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球形纤维素固定化DNA制备免疫吸附剂 被引量:18
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作者 孔德领 代军 +1 位作者 陈长治 俞耀庭 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1848-1851,共4页
以球形纤维素为载体 ,经环氧氯丙烷活化后共价键联小牛胸腺 DNA,制备 DNA免疫吸附剂 ,通过血液灌流能够治疗系统性红斑狼疮 .对病人血清的吸附实验结果表明 ,每毫升吸附剂与 3 m L病人血清混合 ,于 3 7℃保温 1 h,可吸附除去 4 0 %~ 70
关键词 球形纤维素 DNA固定化 SLE 治疗 免疫吸附剂
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DNA免疫吸附治疗狼疮性肾炎的临床观察 被引量:29
2
作者 张静波 张耀全 +8 位作者 刘敏 杨惠标 黄唯麟 梁莉 郭晓霞 王代红 郭艳红 陈枫 黄拥军 《中国血液净化》 2006年第1期27-29,共3页
目的观察DNA免疫吸附血液灌流器对狼疮性肾炎患者的临床疗效。方法选择重庆第三军医大学新桥医院肾内科16例活动性狼疮性肾炎患者,采用DNA免疫吸附血液灌流器进行32例次血液灌流。观察相关症状及蛋白尿改善情况;ANA、ds-DNA清除效果;血... 目的观察DNA免疫吸附血液灌流器对狼疮性肾炎患者的临床疗效。方法选择重庆第三军医大学新桥医院肾内科16例活动性狼疮性肾炎患者,采用DNA免疫吸附血液灌流器进行32例次血液灌流。观察相关症状及蛋白尿改善情况;ANA、ds-DNA清除效果;血常规、肝、肾功能、电解质、免疫球蛋白等影响程度。结果吸附后症状明显改善,尿蛋白减轻;ANA水平显著下降(P=0.0001),ds-DNA抗体完全清除;血中有形成份、肝、肾功能、电解质等无明显影响。结论DNA免疫吸附血液灌流的净化疗法是治疗狼疮性肾炎特异性相对较强、疗效好、无明显毒副反应的一种新疗法。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 免疫吸附 血液灌流
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重症肌无力免疫吸附剂的制备及性能研究 被引量:6
3
作者 颜伟荣 俞耀庭 +2 位作者 杨丽 张卫华 缪鹏冲 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1887-1890,共4页
重症肌无力患者体内致病毒素是乙酰胆碱的受体抗体 .通过对载体材料的优化及对配基的筛选发现 ,使用质量分数为 6%的纤维素球形载体 ,以环氧氯丙烷法活化并固定上 L-色氨酸作为配基制备的血液灌流材料在静态吸附实验 (1 g吸附剂加入 3 m... 重症肌无力患者体内致病毒素是乙酰胆碱的受体抗体 .通过对载体材料的优化及对配基的筛选发现 ,使用质量分数为 6%的纤维素球形载体 ,以环氧氯丙烷法活化并固定上 L-色氨酸作为配基制备的血液灌流材料在静态吸附实验 (1 g吸附剂加入 3 m L 病人血清 ,室温 ,3 h)中可使抗体水平下降 2 5 %以上 ,吸附量达3 .669× 1 0 - 3nmol/g,选择性较高 。 展开更多
关键词 免疫吸附剂 制备 性能 重症肌无力 乙酰胆碱受体抗体 治疗
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以琼脂凝胶固定热聚IgG制备类风湿关节炎免疫吸附剂的研究 被引量:7
4
作者 付春晓 陈长治 俞耀庭 《功能高分子学报》 CAS CSCD 1999年第2期145-148,共4页
以环氧氯丙烷对琼脂凝胶珠进行活化反应后键联热聚IgG,制成一种新型类风湿关节炎免疫吸附剂。确定了最佳制备条件,使凝胶上环氧基的含量达110μmol/g,对热聚IgG的固定量达6mg/g。在体外条件下吸附剂对三种类风湿... 以环氧氯丙烷对琼脂凝胶珠进行活化反应后键联热聚IgG,制成一种新型类风湿关节炎免疫吸附剂。确定了最佳制备条件,使凝胶上环氧基的含量达110μmol/g,对热聚IgG的固定量达6mg/g。在体外条件下吸附剂对三种类风湿因子IgMRF,IgGRF及IgARF的吸附量分别达3400、2250和2400IU/g。 展开更多
关键词 琼脂凝胶 热聚IgG 免疫吸附剂 类风湿关节炎
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单克隆抗体免疫吸附剂的制备及对乙型肝炎表面抗原的吸附 被引量:7
5
作者 李湛勇 史林启 +1 位作者 宋正纪 梁树人 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第4期449-453,共5页
通过环氧氯丙烷活化(1,4)2氨基2脱氧βD葡萄糖(壳聚糖)制备免疫吸附剂,详细讨论了环氧氯丙烷活化过程的影响因素,确定了活化的最佳条件.活化(1,4)2氨基2脱氧βD葡萄糖树脂对单克隆抗体... 通过环氧氯丙烷活化(1,4)2氨基2脱氧βD葡萄糖(壳聚糖)制备免疫吸附剂,详细讨论了环氧氯丙烷活化过程的影响因素,确定了活化的最佳条件.活化(1,4)2氨基2脱氧βD葡萄糖树脂对单克隆抗体的偶联率为176%,对含乙型肝炎表面抗原阳性血清的吸附实验表明,制备的免疫吸附剂能使阳性转为阴性,吸附率为44%. 展开更多
