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白术、黄芪、党参促进IEC-6细胞损伤后的快速修复 被引量:39
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作者 宋厚盼 谢梦洲 +2 位作者 胡志希 黄惠勇 蔡雄 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1170-1175,共6页
目的研究白术、黄芪、党参提取物对体外胃肠黏膜上皮细胞损伤的快速修复作用。方法采用Tips划痕法建立小肠上皮(IEC-6)细胞迁移模型,首先考察不同的IEC-6细胞接种密度、划痕后修复时间、不同的血清浓度以建立稳定的迁移模型;接着采用表... 目的研究白术、黄芪、党参提取物对体外胃肠黏膜上皮细胞损伤的快速修复作用。方法采用Tips划痕法建立小肠上皮(IEC-6)细胞迁移模型,首先考察不同的IEC-6细胞接种密度、划痕后修复时间、不同的血清浓度以建立稳定的迁移模型;接着采用表皮生长因子(EGF)及其阻断剂AG1478对迁移模型进行评价;最后考察三味中药对IEC-6细胞迁移的作用效果。结果 (1)细胞的最佳接种密度为1×105个/m L;(2)宜在划痕后8 h计算细胞迁移率;(3)1%血清浓度为最适宜浓度;(4)EGF明显促进了IEC-6细胞迁移,AG1478明显抑制了细胞迁移;(5)白术、黄芪、党参提取物均可促进IEC-6细胞迁移。结论益气健脾中药可促进胃肠黏膜损伤后的快速修复过程,其机制是否与影响EGFR信号通路有关有待进一步研究。 展开更多
关键词 胃肠黏膜损伤 iec-6细胞 细胞迁移模型 表皮生长因子(EGF) 白术 黄芪 党参
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白术糖复合物对IEC-6细胞分化及绒毛蛋白表达的影响 被引量:32
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作者 王洲 李茹柳 +1 位作者 徐颂芬 陈蔚文 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期938-944,共7页
目的:观察白术糖复合物对小肠隐窝细胞(IEC-6)细胞分化及分化标志物之一绒毛蛋白(villin)表达的影响。方法:IEC-6细胞分为空白对照组、阳性对照药胃泌素组(250μg/L)、白术糖复合物组(62.5、125、250、500、1000 mg/L),经相应处理后。... 目的:观察白术糖复合物对小肠隐窝细胞(IEC-6)细胞分化及分化标志物之一绒毛蛋白(villin)表达的影响。方法:IEC-6细胞分为空白对照组、阳性对照药胃泌素组(250μg/L)、白术糖复合物组(62.5、125、250、500、1000 mg/L),经相应处理后。光镜下观察细胞大体形态;透射电镜下观察细胞超微结构;RT-PCR法检测villin mRNA表达;免疫荧光法检测villin蛋白表达。结果:①给药7 d,光镜下空白对照组细胞处于幼稚状态;胃泌素和白术糖复合物组细胞处于分化状态;②给药20 d,电镜下空白对照组胞核较大,常染色质比例较高,细胞边缘仅见少量微绒毛;胃泌素和白术糖复合物组胞核较小,常/异染色质比例协调,细胞边缘生成大量微绒毛;③给药6 h,空白对照组细胞villin mRNA表达非常少,胃泌素组和白术糖复合物组villin mRNA表达均明显高于空白对照组;④给药7 d,免疫荧光检测发现空白对照组细胞仅有很少villin蛋白表达;胃泌素组表达非常强烈;白术糖复合物组表达稍弱于胃泌素组,但有特异性绒毛蛋白聚集点。结论:白术糖复合物有通过上调IEC-6细胞绒毛蛋白表达及分布而促其分化的作用。 展开更多
关键词 白术糖复合物 iec-6细胞 分化 绒毛蛋白
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四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响 被引量:26
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作者 韩凌 王培训 韩冰 《中国药物与临床》 CAS 2005年第7期496-499,共4页
目的研究四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响。方法以IEC-6细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,观察四君子汤总多糖及各单味药多糖对该细胞增殖的影响。结果各多糖的作用存在差异,茯苓多... 目的研究四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响。方法以IEC-6细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,观察四君子汤总多糖及各单味药多糖对该细胞增殖的影响。结果各多糖的作用存在差异,茯苓多糖具有明显的促进细胞生长的作用,甘草多糖与党参多糖作用不显著,而白术多糖则具有明显的抑制细胞生长的作用。当采用每两味多糖组合时,结果表明所有两组多糖作用强度远不如四君子汤总多糖。结论四君子汤总多糖的作用可能是各种单味药多糖综合作用的结果,也提示中药复方用药具有一定的合理性。 展开更多
关键词 四君子汤 细胞增殖 总多糖 单味药 肠上皮细胞 大鼠 iec-6细胞 四甲基偶氮唑蓝 促进细胞生长 研究对象 茯苓多糖 党参多糖 甘草多糖 白术多糖 作用强度 中药复方 综合作用 比色法 合理性
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党参白术提取物分别和合用诱导IEC-6细胞增殖分化的作用 被引量:18
