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中药DNA条形码鉴定体系及研究方向 被引量:210
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作者 陈士林 庞晓慧 +2 位作者 姚辉 韩建萍 罗焜 《世界科学技术-中医药现代化》 2011年第5期747-754,共8页
近年来,中药DNA条形码分子鉴定得到快速发展,加快了中药鉴定标准化的进程。通过中药DNA条形码鉴定研究,我国首次提出将ITS2序列作为药用植物鉴定的通用条形码序列,并建立以ITS2为核心、psbA-trnH为补充序列的植物类药材DNA条形码鉴定体... 近年来,中药DNA条形码分子鉴定得到快速发展,加快了中药鉴定标准化的进程。通过中药DNA条形码鉴定研究,我国首次提出将ITS2序列作为药用植物鉴定的通用条形码序列,并建立以ITS2为核心、psbA-trnH为补充序列的植物类药材DNA条形码鉴定体系和以COI序列为核心、ITS2为辅助序列的动物类药材DNA条形码鉴定体系,为中药DNA条形码鉴定的发展奠定了坚实基础。本文结合课题组研究工作就构建中药DNA条形码鉴定体系进行了综述,包括中药DNA条形码序列的筛选确定、中药DNA条形码鉴定流程和中药DNA条形码鉴定数据库系统构建,并介绍了中药DNA条形码鉴定的研究方向。 展开更多
关键词 中药 DNA条形码 its2 COI 鉴定
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重楼属药用植物DNA条形码鉴定研究 被引量:153
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作者 朱英杰 陈士林 +4 位作者 姚辉 谭睿 宋经元 罗焜 鲁静 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期376-382,共7页
为评价DNA条形码候选序列对重楼属药用植物的鉴定作用,探讨重楼属药用植物鉴定新方法,本研究对重楼属11个物种17份样品的psbA-trnH、rpoB、rpoC1、rbcL、matK和核ITS2序列进行PCR扩增和测序,比较各序列扩增和测序效率、种内和种间变异,... 为评价DNA条形码候选序列对重楼属药用植物的鉴定作用,探讨重楼属药用植物鉴定新方法,本研究对重楼属11个物种17份样品的psbA-trnH、rpoB、rpoC1、rbcL、matK和核ITS2序列进行PCR扩增和测序,比较各序列扩增和测序效率、种内和种间变异,进行barcoding gap分析,采用BLAST1和Nearest Distance方法评价不同序列的鉴定能力。结果显示,ITS2序列在所研究的重楼属药用植物中的扩增和测序效率均为100%,其种内种间变异、barcoding gap与其他DNA条形码候选序列相比具有明显的优势,ITS2序列在重楼属中的鉴定成功率达到100%,而生物条形码协会(CBOL)植物工作组推荐的matK和rbcL序列的鉴定成功率分别为52.9%和5.9%,二者联合鉴定能力没有提高,对于ITS2序列扩大至29个物种67份样品依然具有100%的鉴定成功率。实验结果表明,ITS2序列能够准确鉴定重楼属药用植物,可以作为潜在的药用植物通用条形码序列。 展开更多
关键词 重楼属 DNA条形码 its2 药用植物 鉴定
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基于芸香科的植物通用DNA条形码研究 被引量:99
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作者 罗焜 陈士林 +8 位作者 陈科力 宋经元 姚辉 马新业 朱英杰 庞晓慧 余华 李西文 刘震 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第4期342-351,共10页
植物DNA条形码研究是近10年来进展最迅速的学科之一,其通用序列的筛选一直是该领域研究的热点问题.2009年,生命条形码联盟植物工作组推荐rbcL+matK组成复合序列作为植物通用条形码,但其研究对象中近缘属、种较少,且物种水平鉴定成功率仅... 植物DNA条形码研究是近10年来进展最迅速的学科之一,其通用序列的筛选一直是该领域研究的热点问题.2009年,生命条形码联盟植物工作组推荐rbcL+matK组成复合序列作为植物通用条形码,但其研究对象中近缘属、种较少,且物种水平鉴定成功率仅为72%,所以仍在进行验证和新序列的研究工作.本研究选取nrDNAITS2序列,利用其具有Ⅱ级结构的特性、通过不同物种类型模型判定全长,将其和目前热点候选序列(matK,rbcL,psbA-trnH,rpoC1,ycf5)及nrDNAITS序列针对芸香科72属192种300个样本进行比较,试图在同一科属下更多近缘种存在时,真实判定候选序列的鉴定能力.结果表明,自行设计引物的ITS2序列具有较好的PCR扩增和测序成功率,在所考察的候选序列中具有最大的种间变异和较小的种内变异,且两者存在极显著差异,同时物种鉴定成功率最高,各评价指标均优于其他候选序列.证实ITS2序列在单一科属内的"高效性",故推荐其作为植物DNA条形码通用序列之一. 展开更多
关键词 DNA条形码 its2 芸香科 鉴定
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多基原药材秦艽ITS2条形码鉴定研究 被引量:75