关键词 免疫吸附剂 单克隆抗体 乙型肝炎 表面抗原
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球型纤维素固定Anti-HBsAg单克隆抗体制备免疫吸附剂 被引量:5
6
作者 邹长军 《化学与生物工程》 CAS 2004年第1期32-33,共2页
以环氧氯丙烷、球型纤维素和NaOH为原料,在活化温度40℃下首先制得含有活化基团的中间体后,再固定Anti HBsAg单克隆抗体,得到偶联率为16 8%的Anti HBsAg单克隆抗体免疫吸附剂。经患者血清体外吸附评价实验结果表明,该吸附剂可吸附除去6... 以环氧氯丙烷、球型纤维素和NaOH为原料,在活化温度40℃下首先制得含有活化基团的中间体后,再固定Anti HBsAg单克隆抗体,得到偶联率为16 8%的Anti HBsAg单克隆抗体免疫吸附剂。经患者血清体外吸附评价实验结果表明,该吸附剂可吸附除去6 2%~46 3%致病抗体,血清由阳性转为阴性。 展开更多
关键词 免疫吸附剂 球型纤维素 乙肝表面抗原 单克隆抗体 环氧氯丙烷
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类风湿关节炎免疫吸附剂的临床应用 被引量:4
7
作者 李治玖 曹培荣 +8 位作者 靳毅 刘玉法 张海霞 李宪芳 冯爱玲 尹蕾 俞耀庭 蔺恩富 陈长治 《中国药物与临床》 CAS 2002年第4期222-224,共3页
目的 探讨免疫吸附剂治疗类风湿关节炎 (RA)的临床效果。方法 将 6 7例RA患者随机分为RA免疫吸附剂治疗 35例 (治疗组 )和非吸附治疗 32例 (对照组 )。将治疗组患者动脉血流经RA免疫吸附剂 ,吸附后由肘静脉回输入体内。随访 8~ 30个... 目的 探讨免疫吸附剂治疗类风湿关节炎 (RA)的临床效果。方法 将 6 7例RA患者随机分为RA免疫吸附剂治疗 35例 (治疗组 )和非吸附治疗 32例 (对照组 )。将治疗组患者动脉血流经RA免疫吸附剂 ,吸附后由肘静脉回输入体内。随访 8~ 30个月 ,比较两组疗效。结果 治疗组经 1~ 2次吸附治疗 ,有效率 97% (34/ 35 ) ,较对照组 6 9% (2 2 / 32 )差异有显著性 (P <0 0 1)。完全缓解率治疗组 83% (2 9/ 35 ) ,较对照组 5 0 % (16 / 32 )差异有显著性 (P <0 0 1)。其中病史 <2年并关节功能状态Ⅱ级者 2 2例 ,完全缓解率 10 0 % (2 2 / 2 2 ) ,较对照组病史 <2年并关节功能状态Ⅱ级者 2 0例 ,完全缓解率 70 % (14 / 2 0 )差异有显著性 (P <0 0 1)。病史≥ 2年治疗组完全缓解率 5 4 %(7/ 13) ,较对照组 17% (2 / 12 )差异有显著性 (P <0 0 1)。关节功能状态Ⅲ级者治疗组完全缓解率 5 8% (7/ 12 ) ,较对照组 18% (2 / 11)差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 免疫吸附剂治疗RA 。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 临床应用 RA 治疗方法 疗效 免疫吸附剂
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重症肌无力特异性免疫吸附剂的制备及对患者血清的静态吸附作用 被引量:3
8
作者 王玉祥 孟繁平 +2 位作者 俞耀庭 尹春燕 金桂花 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2005年第2期73-75,共3页
目的制备一种对重症肌无力(myastheniagravis,MG)致病性乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)具有特异性吸附作用的免疫吸附剂。方法利用悬浮再生法,用环氧氯丙烷活化羟基,以人乙酰胆碱受体(AChR)主要免疫原区10氨基酸多肽作为配基固定于球型纤维... 目的制备一种对重症肌无力(myastheniagravis,MG)致病性乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)具有特异性吸附作用的免疫吸附剂。方法利用悬浮再生法,用环氧氯丙烷活化羟基,以人乙酰胆碱受体(AChR)主要免疫原区10氨基酸多肽作为配基固定于球型纤维素上制备MG特异性免疫吸附剂,以色氨酸为配基制备非特异性免疫吸附剂。应用酶联免疫吸附试验测定其对MG患者血清的静态吸附率。结果以AChR主要免疫原区10氨基酸多肽为配基的吸附剂对AChRAb的吸附率为(4033±229)%,以色氨酸为配基的吸附剂的吸附率为(2235±147)%。结论以球型纤维素为载体,以AChR主要免疫原区10氨基酸多肽作为配基的特异性吸附剂对于MG的治疗可能是一种很有前途的方法。 展开更多
关键词 重症肌无力 免疫吸附剂 球型纤维素
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重组蛋白A免疫吸附剂的制备及吸附性能研究 被引量:4
9