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作者 陈蔚文 张子理 +4 位作者 王建华 沈小玲 韩凌 周联 徐勤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期444-447,共4页
目的 观察党参提取物 (D h)和白术提取物 (B t)对小肠隐窝细胞 (IEC 6 )增殖、分化的作用及其二者配伍对IEC 6细胞增殖的影响。方法 IEC 6细胞培养 2 4h ,加入不同剂量的D h、B t及二者的配伍溶液 ,2 4h后用MTT法观察细胞增殖 ,显微... 目的 观察党参提取物 (D h)和白术提取物 (B t)对小肠隐窝细胞 (IEC 6 )增殖、分化的作用及其二者配伍对IEC 6细胞增殖的影响。方法 IEC 6细胞培养 2 4h ,加入不同剂量的D h、B t及二者的配伍溶液 ,2 4h后用MTT法观察细胞增殖 ,显微镜观察细胞分化的形态特征。结果 D h在 2 5 0mg·L-1以下剂量时对细胞增殖无影响 ,剂量提高到 5 0 0mg·L-1和 10 0 0mg·L-1时 ,明显促进细胞的增殖。B t各剂量均无促进细胞增殖的作用 ,在 5 0 0mg·L-1和10 0 0mg·L-1剂量时 ,细胞增殖反见减弱。二药配伍后 ,促进细胞增殖的作用明显增强 ,具有一定的剂量依赖关系 ,其效果优于D h ;IEC 6细胞在B t作用下 ,分化程度增高 ,低倍镜下细胞呈典型的上皮细胞形态 ,细胞排列呈条索状 ,部分呈腺管状排列。高倍镜下可观察到隐约有细胞连接样结构 ,上皮细胞似有微绒毛形成的趋势。D h处理的细胞分化程度较低 ,镜下所见多为未分化的梭状细胞 ,且排列不规则 ,无任何形成腺管的趋势和有细胞连接样结构。结论 D h能促进细胞增殖 ,B t可促进细胞分化 ,二者配伍后促进细胞增殖作用明显增强 。 展开更多
关键词 白术提取物 细胞增殖 细胞分化 iec-6细胞 党参提取物 药理学 实验研究
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黄芪注射液通过激活鸟氨酸脱羧酶促进IEC-6细胞分化的研究 被引量:18
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作者 张子理 陈蔚文 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期439-443,共5页
目的 :观察黄芪注射液 (Astragalusinjection ,AI)对小肠隐窝细胞株 (IEC 6 )增殖、分化、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶 (ODC)和多胺含量的影响 ,探讨其粘膜修复的作用机理。方法 :IEC 6细胞接种后 2 4h ,加入AI。加药后 12h收获细胞 ... 目的 :观察黄芪注射液 (Astragalusinjection ,AI)对小肠隐窝细胞株 (IEC 6 )增殖、分化、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶 (ODC)和多胺含量的影响 ,探讨其粘膜修复的作用机理。方法 :IEC 6细胞接种后 2 4h ,加入AI。加药后 12h收获细胞 ,分别检测ODCmRNA水平、ODC蛋白、ODC活性及细胞内腐胺含量 ;2 4h观察细胞增殖和细胞分化 ;细胞接种后 72h损伤细胞 ,并加入AI ,加药后 2 4h、4 8h及 72h观察细胞移行。结果 :AI能明显抑制IEC 6细胞增殖 ,促进细胞分化 ,对细胞移行无明显影响。AI 6 2 5~ 2 5 0 μg/ml各剂量组可明显增加ODCmRNA水平 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5~ 0 0 1)。AI各剂量组对ODC蛋白均无明显影响。AI随着剂量增加 ,逐渐升高IEC 6细胞ODC活性和腐胺含量 ,具有剂量依赖关系。结论 :AI通过诱导IEC 6细胞ODC活性和多胺的生物合成促进细胞分化 。 展开更多
关键词 黄芪注射液 鸟氨酸脱羧酶 iec-6细胞 分化 研究
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白术内酯对IEC-6细胞及食管癌细胞ECA9706增殖能力的影响 被引量:18
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作者 高小玲 汪保英 +2 位作者 尹素改 张钟允 陈玉龙 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期921-923,共3页
目的:观察白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对IEC-6细胞及食管癌细胞ECA9706增殖能力的影响。方法:细胞种植于96孔板,24h后分别加入白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ200、100、50、25、12.5、6.25μg/m L,放置培养箱48h后,MTT法检测白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不同剂量对IE... 目的:观察白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对IEC-6细胞及食管癌细胞ECA9706增殖能力的影响。