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甜瓜叶片蛋白质2-DE中IPG胶条及染色方法的选择 被引量：3
1
作者 马成梅 梁永增 钟俐 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期120-124,共5页
研究双向电泳中IPG胶条对甜瓜叶片中的蛋白质在2 DE图谱上的影响，以及双向电泳后凝胶的最适染色方法。结果表明：当上样量为300 μg时，在pH 3～10 L（pH为3~10，线性）、pH 3～10 NL（pH为3~10，非线性）和pH 4～7 L（pH为4~7，线性）... 研究双向电泳中IPG胶条对甜瓜叶片中的蛋白质在2 DE图谱上的影响，以及双向电泳后凝胶的最适染色方法。结果表明：当上样量为300 μg时，在pH 3～10 L（pH为3~10，线性）、pH 3～10 NL（pH为3~10，非线性）和pH 4～7 L（pH为4~7，线性）3种IPG胶条中，pH 4～7 L的IPG胶条在2 DE胶上出现的蛋白点数最多，大约为648个，且分布均匀，清晰度较高；pH 3～10 NL的IPG胶条在图谱上出现的蛋白点数要稍多于pH 3～10 L的IPG胶条。凝胶染色结果说明，银染 考马斯亮蓝复合染色法效果最好，可明显提高蛋白质凝胶电泳的分辨率。 展开更多
关键词 双向电泳 甜瓜 ipg胶条 染色方法
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影响木薯叶片蛋白质双向电泳图谱的因素分析 被引量：2
2
作者 安飞飞 张振文 +1 位作者 郑永清 李庚虎 《热带农业科学》 2011年第5期33-37,共5页
以木薯华南205为试材,采用苯酚抽提法提取叶片蛋白质,并通过双向电泳技术研究影响木薯叶片蛋白电泳分析图谱的主要因素。结果表明:pH 4～7的IPG胶条可提高特定范围蛋白质点的分辨率;上样量200μg可得到较好的双向电泳图谱。本研究不仅... 以木薯华南205为试材,采用苯酚抽提法提取叶片蛋白质,并通过双向电泳技术研究影响木薯叶片蛋白电泳分析图谱的主要因素。结果表明:pH 4～7的IPG胶条可提高特定范围蛋白质点的分辨率;上样量200μg可得到较好的双向电泳图谱。本研究不仅为进一步研究木薯叶片蛋白电泳分析提供技术手段,同时也为分析木薯块根、茎和繁殖器官的蛋白质提供参考。 展开更多
关键词 木薯叶片 双向电泳 ipg胶条
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不同pH梯度的IPG胶条对绿竹叶片蛋白双向电泳的比较
3
作者 沈少炎 吴玉香 +4 位作者 姚旺 荣俊冬 何天友 陈礼光 郑郁善 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期749-754,共6页
双向电泳(2-DE)技术是研究蛋白组学的有效途径和重要手段,而在双向电泳第一向中使用不同pH梯度的IPG胶条,是对双向电泳技术研究的深入。利用改良的TCA/丙酮与Tris-饱和酚提取法,提取纯度更高的绿竹叶片全蛋白,并在双向电泳中使用不同pH... 双向电泳(2-DE)技术是研究蛋白组学的有效途径和重要手段,而在双向电泳第一向中使用不同pH梯度的IPG胶条,是对双向电泳技术研究的深入。利用改良的TCA/丙酮与Tris-饱和酚提取法,提取纯度更高的绿竹叶片全蛋白,并在双向电泳中使用不同pH梯度的IPG胶条,检测其对绿竹叶片双向电泳图谱的影响。结果表明,蛋白样品上样量为20μg时,在7 cm的pH3-10L、pH3-10NL、pH5-8L 3种胶条中,pH5-8L的胶条在双向电泳的凝胶图谱上显现的蛋白点数目最多,约有400个,而且蛋白点的分布较其他2个胶条的结果更为均匀,清晰度更高;pH3-10NL的胶条的图谱上显现的蛋白点要比同一跨度的pH3-10L的胶条更多;通过3种胶条的对比可以使绿竹叶片双向电泳的分辨率显著提高。对于在pH5-8L显现出来的4个蛋白点进行MALDI-TOF-MS质谱分析,成功鉴定出4个蛋白点,其中3个蛋白点在pH3-10L胶条的双向电泳中是没有显现出来的,这些蛋白对于植物生物功能的发挥具有意义。试验表明了对于一些低丰度蛋白及小分子量蛋白的检测和鉴定,可以利用pH梯度较小的固化胶条进行双向电泳试验。 展开更多
关键词 双向电泳 绿竹叶片 蛋白提取 ipg胶条
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突触蛋白质组学分析中双向电泳技术的优化
4
作者 胡永波 高励 +6 位作者 王丹 曾仲 徐朝义 肖兵 骆飞飞 杨志勇 周嫱 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第24期3878-3884,共7页
背景:双向电泳是突触蛋白质组学分析中最流行最通用的蛋白质分离方法之一。但文献中突触蛋白双向电泳对线性固相pH梯度(immobilized pH gradients,IPG)胶条和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide g... 背景:双向电泳是突触蛋白质组学分析中最流行最通用的蛋白质分离方法之一。但文献中突触蛋白双向电泳对线性固相pH梯度(immobilized pH gradients,IPG)胶条和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electroph-oresis,SDS-PAGE)浓度的选择很多,尚未见统一标准。目的:对突触蛋白双向电泳的IPG胶条和SDS-PAGE凝胶浓度进行优化,以获得高质量的突触蛋白双向电泳图谱。方法:以大鼠海马突触蛋白为试材,比较pH 5.0-8.0与pH 3.0-10.0线性IPG胶条,线性与非线性pH 3.0-10.0IPG胶条,以及单一浓度10%与12%SDS-PAGE对双向电泳的影响。此外,还使用计算机检索了1989至2013年中国知网及PubMed数据库中关于突触蛋白双向电泳的文献,对文献中选择的IPG胶条、SDS-PAGE凝胶浓度进行了统计和评价,并总结了突触蛋白在不同pH值IPG胶条和不同浓度SDS-PAGE凝胶的双向电泳图谱上的分布特征。结果与结论:结果表明,使用pH 3.0-10.0的非线性胶条及单一浓度10%SDS-PAGE凝胶进行突触蛋白双向电泳较为适宜,电泳图谱质量好,实验操作便利;同时还推荐合并使用pH 4.0-7.0和pH 6.0-11.0的IPG胶条,以及线性梯度浓度9%-16%SDS-PAGE凝胶,也适用于突触蛋白双向电泳分析。 展开更多
关键词 组织构建 组织工程 突触 双向电泳 蛋白质组学 ipg胶条 国家自然科学基金
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