作者 杜云英 张旭锋 +1 位作者 陈校园 何小维 《北京化工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期92-96,共5页
以琼脂糖凝胶为载体,重组蛋白A为配基制备免疫吸附剂。过血浆动态吸附之后洗脱得到含有免疫球蛋白的洗脱液;通过分析洗脱液中免疫球蛋白的纯度可以考察吸附剂对免疫球蛋白的吸附选择性;最后利用等温静态吸附检测了吸附剂对人免疫球蛋白(... 以琼脂糖凝胶为载体,重组蛋白A为配基制备免疫吸附剂。过血浆动态吸附之后洗脱得到含有免疫球蛋白的洗脱液;通过分析洗脱液中免疫球蛋白的纯度可以考察吸附剂对免疫球蛋白的吸附选择性;最后利用等温静态吸附检测了吸附剂对人免疫球蛋白(hIgG)溶液的吸附行为。结果表明,洗脱液中免疫球蛋白的纯度大于92%,重组蛋白A吸附剂对免疫球蛋白吸附选择性较好;等温静态吸附结果符合Langmuir等温吸附模型;进一步分析Langmuir吸附模型,表明该吸附剂在临床治疗中有吸附量大的明显优势,重组蛋白A免疫吸附剂具有很好的临床应用前景。 展开更多
关键词 重组蛋白A 免疫吸附剂 免疫球蛋白 等温吸附
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IgA肾病免疫吸附剂的研究(Ⅱ) 被引量:2
10
作者 褚佳强 俞耀庭 +3 位作者 张卫华 陈建军 朱伯儒 刘景铎 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第4期636-638,共3页
通过 1 ,4-丁二醇 -二缩水甘油醚法活化琼脂糖载体 ,既起到了活化载体的作用 ,同时又由于该活化剂分子是长链结构而给载体提供了一定长度的手臂 ,有利于人免疫球蛋白 G( Ig G)大分子配基与载体的连接 ,用该方法制成的免疫吸附剂对高 Ig ... 通过 1 ,4-丁二醇 -二缩水甘油醚法活化琼脂糖载体 ,既起到了活化载体的作用 ,同时又由于该活化剂分子是长链结构而给载体提供了一定长度的手臂 ,有利于人免疫球蛋白 G( Ig G)大分子配基与载体的连接 ,用该方法制成的免疫吸附剂对高 Ig A肾病病人血清中 Ig A进行了吸附研究 .通过体外实验条件的优化发现 ,最高可吸附 60 %的 Ig A,同 CDI法比较 (吸附率可达 3 5 %左右 ) 。 展开更多
关键词 IGA 吸附 IGA肾病 自身免疫疾病 免疫吸附剂 血清 琼脂糖 1 4-丁二醇-二缩水甘油醚 治疗
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新型生物学活性免疫吸附剂的研究进展 被引量:1
11
作者 何炳林 郭贤权 吴向东 《材料导报》 EI CAS CSCD 1994年第5期51-59,共9页
评述了生物学活性免疫吸附剂的研究进展。着重对免疫吸附剂的载体结构、活化方法及偶联技术对吸附剂生物学活性的专一性、稳定性及有关机理的影响进行了讨论。说明了免疫吸附剂的应用前景,展望了免疫吸附剂的发展趋势。
关键词 免疫吸附剂 抗原 抗体 生物学
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DNA免疫吸附柱治疗狼疮性肾炎的临床应用 被引量:3
12
作者 何先红 林波 +1 位作者 李明清 李香宜 《中国伤残医学》 2012年第1期19-20,共2页
目的:观察DNA免疫吸附柱对狼疮性肾炎患者的临床疗效。方法:选择16例活动性狼疮性肾炎患者,采用DNA免疫吸附柱进行32例次血液吸附。观察相关症状及蛋白尿改善情况:ANA、ds-DNA清除效果;血常规、肝、肾功能、电解质、免疫球蛋白等影响程... 目的:观察DNA免疫吸附柱对狼疮性肾炎患者的临床疗效。方法:选择16例活动性狼疮性肾炎患者,采用DNA免疫吸附柱进行32例次血液吸附。观察相关症状及蛋白尿改善情况:ANA、ds-DNA清除效果;血常规、肝、肾功能、电解质、免疫球蛋白等影响程度。结果:吸附后症状明显改善,尿蛋白减轻;ANA水平显著下降(P=0.0001),ds-DNA抗体完全清除;血中有形成份、肝、肾功能、电解质等无明显影响。结论:DNA免疫吸附的净化疗法是治疗狼疮性肾炎特异性相对较强、疗效好、无明显毒副反应的一种新疗法。 展开更多
关键词 狼疮性.肾炎 免疫吸附
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DETECTION OF VEGF LEVELS IN ASCITES AND PERITONEAL FLUID
13
作者 孙晓敏 董卫国 +1 位作者 高礼层 蒋兴海 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2003年第4期310-314,共5页
