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免疫磁纳米粒子对肠炎沙门氏菌的富集分离 被引量：3
1
作者 胡雨欣 郑舒 +2 位作者 何早 罗芳 刘霞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第13期162-167,共6页
采用化学共沉淀法制备了羧基化磁纳米粒子,分别对磁纳米粒子-沙门氏菌多克隆抗体复合物(免疫磁纳米粒子)的偶合条件和免疫磁纳米粒子富集分离肠炎沙门氏菌的条件进行了优化,为肠炎沙门氏菌的富集分离和检测提供一种更为快捷、高效的方... 采用化学共沉淀法制备了羧基化磁纳米粒子,分别对磁纳米粒子-沙门氏菌多克隆抗体复合物(免疫磁纳米粒子)的偶合条件和免疫磁纳米粒子富集分离肠炎沙门氏菌的条件进行了优化,为肠炎沙门氏菌的富集分离和检测提供一种更为快捷、高效的方法。结果表明,当51.7μg/m L羧基化磁纳米粒子与碳二亚胺/N-羟基丁二酰亚胺(0.4 mol/L/0.1 mol/L)、1.0 mg/m L的多克隆抗体的体积比为1∶2∶2时,37℃水浴加热40 min,两者的偶合效果最佳。应用上述优化条件制备的免疫磁纳米粒子吸附104 CFU/m L肠炎沙门氏菌,当两者的体积比为4∶5,孵育时间为40 min时,免疫磁纳米粒子对肠炎沙门氏菌的吸附效率可达到94.36%。 展开更多
关键词 免疫磁纳米粒子 肠炎沙门氏菌 富集分离
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金黄色葡萄球菌B型肠毒素的免疫磁分离间接竞争化学发光检测法 被引量：1
2
作者 田赛 霍冰洋 +2 位作者 宁保安 冯炘 高志贤 《职业与健康》 CAS 2018年第12期1620-1625,共6页
目的建立快速、简便、灵敏度高的免疫磁分离(Immune magnetic separation,IMS)间接竞争化学发光法(Chemiluminescence,CL)检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)。方法首先,将SEB连接磁球,通过酶联免疫吸附剂... 目的建立快速、简便、灵敏度高的免疫磁分离(Immune magnetic separation,IMS)间接竞争化学发光法(Chemiluminescence,CL)检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)。方法首先,将SEB连接磁球,通过酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分析确定单克隆抗体的最佳稀释度,然后对不同包被缓冲液、单抗与游离SEB反应时间、单抗与磁球上SEB反应时间、单抗与酶标抗体反应时间及鲁米诺发光系统最佳检测时间进行优化,最后用检测灵敏度、加标回收率以及特异性对该实验方法进行评价。结果结果表明,抗SEB单克隆抗体的最佳稀释浓度为0.82μg/ml,使用浓度为2%的脱脂乳粉作为最佳封闭液,酶标二抗稀释度为1∶4 000,单抗与SEB反应时间、单抗与磁球反应时间、单抗与酶标抗体反应时间、化学发光催化最佳检测时间分别是20、30、15、5 min。该方法的线性回归方程为y=-0.161 6log5x+0.826 6,R2=0.992 4;检出限为4 ng/ml,用本地超市购买的脱脂牛奶、低脂牛奶和鲜牛奶进行加标回收,回收率在89.45%~110.5%之间。结论成功构建了基于免疫磁分离的间接竞争化学发光(Immune magnetic separation chemiluminescence,IMS-CL)检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素的方法。 展开更多
关键词 免疫磁分离 间接竞争 化学发光 金黄色葡萄球菌B型肠毒素
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三种分离人外周血单核细胞方法的比较 被引量：4
3
作者 陈丹 王小东 +6 位作者 童静植 丁文 孙科 何景华 强兆艳 李光 康毅 《天津医科大学学报》 2014年第6期483-485,共3页
目的:用3种方法从人外周血分离单核细胞,比较细胞纯度、得率、实验成本及所需时间,选择最适宜的分离方法。方法:用密度梯度离心法获得外周血的单个核细胞,分别用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法进一步分离单核细胞。经CD14抗体标记,... 目的:用3种方法从人外周血分离单核细胞,比较细胞纯度、得率、实验成本及所需时间,选择最适宜的分离方法。方法:用密度梯度离心法获得外周血的单个核细胞,分别用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法进一步分离单核细胞。经CD14抗体标记,用流式细胞术检测细胞纯度,计算细胞得率、实验成本及所需时间。结果:用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法分离单核细胞,细胞纯度分别为18.8%、80%和73.4%;细胞得率为5%、11%和7.5%;每获得2×107个单核细胞,实验成本约500元、1 500元和2 100元,实验耗时约6 h、6 h和10 h。结论:免疫磁珠法是最适宜的分离人外周血单核细胞的方法,具有细胞纯度与得率较高,实验成本较低,耗时较短的优点。 展开更多
关键词 单核细胞 贴壁法 免疫磁珠 流式细胞术
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大鼠肝再生中8种肝脏细胞的细胞免疫相关基因转录谱预示的生理活动 被引量：4
4
作者 王磊 高静 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期302-306,共5页
