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人胰岛素样生长因子Ⅰ在大肠杆菌中的表达研究 被引量：16
1
作者 刘宝英 赵明 +2 位作者 王会信 王芳 丁红梅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期47-51,共5页
胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）是一种多功能细胞增殖调控因子，它对许多疾病有较好的治疗作用．为了获得大量的ＩＧＦ－Ⅰ产品，在测定了ＩＧＦ－Ⅰ全长序列的基础上，构建了ＩＧＦ－Ⅰ表达载体ｐＢＶＩＧＦ，经热诱导表达后，ＳＤ... 胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）是一种多功能细胞增殖调控因子，它对许多疾病有较好的治疗作用．为了获得大量的ＩＧＦ－Ⅰ产品，在测定了ＩＧＦ－Ⅰ全长序列的基础上，构建了ＩＧＦ－Ⅰ表达载体ｐＢＶＩＧＦ，经热诱导表达后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：含有重组表达质粒的菌株可表达出７．６ｋＤ的蛋白．研究了不同菌株对ＩＧＦ－Ⅰ表达的影响．ＩＧＦ－Ⅰ的表达水平可达１５ｍｇ／Ｌ．重组蛋白主要以包涵体形式存在，进行了初步纯化和复性研究，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ⅰ的抗原性．并初步建立了ＩＧＦ－Ⅰ生物活性测定方法． 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子Ⅰ 大肠杆菌 基因表达
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日粮不同蛋白质水平对绵羊IGF-1和GH分泌及基因表达的影响 被引量：16
2
作者 闫云峰 杨华 +2 位作者 杨永林 潘晓亮 邹云龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期85-95,共11页
本研究旨在探讨不同蛋白质水平日粮对绵羊胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和生长激素(GH)分泌及基因mRNA表达量的影响,为科学配置肉羊饲料及研究肉羊生长发育提供基础。选择6月龄体重相近的多胎萨福克公羔18只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白... 本研究旨在探讨不同蛋白质水平日粮对绵羊胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和生长激素(GH)分泌及基因mRNA表达量的影响,为科学配置肉羊饲料及研究肉羊生长发育提供基础。选择6月龄体重相近的多胎萨福克公羔18只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白质水平的日粮(低蛋白日粮、中蛋白日粮和高蛋白日粮)。采用ELISA方法和SYBR Green Real-time PCR方法检测日粮不同蛋白质水平对不同生长发育阶段(30、60、90和120d)羔羊外周血中IGF-1、GH浓度和皮肤组织中基因表达的影响。结果显示,日粮蛋白质水平显著影响绵羊平均日增重、外周血中IGF-1和GH的浓度以及皮肤组织IGF-1基因的表达丰度,而未显著影响GH基因的表达丰度。结果提示,随着日粮蛋白质水平的升高,绵羊生长发育快,外周血中IGF-1浓度增加,GH浓度降低,IGF-1基因表达量增加。 展开更多
关键词 绵羊 蛋白水平 igf-1 GH 分泌 基因表达
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金钱鱼IGF-1和IGF-2的克隆及其在胚胎发育过程的表达 被引量：13
3
作者 张克伟 陈华谱 +4 位作者 江东能 邓思平 朱春华 吴天利 李广丽 《广东海洋大学学报》 CAS 2018年第2期7-14,共8页
