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利用Golden Gate “One-POT”技术组装运动发酵单胞菌转录单元
被引量:
2
1
作者
杨依伟
赵彩芳
+2 位作者
吴波
秦晗
何明雄
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期170-175,共6页
为研究运动发酵单胞菌合成生物学及代谢工程,评估运动发酵单胞菌内源启动子及终止子,需要建立一种方便有效的多基因代谢途径组装方法.通过Golden Gate方法构建了一个含有运动发酵单胞菌乙醇脱氢酶2编码基因启动子区(P_(adh2))、丙酮酸...
为研究运动发酵单胞菌合成生物学及代谢工程,评估运动发酵单胞菌内源启动子及终止子,需要建立一种方便有效的多基因代谢途径组装方法.通过Golden Gate方法构建了一个含有运动发酵单胞菌乙醇脱氢酶2编码基因启动子区(P_(adh2))、丙酮酸脱羧酶编码基因终止子区(T_(pdc))和绿色荧光蛋白开放阅读框(gfp)的人工转录单元.将含有IIS型限制内切酶Bbs I识别和酶切序列的特异性接头添加到P_(adh2)、T_(pdc)和gfp序列两侧,从而保证在一个反应体系中完成上述3个生物元件的酶切和连接,因此该技术被称作"One-POT".插入上述人工转录单元的穿梭质粒导入大肠杆菌和运动发酵单胞菌后可检测到发出绿色荧光的细胞.结果显示通过Golden Gate方法可有效组装转录单元所需DNA生物元件.本研究不仅可为运动发酵单胞菌合成生物学和代谢工程研究,尤其是设计多基因代谢途径组装方面提供技术工具,也可为评估运动发酵单胞菌内源启动子和终止子提供一种有效方法.
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关键词
分子组装
GOLDEN
GATE
运动发酵单胞菌
转录单元
iis
型
限制
内切
酶
原文传递
题名
利用Golden Gate “One-POT”技术组装运动发酵单胞菌转录单元
被引量:
2
1
作者
杨依伟
赵彩芳
吴波
秦晗
何明雄
机构
农业部沼气科学研究所
四川农业大学小麦研究所
农业部农村可再生能源开发与利用重点实验室
出处
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期170-175,共6页
基金
中国农业科学院基本科研业务费(1610012016020
Y2017LM13
+2 种基金
Y2018LM09和Y2018PT81)
国家自然科学基金项目(31570055)
四川省科技计划项目(17ZDYF1305)资助~~
文摘
为研究运动发酵单胞菌合成生物学及代谢工程,评估运动发酵单胞菌内源启动子及终止子,需要建立一种方便有效的多基因代谢途径组装方法.通过Golden Gate方法构建了一个含有运动发酵单胞菌乙醇脱氢酶2编码基因启动子区(P_(adh2))、丙酮酸脱羧酶编码基因终止子区(T_(pdc))和绿色荧光蛋白开放阅读框(gfp)的人工转录单元.将含有IIS型限制内切酶Bbs I识别和酶切序列的特异性接头添加到P_(adh2)、T_(pdc)和gfp序列两侧,从而保证在一个反应体系中完成上述3个生物元件的酶切和连接,因此该技术被称作"One-POT".插入上述人工转录单元的穿梭质粒导入大肠杆菌和运动发酵单胞菌后可检测到发出绿色荧光的细胞.结果显示通过Golden Gate方法可有效组装转录单元所需DNA生物元件.本研究不仅可为运动发酵单胞菌合成生物学和代谢工程研究,尤其是设计多基因代谢途径组装方面提供技术工具,也可为评估运动发酵单胞菌内源启动子和终止子提供一种有效方法.
关键词
分子组装
GOLDEN
GATE
运动发酵单胞菌
转录单元
iis
型
限制
内切
酶
Keywords
molecular assembly
Golden Gate
Zymomonas mobilis
transcription unit
type
iis
restriction endonuclease
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用Golden Gate “One-POT”技术组装运动发酵单胞菌转录单元
杨依伟
赵彩芳
吴波
秦晗
何明雄
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
原文传递
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