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番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析 被引量:11
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作者 叶开和 王婧茹 +4 位作者 马锦锦 王小康 张晓琦 叶文才 叶春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1681-1687,共7页
目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞,给予GA(0.3、1、3、10、30 n·L^-1),并设空白对照组、溶媒对照组(... 目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞,给予GA(0.3、1、3、10、30 n·L^-1),并设空白对照组、溶媒对照组(0.1% DMSO)、分泌模型组及阳性药组(150 nmol·L^-1格列苯脲含1‰DMSO),药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素,用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^-1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌模型(GSIS),用放射免疫法测定药物对 INS-1细胞胰岛素分泌的影响,结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较,GA 能明显地促进 INS-1胰岛细胞的增殖(P <0.01)并能明显增加 INS-1细胞内胰岛素含量(P <0.01),0.3~30 nmol·L -1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用(P <0.05或 P <0.01),0.3~30 nmol·L^-1 GA 明显地上调 Insulin mRNA 的相对表达(P <0.01)。3、30 nmol·L^-1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达(P <0.01)。3、30 nmol·L^-1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达(P <0.01)。结论GA 能促进 INS-1胰岛β细胞增殖;增加细胞内胰岛素含量与分泌量,可能与其上调 Insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。 展开更多
关键词 番石榴酸 ins-1胰岛β细胞 增殖 胰岛素合成 胰岛素分泌 基因表达
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二至丸对H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞氧化应激损伤的影响 被引量:6
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作者 钟询龙 徐玮 +1 位作者 梁文意 钟艳梅 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1008-1014,共7页
目的探讨二至丸对H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞氧化应激损伤的影响。方法采用H2O2(终浓度500μmol·L^-1)诱导INS-1细胞建立氧化损伤模型,并以不同浓度二至丸(10、50、250μg·mL^-1)进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法... 目的探讨二至丸对H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞氧化应激损伤的影响。方法采用H2O2(终浓度500μmol·L^-1)诱导INS-1细胞建立氧化损伤模型,并以不同浓度二至丸(10、50、250μg·mL^-1)进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法测定细胞胰岛素分泌量;DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;比色法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)含量;Western Blot法测定细胞内过氧化氢酶(CAT)蛋白表达。结果二至丸在浓度为0.5~500μg·mL^-1时对INS-1细胞增殖活力无明显抑制作用。