Objective: The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) is correlated to the invasion and metastasis of tumor cells in many clinical carcinomas. In this study, we detected soluble VEGF levels in ascites... Objective: The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) is correlated to the invasion and metastasis of tumor cells in many clinical carcinomas. In this study, we detected soluble VEGF levels in ascites and peritoneal fluid and explored its clinical significance. Methods: A total of 91 samples were collected and divided into 5 experimental groups: petitoneal fluid of patients with benign (n=10) and malignant disease (n=14), cirrhotic ascites (n=36), tuberculous ascites (n=8) and malignant ascites (n=23). Using a sandwich enzyme-linked immunoadsorbent assay, the concentration of soluble VEGF was measured in ascites (n=67) and petitoneal fluid (n=24). Results: VEGF levels in malignant ascites were 640.74264.81 pg/ml, significantly higher than those in cirrhotic ascites, tuberculous ascites and peritoneal fluid of patients with benign and malignant disease (P<0.01, separately). However, the difference of VEGF levels among the latter 4 groups had no statistic significance (P>0.05), separately). Furthermore, VEGF levels in malignant ascites from patients with ovarian cancer were higher than those with gastric and colon cancer (P<0.01, respectively), while there was no significant difference between gastric cancer and colon cancer (P>0.05). Using VEGF level of 118.96 pg/ml as a minimum cutofflimit, the sensitivity and specificity of VEGF of this assay to diagnose malignant ascites were 91.3% and 73.9% respectively. Conclusion: The elevated levels of VEGF may be useful as an index in differential diagnosis of benign and malignant ascites. It appears that VEGF plays an important role in malignant ascites formation. 展开更多
关键词 ASCITES Peritoneal fluid Vascular endothelial growth factor Enzyme-linked immunoadsorbent assay
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Interaction of Rheumatoid Factor with Immobilized ss-DNA
14
作者 WANGLian-yong LUJing YUYao-ting 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2004年第6期795-800,共6页
Rheumatoid factors(RFs) are the characteristic autoantibodies of rheumatoid arthritis. Recent researches in our laboratory showed that the immobilized single-stranded DNA(ss-DNA) immunoadsorbent can selectively remove... Rheumatoid factors(RFs) are the characteristic autoantibodies of rheumatoid arthritis. Recent researches in our laboratory showed that the immobilized single-stranded DNA(ss-DNA) immunoadsorbent can selectively