方法:细胞种植于96孔板,24h后分别加入白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ200、100、50、25、12.5、6.25μg/m L,放置培养箱48h后,MTT法检测白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不同剂量对IEC-6细胞及ECA9706细胞增殖能力的影响。结果:白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ随着剂量的增加,呈现从增殖到抑制的作用,其中以白术内酯Ⅰ50μg/m L对IEC-6细胞增殖率效果最佳,白术内酯Ⅱ小剂量对IEC-6细胞作用不明显,但是随着剂量的增加,呈现抑制作用;白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ200、100、50μg/m L均能抑制ECA9706细胞的增殖,其中以白术内酯Ⅱ效果明显。结论:白术内酯Ⅰ可能是白术健脾的有效成分,而白术内酯Ⅱ可能是抑制肿瘤细胞增殖的主要成分之一。 展开更多
关键词 白术内酯 增殖 iec-6细胞 ECA9706细胞
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唐古特大黄多糖促进IEC-6细胞增殖、移行作用及其可能的机制研究 被引量:9
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作者 刘琳娜 梅其炳 +3 位作者 王志鹏 张琰 刘莉 刘新友 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期303-307,共5页
目的观察唐古特大黄多糖组分之一(RTP1)对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性和ODC蛋白表达的影响,观察其对胃肠黏膜的修复作用并探讨可能的机制。方法采用MTT法和体外肠上皮细胞移行模型,... 目的观察唐古特大黄多糖组分之一(RTP1)对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性和ODC蛋白表达的影响,观察其对胃肠黏膜的修复作用并探讨可能的机制。方法采用MTT法和体外肠上皮细胞移行模型,观察不同剂量的RTP1(10、30、100mg·L-1)处理IEC-6细胞24h后,细胞增殖和移行情况;Western blot检测ODC蛋白表达;通过测定L-[1-14C]鸟氨酸释放14CO2的量来检测ODC活性变化。结果RTP1在10、30、100mg·L-1时均可明显促进IEC-6细胞的增殖和移行,可增加ODC蛋白表达和ODC活性,并具有剂量依赖性,与空白对照组相比差异具有显著性(P<0·05或0·01)。结论RTP1可促进肠上皮细胞的增殖和移行,提示RTP1可能对肠黏膜的损伤修复具有直接作用。其作用机制可能与鸟氨酸脱羧酶表达增加和(或)活性增大有关。 展开更多
关键词 唐古特大黄多糖 iec-6细胞 增殖 移行 鸟氨酸脱羧酶
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唐古特大黄多糖对过氧化氢诱导的肠上皮细胞凋亡的保护作用及其可能机制 被引量:6
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作者 刘琳娜 张峰 +2 位作者 梅其炳 张琰 刘新友 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期877-881,共5页
目的探讨唐古特大黄多糖(Rheum tanguticumpoly-saccharide,RTP)组分1(RTP1)对过氧化氢(H2O2)诱导的肠上皮细胞IEC-6凋亡的保护作用及其可能的机制。方法以不同浓度的RTP1(10、30、100 mg.L-1)预处理体外培养的IEC-6细胞后,加入H2O2诱导... 目的探讨唐古特大黄多糖(Rheum tanguticumpoly-saccharide,RTP)组分1(RTP1)对过氧化氢(H2O2)诱导的肠上皮细胞IEC-6凋亡的保护作用及其可能的机制。方法以不同浓度的RTP1(10、30、100 mg.L-1)预处理体外培养的IEC-6细胞后,加入H2O2诱导IEC-6细胞凋亡,MTT法检测细胞活力,激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生,DNA琼脂糖凝胶电泳、吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,Western blot测定Caspase-3酶活性。结果 100μmol.L-1H2O2处理细胞2 h明显降低细胞存活率并诱导细胞凋亡,凋亡率为31.3%,细胞内活性氧水平及Caspase-3的活性明显升高,不同浓度(10、30、100 mg.L-1)RTP1预处理细胞24 h,可明显提高细胞存活率,有效抑制DNAladder的发生,流式细胞仪检测凋亡率(30、100 mg.L-1)分别降低至24.4%和21.5%,Caspase-3酶活性降低,并呈现一定的剂量依赖性。结论 RTP1可明显抑制H2O2诱导的IEC-6细胞凋亡,其细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平和抑制Caspase-3活性相关。 展开更多
关键词 唐古特大黄多糖 细胞凋亡 过氧化氢 iec-6细胞 活性氧 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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基于化学成分变化对炆远志“减毒”效应研究 被引量:6
9
作者 丁平平 易斌 +5 位作者 陈华师 陈明霞 吕尚 张青 陈西勇 饶毅 《广东药科大学学报》 CAS 2022年第4期45-51,共7页