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作者 罗焜 马培 +6 位作者 姚辉 辛天怡 胡燕 郑司浩 黄林芳 刘军 宋经元 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1710-1717,共8页
DNA条形码技术的快速发展将促进我国中药材的质量控制和标准化建设,是国际生物分类和鉴定研究中引人注目的新方向,但目前为止该技术相关报道多采用中药材基原植物叶片进行鉴定研究,直接应用于中药材鉴定较少,业内广泛关注的采用DNA条形... DNA条形码技术的快速发展将促进我国中药材的质量控制和标准化建设,是国际生物分类和鉴定研究中引人注目的新方向,但目前为止该技术相关报道多采用中药材基原植物叶片进行鉴定研究,直接应用于中药材鉴定较少,业内广泛关注的采用DNA条形码技术鉴定中药材过程涉及的①如何从根茎类中药材中提取DNA;②不同产地样本种内变异情况;③采用DNA条形码鉴定中药材时的稳定性和准确性等研究报道不足。在此背景下,本文选取多基原中药材秦艽作为研究对象,广泛收集其主产区不同基原和其常见混伪品及其近缘种共86个样品,改良传统DNA试剂盒提取方法,对比植物DNA条形码热点候选序列ITS(internal transcribedspacer),psbA-trnH,matK,rbcL和ITS2优劣,结果显示改良后的试剂盒法可使秦艽药材DNA全部提取成功,基于ITS2序列100%成功鉴定秦艽药材及其混伪品,同时基于本研究建立的鉴定流程成功将药店购买的秦艽药材样品鉴定到基原物种。 展开更多
关键词 秦艽药材 its2 物种鉴定 稳定性 准确性
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中药材DNA条形码鉴定研究进展 被引量:70
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作者 辛天怡 雷美艳 宋经元 《中国现代中药》 CAS 2015年第2期170-176,184,共8页
DNA条形码技术给中药鉴定学发展带来新的机遇,中药材DNA条形码鉴定数据库及中草药DNA条形码生物鉴定体系的创建有利于推进中药鉴定标准化和国际化。中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则已纳入《中华人民共和国药典》2010版第三增补本,为... DNA条形码技术给中药鉴定学发展带来新的机遇,中药材DNA条形码鉴定数据库及中草药DNA条形码生物鉴定体系的创建有利于推进中药鉴定标准化和国际化。中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则已纳入《中华人民共和国药典》2010版第三增补本,为中药材基原物种鉴定提供强有力的科技支撑,将在中药材及中成药流通监管、道地药材鉴别、保健食品和食品质量安全控制等领域发挥重要作用。将中药材DNA条形码分子鉴定法与中国药典规定的其他鉴别方法相结合,能够对药品质量进行综合评价与有效监控。 展开更多
关键词 中药材 DNA条形码 鉴定 its2 PSBA-TRNH COI
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中药材二维DNA条形码流通监管体系研究 被引量:61
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作者 辛天怡 李西文 +3 位作者 姚辉 韩建萍 宋经元 陈士林 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第7期695-702,共8页
中药材品种复杂混乱给中药材流通监管造成不便,加强中药材及饮片质量监管、保证公众用药安全备受关注.本研究将二维DNA条形码技术应用于中药材流通监管领域,建立中药材二维DNA条形码流通监管体系.该体系包括DNA条形码序列获得与DNA条形... 中药材品种复杂混乱给中药材流通监管造成不便,加强中药材及饮片质量监管、保证公众用药安全备受关注.本研究将二维DNA条形码技术应用于中药材流通监管领域,建立中药材二维DNA条形码流通监管体系.该体系包括DNA条形码序列获得与DNA条形码信息跨平台转换两大部分内容,以亚麻子、黑芝麻、火麻仁、蓖麻子和苘麻子5种药材共计109份样本为例研究建立该体系:依照中药材DNA条形码分子鉴定法获得待检样本DNA条形码序列;基于开源代码PHP QR Code的编码方式对实验所得DNA条形码序列进行编码,转换成二维码图片;使用移动终端扫描识读该二维码信息,并通过网页浏览器提交至中药材DNA条形码数据库获知鉴定结果.将二维码技术与DNA条形码技术相结合,为每个药材基原物种提供标准二维DNA条形码,有利于DNA条形码信息在不同平台间转换,为二维DNA条形码技术在实际流通监管工作中的应用提供理论基础,能有效实现对中药材流通的数字化监管,推动中药材流通监管现代化、国际化进程. 展开更多
关键词 DNA条形码 二维码 中药材流通监管 its2
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5种习用柴胡的ITS序列鉴别 被引量:33