remove RFs from the serum of patients. In the present paper are studied the modification of argininine, tryptophan, lysine residues and carboxyl terminus of IgGRF, which was separated from patients′ serum, with 1,2-cyclohexanedione(CHD), N-bromosuccinimide(NBS), pyridoxal 5′-phosphate(PP) and 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide(EDC) respectively, and their effects on the adsorption capacity of the immobilized ss-DNA immunoadsorbent for IgGRF. After the specific modification, the corresponding adsorption capacities of the adsorbents were changed from 48%, 46%, 44% and 54% to 84%, 14%, 21% and 81%, respectively. These results indicate that the electrostatic or ionic-bonding is essential for the interaction between ss-DNA and IgGRF. 展开更多
关键词 immunoadsorbent IgGRF Immobilized ss-DNA
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琼脂凝胶键连热聚IgG——一种新型类风湿关节炎免疫吸附剂 被引量:1
15
作者 付春晓 陈长治 俞耀庭 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-4,共4页
将热聚IgG固载到琼脂凝胶珠上 ,制成了一种特异性类风湿关节炎免疫吸附剂。体外吸附实验表明该吸附剂对类风湿因子及其免疫复合物具有强的选择吸附性能 。
关键词 类风湿关节炎 类风湿因子 免疫吸附剂 热聚IgG 琼脂凝胶珠
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免疫球蛋白(IgG)吸附介质的合成及性能 被引量:2
16
作者 赵钧 李建平 《桂林工学院学报》 北大核心 2008年第2期200-204,共5页
以聚乙烯醇为载体,利用戊二醛为交联剂,得到交联球型聚乙烯醇,再通过环氧氯丙烷环氧化反应,偶联配基L-色氨酸合成了一种新型免疫球蛋白(IgG)吸附剂。研究了色氨酸用量、pH值等参数对偶联量的影响。静态吸附试验结果表明,某试验条件下该... 以聚乙烯醇为载体,利用戊二醛为交联剂,得到交联球型聚乙烯醇,再通过环氧氯丙烷环氧化反应,偶联配基L-色氨酸合成了一种新型免疫球蛋白(IgG)吸附剂。研究了色氨酸用量、pH值等参数对偶联量的影响。静态吸附试验结果表明,某试验条件下该聚乙烯醇偶联色氨酸吸附剂对牛血清白蛋白的吸附量为19.12 mg/g,对IgG的吸附量为22.63 mg/g;对血清进行体外吸附试验时,IgG的减少量在84%以上,而白蛋白的减少在10%以内,表明偶联L-色氨酸吸附介质对IgG具有良好的选择性。 展开更多
关键词 免疫吸附剂 聚乙烯醇 L-色氨酸 选择性吸附
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Anti-HBs Ag单克隆抗体免疫吸附剂的制备及评价
17
作者 邹长军 谭乃迪 岳长进 《沈阳化工学院学报》 CAS 2004年第3期176-178,共3页
 以环氧氯丙烷、脱乙酰几丁质和NaOH为原料,在活化温度43℃下制得含有活化基团的中间体,再固定Anti HBsAg单克隆抗体,得到偶联率为18.7%的Anti HBsAg单克隆抗体免疫吸附剂.经患者血清体外吸附评价实验可知:该吸附剂可吸附除去30%~50%...  以环氧氯丙烷、脱乙酰几丁质和NaOH为原料,在活化温度43℃下制得含有活化基团的中间体,再固定Anti HBsAg单克隆抗体,得到偶联率为18.7%的Anti HBsAg单克隆抗体免疫吸附剂.经患者血清体外吸附评价实验可知:该吸附剂可吸附除去30%~50%致病抗体,血清由阳性转为阴性. 展开更多
关键词 脱乙酰几丁质 HBsAg单克隆抗体 免疫吸附剂 评价
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类风湿因子免疫吸附剂的制备及性能研究 被引量:1
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作者 张秀敏 国建琴 +1 位作者 苏晓辉 徐秀林 《生物医学工程与临床》 CAS 2010年第5期378-382,共5页
