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题名鸡源IFIT5蛋白的体外表达及单克隆抗体的制备
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作者
高向向
贾璐
胡伯里
邓婷娟
郑肖娟
周继勇
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机构
浙江大学农业部动物病毒学重点实验室
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出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期1087-1093,共7页
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基金
国家蛋鸡产业技术体系岗位专家项目(CARS-41-K11)
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文摘
鸡IFIT5(chIFIT5)蛋白在抗病毒免疫中具有重要作用。为了阐明其具体作用机制,本研究将禽传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)感染DF-1细胞后,通过RT-PCR方法扩增chIFIT5基因,将其构建到pET-28a(+)原核表达载体上进行表达,然后用纯化的重组chIFIT5蛋白免疫小鼠后通过细胞融合技术筛选能稳定分泌抗chIFIT5蛋白的单克隆抗体细胞株。结果显示,扩增获得的chIFIT5基因的大小为1 440 bp,在原核细胞中成功表达的重组chIFIT5蛋白约58 ku。Western-blot检测显示,有4株单抗与重组chIFIT5蛋白、IBDV感染的细胞中chIFIT5蛋白以及Myc-chIFIT5真核转染蛋白均能发生免疫反应,但间接免疫荧光(IFA)检测反应却均呈阴性。抗体亚类分析结果显示,四株细胞株所分泌的单克隆抗体均为Ig G 2a亚类,轻链均为κ链。这为鸡源IFIT蛋白的生物学特性研究奠定了基础。
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关键词
ifit家族蛋白
chifit5
单克隆抗体
抗体亚型
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Keywords
ifit family protein
chifit5
monoclonal antibody
mAb subtype
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分类号
S852.43
[农业科学—基础兽医学]
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