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作者 武莹 刘春生 +1 位作者 刘玉法 阎玉凝 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期732-734,共3页
目的:用PCR扩增方法测定5种常用柴胡的ITS序列,为柴胡的分子鉴定提供依据。方法:分别从5种柴胡的叶片中提取总DNA,以核基因组通用引物进行扩增,扩增产物经纯化后,用PCR产物直接测序。结果:各样品的ITS1长度为214~220bp,ITS2长度为230~... 目的:用PCR扩增方法测定5种常用柴胡的ITS序列,为柴胡的分子鉴定提供依据。方法:分别从5种柴胡的叶片中提取总DNA,以核基因组通用引物进行扩增,扩增产物经纯化后,用PCR产物直接测序。结果:各样品的ITS1长度为214~220bp,ITS2长度为230~231bp。5种柴胡的ITS序列分别有多个特异性信息位点。结论:ITS序列可以作为柴胡分子鉴定的依据。 展开更多
关键词 its序列 柴胡 鉴别 分子鉴定 PCR产物 扩增方法 总DNA 通用引物 扩增产物 直接测序 its1 its2 基因组 性信息 依据 长度
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不同花纹文蛤(Meretrix meretrix)的ITS2分析 被引量:28
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作者 李太武 张安国 +4 位作者 苏秀榕 李成华 刘保忠 林志华 柴雪良 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期132-137,共6页
采用分子生物学方法,进行了江苏和广西两个地区不同花纹文蛤群体的核糖体DNA转录间隔区(ITS2)的序列分析研究。结果表明,广西的文蛤群体和江苏的群体相比较,仅发现江苏群体在333—336bp处发生了缺失,江苏群体内不同花纹文蛤个体间的ITS... 采用分子生物学方法,进行了江苏和广西两个地区不同花纹文蛤群体的核糖体DNA转录间隔区(ITS2)的序列分析研究。结果表明,广西的文蛤群体和江苏的群体相比较,仅发现江苏群体在333—336bp处发生了缺失,江苏群体内不同花纹文蛤个体间的ITS2也发生了变化。聚类分析结果证实了序列分析结果,广西文蛤群体和江苏文蛤群体间发生了遗传变异,江苏文蛤群体内部也发生了遗传分化。 展开更多
关键词 文蛤 花纹 its2
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忍冬科药用植物DNA条形码通用序列的筛选 被引量:31
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作者 刘震 陈科力 +2 位作者 罗焜 潘宏林 陈士林 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期2527-2532,共6页
目的:从4条DNA片段(psbA-trnH,matK,rbcL,和ITS2)中筛选可用于忍冬科药用植物鉴定的DNA条形码通用序列。方法:通过比较各序列的PCR扩增成功率、测序效率、种内和种间变异、barcoding gap和鉴定成功率等指标评价不同序列在忍冬科植物中... 目的:从4条DNA片段(psbA-trnH,matK,rbcL,和ITS2)中筛选可用于忍冬科药用植物鉴定的DNA条形码通用序列。方法:通过比较各序列的PCR扩增成功率、测序效率、种内和种间变异、barcoding gap和鉴定成功率等指标评价不同序列在忍冬科植物中的鉴定能力。结果:对忍冬科13个属,33个物种,58个样本进行分析,ITS2序列在属水平上的鉴定成功率为100.0%,物种水平上的鉴定成功率为96.6%。结论:ITS2序列可以作为忍冬科植物的DNA条形码候选序列,同时推荐psbA-trnH序列作为ITS2序列的补充序列。 展开更多
关键词 DNA条形码 忍冬科 its2 PSBA-TRNH MATK RBCL
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Assessment of candidate plant DNA barcodes using the Rutaceae family 被引量:32
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作者 LUO Kun1,2,CHEN ShiLin1,CHEN KeLi2,SONG JingYuan1,YAO Hui1,MA XinYe1,ZHU YingJie3,PANG XiaoHui1,YU Hua1,LI XiWen1,4 & LIU Zhen2 1Institute of Medicinal Plant Development,Peking Union Medical College,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100193,China 2College of Pharmacy,Hubei University of Chinese Medicine,Wuhan 430061,China +1 位作者 3School of Bioscience and Engineering,Southwest Jiaotong University,Chengdu 610031,China 4Department of Chemistry,Tsinghua University,Beijing 100084,China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2010年第6期701-708,共8页