【目的】克隆金钱鱼IGF-1和IGF-2基因,研究二基因在金钱鱼胚胎发育过程中的表达。【方法】采用实时荧光定量PCR,以不同发育时间点的金钱鱼(Scatophagus argus)胚胎为实验材料,分析IGF-1和IGF-2基因在鱼类胚胎发育过程中的表达图式。【... 【目的】克隆金钱鱼IGF-1和IGF-2基因,研究二基因在金钱鱼胚胎发育过程中的表达。【方法】采用实时荧光定量PCR,以不同发育时间点的金钱鱼(Scatophagus argus)胚胎为实验材料,分析IGF-1和IGF-2基因在鱼类胚胎发育过程中的表达图式。【结果】金钱鱼IGF-1和IGF-2的蛋白全序列分别为186和215个氨基酸。序列分析表明,IGF-1和IGF-2均有胰岛素样生长因子蛋白典型结构,含有N端信号肽、B、C、A、D和E结构域,且有6个保守的半胱氨酸,与其他鲈形目鱼类花鲈的IGF-1和IGF-2相似性较高(95%和91%)。IGF-1从受精卵到出膜的胚胎发育过程中表达量逐渐上调;IGF-2在受精后至囊胚期表达量极低,而在原肠胚期和神经胚期表达量显著上调至最高水平,在神经胚期后表达量显著降低并维持稳定。【结论】IGF-1和IGF-2序列保守性低,与鲈形目同源性高,在金钱鱼胚胎发育过程中起不同调控作用。 展开更多
关键词 金钱鱼 igf-1 igf-2 基因克隆 胚胎发育
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鱼类IGF-I生理功能及其表达调控的研究进展 被引量：10
4
作者 刘红云 童富淡 《水产科学》 CAS 北大核心 2004年第5期37-40,共4页
胰岛素样生长因子 -Ⅰ (IGF -Ⅰ )是一种 70个氨基酸组成的蛋白质 ,分子量约 75 0 0Da ,是胰岛素样生长因子系统的重要成员 ,与胰岛素高度同源。IGF -Ⅰ具有可以调节细胞代谢、促进细胞生长、分化和分裂 ,抑制细胞死亡 ,调节多种细胞功... 胰岛素样生长因子 -Ⅰ (IGF -Ⅰ )是一种 70个氨基酸组成的蛋白质 ,分子量约 75 0 0Da ,是胰岛素样生长因子系统的重要成员 ,与胰岛素高度同源。IGF -Ⅰ具有可以调节细胞代谢、促进细胞生长、分化和分裂 ,抑制细胞死亡 ,调节多种细胞功能等作用。本文对IGF 展开更多
关键词 鱼类 胰岛素样生长因子-Ⅰ igf-Ⅰ 蛋白质 表达 调节 生物学功能
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IGF-2r的结构和功能及其在胚胎发育中的作用 被引量：5
5
作者 龙健儿 贺力强 蔡霞 《生命科学》 CSCD 2005年第5期439-444,共6页
胰岛素样生长因子-2受体(insulin-like growth factor-2 receptor,IGF-2r)和非阳离子依赖型甘露糖-6-磷酸受体(cation-independent mannose-6-phosphate receptor,CI-MPR)为同一分子,属多结构域跨膜糖蛋白。IGF-2r与阳离子依赖型M6P受体... 胰岛素样生长因子-2受体(insulin-like growth factor-2 receptor,IGF-2r)和非阳离子依赖型甘露糖-6-磷酸受体(cation-independent mannose-6-phosphate receptor,CI-MPR)为同一分子,属多结构域跨膜糖蛋白。IGF-2r与阳离子依赖型M6P受体(cation-dependent mannose-6-phosphotase receptor,CD-MPR) 共同介导溶酶体酶的分选和转运过程,对溶酶体的形成起重要作用。IGF-2/M6P受体除能与溶酶体酶、TGF-β前体等M6P配体结合外,还能与非糖基化的IGF-2、视黄酸等作用,调节蛋白质的转运和跨膜信号传导等活动。IGF-2r为父源性印迹(paternal imprinted)基因,基因的印迹、表达受基因印迹控制区(imprinting control region,ICR)的甲基化差异修饰所调控。IGF-2r基因表达缺失出现胎儿肥大、心脏和胎盘发育不全、围产期死亡等异常现象,证明IGF-2r在胚胎发育过程中起重要作用。 展开更多
关键词 igf-2r M6P受体 igf 溶酶体酶 基因印迹 胚胎发育
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外源性人胰岛素样生长因子-1基因在关节软骨细胞中的表达 被引量：9
6
作者 张绍昆 刘一 +2 位作者 吴宏 单玉兴 徐莘香 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期278-280,共3页