目的基于远志炆制前后化学成分变化情况及胃肠道毒性相关试验,探讨炆远志“减毒”的物质基础。方法采用HPLC法对生远志、制远志、炆远志中化学成分进行定量分析;采用小鼠小肠上皮隐窝IEC-6细胞系作为评价模型,以IC_(50)和丙二醛(MDA)、... 目的基于远志炆制前后化学成分变化情况及胃肠道毒性相关试验,探讨炆远志“减毒”的物质基础。方法采用HPLC法对生远志、制远志、炆远志中化学成分进行定量分析;采用小鼠小肠上皮隐窝IEC-6细胞系作为评价模型,以IC_(50)和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)为评价指标,对远志炮制前后胃肠道毒性进行评价。结果炆远志中,远志皂苷B的含量较制远志的下降程度更为显著,远志酮Ⅲ和细叶远志皂苷的含量均无明显变化,3,6′-二芥子酰基蔗糖酯的含量则缓慢下降。IEC-6细胞评价胃肠道毒性试验结果显示,综合抑制率和IC_(50)值,细胞的毒性大小为生远志>制远志>炆远志;MDA、GSH、SOD的变化情况显示,炆远志的GSH及SOD的含量均显著增加(P<0.01),MDA的含量显著降低(P<0.01),表明炆远志的毒性较制远志毒性低。结论远志经炆制,具有“减毒”的效果,具有毒性的远志皂苷类成分(如远志皂苷B)含量更低为其“减毒”原因之一。 展开更多
关键词 远志 炆远志 化学成分 远志皂苷B iec-6细胞 胃肠道毒性
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IEC-6细胞的培养鉴定和生长特性研究 被引量:5
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作者 陈祥贵 芮光伟 +3 位作者 任川洪 王瑞淑 王志民 冉新泽 《四川工业学院学报》 CAS 2003年第1期41-44,共4页
大鼠肠上皮细胞株IEC 6具有正常的未分化的肠上皮隐窝细胞的特征 ,在营养学研究中具有重要应用价值。本研究采用相差显微镜、透射电镜、扫描电镜等技术观察细胞形态结构 ,采用MTT法研究血清和血清替代品对ICE 6细胞生长的影响。结果表... 大鼠肠上皮细胞株IEC 6具有正常的未分化的肠上皮隐窝细胞的特征 ,在营养学研究中具有重要应用价值。本研究采用相差显微镜、透射电镜、扫描电镜等技术观察细胞形态结构 ,采用MTT法研究血清和血清替代品对ICE 6细胞生长的影响。结果表明 :引进的IEC 6细胞具有典型的正常肠上皮隐窝细胞的形态特征、超微结构和生长特性 ,表明的细胞株未发生转化或变异。不同的血清和血清替代品对细胞增殖的效应有差异 ,2 %的透析胎牛血清能维持细胞良好的增殖状态 ,可用于研究正常培养条件下外源核苷酸对肠上皮细胞的作用。 展开更多
关键词 iec-6细胞 鉴定 生长特性 细胞培养 细胞增殖 透析血清 肠上皮细胞 形态特征 超微结构 营养素
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四君子汤对IEC-6细胞增殖相关指标及大鼠胃肠黏膜c-Myc表达的影响 被引量:5
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作者 涂小华 杨欣 +5 位作者 杨光勇 徐萌萌 邓颖 张庚鑫 杜海洋 王慧 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期143-150,共8页
目的观察四君子汤对IEC-6细胞(大鼠小肠上皮细胞)增殖,多胺调控生长相关基因细胞周期检测点激酶2(Checkpoint kinase 2,Chk2)、c-Myc表达,以及对大鼠胃肠黏膜c-Myc蛋白表达的影响。方法采用SD大鼠制备空白血清及四君子汤含药血清;无负... 目的观察四君子汤对IEC-6细胞(大鼠小肠上皮细胞)增殖,多胺调控生长相关基因细胞周期检测点激酶2(Checkpoint kinase 2,Chk2)、c-Myc表达,以及对大鼠胃肠黏膜c-Myc蛋白表达的影响。方法采用SD大鼠制备空白血清及四君子汤含药血清;无负荷细胞实验设空白对照组、腐胺组(10μmol·L^(-1))及四君子汤含药血清低、中、高(5%、10%、20%)剂量组;α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)负荷细胞实验设空白对照组、DFMO组(2.5 mmol·L^(-1))、腐胺组(10μmol·L;)及四君子汤含药血清低、中、高(5%、10%、20%)剂量组;动物实验将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组(吲哚美辛组)及四君子汤低、高(5、15 g·kg^(-1))剂量组。采用MTT法检测IEC-6细胞增殖情况;qPCR法检测细胞Chk2、c-Myc mRNA表达;Western Blot法检测细胞Chk2、p-Chk2、c-Myc蛋白表达和大鼠胃肠黏膜的c-Myc蛋白表达。结果 (1)细胞实验:与空白对照组比较,10%、20%四君子汤含药血清可促进给药24 h后IEC-6细胞的增殖(P<0.01),提高p-Chk2蛋白及c-Myc m RNA/蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);5%、10%、20%四君子汤含药血清可促进给药48、72 h后细胞增殖(P<0.01),促进Chk2 mRNA/蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与DFMO组比较,5%、10%、20%四君子汤含药血清可促进给药48 h后细胞增殖(P<0.01),提高c-Myc mRNA/蛋白表达(P<0.05,P<0.01);10%、20%四君子汤含药血清可促进给药72 h后细胞增殖(P<0.01),促进Chk2及p-Chk2蛋白表达(P<0.05,P<0.01);20%四君子汤含药血清可促进Chk2 mRNA表达(P<0.05)。(2)动物实验:与模型组比较,四君子汤5、15 g·kg^(-1)可上调模型大鼠胃黏膜及小肠黏膜c-Myc蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论四君子汤可促进IEC-6细胞增殖,其作用机制可能与影响多胺信号通路,上调生长相关基因Chk2、c-Myc表达有关。四君子汤可提高胃肠黏膜损伤模型大鼠胃及小肠黏膜c-Myc蛋白表达水平。 展开更多
