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靶向人白细胞介素17受体C的特异性shRNA表达载体的构建及鉴定 被引量：2
1
作者 李永忠 胡大军 +3 位作者 李欣 林华 陈贤梅 陈亮 《中华关节外科杂志（电子版）》 CAS 2009年第5期57-59,共3页
目的构建同时靶向人白细胞介素17受体C(IL-17RC)的小发夹状干扰RNA(shRNA)真核表达载体。方法设计并合成针对人IL-17RCcDNA的寡聚DNA引物,退火并连接至载体pGenesil-1,将重组质粒转染至293T细胞,提取转染或未转染293T细胞的mRNA,逆转录... 目的构建同时靶向人白细胞介素17受体C(IL-17RC)的小发夹状干扰RNA(shRNA)真核表达载体。方法设计并合成针对人IL-17RCcDNA的寡聚DNA引物,退火并连接至载体pGenesil-1,将重组质粒转染至293T细胞,提取转染或未转染293T细胞的mRNA,逆转录成cDNA,经荧光定量PCR检测细胞IL-17RC基因表达水平,最后用流式细胞仪检测转染阳性细胞表面IL-17RC的表达。结果1.限制性酶切和测序结果表明成功构建了人IL-17RC的特异性shRNA真核表达载体shRNA-IL-17RC。2.流式细胞仪显示pGenesi1-IL-17RC的转染效率大于40%,并能显著抑制细胞IL-17RC的表达。结论shRNA-IL-17RC的构建为深入研究IL-17在骨关节炎(OA)中的功能以及针对细胞因子受体设计新的治疗OA的药物奠定基础。 展开更多
关键词 细胞介素17受体C 小发夹状干扰rna 骨关节炎
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