与空白对照组比较,模型组细胞在基础葡萄糖(BIS)/高糖(GSIS)状态下的胰岛素分泌量、SOD、GSH-Px含量及CAT蛋白表达水平显著降低(P<0.01),ROS、MDA含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,二至丸中、高剂量组(50、250μg·mL^-1)可显著促进H2O2诱导氧化损伤INS-1细胞BIS/GSIS状态下的胰岛素分泌量(P<0.05,P<0.01),提高SOD、GSH-Px含量及CAT蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),降低MDA含量(P<0.05,P<0.01);二至丸各剂量组均可显著降低氧化损伤INS-1细胞内的ROS水平(P<0.01)。结论二至丸能够改善H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞氧化应激损伤及保护其细胞功能,其作用机制可能与抑制细胞内ROS生成、提高抗氧化酶活性及其蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 二至丸 ins-1胰岛β细胞 氧化应激损伤 胰岛素分泌 活性氧 抗氧化酶
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知母总皂苷对INS-1胰岛β细胞功能的影响 被引量:6
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作者 钟艳梅 陈坚平 +2 位作者 钟静君 陈永浩 冯毅凡 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期2631-2633,共3页
目的:通过知母总皂苷药物干预INS-1胰岛β细胞评价知母总皂苷的对胰岛细胞功能的影响。方法:采用MTT法考察知母总皂苷对INS-1细胞增殖的影响,知母总皂苷不同剂量药物组干预不同状态INS-1细胞,ELISA试剂盒测定药物干预后胰岛素分泌量,SOD... 目的:通过知母总皂苷药物干预INS-1胰岛β细胞评价知母总皂苷的对胰岛细胞功能的影响。方法:采用MTT法考察知母总皂苷对INS-1细胞增殖的影响,知母总皂苷不同剂量药物组干预不同状态INS-1细胞,ELISA试剂盒测定药物干预后胰岛素分泌量,SOD、GSH和MDA含量。结果:知母总皂苷在浓度为0.3~80μg/m L时,对INS-1细胞有明显的促进增殖作用,并增强氧化损伤INS-1细胞胰岛素释放(P<0.01),显著增加氧化损伤模型细胞中SOD、GSH的含量(P<0.01),减少MDA的含量(P<0.01)。结论:知母总皂苷能够保护INS-1细胞,减少其氧化损伤,促进其胰岛素释放。 展开更多
关键词 知母总皂苷 ins-1胰岛β细胞 氧化损伤
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天竺桂多酚提取物降血糖活性研究 被引量:5
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作者 陈亮 孙鹏 +4 位作者 王婷 徐娜 贾琦 李医明 陈凯先 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期229-235,共7页
目的研究天竺桂提取物中多酚的结构类型及降糖活性。方法运用HPLC及ESI-MS方法确定多酚的结构,利用噻唑蓝法测定细胞活力评价天竺桂提取物对棕榈酸或过氧化氢损伤的INS-1细胞的保护作用,利用db/db自发2型糖尿病小鼠观察天竺桂提取物对... 目的研究天竺桂提取物中多酚的结构类型及降糖活性。方法运用HPLC及ESI-MS方法确定多酚的结构,利用噻唑蓝法测定细胞活力评价天竺桂提取物对棕榈酸或过氧化氢损伤的INS-1细胞的保护作用,利用db/db自发2型糖尿病小鼠观察天竺桂提取物对糖尿病小鼠糖代谢的影响。结果天竺桂提取物中多酚主要为B-型多酚;提取物能剂量依赖地保护棕榈酸或过氧化氢诱导损伤的INS-1细胞,并且显著抑制过氧化氢引起的INS-1细胞内活性氧增加;200 mg/kg剂量给药4周后降低了db/db小鼠空腹血糖,改善了口服糖耐量,显著增加了胰岛素耐量。结论天竺桂多酚为B-型多酚,具有一定的降糖活性,其机制可能为减少胰岛β细胞活性氧水平,抵抗氧化应激对β细胞的损伤,从而保护胰岛β细胞。 展开更多
关键词 天竺桂 多酚 ins-1胰岛β细胞 DB DB 2型糖尿病小鼠 抗糖尿病
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番石榴酸改善INS-1胰岛β细胞胰岛素抵抗 被引量:3
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作者 魏崧丞 王婧茹 +5 位作者 叶开和 王小康 马锦锦 张晓琦 叶文才 叶春玲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期710-715,共6页