目的探讨含有绿色荧光蛋白(GFP)的外源性人胰岛素样生长因子(hIGF)1基因真核表达载体在关节软骨细胞内稳定表达的可行性,建立IGF1基因工程化的关节软骨细胞。方法利用基因重组技术,将GFPcDNA片段插入pcDNA3.1hIGF1载体中,构建重组载体p... 目的探讨含有绿色荧光蛋白(GFP)的外源性人胰岛素样生长因子(hIGF)1基因真核表达载体在关节软骨细胞内稳定表达的可行性,建立IGF1基因工程化的关节软骨细胞。方法利用基因重组技术,将GFPcDNA片段插入pcDNA3.1hIGF1载体中,构建重组载体pcGI。然后采用脂质体方法,转染原代关节软骨细胞,经G418筛选后,继续体外单层培养4周。原位杂交和免疫细胞化学检测hIGF1的表达,荧光显微镜观察GFP的表达,Ⅱ型胶原免疫细胞化学检测软骨细胞表型,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测软骨细胞增殖能力。结果根据重组载体pcGI内的酶切位点,设计采用BamHI酶切显示为线性化,XbaI酶切显示为512bp、1768bp、5915bp三个片段,HindⅢ则酶切下3023bp、5172bp二个片段,证明所构建的质粒方向及大小正确,含有GFP和hIGF1cDNA片段。稳定转染pcGI的软骨细胞原位杂交、免疫细胞化学和荧光显微镜证实了hIGF1和GFP的表达,同时MTT显示转染后的软骨细胞增殖能力增强,并能维持Ⅱ型胶原的表达。结论外源性hIGF1和GFP基因在关节软骨细胞内获得稳定表达,体外单层培养的转染关节软骨细胞增殖能力增强,同时维持软骨细胞表型。 展开更多
关键词 关节软骨细胞 igf-1 表达 外源性 免疫细胞化学 转染 Ⅱ型胶原 绿色荧光蛋白(GFP) 酶切位点 GFP基因
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胰岛素样生长因子Ⅰ基因治疗对糖尿病大鼠血糖调节的研究 被引量：7
7
作者 段宇 周红文 +1 位作者 汪承亚 陈家伟 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期468-469,共2页
本研究以基因治疗的方法 ,将胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )基因导入实验性糖尿病 (DM)大鼠体内 ,使IGF Ⅰ在动物模型体内得到高效表达 ,DM大鼠血糖显著降低 ,血IGF
关键词 胰岛素样生长因子Ⅰ igf-Ⅰ 基因治疗 糖尿病大鼠 血糖调节 体内 DM 高效表达
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牙鲆变态中IGF-I基因表达及甲状腺激素对其的调节作用 被引量：8
8
作者 张俊玲 施志仪 +1 位作者 付元帅 程琦 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期355-359,共5页
胰岛素样生长因子（Insulin-like growth factors,IGFs）是一类具有胰岛素样代谢和促有丝分裂功能的蛋白质,参与脊椎动物的胚胎发育、生长和生殖。IGF系统包括两个配体（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）、IGF受体（IGF-I receptor,IGF-I R;IGF-II rece... 胰岛素样生长因子（Insulin-like growth factors,IGFs）是一类具有胰岛素样代谢和促有丝分裂功能的蛋白质,参与脊椎动物的胚胎发育、生长和生殖。IGF系统包括两个配体（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）、IGF受体（IGF-I receptor,IGF-I R;IGF-II receptor,IGF-ⅡR）以及IGF结合蛋白（IGF binding proteins，IGFBPs）。 展开更多
关键词 牙鲆 变态发育 igf-I 基因表达 甲状腺激素
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类胰岛素生长因子-Ⅰ的克隆、表达、分离纯化与活性检测 被引量：5
9
作者 魏辉俊 黄秉仁 蔡良琬 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期342-345,共4页
把类胰岛素生长因子-Ⅰ（IGF－Ⅰ）cDNA重组于酵母游离体型表达载体YEpHC8，转化酵母后获得了IGF－Ⅰ的表达，并经Bio－Rex70和Bio－GelP10分离纯化后进行了重组蛋白的活性检测。
关键词 基因表达 igf-I 类胰岛素 生长因子 克隆 活性
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阻断转化生长因子β_1自分泌环基因治疗骨肉瘤的机制研究 被引量：9
10
作者 刘勇 杜靖远 +3 位作者 杨述华 郑启新 邵增务 郭晓东 《中国临床康复》 CAS CSCD 2003年第11期1648-1649,F003,共3页