目的了解大鼠肝再生中8种肝脏细胞的细胞免疫相关基因转录谱,及其预示的细胞免疫活动。方法用Percoll密度梯度离心结合免疫磁珠分选方法分离大鼠再生肝的肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞... 目的了解大鼠肝再生中8种肝脏细胞的细胞免疫相关基因转录谱,及其预示的细胞免疫活动。方法用Percoll密度梯度离心结合免疫磁珠分选方法分离大鼠再生肝的肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞和树突状细胞等8种细胞,用RatGenome2302.0芯片等检测细胞免疫相关基因在上述细胞中表达变化,用Cluster等软件及生物信息学和系统学生物等方法分析它们的表达模式及预示的生理活动。结果大鼠肝再生中40个细胞免疫相关基因发生了表达变化,相应细胞的基因数为19、19、9、19、19、21、22、21。肝再生启动阶段和进展阶段抗原肽-MHC复合物形成,NF-κB激酶活性和IL-2等细胞因子合成增加,终止阶段NF-κB促进细胞分化活动和caspase诱导T细胞凋亡活动增强。结论大鼠肝再生与细胞免疫相关。 展开更多
关键词 肝再生 Genome 230 2.0芯片 基因转录谱 细胞免疫 免疫磁珠分选 大鼠
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大鼠肝再生中8种肝脏细胞的凝血反应相关基因转录谱预示的生理活动 被引量：1
5
作者 崔胜男 高静 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期313-317,共5页
目的了解大鼠肝再生中8种肝脏细胞的凝血反应相关基因转录谱及其预示的生理活动。方法大鼠再生肝8种细胞的分离,基因表达变化检测,预示的生理活动分析用Cluster等软件及生物信息学和系统生物等方法进行,用MicrosoftExcel等软件分析基因... 目的了解大鼠肝再生中8种肝脏细胞的凝血反应相关基因转录谱及其预示的生理活动。方法大鼠再生肝8种细胞的分离,基因表达变化检测,预示的生理活动分析用Cluster等软件及生物信息学和系统生物等方法进行,用MicrosoftExcel等软件分析基因的表达模式。结果40个参与凝血反应的基因与肝再生相关,肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞的相应基因数为13、31、12、33、32、9、34、33。serpine1、a2m在上述8种细胞,vwf、klkb1在除库普弗细胞之外的7种细胞,其他基因在两种或两种以上细胞中发生有意义表达变化。上述基因转录谱预示,肝再生启动和进展阶段激肽释放酶和凝血酶原合成,凝血酶形成等活动增强。终止阶段纤维蛋白单体形成纤维蛋白聚合体等活动增强。结论大鼠肝再生与凝血反应密切相关。 展开更多
关键词 肝再生 Genome 230 2.0芯片 基因表达谱分析 凝血反应 免疫磁珠分选 大鼠
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胚胎造血干Sca-1^+细胞向肝细胞分化的研究 被引量：1
6
作者 缪辉来 张晟晃 +2 位作者 陈念平 陈明 郑淑华 《广东医学院学报》 2007年第6期605-608,613,共5页
目的探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-1^+)细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免... 目的探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-1^+)细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免疫组织化学法检测AFP和CK8/18蛋白水平的表达,以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能。结果免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞能达到(85.57±1.66)%的纯度(P<0.01),对分离前后细胞活力的影响小(P<0.05)。随着诱导分化时间延长,细胞形态明显向肝细胞变化,AFP表达消失、CK8/18蛋白表达升高,ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高,且细胞糖原染色和尿素合成功能增强,逐渐向成熟肝细胞转化。结论免疫磁性分离法能够分离出较高纯度的胚胎造血干Sca-1^+细胞,并能够向肝脏细胞分化。 展开更多
关键词 SCA-1^+细胞 肝细胞 免疫磁性分离法 鉴定 分化
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应用斑点免疫层析、免疫磁珠法快速分离大肠杆菌O_(157)∶H_7 被引量：8
7
作者 庞惠勇 张玉玲 +2 位作者 田锦萍 晏梅 张慧 《现代预防医学》 CAS 2002年第3期347-349,共3页
目的 :探讨斑点免疫层析法 (DICA)和免疫磁珠法 (IMS)在分离大肠杆菌 O1 57∶ H7(E.Coli O1 57∶ H7)上的快速性和敏感性。方法 :先用 DICA法对腹泻病人、家禽 (畜 )粪便增菌液进行快速筛检 ,再用 IMS法对所有标本做进一步检测 ,并和直... 目的 :探讨斑点免疫层析法 (DICA)和免疫磁珠法 (IMS)在分离大肠杆菌 O1 57∶ H7(E.Coli O1 57∶ H7)上的快速性和敏感性。方法 :先用 DICA法对腹泻病人、家禽 (畜 )粪便增菌液进行快速筛检 ,再用 IMS法对所有标本做进一步检测 ,并和直接分离法作对照。结果 :DICA法阳性率为 10 .34% (43/ 4 16 ) ,IMS法检出率 1.92 % (8/ 4 16 ) ,DICA法假阳性率为 8.4 1% (35 / 4 16 ) ,无一例 DICA法假阴性 ,而直接法检出率为 0 .2 4 % (1/ 4 16 ) ,IMS法比直接法检出率有显著性提高 (P<0 .0 5 )。结论 :两法结合应用于检测 E.Coli O1 57∶ H7具有快速、省时、灵敏度高等特点 ,是开展 E.Coli O1 57∶ H7病原学检索值得推广应用的方法。 展开更多
关键词 斑点免疫层析法 免疫磁珠法 快速分离 大肠杆菌O157:H7
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