目的考察番石榴酸对INS-1胰岛β细胞胰岛素抵抗的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 40 mmol/L葡萄糖干预INS-1胰岛β细胞48 h建立胰岛素抵抗模型,设番石榴酸干预组(0.3、1、3、10、30 nmol/L),以及空白对照组、二甲亚砜对照组,胰岛素... 目的考察番石榴酸对INS-1胰岛β细胞胰岛素抵抗的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 40 mmol/L葡萄糖干预INS-1胰岛β细胞48 h建立胰岛素抵抗模型,设番石榴酸干预组(0.3、1、3、10、30 nmol/L),以及空白对照组、二甲亚砜对照组,胰岛素抵抗模型组,正钒酸钠组(1 mmol/L)和罗格列酮组(1 mmol/L),药物作用48 h。分别以5.6、16.7 mmol/L葡萄糖干预细胞1 h作为基础胰岛素分泌(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌(GSIS)条件,用放射免疫法检测药物对胰岛素分泌的影响,结果以该细胞总蛋白量校正。荧光定量PCR法检测药物对胰岛素抵抗INS-1细胞内PTP1B、PPARγmRNA表达的作用。结果与胰岛素抵抗模型组比较,0.3 nmol/L番石榴酸便能促进胰岛素抵抗INS-1细胞的GSIS(P<0.05或P<0.01);1 nmol/L番石榴酸即可显著促进基础胰岛素分泌(P<0.01)。0.3、3、30 nmol/L番石榴酸均能显著下调胰岛素抵抗INS-1细胞的PTP1B mRNA相对表达(P<0.05或P<0.01),其中0.3和3 nmol/L番石榴酸下调作用优于正钒酸钠,上调PPARγmRNA相对表达作用优于罗格列酮。结论番石榴酸能够改善INS-1细胞胰岛素抵抗,可能通过下调PTP1B和上调PPARγ基因表达有关。番石榴酸可能通过改善胰岛β细胞自身胰岛素抵抗而发挥抗糖尿病作用。 展开更多
关键词 番石榴酸 ins-1胰岛β细胞 胰岛素抵抗 PTP1B PPARΓ
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贝那鲁肽对高糖诱导的胰岛β细胞功能障碍和凋亡的影响及机制研究 被引量:3
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作者 辛丽娟 宁建峰 +5 位作者 唐宏霞 左源渊 王新婷 彭一 尚宏博 鲍喜静 《现代检验医学杂志》 CAS 2022年第1期103-106,113,共5页
目的探讨贝那鲁肽对高糖诱导的胰岛β细胞功能障碍和凋亡的影响以及相关机制。方法将INS-1胰岛β细胞随机分为对照组、高糖组、贝那鲁肽处理组、MG-132预处理组和ISO-1预处理组,对照组给予5.5mmol/L葡萄糖处理,高糖组给予30 mmol/L葡萄... 目的探讨贝那鲁肽对高糖诱导的胰岛β细胞功能障碍和凋亡的影响以及相关机制。方法将INS-1胰岛β细胞随机分为对照组、高糖组、贝那鲁肽处理组、MG-132预处理组和ISO-1预处理组,对照组给予5.5mmol/L葡萄糖处理,高糖组给予30 mmol/L葡萄糖处理,贝那鲁肽处理组在高糖组的基础上给予1 nmol/L贝那鲁肽处理,MG-132预处理组和ISO-1预处理组分别在高糖的基础上给予20μmol/L MG-132和50μmol/L ISO-1预处理。培养24h后噻唑蓝(MTT)比色法评估细胞的活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测INS-1胰岛β细胞胰岛素和巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的分泌,Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax和cleaved caspase 3)和NF-κB通路相关蛋白(p-IκB,IκB和NF-κBp65)的表达。结果与对照组相比,高糖组胰岛β细胞的存活率(t=4.949,P<0.01)、胰岛素的分泌(t=3.168,4.273,均P<0.05)和IκB的表达(t=3.062,P<0.05)明显降低,凋亡相关蛋白(Bax和cleaved caspase 3)的表达(t=2.923,3.141,均P<0.05)、p-IκB和NF-κB p65表达(t=3.544,4.658,均P<0.01)以及MIF分泌(t=3.024,P<0.05)明显增加.与高糖组相比,贝那鲁肽处理组可逆转高糖组上述指标的变化(t=2.415~4.290,均P<0.05),差异均有统计学意义。进一步给予NF-κB抑制剂MG-132和MIF抑制剂ISO-1预处理后,与高糖组相比,MG-132预处理组和ISO-1预处理组均可改善高糖诱导的INS-1胰岛β细胞胰岛素分泌功能(t=2.515~6.867,均P<0.05),还可降低凋亡相关蛋白Bax(t=4.022,2.554,均P<0.05)和cleaved caspase 3(t=4.022,2.760,均P<0.05)的表达,差异均有统计学意义。结论贝那鲁肽可通过抑制NF-κB/MIF依赖的炎症途径减轻高糖诱导的胰岛β细胞功能障碍和凋亡。 展开更多