目的阻断骨肉瘤细胞TGF-β1自分泌环能抑制肿瘤细胞的增殖活性,从而达到基因治疗骨肉瘤的目的,探讨阻断TGF-β1自分泌环基因治疗骨肉瘤的机制。方法将反义TGF-β1基因转染骨肉瘤细胞MG-63后,采用RT-PCR的方法检测肿瘤细胞BMP-2、IGF-1、... 目的阻断骨肉瘤细胞TGF-β1自分泌环能抑制肿瘤细胞的增殖活性,从而达到基因治疗骨肉瘤的目的,探讨阻断TGF-β1自分泌环基因治疗骨肉瘤的机制。方法将反义TGF-β1基因转染骨肉瘤细胞MG-63后,采用RT-PCR的方法检测肿瘤细胞BMP-2、IGF-1、bFGF基因表达的变化。结果阻断TGF-β1自分泌环后,骨肉瘤细胞BMP-2、IGF-1、bFGF基因表达明显降低或消失。结论通过阻断自分泌环以降低骨肉瘤细胞表达的TGF-β1后,肿瘤细胞其他各种细胞因子的表达明显抑制,肿瘤细胞生物学活性降低。研究阻断TGF-β1自分泌环抑制肿瘤生长和发展的机制,将为开辟骨肉瘤基因治疗的新方向奠定基础。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 骨肉瘤 肿瘤细胞增殖活性 基因治疗 BMP-2 igf-1 基因表达 bFGF
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人胰岛素样生长因子-1基因的克隆及其表达 被引量：6
11
作者 吴岚晓 李明 +1 位作者 王萍 陈白虹 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2002年第1期1-3,共3页
目的获得大量高纯度、具有生物学活性的人胰岛素样生长因子 1(hIGF 1) ,构建hIGF 1原核表达载体 ,并进行表达与纯化。方法以pUCIGF质粒为模板 ,PCR扩增了hIGF 1基因。经适当酶切后 ,构建表达载体pRSET IGF ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3)进行... 目的获得大量高纯度、具有生物学活性的人胰岛素样生长因子 1(hIGF 1) ,构建hIGF 1原核表达载体 ,并进行表达与纯化。方法以pUCIGF质粒为模板 ,PCR扩增了hIGF 1基因。经适当酶切后 ,构建表达载体pRSET IGF ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3)进行表达 ,并经阴离子交换色谱、疏水色谱和凝胶过滤纯化。结果带有重组质粒pRSET IGF的大肠杆菌经IPTG诱导后 ,以可溶性形式表达 7.8kD大小的蛋白 ,其表达量占菌体总蛋白量的10 %～ 2 0 % ,纯化后目的蛋白纯度达 95 %以上 ,Western印迹表明重组蛋白具有hIGF 1抗原活性。结论构建了pRSET IGF重组质粒 ,并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达 。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 基因克隆 原核表达 基因工程 igf-1制剂 糖尿病 药物
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生长抑素基因免疫对湖羊羔羊生长及GH和IGF-Ⅰ的影响 被引量：7
12
作者 薛春林 茆达干 +2 位作者 程瑞禾 方永飞 杨利国 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期16-22,共7页
为探讨生长抑素DNA疫苗免疫湖羊的效果,将生长抑素(SS)与乙肝表面抗原(S)基因融合构建真核表达质粒pES/2SS,分别与pE-CpG质粒、细菌DNA、脂质体粗品配合及重新构建的pES/2SS-GMCSF免疫断奶母羔羊,4周后以相同剂量加强免疫1次。结果显示... 为探讨生长抑素DNA疫苗免疫湖羊的效果,将生长抑素(SS)与乙肝表面抗原(S)基因融合构建真核表达质粒pES/2SS,分别与pE-CpG质粒、细菌DNA、脂质体粗品配合及重新构建的pES/2SS-GMCSF免疫断奶母羔羊,4周后以相同剂量加强免疫1次。结果显示,免疫组的抗体水平高于对照组(P<0.05),首次免疫4周和加强免疫2周后,细菌DNA佐剂组的抗体水平高于生长抑素单独免疫组(P<0.05),其抗体阳性率也为各免疫组最高。全期免疫组抗生长抑素抗体阳性率达36.0%;免疫羊的增重比对照组高18.82%(P<0.01)。加强免疫后2周,免疫组的GH和IGF-Ⅰ水平显著高于对照组(P<0.05),抗体阳性羊的GH和IGF-Ⅰ水平显著高于抗体阴性羊(P<0.01)。分析第2、4、6和10周所检测的各免疫组湖羊生长抑素抗体P/N值、GH、IGF-Ⅰ及周增重之间的相关性,发现生长抑素抗体与GH、IGF-Ⅰ、周增重显著相关(P<0.01),周增重与生长抑素抗体(P<0.01)、GH(P<0.01)、IGF-Ⅰ(P<0.05)显著相关。结果表明:SS基因免疫产生SS抗体,有效中和了内源性SS,影响了相关激素的分泌,促进羔羊生长。 展开更多