目的制备一种类风湿因子(RF)免疫吸附剂并研究其性能。方法利用悬浮聚合法制备出大孔聚乙烯醇(PVA)树脂,以此为载体接枝苯丙氨酸,制备出可用于血液灌流吸附的RF免疫吸附剂(PVA-P树脂),通过体外吸附实验观察不同处理方法对RF吸附性能的... 目的制备一种类风湿因子(RF)免疫吸附剂并研究其性能。方法利用悬浮聚合法制备出大孔聚乙烯醇(PVA)树脂,以此为载体接枝苯丙氨酸,制备出可用于血液灌流吸附的RF免疫吸附剂(PVA-P树脂),通过体外吸附实验观察不同处理方法对RF吸附性能的影响。通过体外血液学实验和溶血实验观察该吸附剂的血液相容性。结果免疫吸附剂的体外吸附实验表明,免疫吸附剂对RF的吸附清除率达到60%以上,处理工艺对RF吸附性能无明显影响。体外血液相容性实验结果表明:免疫吸附剂对红细胞、血小板、总蛋白的影响差异有统计学意义(P<0.05),其他血液指标差异无统计学意义(P>0.05),与日本同类吸附RF产品平行比较,对血细胞的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PVA-P树脂作为RF免疫吸附剂具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 免疫吸附剂 类风湿因子 类风湿性关节炎 聚乙烯醇微球 苯丙氨酸
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MODIFICATION OF TRYPTOPHAN RESIDUES OF IgGRF AND ITS EFFECT ON THE ADSORPTION CAPACITY
19
作者 WANG Lianyong LU Jing YU Yaoting 《Chinese Journal of Reactive Polymers》 2002年第1期49-54,共6页
Tryptophan residues of IgGRF from rheumatoid arthritis patient were modified with N-Bromosuccinimide (NBS) and the product of modification was characterized by UV-spectrum、Fluorescence emission spectrum and CD-spectr... Tryptophan residues of IgGRF from rheumatoid arthritis patient were modified with N-Bromosuccinimide (NBS) and the product of modification was characterized by UV-spectrum、Fluorescence emission spectrum and CD-spectrum. The corresponding adsorption capacity of immobilized ssDNA immunoadsorbent for IgGRF was enhanced from 46% to 86%, This result indicates the tryptophan residue is essential for the interaction between ssDNA and IgGRF .and ionic-bonding plays an important role in adsorption. 展开更多
关键词 immunoadsorbent IgGRF immobilized DNA MODIFICATION
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小鼠抗人IgE单克隆抗体制备及鉴定
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作者 续艳梅 杨正根 +2 位作者 刘诗俐 黄慧慧 董文其 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期640-644,共5页
目的制备高特异性的小鼠抗人IgE单克隆抗体(mAb)作为候选免疫吸附剂。方法用重组人IgE重链2~4区(IgECε2-4)免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞。用IgECε2-4包被酶标板,间接ELISA筛选阳性细胞株,... 目的制备高特异性的小鼠抗人IgE单克隆抗体(mAb)作为候选免疫吸附剂。方法用重组人IgE重链2~4区(IgECε2-4)免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞。用IgECε2-4包被酶标板,间接ELISA筛选阳性细胞株,用天然IgE、IgG、IgM、IgA、IgD包被酶标板,间接ELISA检测阳性杂交瘤细胞无血清培养上清与天然IgE的亲和性和特异性;将稳定分泌特异性抗IgE mAb的细胞株扩大培养,小鼠体内诱生腹水法制备mAb,检测腹水的效价和亲和力,利用mAb亚型鉴定试剂盒检测获得的mAb的亚型。结果经过5次细胞融合总共得到29株阳性杂交瘤细胞,有11株与天然IgE亲和性较强,有2株与其他免疫球蛋白几乎无交叉反应,分别为3E9和7B4。结论成功制备了小鼠抗人IgE mAb,该mAb具有高效价、较高亲和力和高特异性。 展开更多
关键词 IGE 免疫吸附剂 单克隆抗体
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