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抑制lncRNA HIF1A-AS1表达对长春新碱耐药视网膜母细胞瘤细胞株裸鼠移植瘤生长及转移的影响
1
作者 何道侗 高玉 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2023年第9期785-791,共7页
目的探讨抑制长链非编码RNA(lncRNA)缺氧诱导因子1α-反义RNA1(HIF1A-AS1)表达对长春新碱(VCR)耐药视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株裸鼠的生存期、移植瘤生长和转移的影响。方法体外培养人Rb细胞株HXO-RB44、Y79、SO-RB50,通过逐步增加VCR浓... 目的探讨抑制长链非编码RNA(lncRNA)缺氧诱导因子1α-反义RNA1(HIF1A-AS1)表达对长春新碱(VCR)耐药视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株裸鼠的生存期、移植瘤生长和转移的影响。方法体外培养人Rb细胞株HXO-RB44、Y79、SO-RB50,通过逐步增加VCR浓度的方法刺激诱导建立其相应的VCR耐药Rb细胞HXO-RB44/VCR、Y79/VCR、SO-RB50/VCR,以实时荧光定量PCR(qPCR)实验检测上述细胞中lncRNA HIF1A-AS1、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达。于裸鼠背部皮下注射Y79/VCR细胞悬液建立VCR耐药Rb细胞株裸鼠模型,随机分为模型组、VCR组、VCR+lncRNA HIF1A-AS1敲低组、VCR+lncRNA HIF1A-AS1空载组,以VCR和相应质粒分组干预处理后,检测各组裸鼠移植瘤的肿瘤体积、抑瘤率、转移情况及存活率;qPCR实验检测各组裸鼠移植瘤lncRNA HIF1A-AS1及HIF-1α、多药耐药1(MDR1)、乳腺癌相关耐药蛋白(BCRP/ABCG2)mRNA表达;免疫印迹法检测VCR耐药Rb细胞株裸鼠移植瘤HIF-1α、P-gp、ABCG2蛋白表达。结果与人Rb正常细胞HXO-RB44、Y79和SO-RB50相比,lncRNA HIF1A-AS1、HIF-1α在其相应VCR耐药细胞HXO-RB44/VCR、Y79/VCR、SO-RB50/VCR中的表达均显著升高(P<005)。与模型组比较,VCR+lncRNA HIF1A-AS1敲低组VCR耐药Rb细胞株裸鼠移植瘤肿瘤体积、转移器官数、转移灶总数、lncRNA HIF1A-AS1及HIF-1α、MDR1、ABCG2 mRNA表达、HIF-1α及P-gp、ABCG2蛋白表达均显著降低(P<005),裸鼠给药后30 d存活率、抑瘤率显著升高(P<005);VCR组、VCR+lncRNA HIF1A-AS1空载组VCR耐药Rb细胞株裸鼠各指标无显著变化(P>005)。与VCR组比较,VCR+lncRNA HIF1A-AS1敲低组VCR耐药Rb细胞株裸鼠移植瘤肿瘤体积、转移器官数、转移灶总数、lncRNA HIF1A-AS1及HIF-1α、MDR1、ABCG2 mRNA表达、HIF-1α及P-gp、ABCG2蛋白表达均显著降低(P<005),裸鼠给药后30 d存活率、抑瘤率显著升高(P<005);VCR+lncRNA HIF1A-AS1空载组VCR耐药Rb细胞株裸鼠各指标无显著变化(P>005)。结论下调lncRNA HIF1A-AS1表 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 缺氧诱导因子1α-反义rna1 耐药 生存期 移植瘤 生长转移
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NASH患者外周血乏氧诱导因子1a-反义RNA 1和自噬基因Beclin1变化及其临床意义
2
作者 张羿 尹刚 赵艳萍 《实用肝脏病杂志》 CAS 2022年第4期517-520,共4页
目的研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者外周血单个核细胞(PBMC)乏氧诱导因子1a-反义RNA 1(HIF1a-AS1)和血清自噬基因beclin1水平变化及其临床意义。方法2019年1月~2021年4月我院诊治的NASH患者118例(早期纤维化、进展期纤维化和肝硬化... 目的研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者外周血单个核细胞(PBMC)乏氧诱导因子1a-反义RNA 1(HIF1a-AS1)和血清自噬基因beclin1水平变化及其临床意义。方法2019年1月~2021年4月我院诊治的NASH患者118例(早期纤维化、进展期纤维化和肝硬化分别为43例、46例和29例)和同期健康体检者118例,使用全自动生化分析仪检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用实时荧光定量PCR法检测PBMC HIF1a-AS1水平,采用ELISA法检测血清beclin1水平。