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利用CRISPR/Cas9系统敲除ITGB6基因对人结肠癌HT-29细胞生物学行为的影响 被引量：2
1
作者 薛栋 孙祺 +2 位作者 邬君义 佘军军 李凡妮 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期585-590,共6页
目的 探讨整合素β6(ITGB6)基因敲除后对人结肠癌HT-29细胞生物学行为的影响。方法 通过CRISPR/Cas9技术构建ITGB6敲除的HT-29细胞(ITGB6-KO)作为敲除组,选择空白转染细胞作为对照组。通过Western blot法检测ITGB6表达,通过MTT实验、平... 目的 探讨整合素β6(ITGB6)基因敲除后对人结肠癌HT-29细胞生物学行为的影响。方法 通过CRISPR/Cas9技术构建ITGB6敲除的HT-29细胞(ITGB6-KO)作为敲除组,选择空白转染细胞作为对照组。通过Western blot法检测ITGB6表达,通过MTT实验、平板克隆形成实验和Transwell侵袭实验检测敲除ITGB6基因对HT-29细胞的增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力的影响。结果 Western blot和DNA测序结果显示CRISPR/Cas9技术有效敲除ITGB6基因。MTT实验、平板克隆形成实验和Transwell侵袭实验显示敲除ITGB6基因能够抑制HT-29细胞增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力(P <0.01)。结论 CRISPR/Cas9技术能够有效建立敲除ITGB6基因的结肠癌HT-29细胞系,ITGB6敲除后HT-29细胞恶性生物学行为受到抑制,ITGB6基因有望成为结肠癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 结肠癌 itgb6 CRISPR/Cas9 克隆增殖 侵袭
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EGFR参与溶血磷脂酸诱导口腔鳞癌细胞整合素β6的表达 被引量：1
2
作者 殷豪 邓小玲 +3 位作者 李国阳 石松林 李祺福 许铭炎 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期767-770,共4页
目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在溶血磷脂酸(LPA)诱导口腔鳞癌细胞整合素β6(ITGB6)表达中的作用。方法:将口腔鳞癌细胞SAS接种到6孔板中,经LPA诱导后,收集细胞,用定量RT-PCR和Western Blot检测ITGB6的mRNA和蛋白表达量;利用EGFR抑制... 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在溶血磷脂酸(LPA)诱导口腔鳞癌细胞整合素β6(ITGB6)表达中的作用。方法:将口腔鳞癌细胞SAS接种到6孔板中,经LPA诱导后,收集细胞,用定量RT-PCR和Western Blot检测ITGB6的mRNA和蛋白表达量;利用EGFR抑制剂AG1478检测EGFR对LPA诱导ITGB6mRNA和蛋白表达的影响。结果:1)经10μmol/L LPA诱导2h后,SAS细胞ITGB6的mRNA表达水平显著性增加;而ITGB6的蛋白水平则在诱导4h后有显著性升高。2)LPA诱导促进SAS细胞EGFR磷酸化水平增加。3)EGFR抑制剂AG1478抑制LPA诱导SAS细胞ITGB6mRNA和蛋白表达。结论:LPA能诱导SAS口腔鳞癌细胞ITGB6mRNA和蛋白表达,EGFR参与LPA诱导的ITGB6表达。 展开更多
关键词 溶血磷脂酸 表皮生长因子受体 整合素β6 口腔鳞癌
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上皮性卵巢癌组织中CircITGB6、CircPBX3的表达变化及意义
3
作者 张艳 韩建秋 +4 位作者 田静 王露 邢雅玲 赵明飞 郝丽慧 《山东医药》 CAS 2023年第34期16-20,共5页
目的探讨环状RNA(Circ)ITGB6、CircPBX3在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达变化及意义。方法选取接受卵巢癌根治术的80例EOC患者,应用实时荧光定量PCR检测癌及癌旁正常组织(距离癌组织≥3 cm)中CircITGB6、CircPBX3表达。Pearson相关分析... 目的探讨环状RNA(Circ)ITGB6、CircPBX3在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达变化及意义。方法选取接受卵巢癌根治术的80例EOC患者,应用实时荧光定量PCR检测癌及癌旁正常组织(距离癌组织≥3 cm)中CircITGB6、CircPBX3表达。Pearson相关分析EOC组织中circITGB6与CircPBX3表达的相关性。比较不同临床病理特征患者癌组织中CircITGB6、CircPBX3表达差异。Kaplan-Meier生存分析(Log-Rank检验)不同CircITGB6、CircPBX3表达EOC患者生存预后差异。Cox比例风险模型分析影响EOC患者预后的因素。结果EOC癌组织中CircITGB6、CircPBX3相对表达量分别为3.17±0.57、4.02±0.62,癌旁正常组织分别为1.06±0.24、1.23±0.32,癌组织中CircITGB6、CircPBX3相对表达量高于癌旁正常组织(t分别为30.515,35.766,P均<0.05)。EOC癌组织中CircITGB6与CircPBX3表达呈正相关(r=0.685,P<0.05)。