMMC-7221细胞,并设对照组和实验组(LY294002:5、10、20、40μmol/L),MTT法检测LY294002作用24、4... 目的:探讨PI3K/AKT(磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B)信号转导通路在人肝癌细胞株SMMC-7221生长和黏附中的作用机制.方法:应用LY294002作用于SMMC-7221细胞,并设对照组和实验组(LY294002:5、10、20、40μmol/L),MTT法检测LY294002作用24、48、72、96h后,对SMMC-7221细胞增殖的影响;采用肿瘤细胞-基质黏附实验检测对照组和干预组SMMC-7221黏附能力的变化;流式细胞仪检测肝癌细胞黏附分子CD44s表达情况;细胞免疫化学S-P法检测SMMC-7221细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD44V6蛋白表达.结果:LY294002对SMMC-7221细胞的增殖有抑制作用,呈剂量和时间依赖性;5、10mol/L的LY294002作用于肝癌细胞后与对照组相比CD44s,VEGF,CD44V6蛋白表达下降(CD44s:42.84%±6.35%,20.21%±4.5%vs89.23%±3.91%,P<0.01;VEGF:103.11±18.60,68.99±15.99vs137.84±22.50,P<0.01;CD44V6:47.33±6.15,33.09±5.23vs61.36±7.39,P<0.01);5、10μmol/L的LY294002干预后与对照组相比SMMC-7221黏附能力下降(0.498±0.024,0.407±0.029vs0.616±0.080,P<0.01).结论:阻断PI3K/AKT信号传导通路,肝癌细胞生长受到抑制、黏附能力下降.LY294002抑制肝癌细胞黏附力的作用机制与通过降低CD44V6、CD44s和VEGF水平有关. 展开更多
关键词 PI3K/AKT信号转导通路 LY294002 SMMC-7221 血管内皮生长因子 CD44S CD44V6 MTT法 流式细胞术 细胞免疫化学
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