关键词 贝那鲁肽 ins-1胰岛β细胞 NF-ΚB 巨噬细胞迁移抑制因子 凋亡
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番石榴酸抗H_2O_2诱导的INS-1胰岛β细胞氧化损伤作用及其机制分析 被引量:3
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作者 王婧茹 叶开和 +4 位作者 吕艳青 魏崧丞 张晓琦 叶文才 叶春玲 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期233-238,共6页
目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对INS-1胰岛β细胞氧化损伤的作用。方法培养INS-1胰岛β细胞,给予番石榴酸0.3、1、3、10、30 nmol·L-1,并设空白对照组、溶媒对照组及阳性药组,药物作用时间均为48 h。650μmol·L-1H2O2... 目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对INS-1胰岛β细胞氧化损伤的作用。方法培养INS-1胰岛β细胞,给予番石榴酸0.3、1、3、10、30 nmol·L-1,并设空白对照组、溶媒对照组及阳性药组,药物作用时间均为48 h。650μmol·L-1H2O2干预细胞2 h建立氧化损伤模型,用四甲基偶氮唑蓝法检测药物对INS-1β细胞氧化损伤的保护作用,用核染色法观察细胞核变化,用流式细胞术检测药物对细胞活性氧生成的作用,用双染-流式细胞术检测药物对细胞凋亡的保护作用。结果与氧化损伤模型组比较,低剂量的番石榴酸(0.3、1 nmol·L-1)能显著保护INS-1β细胞活力(P<0.05或P<0.01);核染色结果显示,与氧化损伤模型组相比,低浓度番石榴酸(0.3 nmol·L-1)作用下,细胞荧光强度较弱。0.3、1、3 nmol·L-1番石榴酸均能十分显著地降低二氯荧光黄(DCF)荧光强度(P<0.01),即减少细胞内活性氧的产生。0.3 nmol·L-1番石榴酸能显著抵抗细胞凋亡的发生(P<0.05)。结论番石榴酸能对抗INS-1细胞氧化损伤,可能与其抑制细胞内活性氧的产生、对抗细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 番石榴酸 ins-1胰岛β细胞 氧化损伤
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糖尿病诱导硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对小鼠胰岛β细胞衰老的影响 被引量:3
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作者 霍海燕 王瑾 +3 位作者 张许梅 张文婷 岳继萍 焦向英 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期119-123,193-196,共9页
目的:本研究旨在观察糖尿病中硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的表达是否影响胰岛β细胞衰老。方法:正常小鼠(db/m)、糖尿病小鼠(db/db)随机各取6只,血糖仪检测其空腹血糖值,Western blot检测胰腺组织TXNIP蛋白表达、免疫化学染色检测胰... 目的:本研究旨在观察糖尿病中硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的表达是否影响胰岛β细胞衰老。方法:正常小鼠(db/m)、糖尿病小鼠(db/db)随机各取6只,血糖仪检测其空腹血糖值,Western blot检测胰腺组织TXNIP蛋白表达、免疫化学染色检测胰腺组织中衰老相关β-半乳糖苷酶活性,Western blot检测胰腺组织衰老相关指标p16、p21、Rb表达的变化。INS-1胰岛β细胞随机分7组(n=6),用各组慢病毒(30μl)转染4~6 h后,嘌呤霉素(PM,3μg/m)筛选7 d,构建Normal组(正常组)、Scramble ShRNA组(干扰空病毒组)、TXNIP-ShRNA-1(TXNIP沉默一组)组、TXNIP-ShRNA-2(TXNIP沉默二组)组、TXNIP-ShRNA-3组(TXNIP沉默三组)、Ad-GFP组(过表达空病毒组)、Ad-TXNIP-GFP组(TXNIP过表达组)稳转INS-1胰岛β细胞株,检测其TXNIP蛋白表达、衰老相关β-半乳糖苷酶活性、衰老相关指标。结果:与正常小鼠相比,db/db组小鼠空腹血糖显著上升(P<0.01),胰腺组织TXNIP蛋白表达显著升高(P<0.05),胰腺组织β-半乳糖苷酶阳性染色率增加,p16、p21、Rb蛋白表达显著升高(P<0.05)。与Ad-GFP组相比,Ad-TXNIP-GFP组β-半乳糖苷酶阳性染色率增加,p16、p21、Rb蛋白表达均显著增加(P<0.01)。与Scramble ShRNA组相比,TXNIP-ShRNA组β-半乳糖苷酶阳性染色率降低,p16、p21以及Rb蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:糖尿病可通过上调TXNIP表达,诱导胰岛β细胞衰老。 展开更多