关键词 湖羊 生长抑素 基因免疫 GH igf—Ⅰ
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胰岛素样生长因子系统基因在不同鸭种发育早期肝和肌肉中的表达 被引量：6
13
作者 束婧婷 朱文奇 +6 位作者 单艳菊 陈文峰 徐文娟 胡艳 宋迟 李慧芳 王金玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期183-190,共8页
本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验模型,首次对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉和肝中胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors,IGFs)系统基因的表达及其与体重等指标进行了相关性研究。采用实时荧光定量PCR方法研究... 本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验模型,首次对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉和肝中胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors,IGFs)系统基因的表达及其与体重等指标进行了相关性研究。采用实时荧光定量PCR方法研究鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄IGF-I、IGF-IR和IGFBP-3基因表达的发育性变化。结果首次证实鸭肌肉和肝IGF-I、IGF-IR和IGFBP-3在13胚龄已有表达,并表现出显著的品种和时间特异性。2品种肝中IGF-I的表达量在整个胚胎期均维持在极低的水平,出雏后显著上升;而肌肉中IGF-I的表达量要显著地高于肝。IGF-IR基因在肝中表达量高于肌肉组织,同时在肌肉中表达模式存在品种差异。IGFBP-3在2品种肝中的表达量相对较低,在胸肌中的表达量从胚胎发育末期至出雏早期均表现出上升趋势。IGF-I与IGF-IR、IGFBP-3基因表达水平之间存在负相关关系,而IGFBP-3基因与IGF-IR基因表达水平之间存在极显著的正相关;IGFs系统基因与体重、肝重和胸肌重之间呈现不同程度的线性相关。上述结果首次揭示了鸭胚胎期和出雏早期生长发育过程中IGFs系统基因表达的发育性变化模式和品种差异,同时也为深入研究IGFs系统基因的相互调控机制提供了基础数据。 展开更多
关键词 鸭 早期发育 基因表达 igf-I igf-IR igfBP-3
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温度与光照周期对公子小丑鱼幼鱼生长及相关生长基因表达的影响 被引量：8
14
作者 李泽滨 李云 +1 位作者 蔡生力 鞠晨曦 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期321-329,共9页
探究了不同温度、光照周期对公子小丑鱼(Amphiprion ocellaris)幼鱼成活率、饵料转化率及生长率的影响,并利用实时荧光定量PCR技术检测了50 d后幼鱼肝脏生长激素受体基因Ⅰ型(Growth hormone receptor1)、生长激素受体基因Ⅱ型(Growth h... 探究了不同温度、光照周期对公子小丑鱼(Amphiprion ocellaris)幼鱼成活率、饵料转化率及生长率的影响,并利用实时荧光定量PCR技术检测了50 d后幼鱼肝脏生长激素受体基因Ⅰ型(Growth hormone receptor1)、生长激素受体基因Ⅱ型(Growth hormone receptor 2)、类胰岛素生长因子基因(Insulin-like growth factor)和类胰岛素生长因子结合蛋白基因(Insulin-like growth factor-binding protein)相对表达量的变化情况。结果显示,不同温度、光照周期对公子小丑鱼幼鱼的成活率无显著影响(P>0.05),但对其生长率、饵料转化率影响显著。幼鱼的生长率、饵料转化率在温度27℃时最大,22℃次之,17℃、32℃较低;光照周期方面,幼鱼的生长率、饵料转化率在24L∶0D组最大,且显著高于其他光照周期组。荧光定量PCR的结果显示,幼鱼肝脏各生长相关基因的相对表达量在温度27℃时最高,且显著高于其他温度组(P<0.05);光照周期方面,各基因在24L∶0D时相对表达量最高,且显著高于其他光照周期组(P<0.05)。研究结果表明,公子小丑鱼幼鱼生长的最适温度为27℃,最适光照周期为24L∶0D。 展开更多