关键词 四君子汤 胃肠黏膜损伤修复 细胞增殖 多胺 细胞周期检测点激酶2 c-Myc iec-6细胞 大鼠
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富二十二碳六烯酸裂殖壶藻藻油对过氧化氢诱导的小肠上皮细胞抗炎和抗氧化系统的影响 被引量:2
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作者 丁军 和俊豪 +4 位作者 付子琳 朱颍琨 郭治国 马露 卜登攀 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期3303-3312,共10页
本研究以大鼠小肠上皮细胞(IEC-6细胞)为研究对象,探究二十二碳六烯酸(DHA)和富DHA裂殖壶藻藻油(SZO)预防和缓解过氧化氢(H_(2)O_(2) )诱导的IEC-6细胞氧化损伤的影响。首先添加0、5、10、20、40、80μg/mL的DHA和SZO培养IEC-6细胞24和4... 本研究以大鼠小肠上皮细胞(IEC-6细胞)为研究对象,探究二十二碳六烯酸(DHA)和富DHA裂殖壶藻藻油(SZO)预防和缓解过氧化氢(H_(2)O_(2) )诱导的IEC-6细胞氧化损伤的影响。首先添加0、5、10、20、40、80μg/mL的DHA和SZO培养IEC-6细胞24和48 h,通过四氮甲基唑蓝(MTT)细胞活力检测试剂盒检测细胞增殖指数,确定最适添加浓度和培养时间。然后在H_(2)O_(2) 诱导前后以最适添加浓度添加DHA和SZO至细胞培养基中进行培养。培养结束后,收集细胞和培养基上清,检测细胞的抗氧化指标和炎性因子表达情况,以及细胞内核因子E2相关因子2(Nrf2)和转录核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达情况。结果显示:DHA最适添加浓度和培养时间分别为40μg/mL和24 h。DHA和SZO处理提高了H_(2)O_(2) 诱导的IEC-6细胞总抗氧化能力和抗氧化酶(超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶)活性,并且降低了活性氧和丙二醛含量,且缓解效果的抗氧化酶活性显著高于预防效果(P<0.05)。免疫印迹结果显示,DHA和SZO处理降低了H_(2)O_(2) 诱导的IEC-6细胞NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达量,提高了Nrf2蛋白表达量。此外,SZO处理的缓解效果使IEC-6细胞TNF-α蛋白表达量显著低于预防效果(P<0.05)。综上所述,DHA和SZO通过激活Nrf2和抑制NF-κB信号通路增强细胞抗氧化和抗炎能力,预防和缓解了H_(2)O_(2) 引起的IEC-6细胞的氧化应激,且SZO对氧化损伤的缓解效果优于预防效果。 展开更多
关键词 裂殖壶藻 DHA iec-6细胞 抗氧化 抗炎
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四君子汤含药血清对IEC-6细胞增殖及RhoA、p21、Cdk2表达的影响 被引量:5
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作者 涂小华 杨光勇 +5 位作者 杨欣 邓颖 徐萌萌 魏砚君 万亿 王慧 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期2125-2131,共7页
目的 探究四君子汤含药血清对IEC-6细胞增殖及Rho GTP酶(RhoA)、p21、细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cdk2)表达的影响。方法 分别制备大鼠空白血清及四君子汤含药血清,MTT法检测IEC-6细胞增殖,RT-qPCR法检测p21、Cdk2 mRNA表达,Western blot... 目的 探究四君子汤含药血清对IEC-6细胞增殖及Rho GTP酶(RhoA)、p21、细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cdk2)表达的影响。方法 分别制备大鼠空白血清及四君子汤含药血清,MTT法检测IEC-6细胞增殖,RT-qPCR法检测p21、Cdk2 mRNA表达,Western blot法检测RhoA、p21、Cdk2及磷酸化Cdk2(p-Cdk2)蛋白表达。结果 与对照组比较,10%、20%四君子汤含药血清可促进给药24 h后细胞增殖(P<0.01),提高RhoA蛋白表达,Cdk2 mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01);各剂量四君子汤含药血清可促进给药48、72 h后细胞增殖(P<0.01),降低p21 mRNA和蛋白表达(P<0.01),升高p-Cdk2蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与DFMO组比较,各剂量四君子汤含药血清可促进给药48 h后细胞增殖(P<0.01),提高RhoA及p-Cdk2蛋白表达(P<0.01);10%、20%四君子汤含药血清可促进给药72 h后细胞增殖(P<0.01),降低p21 mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01),提高Cdk2 mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论 四君子汤含药血清可促进正常小肠上皮细胞增殖,其机制与影响多胺调控RhoA、p21、Cdk2表达有关。 展开更多
