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MGB探针标记-实时荧光PCR方法检测细菌int1基因和ISCR1元件方法的建立
被引量：
3
1
作者
车洁
赵晓菲
+2 位作者
卢金星
李娟
陈霞
《疾病监测》
CAS
2017年第10期878-882,共5页
目的 建立一种快速、准确检测细菌中ISCR1复合型Ⅰ型整合子的MGB探针二重实时荧光PCR方法。方法 根据ISCR1复合型Ⅰ型整合子中int1基因和ISCR1元件序列设计特异性引物和探针,在多种经常携带有2种多耐药相关基因元件的细菌中检测其特异性...
目的 建立一种快速、准确检测细菌中ISCR1复合型Ⅰ型整合子的MGB探针二重实时荧光PCR方法。方法 根据ISCR1复合型Ⅰ型整合子中int1基因和ISCR1元件序列设计特异性引物和探针,在多种经常携带有2种多耐药相关基因元件的细菌中检测其特异性;使用含有2种基因元件特异性序列的重组质粒标准品评价建立方法的灵敏度。结果 建立的MGB二重探针实时荧光PCR检测方法特异性好,携带2种基因元件或单独含有ISCR1或者int1的实验菌株均出现相应特异性扩增曲线,对2种基因元件均不含的菌株进行试验扩增时,均未见出现特异性扩增曲线。对2种基因元件都存在的实验菌株的扩增中,亦不存在由于2套引物/探针相互影响而造成的干扰扩增。根据标准质粒样品构建的标准曲线可确定其对int1基因和ISCR1元件的检测灵敏度分别为5.89×10~1拷贝/μl和4.13×10~1拷贝/μl。结论本研究成功建立了MGB二重探针实时荧光PCR快速检测方法。
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关键词
iscr
1
复合型Ⅰ型整合子
int
1
基因
iscr
1
元件
实时荧光PCR
MGB探针
原文传递
题名
MGB探针标记-实时荧光PCR方法检测细菌int1基因和ISCR1元件方法的建立
被引量：
3
1
作者
车洁
赵晓菲
卢金星
李娟
陈霞
机构
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
出处
《疾病监测》
CAS
2017年第10期878-882,共5页
基金
国家自然科学基金青年科学基金(No.31502124)
文摘
目的 建立一种快速、准确检测细菌中ISCR1复合型Ⅰ型整合子的MGB探针二重实时荧光PCR方法。方法 根据ISCR1复合型Ⅰ型整合子中int1基因和ISCR1元件序列设计特异性引物和探针,在多种经常携带有2种多耐药相关基因元件的细菌中检测其特异性;使用含有2种基因元件特异性序列的重组质粒标准品评价建立方法的灵敏度。结果 建立的MGB二重探针实时荧光PCR检测方法特异性好,携带2种基因元件或单独含有ISCR1或者int1的实验菌株均出现相应特异性扩增曲线,对2种基因元件均不含的菌株进行试验扩增时,均未见出现特异性扩增曲线。对2种基因元件都存在的实验菌株的扩增中,亦不存在由于2套引物/探针相互影响而造成的干扰扩增。根据标准质粒样品构建的标准曲线可确定其对int1基因和ISCR1元件的检测灵敏度分别为5.89×10~1拷贝/μl和4.13×10~1拷贝/μl。结论本研究成功建立了MGB二重探针实时荧光PCR快速检测方法。
关键词
iscr
1
复合型Ⅰ型整合子
int
1
基因
iscr
1
元件
实时荧光PCR
MGB探针
Keywords
iscr
1
related
complex
class
1
integron
intl
iscr
1
Real-time
quantitative
PCR
assay
MGB
probe
分类号
R446.5 [医药卫生—诊断学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MGB探针标记-实时荧光PCR方法检测细菌int1基因和ISCR1元件方法的建立
车洁
赵晓菲
卢金星
李娟
陈霞
《疾病监测》
CAS
2017
3
原文传递
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参考文献
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