关键词 公子小丑鱼 温度 光照周期 生长 生长激素受体 类胰岛素生长因子 类胰岛素生长因子结合蛋白 基因表达
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南阳牛肌肉发育过程中IGF基因家族的表达变化研究 被引量：7
15
作者 张小辉 高雪 +2 位作者 许尚忠 祁艳霞 李云雷 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期515-521,共7页
IGF基因家族对肌肉发育起重要的调控作用,而目前对牛肌肉发育过程中IGF基因家族的表达变化研究还不充分。本研究利用荧光实时定量PCR技术分析了南阳牛3月龄到24月龄期间背最长肌组织中IGF,IGF受体和IGF结合蛋白基因的表达变化规律,发现I... IGF基因家族对肌肉发育起重要的调控作用,而目前对牛肌肉发育过程中IGF基因家族的表达变化研究还不充分。本研究利用荧光实时定量PCR技术分析了南阳牛3月龄到24月龄期间背最长肌组织中IGF,IGF受体和IGF结合蛋白基因的表达变化规律,发现IGF1,IGF2,IGF1R,IGF2R,IGFBP1和IGFBP3的表达量均呈现出明显的下降趋势,其中18月龄和24月龄时的表达量与3月龄时相比显著低(P<0.05);IGFALS也呈现出下降的趋势,但表达量在各个时期没有显著的差异(P>0.05);IGFBP2,IGFBP4和IGFBP6在6月龄时表达量上升,在12月龄和18月龄时表达量降低,在24月龄时表达量再次上升,但各个时期表达量均无显著差异(P>0.05);IGFBP5表现出先升高而后降低的趋势,6月龄比24月龄时表达量显著高(P<0.05),其他各月龄之间差异不显著。本研究对IGF基因家族在南阳牛肌肉发育过程中的表达变化进行了系统的研究,为进一步深入分析IGF系统在牛肌肉发育过程中的作用提供了有力的理论基础。 展开更多
关键词 牛 肌肉发育 igf家族 基因表达
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樱桃谷肉鸭肝脏发育早期IGF和IGF-ⅠR基因表达规律研究
16
作者 龙美合 陈伟 +1 位作者 金成龙 郑春田 《广东畜牧兽医科技》 2024年第3期10-15,共6页
樱桃谷肉鸭是世界著名的瘦肉型鸭,其肝脏发育对机体健康及生长至关重要。该研究旨在探讨樱桃谷肉鸭在胚胎后期和出壳早期肝脏发育及关键基因表达规律。试验选用120枚受精鸭蛋,在第16、21、28胚龄,和第7、14、21日龄记录胚体重、体质量... 樱桃谷肉鸭是世界著名的瘦肉型鸭,其肝脏发育对机体健康及生长至关重要。该研究旨在探讨樱桃谷肉鸭在胚胎后期和出壳早期肝脏发育及关键基因表达规律。试验选用120枚受精鸭蛋,在第16、21、28胚龄,和第7、14、21日龄记录胚体重、体质量重和肝脏质量重的变化。采用荧光定量PCR技术检测肝脏发育相关IGF1、IGF2、IGF-ⅠR mRNA的表达情况。结果表明,IGF1、IGF2、IGF-ⅠR在16胚龄鸭肝脏中已有少量表达。随胚龄/日龄增加IGF1 mRNA表达量呈现持续增长的态势,IGF2和IGF-ⅠR mRNA表达量呈现先增加后下降的趋势。IGF1、IGF2、IGF-ⅠR mRNA表达量相互间存在显著正相关,三个基因在鸭早期肝脏生长发育过程中存在协同表达现象,肝脏IGF1、IGF2、IGF-ⅠR mRNA的表达在鸭早期发育过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 樱桃谷肉鸭 肝脏发育 igf基因 igf-ⅠR基因
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可磷酸化短肽偶联壳聚糖介导兔关节软骨损伤修复的基因治疗 被引量：7
17
作者 赵荣兰 彭效祥 +2 位作者 楚海荣 宋伟 刘庆 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1346-1352,共7页