关键词 四君子汤 含药血清 iec-6细胞 增殖 RHOA P21 CDK2
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岗梅根和茎超临界CO_2萃取物中低极性挥发性成分比较及其对IEC-6细胞增殖活性的影响 被引量:5
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作者 马洪艳 汪天呈 +1 位作者 李武国 刘嘉炜 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第8期1056-1060,共5页
目的:比较岗梅根和茎的超临界CO_2萃取物中的低极性挥发性化学成分及其体外对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6增殖活性的影响,为充分利用岗梅野生资源和扩大其药用部位提供参考。方法:采用超临界CO_2萃取法提取岗梅根和茎中的低极性挥发性化... 目的:比较岗梅根和茎的超临界CO_2萃取物中的低极性挥发性化学成分及其体外对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6增殖活性的影响,为充分利用岗梅野生资源和扩大其药用部位提供参考。方法:采用超临界CO_2萃取法提取岗梅根和茎中的低极性挥发性化学成分,通过气质联用法(GC-MS)分析其化学成分组成。以IEC-6细胞为对象,采用不同质量浓度的岗梅根或茎超临界CO_2萃取物(0、1、5、10、20、40、60、80、100μg/mL)处理细胞,以MTT法检测细胞相对活力,绘制细胞增殖曲线图并计算各萃取物的半数有效浓度(EC_(50))。结果:通过GC-MS分析技术从岗梅根和茎超临界CO2萃取物中分别鉴定出62、46个低极性挥发性化学成分,其中共有成分24个,主要为壬酸(根、茎中分别含14.18%、6.14%)、辛酸(根、茎中分别含10.59%、4.35%)、己酸(根、茎中分别含8.63%、10.86%)、丹皮酚(根、茎中分别含7.79%、6.00%)、2-甲基-3-苯基-丙醇(根、茎中分别含6.30%、0.58%)、乙酸(根、茎中分别含1.72%、33.77%)等。细胞体外试验结果显示,岗梅根和茎超临界CO_2萃取物质量浓度较低(≤60μg/mL)时,能显著促进IEC-6细胞增殖,EC_(50)分别为16.35、20.20μg/mL;而当质量浓度较高(≥80μg/mL)时,则表现出细胞毒活性,对IEC-6细胞增殖呈抑制作用。结论:岗梅根和茎中的低极性挥发性化学成分种类相似,其萃取物对IEC-6细胞的体外生物活性也相似;短链脂肪酸很可能是其促进细胞增殖的活性成分,而丹皮酚则可能是其细胞毒活性成分。 展开更多
关键词 岗梅 低级性 挥发性成分 超临界CO2萃取 气质联用 iec-6细胞 细胞增殖
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干酪乳杆菌SB27降低N-亚硝胺对IEC-6细胞毒性作用研究 被引量:4
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作者 王淑梅 邸维 +3 位作者 于佳睿 王雪 单艺 易华西 《中国酿造》 CAS 北大核心 2022年第4期54-58,共5页
该研究选用具有益生功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)SB27为研究对象,采用菌落计数法分析N-亚硝胺(N-二甲基亚硝胺(NDMA)、N-二乙基亚硝胺(NDEA)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)和N-亚硝基哌啶(NPIP)(0~80μg/mL)在MRS液体培养基中对干酪... 该研究选用具有益生功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)SB27为研究对象,采用菌落计数法分析N-亚硝胺(N-二甲基亚硝胺(NDMA)、N-二乙基亚硝胺(NDEA)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)和N-亚硝基哌啶(NPIP)(0~80μg/mL)在MRS液体培养基中对干酪乳杆菌SB27生长的影响,并以维生素C(VC)(50μmol/L)为阳性对照,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法分析干酪乳杆菌SB27(103~10^(6) CFU/mL)降低N-亚硝胺对大鼠肠道黏膜细胞IEC-6毒性的损伤。结果表明,N-亚硝胺在MRS液体培养基中对干酪乳杆菌SB27的生长增殖无显著影响(P>0.05)。干酪乳杆菌SB27可降低NDMA、NDEA、NPYR及NPIP对大鼠肠道黏膜细胞IEC-6的毒性损伤。 展开更多
关键词 干酪乳杆菌 N-亚硝胺 iec-6细胞 毒性作用
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灵芝多糖对IEC-6细胞促增殖、迁移与分化作用 被引量:5