结果NASH患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(5.9±1.6)mmol/L、(6.2±0.5)mmol/L、(2.4±0.6)mmol/L、(3.7±0.9)mmol/L、(1.9±0.2)和(5.7±1.9)ng/mL,显著高于健康者【分别为(4.8±0.7)mmol/L、(5.3±0.3)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L、(2.3±0.6)mmol/L、(1.0±0.1)和(4.1±1.5)ng/mL,P<0.05】,而血清HDL-C水平为(1.2±0.2)mmol/L,显著低于健康者【(1.4±0.3)mmol/L,P<0.05】;肝硬化患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(6.8±2.0)mmol/L、(6.8±0.8)mmol/L、(2.8±0.7)mmol/L、(4.4±1.2)mmol/L、(2.5±0.3)和(6.4±2.1)ng/mL,显著高于早期纤维化患者【分别为(5.2±1.1)mmol/L、(5.7±0.4)mmol/L、(1.9±0.5)mmol/L、(3.1±1.0)mmol/L、(1.4±0.1)和(5.1±1.3)ng/mL,P<0.05】;49例有高血压、糖尿病或/和高脂血症合并症的NASH患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(6.5±1.9)mmol/L、(6.9±0.8)mmol/L、(2.7±0.8)mmol/L、(4.0±1.1)mmol/L、(2.2±0.3)和(6.3±2.0)ng/mL,显著高于69例无合并症者【分别为(5.5±1.3)mmol/L、(5.7±0.4)mmol/L、(2.2±0.5)mmol/L、(3.5±0.7)mmol/L、(1.7±0.2)和(5.3±1.6)ng/mL,P<0.05】,而血清HDL-C水平为(1.1±0.2)mmol/L,显著低于无合并症者【(1.3±0.4)mmol/L,P<0.05】。结论NASH患者PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平异常升高,监测其水平可能有助于病情评估。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝炎 单个核细胞 乏氧诱导因子1a-反义rna 1 BECLIN1 临床意义
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长链非编码RNA缺氧诱导因子-1α-反义链2在肝癌中的表达及对肝癌增殖和侵袭能力的影响 被引量：1
3
作者 付雪岩 吴刚 +1 位作者 王雅玮 王文青 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期837-840,共4页
目的检测长链非编码RNA缺氧诱导因子-1α-反义链2(lncRNA-HIF1A-AS2)在肝癌组织及肝癌细胞株中的表达并探讨其对肝癌增殖和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测HIF1A-AS2在49例肝癌患者的癌组织及其癌旁... 目的检测长链非编码RNA缺氧诱导因子-1α-反义链2(lncRNA-HIF1A-AS2)在肝癌组织及肝癌细胞株中的表达并探讨其对肝癌增殖和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测HIF1A-AS2在49例肝癌患者的癌组织及其癌旁组织以及4种肝癌细胞株(Huh7、HepG2、SMMC-7721、Bel-7402)和正常肝细胞L02的表达,并分析HIF1A-AS2表达与临床病理特征之间的联系;选取两种高表达HIF1A-AS2肝癌细胞分别转染小干扰RNA(si-HIF1A-AS2)和阴性对照(si-NC);利用细胞增殖-毒性检测实验(CCK-8)和平板克隆实验检测细胞增殖能力;利用Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果HIF1A-AS2在肝癌组织中的表达高于癌旁组织(-12.060±0.657比-12.450±0.683,P<0.01);HIF1A-AS2表达与年龄、肿瘤大小和肿瘤分化相关(χ2=4.573、4.871、8.353,P<0.05);在肝癌细胞株的表达也明显高于正常肝细胞株,其中在Huh7和HepG2的表达最高(Huh7:5.349±0.992,HepG2:5.660±0.726,P<0.01);CCK-8和平板克隆显示转染si-HIF1A-AS2后,细胞增殖能力明显低于对照组(Huh7:0.668±0.067比0.558±0.055,0.931±0.881比0.670±0.072,1.769±0.079比1.036±0.074;HepG2:1.063±0.060比0.803±0.097,1.767±0.091比1.083±0.080,P<0.01)(Huh7:542.70±25.50比378.00±19.31,HepG2:530.00±14.53比217.30±18.15,P<0.01);侵袭实验显示转染si-HIF1A-AS2后,细胞侵袭数明显低于对照组[Huh7:(116.300±6.506)个比(52.000±9.539)个,HepG2:(88.330±5.686)个比(55.000±5.245)个,P<0.01]。结论HIF1A-AS2在肝癌及细胞株中高表达,下调HIF1A-AS2表达可以抑制肝癌细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 肝细胞癌 长链非编码rna-缺氧诱导因子-1α-反义链2 增殖 侵袭
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