目的探讨可磷酸化短肽（phosphorylatable short peptide,pSP）偶联壳聚糖（chitosan,CS）（pSP-CS）,携载IGF-1和IL-1受体拮抗剂（IL-1 receptor antagonist,IL-1Ra）基因,局部转染促进关节软骨损伤修复的作用。方法构建pBudCE4.1-IL-... 目的探讨可磷酸化短肽（phosphorylatable short peptide,pSP）偶联壳聚糖（chitosan,CS）（pSP-CS）,携载IGF-1和IL-1受体拮抗剂（IL-1 receptor antagonist,IL-1Ra）基因,局部转染促进关节软骨损伤修复的作用。方法构建pBudCE4.1-IL-1Ra、pBudCE4.1-IGF-1及pBudCE4.1-IL-1Ra＋IGF-1质粒,以pSP偶联CS形成pSP-CS,将以上重组质粒分别与其复合形成pSP-CS/质粒DNA（pDNA）复合物。取3月龄健康雄性新西兰大耳白兔30只,体重2.0-2.5 kg,双侧后肢随机分为5组（n=12）。假手术组（A组）仅暴露股骨外侧髁关节面,pSP-CS/pBudCE4.1干预组（B组）、pSP-CS/pBudCE4.1-IL-1Ra干预组（C组）、pSP-CS/pBudCE4.1-IGF-1干预组（D组）、pSP-CS/pBudCE4.1-IL-1Ra＋IGF-1干预组（E组）制备膝关节外侧髁软骨缺损模型。术后1周,各干预组给予对应pSP-CS/pDNA复合物,共7周;A组注射等量生理盐水。术后观察动物一般情况,8周时处死实验动物,取关节腔灌洗液ELISA分析IL-1Ra及IGF-1含量;实时荧光定量PCR检测缺损区软骨组织聚集蛋白聚糖（Aggrecan）、基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinase 3,MMP-3）、MMP抑制剂1（MMP inhibitor 1,TIMP-1）mRNA表达;阿尔辛蓝-过碘酸雪夫（alcian blue-periodic acid/schiff,ABPAS）染色及Aggrecan免疫组织化学染色鉴定损伤区新生细胞的软骨细胞表型,分析Aggrecan染色吸光度（A）值。结果实验动物术后无感染及死亡。各干预组关节腔灌洗液中检测到大量外源蛋白IGF-1和IL-1Ra,其中D、E组IGF-1含量以及C、E组IL-1Ra含量显著高于A组（P〈0.05）。E组Aggrecan和TIMP-1 mRNA表达上调,MMP-3 mRNA表达下调,明显优于C、D组（P〈0.05）。C、D、E组缺损处出现不同程度软骨性修复,AB-PAS染色及Aggrecan免疫组织化学染色均为阳性,且E组作用明显优于C、D组（P〈0.05）;B组缺损处仅被大量纤维组织增生和炎性细胞浸润,未见明显软骨性修复。结论 pSP-CS是一种较理想的基因载体,可携载治 展开更多
关键词 可磷酸化短肽 壳聚糖 软骨损伤 基因治疗 igf-1 IL-1受体拮抗剂 兔
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新型有序纳米介孔生物活性玻璃对成骨细胞IGF-Ⅱ基因调控的影响 被引量：5
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作者 张权 谢寒 +1 位作者 余承忠 易静 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期313-316,327,共5页
目的研究新型有序纳米介孔生物活性玻璃的体外生物活性及其对鼠成骨细胞的IGF-Ⅱ基因表达效果,探讨其可能的调控机制。方法定量选取新型的生物活性玻璃MBG(80S15C),浸泡于MEM培养液中,取离子浸出液培养大鼠成骨细胞,使用MTT法和PNPP法... 目的研究新型有序纳米介孔生物活性玻璃的体外生物活性及其对鼠成骨细胞的IGF-Ⅱ基因表达效果,探讨其可能的调控机制。方法定量选取新型的生物活性玻璃MBG(80S15C),浸泡于MEM培养液中,取离子浸出液培养大鼠成骨细胞,使用MTT法和PNPP法测定成骨细胞增殖和ALP的活性,RT-PCR法测定IGF-Ⅱ的mRNA表达,ELISA法测定IGF-Ⅱ蛋白和IGFBP的浓度。结果实验组成骨细胞的ALP活性为对照组的126%,IGF-Ⅱ基因表达为对照组的126%,IGF-Ⅱ蛋白和IGFBP的浓度分别是对照组175%和237%,细胞增殖为对照组的92%。结论MBG的离子浸出液能够明显促进成骨细胞的分化,其机制可能是通过诱导激活IGF-Ⅱ基因的表达,增加IGF-Ⅱ蛋白,IGFBP的合成和分泌,进而促进成骨细胞的分化。 展开更多
关键词 有序纳米介孔生物活性玻璃 igf-Ⅱ 基因调控
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半胱胺和大豆黄酮对东北细毛羊部分组织IGF-Ⅰ mRNA表达量的影响 被引量：6
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作者 任道平 耿忠诚 +1 位作者 刘胜军 国君 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期967-973,共7页