关键词 糖尿病 硫氧还蛋白相互作用蛋白 ins-1胰岛β细胞 细胞衰老 小鼠
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知母醇提物对INS-1胰岛β细胞功能的影响 被引量:1
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作者 张国改 曾平燕 +2 位作者 肖雪蓉 冯毅凡 吴霞 《广东药学院学报》 CAS 2016年第6期762-766,共5页
目的研究知母醇提物对正常和抵抗INS-1胰岛β细胞的增殖及分泌功能的影响,探讨知母醇提物对正常细胞的毒性影响以及对胰岛素抵抗细胞的改善作用。方法采用MTT法测定知母醇提物对正常INS-1胰岛β细胞的增殖作用;知母醇提物干预正常细胞... 目的研究知母醇提物对正常和抵抗INS-1胰岛β细胞的增殖及分泌功能的影响,探讨知母醇提物对正常细胞的毒性影响以及对胰岛素抵抗细胞的改善作用。方法采用MTT法测定知母醇提物对正常INS-1胰岛β细胞的增殖作用;知母醇提物干预正常细胞及胰岛素抵抗INS-1胰岛β细胞,分为溶媒组(ME)、胰岛素分泌模型组(MC)、胰岛素抵抗组(IR)、阳性药格列本脲组(Gli)和罗格列酮组(ROZ)及知母醇提物组,测定各组基础胰岛素分泌(BIS)和葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)值。结果知母醇提物质量浓度在0.3~30μg/m L时对正常细胞有明显的增殖作用,与MC组的GSIS比较,差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01);与IR组的BIS和GSIS比较,知母醇提物浓度在3~30μg/m L能显著促进细胞的BIS能力,同时其质量浓度在0.3~30μg/m L能显著性促进GSIS功能。结论知母醇提物在一定浓度范围内对正常INS-1胰岛β细胞的毒性较低,同时能通过促进正常细胞的增殖,增强其胰岛素分泌能力,改善细胞自身的胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 知母醇提物 ins-1胰岛β细胞 增殖 毒性
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重组胰生定多肽对H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞凋亡的抑制作用
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作者 董瓅瑾 金鑫 +4 位作者 高欣 李文潮 袁强 邓靖 宋光明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1141-1143,共3页
目的观察重组胰生定多肽(EXf)对H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法将INS-1细胞分成5组:空白对照组、阴性对照组、阳性对照组(EX-4)、给药组(EXf,终浓度分别为10、100 nmol/L),每组至少6孔。除空白对照组外,均给予终浓度为100μ... 目的观察重组胰生定多肽(EXf)对H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法将INS-1细胞分成5组:空白对照组、阴性对照组、阳性对照组(EX-4)、给药组(EXf,终浓度分别为10、100 nmol/L),每组至少6孔。除空白对照组外,均给予终浓度为100μmol/L H2O2诱导INS-1胰岛β细胞凋亡模型。通过MTT检测法、Hoechest 33342染色法、DNA ladder检测法,观察EXf对H2O2诱导INS-1胰岛β细胞细胞存活率、形态学变化和凋亡的影响。结果 MTT实验结果显示与模型对照组相比,EXf能使H2O2处理的INS-1胰岛β细胞存活率明显增加(P<0.01),并呈剂量依赖性。Hoechst 33342染色检测显示给药组细胞凋亡数量明显减少,正常细胞数量明显增加。EXf能明显抑制DNA ladder的出现,且呈一定量效关系。结论 EXf对H2O2诱导的INS-1胰岛β细胞的凋亡具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 ins-1胰岛β细胞 肠促胰岛素类似物 凋亡 H2O2
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