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空气净化装置病毒净化效率试验中病毒滴度测定方法比较
1
作者
马向东
叶智坚
+3 位作者
张文欢
覃芳敏
赵爽
朱吉兴
《中国消毒学杂志》
CAS
2024年第5期327-329,334,共4页
目的比较3种不同病毒滴度测定方法在通风系统用空气净化装置病毒净化效率试验中的适用性。方法采用气溶胶染菌,分别使用噬斑法、定量聚合酶链反应法(qPCR)和结合细胞培养的qPCR法(ICC-qPCR)3种病毒滴度测定方法,对5款不同类型空气净化...
目的比较3种不同病毒滴度测定方法在通风系统用空气净化装置病毒净化效率试验中的适用性。方法采用气溶胶染菌,分别使用噬斑法、定量聚合酶链反应法(qPCR)和结合细胞培养的qPCR法(ICC-qPCR)3种病毒滴度测定方法,对5款不同类型空气净化装置的一次净化效率进行对比。结果高压静电净化装置、初效过滤器、中效过滤器的净化效率,3种方法检测结果无统计学差异(P>0.01);紫外线净化装置和高效过滤器的净化效率,qPCR法的检测灵敏性高于与其他2种方法(P<0.01),ICC-qPCR法耗时最短(约5 h),重复性好,RSD值小于其他2种方法,最低为0.01%。结论ICC-qPCR法适用范围广、用时短、结果稳定性高,适用于通风系统用净化装置病毒净化效率的评价。
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关键词
通风系统
净化装置
净化效率
噬菌体MS2
噬斑法
qpcr
法
icc
-
qpcr
法
原文传递
猪细小病毒检测ICC-qPCR替代方法的建立
被引量:
2
2
作者
张羽
郭佳花
+2 位作者
屈树新
段晓杰
徐丽明
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期97-103,共7页
目的:建立猪细小病毒(PPV)的细胞培养结合荧光定量PCR(ICC-qP CR)方法并进行优化,结合传统的病毒滴定(细胞培养法)及ICC-qP CR方法,考察将其应用于病毒灭活验证研究的可行性。方法:将系列10倍稀释的PPV病毒接种于猪睾丸(ST)细胞,分别扩...
目的:建立猪细小病毒(PPV)的细胞培养结合荧光定量PCR(ICC-qP CR)方法并进行优化,结合传统的病毒滴定(细胞培养法)及ICC-qP CR方法,考察将其应用于病毒灭活验证研究的可行性。方法:将系列10倍稀释的PPV病毒接种于猪睾丸(ST)细胞,分别扩增培养0、12、18、24 h,考察理想的病毒扩增培养时间,确定ICC-qP CR定量检测区间及获得病毒扩增倍数(K);将病毒平行接种于病毒扩增组及非扩增的对照组,通过扩增组和对照组的系列病毒接种量与PCR反应周期(Ct)值的拟合曲线,分别获得病毒扩增组及对照组的ICC-qP CR检测病毒滴度(T_(a)、T_(c)),结合扩增倍数(K),根据公式[Log_(10)(10^(Ta)-10^(Tc))/(K-1)]直接计算样本中的感染性病毒滴度。最后,将ICC-qP CR、优化ICC-qP CR方法和细胞培养法分别用于模拟样本(由不同比例感染性病毒和非感染性病毒组成)中的感染性病毒滴度测定,考察将其应用于病毒灭活验证研究的可行性。结果:PPV接种后的最佳扩增培养时间为24 h,检测下限为-1 LogL0~5.00 Logs_(10)TCID_(50)·100μL^(-1)(ogs),定量区间为,扩增倍数为83.11。当模拟样本中的非感染性病毒含量较低或与感染性病毒等量时,ICC-qP CR、优化ICC-qP CR方法和细胞培养法测得的感染性病毒滴度没有显著性差异;然而,当模拟样本中的非感染性病毒含量较高时,由优化的ICC-qP CR方法和细胞培养法测得的感染性病毒滴度分别是1.46、1.50 Logs,二者高度一致,而常规ICC-qP CR方法测得的结果(1.75 Logs)存在极显著性差异。结论:本研究所优化的ICC-qP CR方法作为细胞培养法的替代方法,具有用于病毒灭活验证研究的前景。
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关键词
猪细小病毒
细胞培养结合荧光定量PCR方法
替代方法
扩增倍数
病毒灭活验证
病毒滴定
非感染性病毒
假阳性信号
原文传递
题名
空气净化装置病毒净化效率试验中病毒滴度测定方法比较
1
作者
马向东
叶智坚
张文欢
覃芳敏
赵爽
朱吉兴
机构
中科检测技术服务(广州)股份有限公司
中国科学院广州化学研究所
中科广化(重庆)新材料研究院有限公司
中国家用电器研究院
佛山市顺德区阿波罗环保器材有限公司
出处
《中国消毒学杂志》
CAS
2024年第5期327-329,334,共4页
文摘