DNA barcoding is a rapidly developing frontier technology that is gaining worldwide attention.Here,seven regions (psbA-trnH,matK,ycf5,rpoC1,rbcL,ITS2,and ITS) with potential for use as DNA barcodes were tested for the... DNA barcoding is a rapidly developing frontier technology that is gaining worldwide attention.Here,seven regions (psbA-trnH,matK,ycf5,rpoC1,rbcL,ITS2,and ITS) with potential for use as DNA barcodes were tested for their ability to identify 300 samples of 192 species from 72 genera of the family Rutaceae.To evaluate each barcode’s utility for species authentication,PCR amplification efficiency,genetic divergence,and barcoding gaps were assessed.We found that the ITS2 region exhibited the highest inter-specific divergence,and that this was significantly higher than the intra-specific variation in the "DNA barcoding gap" assessment and Wilcoxon two-sample tests.The ITS2 locus had the highest identification efficiency among all tested regions.In a previous study,we found that ITS2 was able to discriminate a wide range of plant taxa,and here we confirmed that ITS2 was also able to discriminate a number of closely related species.Therefore,we propose that ITS2 is a promising candidate barcode for plant species identification. 展开更多
关键词 DNA BARCODING its2 RUTACEAE identification
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中华按蚊和嗜人按蚊rDNA内转录间隔2区序列差异 被引量:29
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作者 马雅军 瞿逢伊 +1 位作者 徐建农 郑哲民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期234-236,共3页
目的:比较中华按蚊和嗜人按蚊核糖体DNA(rDNA)内转录间隔2区(ITS2)序列差异。方法:通过对PCR扩增的rDNAITS2片段进行克隆测序,每种蚊测定3个克隆片段序列,比较其差异。结果:中华按蚊和嗜人按蚊的rD... 目的:比较中华按蚊和嗜人按蚊核糖体DNA(rDNA)内转录间隔2区(ITS2)序列差异。方法:通过对PCR扩增的rDNAITS2片段进行克隆测序,每种蚊测定3个克隆片段序列,比较其差异。结果:中华按蚊和嗜人按蚊的rDNAITS2序列长度分别为468和452bp,GC含量分别为44.87%和49.12%,两者序列差异为28.8%。 展开更多
关键词 中华按蚊 嗜人按蚊 DNA 核糖体 its2
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基于高通量测序的褐飞虱肠道微生物多样性分析 被引量:29
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作者 王天召 王正亮 +2 位作者 朱杭锋 王紫晔 俞晓平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期323-333,共11页