肿瘤FIGO分期Ⅲ期、合并淋巴结转移的EOC患者癌组织中CircITGB6、CircPBX3相对表达量高于FIGO分期Ⅰ、Ⅱ期及无淋巴结转移癌组织(P均<0.05)。CircITGB6高表达和低表达者3年累积生存率分别为51.28%(20/39)、80.49%(33/41),CircITGB6高表达者3年累积生存率低于CircITGB6低表达者(χ^(2)=8.179,P<0.05)。CircPBX3高表达和低表达者3年累积生存率分别为55.26%(21/38)、76.19%(32/42),CircPBX3高表达者3年累积生存率低于CircPBX3低表达者(χ^(2)=5.763,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、合并淋巴结转移、CircITGB6高表达、CircPBX3高表达是影响EOC患者不良生存预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论EOC癌组织中CircITGB6、CircPBX3表达升高,二者表达与肿瘤FIGO分期、淋巴结转移有关,CircITGB6、CircPBX3升高是EOC患者不良生存预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 环状RNA itgb6 环状RNA PBX3 预后
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口腔鳞癌细胞中ITGB6基因主要转录调控区域的定位分析 被引量：1
4
作者 陈锡和 邓小玲 +2 位作者 尹丽琴 傅玉才 许铭炎 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2013年第3期190-193,共4页
目的:鉴定ITGB6基因在口腔鳞癌细胞中的主要调控区域,为研究基因在口腔鳞癌细胞中的转录调控机制奠定基础。方法:构建含有ITGB6基因转录起始点上游5'端侧翼区不同长度DNA序列的重组pGL2荧光素酶报告基因质粒,转染口腔鳞癌细胞株TCA8... 目的:鉴定ITGB6基因在口腔鳞癌细胞中的主要调控区域,为研究基因在口腔鳞癌细胞中的转录调控机制奠定基础。方法:构建含有ITGB6基因转录起始点上游5'端侧翼区不同长度DNA序列的重组pGL2荧光素酶报告基因质粒,转染口腔鳞癌细胞株TCA8113和SAS,利用双荧光素酶报告基因系统检测启动子转录活性,并通过生物信息学方法预测ITGB6基因中潜在的主要转录因子结合位点。结果:获得一系列不同长度ITGB6基因5'侧翼区序列的重组荧光素酶报告基因质粒;当ITGB6基因5'端侧翼片段截短到-187～-35和-35～+27之间时,启动子活性均显著下降;生物信息学分析显示,在-187～-35区域有2个Ets-1的潜在结合位点,而在-35～+27区域有1个IRF-4潜在结合位点。结论:在口腔鳞癌细胞中,ITGB6基因-187^-35和-35^+27区域是主要的转录因子结合区。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 itgb6基因 主要调控区 转录因子 荧光素酶报告基因分析
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钛板表面壳聚糖-金纳米粒子/整合素β6复合物涂层的制备与性能分析
5
作者 胡清玮 邓小玲 +2 位作者 钟鸣 黄文霞 许铭炎 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2021年第3期342-346,共5页
目的在粗糙纯钛板表面制备壳聚糖-金纳米粒子/整合素β6复合物(Ch-AuNPs/ITGB6)涂层,研究ChAuNPs/ITGB6对细胞成骨分化和抗炎能力的影响。方法氧化还原法制备Ch-AuNPs,分别加入等质量ITGB6质粒(pLV-ITGB6)和空白质粒(p LV-cs2.0),在粗... 目的在粗糙纯钛板表面制备壳聚糖-金纳米粒子/整合素β6复合物(Ch-AuNPs/ITGB6)涂层,研究ChAuNPs/ITGB6对细胞成骨分化和抗炎能力的影响。方法氧化还原法制备Ch-AuNPs,分别加入等质量ITGB6质粒(pLV-ITGB6)和空白质粒(p LV-cs2.0),在粗糙纯钛板表面分别形成Ch-AuNPs/ITGB6涂层和Ch-AuNPs/pLV涂层。应用动态光散射法(DLS)、电泳光散射法(ELS)检测Ch-AuNPs的湿态性质,通过透射电子显微镜(TEM)及扫描电子显微镜(SEM)观察涂层形态,使用能量色散X射线光谱(EDX)分析涂层性质。将具有Ch-AuNPs/ITGB6及Ch-AuNPs/pLV涂层的钛板分别与成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)共培养48 h,记为Ch-AuNPs/ITGB6组和Ch-AuNPs/pLV组。应用Western Blot检测两组骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-6(IL-6)的蛋白表达水平。结果 Ch-AuNPs湿态直径大多为50~120 nm、分布均匀(多扩散系数PDI=0.544),携带弱正电荷(zeta电位主要位于0~10 mV),可与ITGB6质粒形成Ch-AuNPs/ITGB6包被于钛板表面。与Ch-AuNPs/pLV组相比,Ch-AuNPs/ITGB6组可提高细胞OCN、OPN的蛋白表达水平,降低TNF-α、IL-6的蛋白表达水平。结论 Ch-AuNPs/ITGB6可成功包被于钛板表面,且能够促进MC3T3-E1中成骨分化蛋白的表达,降低炎症因子的表达水平,为种植体表面生物修饰提供新思路。 展开更多
关键词 钛种植体表面改性 涂层检测 壳聚糖-金纳米粒子/整合素β6复合物
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