为了探讨半胱胺和大豆黄酮对东北细毛羊肝脏、肌肉和皮肤组织中IGF-ⅠmRNA表达量的影响,选取体重27～28 kg,5～6月龄健康的东北细毛羊育成羊21只,随机分成7组,每组3个重复,每个重复1只,采用实时荧光定量PCR法检测肝脏、肌肉和皮肤组织中... 为了探讨半胱胺和大豆黄酮对东北细毛羊肝脏、肌肉和皮肤组织中IGF-ⅠmRNA表达量的影响,选取体重27～28 kg,5～6月龄健康的东北细毛羊育成羊21只,随机分成7组,每组3个重复,每个重复1只,采用实时荧光定量PCR法检测肝脏、肌肉和皮肤组织中IGF-ⅠmRNA相对表达量。结果表明:(1)半胱胺和大豆黄酮均能显著提高东北细毛羊的生长性能(P<0.05),其中以7.5 mg/kg BW半胱胺组和7.5 mg/kg BW半胱胺+3 mg/kg BW大豆黄酮组效果较佳;(2)半胱胺和大豆黄酮对东北细毛羊肝脏和肌肉中IGF-ⅠmRNA表达量有显著的提高作用(P<0.05),但各试验组之间差异不显著(P>0.05);(3)对皮肤中表达量的影响:对照组与添加3和6 mg/kg BW大豆黄酮组和7.5 mg/kg BW半胱胺+3 mg/kg BW大豆黄酮组之间差异显著(P<0.05),与添加7.5和15 mg/kg BW半胱胺组和15 mg/kg BW半胱胺+6 mg/kg BW大豆黄酮组之间差异不显著(P>0.05)。由结果可知,半胱胺和大豆黄酮均能提高肝脏和肌肉中IGF-ⅠmRNA的表达量,但协同应用并没有促使IGF-ⅠmRNA表达量在肝脏、肌肉和皮肤组织中的明显提高,综合分析以添加3 mg/kg BW大豆黄酮效果最佳。 展开更多
关键词 东北细毛羊 igf-Ⅰ 实时荧光定量PCR 基因表达
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慢病毒介导的IGF-1与PDGF基因对人退变椎间盘髓核组织的影响 被引量：6
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作者 许刚 张长春 +2 位作者 朱坤 叶雨辰 鲍正齐 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期907-914,共8页
目的观察比较人正常和退变髓核的细胞学和生物学差异,并研究IFG-1和PDGF对人退变髓核的修复作用。方法取患者自愿捐赠的人退变及正常髓核组织,一部分制作成组织切片,进行HE染色观察髓核退变前后形态变化,免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原... 目的观察比较人正常和退变髓核的细胞学和生物学差异,并研究IFG-1和PDGF对人退变髓核的修复作用。方法取患者自愿捐赠的人退变及正常髓核组织,一部分制作成组织切片,进行HE染色观察髓核退变前后形态变化,免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bcl-2 associate X,Bax)蛋白表达;另一部分髓核组织进行细胞培养,倒置显微镜观察细胞形态,Western blot检测Ⅱ型胶原蛋白表达。然后进行基因转染实验,分为4组,A组为退变髓核细胞;B、C、D组分别用IGF-1基因慢病毒颗粒、PDGF基因慢病毒颗粒和携带IGF-1、PDGF双基因的慢病毒颗粒转染退变髓核细胞。转染21 d,倒置显微镜观察各组细胞形态,流式细胞仪测定各组细胞IGF-1和PDGF阳性率,免疫组织化学染色和Western blot检测各组细胞Ⅱ型胶原蛋白表达。结果HE染色示,正常组中央髓核组织可见大量脊索细胞和少量类软骨细胞;而退变组髓核细胞明显减少,且髓核组织内可见大量纤维软骨组织。免疫组织化学染色示,退变组Ⅰ型胶原、Bax蛋白阳性细胞百分比显著高于正常组,Ⅱ型胶原、Bcl-2蛋白阳性细胞百分比显著低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测示,退变组Ⅱ型胶原蛋白相对表达量显著低于正常组(t=65.493,P=0.000)。基因转染后21 d,与A组比较,B、C、D组细胞活性增加,形态变得较为规则。流式细胞仪检测示B、D组IGF-1阳性率较A组明显增高,C、D组PDGF阳性率较A组明显增高(P<0.05)。免疫组织化学染色观察示,A、B、C、D组Ⅱ型胶原蛋白阳性染色情况依次为(±)、(+)、(+)、(++)。Western blot检测示,A、B、C、D组Ⅱ型胶原蛋白相对表达量依次增加,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论IGF-1与PDGF均能逆转椎间盘髓核细胞的退变且二者具有协同作用,为其今后应用于临床治疗椎� 展开更多
关键词 椎间盘退变 髓核 igf-1 PDGF 基因转染
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