【目的】探明褐飞虱Nilaparvata lugens成虫肠道微生物群落结构和多样性。【方法】分离褐飞虱成虫完整肠道并提取总DNA,利用Illumina MiSeq(PE300)技术对其肠道细菌16S rRNA的V3-V4变异区和真菌ITS2序列进行测序,统计肠道微生物的操作... 【目的】探明褐飞虱Nilaparvata lugens成虫肠道微生物群落结构和多样性。【方法】分离褐飞虱成虫完整肠道并提取总DNA,利用Illumina MiSeq(PE300)技术对其肠道细菌16S rRNA的V3-V4变异区和真菌ITS2序列进行测序,统计肠道微生物的操作分类单元(operational taxonomic unit, OTU)数量,分析其物种组成、丰度及Alpha多样性。并通过qPCR技术验证随机挑选注释到的4种肠道菌的高通量测序数据的有效性。【结果】分别获得褐飞虱成虫肠道细菌16S rRNA和真菌ITS2优质序列32 395和24 986条,根据序列相似性进行聚类分析分别获得235和128个OTUs。其中,细菌共注释到7个门, 15个纲, 26个目, 45个科和73个属;真菌共鉴定到3个门, 9个纲, 12个目, 15个科和18个属。在门分类水平上,细菌以变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)为优势门类;真菌以子囊菌门(Ascomycota)为绝对优势菌门。在属分类水平上,细菌的优势属为不动杆菌属Acinetobacter以及紫单胞菌科(Porphyromonadaceae)未确定属和毛螺菌科(Lachnospiraceae)未确定属,其丰度分别为36.37%, 17.22%和15.01%;真菌的优势属为粪壳菌纲(Sordariomycetes)未确定属,丰度为95.77%。Alpha多样性分析结果显示,褐飞虱肠道细菌(真菌)的观测物种数、Chao1指数、Shannon指数和Simpson指数分别为235(128), 262.64(165.40), 3.90(0.91)和0.62(0.75)。4种肠道菌的qPCR结果显示高通量测序数据具有较高的有效性。【结论】褐飞虱成虫肠道细菌和真菌群落整体多样性比较丰富。研究结果为从共生微生物角度解析褐飞虱的环境适应性以及开发基于微生物防治的新技术等方面提供了依据。 展开更多
关键词 褐飞虱 肠道微生物 16S RRNA its2 高通量测序 细菌 真菌 物种多样性
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苏皖产大戟属药用植物rDNA的ITS序列分析 被引量:22
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作者 蒋继宏 孟娜 +2 位作者 曹小迎 周守标 戴传超 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期900-902,共3页
目的研究苏皖产大戟属内6种药用植物的ITS长度的变异,为探讨大戟属植物的系统演化关系和大戟属植物鉴定提供DNA分子证据.方法利用PCR技术对大戟属植物的rDNA ITS区碱基序列进行测定.结果这6种大戟属植物的ITS1的长度范围为255~262 bp,I... 目的研究苏皖产大戟属内6种药用植物的ITS长度的变异,为探讨大戟属植物的系统演化关系和大戟属植物鉴定提供DNA分子证据.方法利用PCR技术对大戟属植物的rDNA ITS区碱基序列进行测定.结果这6种大戟属植物的ITS1的长度范围为255~262 bp,ITS2的长度范围为214~236 bp.运用Mega2软件进行的系统分析得到大戟属内6种植物的系统进化树.这一分析结果与来自形态学的研究结果相吻合.结论此法可用于大戟属植物种间及真伪品鉴别. 展开更多
关键词 药用植物 its序列分析 rDNAits 大戟属植物 DNA分子 PCR技术 系统进化树 植物鉴定 碱基序列 its1 its2 系统分析 分析结果 伪品鉴别 长度 形态学
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基于ITS2序列的羌活及其混伪品的DNA条形码鉴定 被引量:28
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作者 孙稚颖 陈士林 +1 位作者 姚辉 宋经元 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期568-571,共4页
目的对羌活及其混伪品进行分子鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法利用PCR测序法,对样品进行核基因ITS2片段扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA4.0进行相关数据分析,并构建邻接(NJ)树。利用已建立的I... 目的对羌活及其混伪品进行分子鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法利用PCR测序法,对样品进行核基因ITS2片段扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA4.0进行相关数据分析,并构建邻接(NJ)树。利用已建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果羌活与宽叶羌活ITS2序列长度均为228 bp,二者种内平均K2P(Kimura-2-parameter)遗传距离均远远小于其与混伪品的种间平均K2P遗传距离;由所构建的系统聚类树图可以看出,羌活与宽叶羌活均表现出了单系性,而同时又与其他混伪品明显分开;比较ITS2二级结构发现,羌活基原植物与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以方便快捷地鉴别羌活及其混伪品,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据。 展开更多
