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基于CCL2/CCR2/NF-κB通路探讨活膝汤含药血清对软骨细胞焦亡的影响
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作者 谢芳 简功辉 +4 位作者 戴斌玉 邓志 邵先舫 陈竹明 陈绍军 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期30-36,共7页
目的:探讨活膝汤含药血清对脂多糖诱导的软骨细胞焦亡的保护作用。方法:构建CCL2过表达质粒,制备活膝汤含药血清,CCK8法检测血清干预软骨细胞的最佳浓度及最佳时间。将培养的软骨细胞分为:空白对照组、模型对照组、12.81 g/kg活膝汤20%... 目的:探讨活膝汤含药血清对脂多糖诱导的软骨细胞焦亡的保护作用。方法:构建CCL2过表达质粒,制备活膝汤含药血清,CCK8法检测血清干预软骨细胞的最佳浓度及最佳时间。将培养的软骨细胞分为:空白对照组、模型对照组、12.81 g/kg活膝汤20%含药血清组、核因子κB(NF-κB)抑制组、CCL2过表达组、CCL2过表达+NF-κB抑制组、CCL2过表达+12.81 g/kg活膝汤20%含药血清组;应用ELISA法检测细胞上清中白介素-18(IL-18)、IL-1β的含量;RT-PCR法检测半胱天冬酶-1(Caspase-1)、削皮素D(Gsdmd)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nlrp3)mRNA的表达;Western blot法检测半胱天冬酶剪切体-1(Cleaved-Caspase-1)、GSDMD、NLRP3、磷酸化P65(Ser536)(p-P65(Ser536))蛋白的表达;免疫荧光双染检测Caspase-1介导的软骨细胞焦亡水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组软骨细胞IL-18、IL-1β含量显著升高,NLRP3、GSDMD、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、p-P65(Ser536)表达显著上调(P<0.01),软骨细胞焦亡增多;与模型对照组比较,12.81 g/kg活膝汤20%含药血清组及NF-κB抑制组软骨细胞IL-18、IL-1β含量显著降低,NLRP3、GSDMD、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、p-P65(Ser536)表达显著下调(P<0.01),软骨细胞焦亡减少;CCL2过表达组软骨细胞IL-18、IL-1β含量显著升高,NLRP3、GSDMD、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、p-P65(Ser536)表达显著上调(P<0.01),软骨细胞焦亡增多。结论:活膝汤含药血清可能通过抑制CCL2/CCR2/NF-κB信号轴下调Caspase-1介导的软骨细胞焦亡。 展开更多
关键词 活膝汤 软骨细胞 细胞焦亡 CC趋化因子配体2 核因子ΚB
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