目的比较3种不同病毒滴度测定方法在通风系统用空气净化装置病毒净化效率试验中的适用性。方法采用气溶胶染菌,分别使用噬斑法、定量聚合酶链反应法(qPCR)和结合细胞培养的qPCR法(ICC-qPCR)3种病毒滴度测定方法,对5款不同类型空气净化装置的一次净化效率进行对比。结果高压静电净化装置、初效过滤器、中效过滤器的净化效率,3种方法检测结果无统计学差异(P>0.01);紫外线净化装置和高效过滤器的净化效率,qPCR法的检测灵敏性高于与其他2种方法(P<0.01),ICC-qPCR法耗时最短(约5 h),重复性好,RSD值小于其他2种方法,最低为0.01%。结论ICC-qPCR法适用范围广、用时短、结果稳定性高,适用于通风系统用净化装置病毒净化效率的评价。
关键词
通风系统
净化装置
净化效率
噬菌体MS2
噬斑法
qpcr
法
icc
-
qpcr
法
Keywords
ventilation
system
cleaning
device
cleaning
efficiency
bacteriophage
MS2
plaque
assay
method
qpcr
method
icc
-
qpcr
method
分类号
R187 [医药卫生—流行病学]
原文传递
题名
猪细小病毒检测ICC-qPCR替代方法的建立
被引量:
2
2
作者
张羽
郭佳花
屈树新
段晓杰
徐丽明
机构
中国食品药品检定研究院
西南交通大学生命科学与工程学院
西南交通大学材料科学与工程学院
出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期97-103,共7页
基金
中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金(2018C6)。
文摘
目的:建立猪细小病毒(PPV)的细胞培养结合荧光定量PCR(ICC-qP CR)方法并进行优化,结合传统的病毒滴定(细胞培养法)及ICC-qP CR方法,考察将其应用于病毒灭活验证研究的可行性。方法:将系列10倍稀释的PPV病毒接种于猪睾丸(ST)细胞,分别扩增培养0、12、18、24 h,考察理想的病毒扩增培养时间,确定ICC-qP CR定量检测区间及获得病毒扩增倍数(K);将病毒平行接种于病毒扩增组及非扩增的对照组,通过扩增组和对照组的系列病毒接种量与PCR反应周期(Ct)值的拟合曲线,分别获得病毒扩增组及对照组的ICC-qP CR检测病毒滴度(T_(a)、T_(c)),结合扩增倍数(K),根据公式[Log_(10)(10^(Ta)-10^(Tc))/(K-1)]直接计算样本中的感染性病毒滴度。最后,将ICC-qP CR、优化ICC-qP CR方法和细胞培养法分别用于模拟样本(由不同比例感染性病毒和非感染性病毒组成)中的感染性病毒滴度测定,考察将其应用于病毒灭活验证研究的可行性。结果:PPV接种后的最佳扩增培养时间为24 h,检测下限为-1 LogL0~5.00 Logs_(10)TCID_(50)·100μL^(-1)(ogs),定量区间为,扩增倍数为83.11。当模拟样本中的非感染性病毒含量较低或与感染性病毒等量时,ICC-qP CR、优化ICC-qP CR方法和细胞培养法测得的感染性病毒滴度没有显著性差异;然而,当模拟样本中的非感染性病毒含量较高时,由优化的ICC-qP CR方法和细胞培养法测得的感染性病毒滴度分别是1.46、1.50 Logs,二者高度一致,而常规ICC-qP CR方法测得的结果(1.75 Logs)存在极显著性差异。结论:本研究所优化的ICC-qP CR方法作为细胞培养法的替代方法,具有用于病毒灭活验证研究的前景。
关键词
猪细小病毒
细胞培养结合荧光定量PCR方法
替代方法
扩增倍数
病毒灭活验证
病毒滴定
非感染性病毒
假阳性信号
Keywords
porcine
parvovirus
icc
-
qpcr
alternative
method
amplification
times
virus
inactivation
validation
virus
titration
noninfectious
virus
false
positive
signal
分类号
R917 [医药卫生—药物分析学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
空气净化装置病毒净化效率试验中病毒滴度测定方法比较
马向东
叶智坚
张文欢
覃芳敏
赵爽
朱吉兴
《中国消毒学杂志》
CAS
2024
0
原文传递
2
猪细小病毒检测ICC-qPCR替代方法的建立
张羽
郭佳花
屈树新
段晓杰
徐丽明
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
原文传递
已选择
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