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作者 陈丽华 李卫东 +3 位作者 杨菁 张佳琦 秦莹 林志彬 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期270-272,273,共4页
目的通过灵芝多糖作用于体外培养的大鼠小肠隐窝细胞株IEC-6细胞,观察灵芝多糖对IEC-6细胞增殖、迁移与分化的影响。方法不同浓度的灵芝多糖作用于正常IEC-6细胞44h后,用噻唑蓝(MTT)法测细胞的增殖。灵芝多糖预作用IEC-6细胞46h后,用500... 目的通过灵芝多糖作用于体外培养的大鼠小肠隐窝细胞株IEC-6细胞,观察灵芝多糖对IEC-6细胞增殖、迁移与分化的影响。方法不同浓度的灵芝多糖作用于正常IEC-6细胞44h后,用噻唑蓝(MTT)法测细胞的增殖。灵芝多糖预作用IEC-6细胞46h后,用500μmol·L-1H2O2刺激IEC-6细胞40min,以MTT法测细胞的增殖变化。采用IEC-6单层肠上皮细胞损伤重建模型,检测灵芝多糖对IEC-6细胞迁移的影响,并用ELISA方法检测培养细胞上清中TGF-β的含量以探讨迁移途径。对细胞进行HE染色来观察IEC-6细胞的分化情况。结果灵芝多糖对正常及受H2O2损伤后的IEC-6细胞均有促增殖作用,并呈量效关系;10mg·L-1灵芝多糖可促进受损IEC-6细胞的迁移,但对细胞上清中TGFβ含量无影响。在10mg·L-1灵芝多糖作用下,IEC-6细胞分化程度增高。结论灵芝多糖可以促进IEC-6细胞增殖、迁移与分化。其促迁移作用是非依赖TGFβ途径的。 展开更多
关键词 灵芝多糖 iec-6细胞 增殖 迁移 分化
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植物乳杆菌STIII对大鼠小肠上皮细胞钙离子吸收的影响 被引量:5
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作者 贾慧琼 安敏 +5 位作者 徐熙 蔺丽玲 郝艳云 王慧利 曾爱兵 陈增强 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期6-9,共4页
目的探讨乳杆菌对小肠上皮钙离子吸收的影响及其作用机制。方法测定植物乳杆菌ST III发酵上清液对复合钙盐解离效果的基础上,通过MTT比色法测定植物乳杆菌ST III发酵上清液对大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)增殖率影响以及用fluo-3AM荧光... 目的探讨乳杆菌对小肠上皮钙离子吸收的影响及其作用机制。方法测定植物乳杆菌ST III发酵上清液对复合钙盐解离效果的基础上,通过MTT比色法测定植物乳杆菌ST III发酵上清液对大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)增殖率影响以及用fluo-3AM荧光染色观察对IEC-6细胞内游离钙离子浓度变化。结果植物乳杆菌ST III发酵上清液对大鼠IEC-6增殖有明显的促进作用,与对照组比较差异有统计学意义,24h(F=548.401,P=0.000,P<0.05),48h(F=722.352,P=0.000,P<0.05),并呈良好的量效关系;同时植物乳酸菌ST III发酵上清液刺激后小肠隐窝上皮细胞6、12和24h,细胞内游离钙离子荧光强度相对值明显高于对照组,6h(F=203.911,P=0.000,P<0.05),12h(F=106.158,P=0.000,P<0.05),24h(F=26.076,P=0.000,P<0.05),差异有统计学意义。结论植物乳杆菌ST III在细胞水平上促进小肠上皮增殖并对细胞内Ca2+有明显的促进作用。 展开更多
关键词 乳酸菌 植物乳杆菌 iec-6细胞 钙离子吸收
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小儿广朴止泻口服液治疗腹泻机制的预测及初步验证 被引量:4
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作者 陈琦 张亚云 +4 位作者 张丹丹 夏杨 孙丽 曹思瑶 卞慧敏 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2390-2398,共9页
目的通过数据库预测和分子对接技术探究小儿广朴止泻口服液治疗腹泻的活性成分和作用机制,并在大鼠小肠上皮IEC-6细胞上进行初步实验验证。方法通过中药系统药理学平台(TCMSP)数据库和文献检索获取小儿广朴止泻口服液的化学成分;采用Gen... 目的通过数据库预测和分子对接技术探究小儿广朴止泻口服液治疗腹泻的活性成分和作用机制,并在大鼠小肠上皮IEC-6细胞上进行初步实验验证。方法通过中药系统药理学平台(TCMSP)数据库和文献检索获取小儿广朴止泻口服液的化学成分;采用GeneCards和DisGeNET数据库获得腹泻相关基因,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction network,PPI)网络获得小儿广朴止泻口服液治疗腹泻的重要靶点,并进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;使用Autodock Vina软件进行分子对接验证。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导IEC-6细胞损伤模型,采用MTT、ELISA法检测小儿广朴止泻口服液对细胞凋亡及炎症的影响,并通过Western blotting法验证其可能的作用机制。