关键词 羌活 DNA条形码 its2 分子鉴定 遗传距离
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DNA条形码序列对9种蒿属药用植物的鉴定 被引量:28
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作者 刘美子 宋经元 +3 位作者 罗焜 林余霖 刘萍 姚辉 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1393-1397,共5页
目的采用DNA条形码序列对9种常见的蒿属药用植物进行鉴定,为常见蒿属药用植物的鉴定提供分子依据。方法对9种常见蒿属药用植物的4条候选DNA条形码序列(ITS2、rbcL、matK、psbA-trnH)进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增和测序效率,应用B... 目的采用DNA条形码序列对9种常见的蒿属药用植物进行鉴定,为常见蒿属药用植物的鉴定提供分子依据。方法对9种常见蒿属药用植物的4条候选DNA条形码序列(ITS2、rbcL、matK、psbA-trnH)进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增和测序效率,应用BLAST1、Distance方法来评估各序列的鉴定效率。此外,基于MEGA5分析9种常见蒿属药用植物ITS2序列种间K2P遗传距离并构建NJ树。结果除matK外,其余3条片段的PCR扩增和测序效率均为100%,ITS2序列对9种蒿属药用植物的物种水平鉴定成功率最高,为100%,而psbA-trnH、rbcL、matK、matK+rbcL的鉴定成功率(BLAST1法)分别为83.3%、66.7%、54.5%、75%。通过ITS2序列的种间K2P遗传距离及NJ树均能将不同物种全部区分。结论 ITS2序列可以作为鉴定蒿属药用植物的潜在条形码。 展开更多
关键词 蒿属:DNA条形码 its2 PCR扩增 遗传距离
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葫芦科植物通用DNA条形码的筛选 被引量:26
16
作者 李妮 陈士林 +1 位作者 刘义梅 陈科力 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1396-1401,共6页
目的评价几个热点DNA条形码候选序列对葫芦科植物的鉴别能力。方法使用ITS2、rbcL、matK和psbA-trnH序列的通用引物对葫芦科植物进行PCR扩增和测序,通过比较各序列的扩增和测序成功率、种内和种间的变异、barcodinggap,并采取相似性探索... 目的评价几个热点DNA条形码候选序列对葫芦科植物的鉴别能力。方法使用ITS2、rbcL、matK和psbA-trnH序列的通用引物对葫芦科植物进行PCR扩增和测序,通过比较各序列的扩增和测序成功率、种内和种间的变异、barcodinggap,并采取相似性探索BLAST 1和最近距离Nearest Distance方法评价不同序列的鉴别能力。结果 ITS2序列对葫芦科33个属、90个物种、182个样本进行分析,其鉴定成功率较高,在属水平为100.0%,在物种水平为88.5%;psbA-trnH序列对201个样本进行分析,其鉴定成功率在属水平为93.0%,在物种水平为73.1%,但其可以补充部分ITS2不能分析的物种区域。结论 ITS2和psbA-trnH是适合葫芦科植物鉴别的一个较好的DNA条形码序列组合。 展开更多
关键词 DNA条形码 葫芦科 PSBA-TRNH MATK RBCL its2
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砂仁及其混淆品的ITS2序列鉴定 被引量:25
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作者 韩建萍 李美妮 +2 位作者 石林春 姚辉 宋经元 《环球中医药》 CAS 2011年第2期99-102,共4页
目的应用内转录第二间隔区(ITS2)序列及其二级结构对砂仁混淆品进行鉴定。方法应用CLUSTALX1.83软件进行序列比对,比对后的长度为252bp。用MEGA4.1计算种间、种内遗传距离,并构建系统进化树。结果 ITS2序列可以将砂仁的三个来源阳春砂Am... 目的应用内转录第二间隔区(ITS2)序列及其二级结构对砂仁混淆品进行鉴定。方法应用CLUSTALX1.83软件进行序列比对,比对后的长度为252bp。用MEGA4.1计算种间、种内遗传距离,并构建系统进化树。结果 ITS2序列可以将砂仁的三个来源阳春砂Amomum villosum、绿壳砂Amomum villosum var.xanthioides或海南砂Amomum longiligulare互相区分开,并与伪品艳山姜Alpinia zerumbet、山姜Alpinia japonica、草果Amomum tsao-ko及同属其它近缘种区分开。结论推荐ITS2作为砂仁及其伪品鉴定用条形码序列。 展开更多
