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微小RNA-122通过调控沉默信息调节因子1的表达抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖 被引量：2
1
作者 底旺 冀宏 +1 位作者 李清怀 张霖雷 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2167-2169,共3页
目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中微小RNA(miRNA,miR)-122对组蛋白脱乙酰酶沉默信息调节因子1(SIRT1)基因的调控作用,及对甲状腺乳头状癌细胞增殖能力的影响.方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)观察甲状腺乳头状癌及癌旁组织中m... 目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中微小RNA(miRNA,miR)-122对组蛋白脱乙酰酶沉默信息调节因子1(SIRT1)基因的调控作用,及对甲状腺乳头状癌细胞增殖能力的影响.方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)观察甲状腺乳头状癌及癌旁组织中miR-122的表达并分析其与SIRT1表达的相关性.将miR-122 mimics转染人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1后,应用双荧光素酶报告基因实验观察miR-122对SIRT1基因的调控作用;应用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验观察miR-122对甲状腺癌细胞增殖的影响.同时,将过表达SIRT1质粒共转染至TPC-1细胞,然后应用CCK-8法检测miR-122和SIRT1表达变化对甲状腺乳头状癌细胞增殖能力的影响.应用GraphPad Prism 7.0统计软件分析,相关性分析采用Spearman等级相关分析,两样本均数间的比较采用Student't检验.结果在人甲状腺乳头状癌组织中miR-122的表达水平(1.20±0.15)明显低于癌旁组织(3.06±0.26),差异有统计学意义(t=5.972,P<0.01).相关性分析结果表明miR-122与SIRT1 mRNA的表达呈负相关(r=-0.621,P<0.01).miR-122 mimics转染组SIRT1相对荧光素酶活性与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(t=17.730,P<0.01).miR-122 mimics组细胞增殖能力较对照组显著降低,差异有统计学意义(t=3.991,P<0.01).而共转染SIRT1过表达质粒后,miR-122 mimics对甲状腺乳头状癌细胞的增殖能力的抑制出现逆转.结论miR-122可抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与靶向抑制SIRT1的表达有关. 展开更多
关键词 微小RNA-122 沉默信息调节因子1 甲状腺乳头状癌 增殖
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过表达沉默信息调节因子1对心脏移植小鼠心肌的保护作用及其机制 被引量：1
2
作者 王圣 程兆云 +3 位作者 陈现杰 周胜凯 赵亮 杨雷一 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期884-887,共4页
目的探讨过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对心脏移植小鼠心肌保护机制。方法30只BALB/c随机分为对照组和实验组,实验组小鼠经尾静脉注射心肌特异性表达的SIRT1-Flag腺相关病毒,对照组小鼠经尾静脉对照腺相关病毒。在表达4周后,分别以两... 目的探讨过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对心脏移植小鼠心肌保护机制。方法30只BALB/c随机分为对照组和实验组,实验组小鼠经尾静脉注射心肌特异性表达的SIRT1-Flag腺相关病毒,对照组小鼠经尾静脉对照腺相关病毒。在表达4周后,分别以两组小鼠心脏作为供体,C57BL/6作为受体,采用Cuff血管吻合术进行异位心脏移植。观察术后移植心脏的成活率。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析两组受体小鼠外周血炎症因子的水平;采用生化反应法检测外周血超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法分析心肌细胞凋亡水平,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析心肌组织凋亡蛋白的表达水平。结果与对照组小鼠心脏存活时间[(7.41±2.14)d]比较,实验组小鼠心脏存活时间[(12.46±3.14)d]明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组外周血白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)[(189.10±15.39)、(209.44±10.98)、(59.21±9.90)mmol/L]比较,实验组小鼠外周血IL-1β、IL-6和TNF-α[(55.12±11.32)、(41.32±9.21)、(29.44±7.80)mmol/L]显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组小鼠外周SOD和MDA水平[(6.19±1.20)、(3.44±0.76)mmol/L]比较,实验组小鼠外周血SOD[(3.09±0.89)U/ml]显著升高,MDA[(2.01±0.45)μmol/L]水平显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组心肌细胞凋亡指数(48.32±9.12)比较,实验组小鼠心肌凋亡指数(10.45±5.59)显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组小鼠半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)表达水平比较,实验组小鼠心肌Caspase-3表达显著下调,而bcl-2表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在心肌组织过表达SIRT1可明显降低移植心脏炎症、氧化应激和凋亡水平,延长移植心脏存活时间。 展开更多
关键词 沉默信息调节因子1 心脏移植 炎症 氧化应激 凋亡
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