结果小儿广朴止泻口服液的主要活性成分有63个,预测获得重要靶点86个,核心靶点28个;GO功能和KEGG通路富集分析显示小儿广朴止泻口服液主要调控了机体炎症反应、细胞增殖、细胞凋亡等生物过程,涉及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)以及磷酸肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)等信号通路。体外结果表明小儿广朴止泻口服液能显著升高LPS诱导的IEC-6细胞存活率(P<0.01),显著抑制炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和TNF-α的分泌(P<0.01),显著下调剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3)、Caspase-8、核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)蛋白表达(P<0.01),上调β-catenin蛋白表达(P<0.01)。结论小儿广朴止泻口服液可能通过抑制炎症反应和细胞凋亡治疗腹泻。 展开更多
关键词 小儿广朴止泻口服液 腹泻 iec-6细胞 抗炎 凋亡 分子对接 啤酒甾醇 芦丁
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白术多糖对小肠上皮细胞细胞屏障及黏附连接蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 罗蒙 伍婷婷 +4 位作者 李茹柳 张东 朱惠彬 胡玲 陈蔚文 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期533-539,共7页
目的观察白术多糖对小肠上皮细胞(IEC-6)渗透性的影响,并从其对黏附连接蛋白表达影响的角度,探讨白术多糖对肠黏膜上皮屏障的作用及机制。方法在3种实验条件下[正常含钙、含钙+多胺合成抑制剂(DFMO)、无钙培养],以检测Transwell小室酚... 目的观察白术多糖对小肠上皮细胞(IEC-6)渗透性的影响,并从其对黏附连接蛋白表达影响的角度,探讨白术多糖对肠黏膜上皮屏障的作用及机制。方法在3种实验条件下[正常含钙、含钙+多胺合成抑制剂(DFMO)、无钙培养],以检测Transwell小室酚红透过率的方法观察细胞间渗透性;以Western Blot法检测细胞黏附连接蛋白(E-cadherin、α-catenin和β-catenin)的表达。结果(1)正常含钙培养时,白术多糖(25、50、100 mg·L-1)能降低细胞间渗透性并提高黏附连接蛋白表达(P<0.05或P<0.01);(2)含钙+DFMO负荷时,细胞间渗透性增加且黏附连接蛋白表达下降(P<0.01);各剂量的白术多糖能逆转DFMO所致的细胞间渗透性增加,且对黏附连接蛋白表达下降有拮抗作用(P<0.05或P<0.01);(3)无钙培养时,细胞间渗透性增加且黏附连接蛋白表达下降(P<0.01),各剂量的白术多糖可逆转无钙培养所致的细胞间渗透性增加及E-cadherin表达降低(P<0.05或P<0.01),但对α-catenin和β-catenin表达无明显影响。结论白术多糖有增强小肠上皮屏障的作用,其机制与影响黏附连接蛋白表达有关,研究结果为探讨益气健脾中药白术对胃肠黏膜保护作用提供了参考。 展开更多
关键词 白术多糖 iec-6细胞 细胞间渗透性 上皮屏障 黏附连接蛋白
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长链n-3多不饱和脂肪酸对肠上皮细胞促炎细胞因子基因mRNA表达的影响 被引量:4
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作者 黄志清 陈小玲 +2 位作者 陈代文 余冰 何军 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1384-1388,共5页
本试验旨在探讨长链n-3多不饱和脂肪酸(LC n-3PUFA)对肠上皮细胞促炎细胞因子基因mRNA表达的影响。试验选用大鼠肠上皮细胞系IEC-6细胞为模型,分为4个处理,分别为对照、脂多糖(LPS,1μg/mL)、LPS(1μg/mL)+二十二碳六烯酸(DHA,100μmol... 本试验旨在探讨长链n-3多不饱和脂肪酸(LC n-3PUFA)对肠上皮细胞促炎细胞因子基因mRNA表达的影响。试验选用大鼠肠上皮细胞系IEC-6细胞为模型,分为4个处理,分别为对照、脂多糖(LPS,1μg/mL)、LPS(1μg/mL)+二十二碳六烯酸(DHA,100μmol/L)和LPS(1μg/mL)+二十碳五烯酸(EPA,100μmol/L),每个处理3个重复,每孔为1个重复。细胞先用DHA、EPA或等量二甲基亚砜(DHA和EPA的溶剂,对照)预处理48h,再用LPS处理3h,收集细胞提取总RNA,采用实时定量PCR方法分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的基因mRNA表达水平的差异。结果表明:LPS极显著上调了细胞中TNF-α、IL-1β和IL-6的基因mRNA表达水平(P<0.01),EPA均极显著或显著削弱了细胞内LPS诱导的TNF-α(P<0.01)、IL-1β(P<0.01)和IL-6的基因mRNA水平(P<0.05)的上调,而DHA仅显著削弱了细胞内LPS诱导的IL-1β的基因mRNA水平的上调(P<0.05)。结果提示,LC n-3PUFA在肠上皮细胞中具有抗炎作用,且在本试验条件下EPA的抗炎效果要优于DHA。 展开更多
关键词 长链n-3多不饱和脂肪酸 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸 iec-6细胞 促炎细胞因子
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