关键词 砂仁 内转录第二间隔区 DNA条形码
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应用ITS2条形码鉴定中药材麻黄 被引量:25
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作者 庞晓慧 宋经元 +1 位作者 徐海滨 姚辉 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1118-1121,共4页
目的:应用ITS2条形码快速、准确地鉴定中药材麻黄,为其用药安全、有效提供保障。方法:提取麻黄药材及其同属密切相关种的DNA、扩增ITS2序列并测序,采用软件CodonCode Aligner V3.0对测序峰图进行校对拼接,并进行质量控制。应用MEGA5.0... 目的:应用ITS2条形码快速、准确地鉴定中药材麻黄,为其用药安全、有效提供保障。方法:提取麻黄药材及其同属密切相关种的DNA、扩增ITS2序列并测序,采用软件CodonCode Aligner V3.0对测序峰图进行校对拼接,并进行质量控制。应用MEGA5.0软件计算种内种间Kimura 2-parameter(K2P)遗传距离。应用相似性搜索法、最近距离法进行鉴定分析,并构建NJ系统聚类树直观反映鉴定结果。结果:麻黄药材基原物种种内K2P遗传距离分布于0~0.002,基原物种与其他密切相关种之间的K2P遗传距离分布于0.004~0.034;几种鉴定方法分析结果表明ITS2序列能将麻黄药材与其他密切相关种鉴别开。结论:ITS2条形码适用于鉴别中药材麻黄,进一步验证了DNA条形码技术鉴定中药材的有效性。 展开更多
关键词 DNA条形码 its2 麻黄
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党参药材及其混伪品的ITS/ITS2条形码鉴定研究 被引量:24
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作者 赵莎 辛天怡 +3 位作者 侯典云 庞晓慧 程睿旸 高建平 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2013年第3期421-428,共8页
为简便有效地鉴定党参药材及其混伪品并验证ITS/ITS2序列作为DNA条形码鉴定药材的稳定性和准确性,本研究选用党参药材及其混伪品作为研究对象,对33份药材样本提取基因组DNA,通过PCR扩增ITS序列,采用比对法、最小距离法对序列鉴定能力进... 为简便有效地鉴定党参药材及其混伪品并验证ITS/ITS2序列作为DNA条形码鉴定药材的稳定性和准确性,本研究选用党参药材及其混伪品作为研究对象,对33份药材样本提取基因组DNA,通过PCR扩增ITS序列,采用比对法、最小距离法对序列鉴定能力进行评估。通过序列比对,分析变异位点信息确定不同的单倍型并计算种内和种间K2P距离。ITS2序列采用基于隐马尔可夫模型的HMMer(Hidden Markov Model)注释方法获得。结果表明,党参药材3个基原物种ITS序列长度为654-655 bp,ITS2序列长度均为239 bp,ITS/ITS2序列种内平均K2P遗传距离均远小于其与混伪品的种间平均K2P遗传距离,因此ITS/ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别党参药材及其混伪品,为其鉴定提供新的技术手段。 展开更多
关键词 党参 its its2 分子鉴定 DNA 条形码
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ITS2条形码序列对茜草科黎药植物的鉴定 被引量:24
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作者 李栎 肖憬 +2 位作者 苏振宇 黄瑶 唐历波 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1814-1818,共5页
目的利用DNA条形码技术通过ITS2序列对海南茜草科黎药植物进行快速鉴定。方法对样本的核基因ITS2片段进行PCR扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,利用MEGA5.0软件进行数据分析,并构建聚类树。从ITS2网站上获得ITS2二级... 目的利用DNA条形码技术通过ITS2序列对海南茜草科黎药植物进行快速鉴定。方法对样本的核基因ITS2片段进行PCR扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,利用MEGA5.0软件进行数据分析,并构建聚类树。从ITS2网站上获得ITS2二级结构信息,利用TAXON DNA软件分析序列种内、种间变异并作barcoding gap分析。结果构建的系统树各个种不同样本均分别聚在一起,表现出单系性;各ITS2二级结构种内无明显差异;种间存在明显差异;基于ITS2序列的barcoding gap图显示种内变异和种间变异存在明显的barcoding gap。结论 ITS2序列可以作为DNA条形码对海南茜草科黎药植物进行快速鉴定。 展开更多
关键词 茜草科 黎药植物 its2 DNA条形码 二级结构
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