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原代人绒毛滋养层细胞分离培养及其对巨细胞病毒的易感性研究
被引量:
2
1
作者
周淑
董丽群
+1 位作者
关林波
于萍
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期344-347,377,共5页
目的通过分离培养原代人绒毛滋养层细胞(HTCs)并检测其对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径。方法将30例健康孕妇经负压真空吸引手术所得的流产早孕绒毛组织充分剪碎,用0.25%胰蛋白酶和0.2%DNA酶混合消化法制...
目的通过分离培养原代人绒毛滋养层细胞(HTCs)并检测其对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径。方法将30例健康孕妇经负压真空吸引手术所得的流产早孕绒毛组织充分剪碎,用0.25%胰蛋白酶和0.2%DNA酶混合消化法制备细胞悬液,细胞悬液经200目不锈钢筛网过滤后用Percoll液密度梯度离心对HTCs进行初步纯化,细胞传代中应用反复胰酶消化法对HTC进行3~5次纯化,通过细胞学形态观察和免疫荧光染色方法对HTCs进行鉴定;用HCMV病毒株体外感染HTCs,应用PCR、Westernblot和免疫荧光方法对HCMV基因及蛋白进行检测,从而确定HTCs对HCMV的易感性。结果 Percoll分离联合胰酶、DNA酶消化法对原代HTCs有较好的分离效果,免疫荧光染色结果表明90%以上细胞表达CK-7相关抗原,HTCs体外感染HCMV 72h后形态学发生明显改变,病毒基因及蛋白均呈阳性表达。结论原代HTCs对HCMV易感,通过HTCs感染胎儿可能是HCMV宫内感染的重要传播途径之一。
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关键词
人绒毛滋养层细胞
人巨细胞病毒
原文传递
题名
原代人绒毛滋养层细胞分离培养及其对巨细胞病毒的易感性研究
被引量:
2
1
作者
周淑
董丽群
关林波
于萍
机构
四川大学华西第二医院妇产科
四川大学华西第二医院儿科
四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院细胞与基因治疗实验室
妇儿疾病与出生缺陷教育部重点实验室.成都
出处
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期344-347,377,共5页
基金
国家自然科学基金(批准号81070499)
四川省科技厅应用基础项目(2009JY0048)
+1 种基金
四川省科技厅科技支撑项目(2009SZ0198)资助
早期发育与损伤的基础与临床嵌合研究教育部创新团队(PCSIRT0935)
文摘
目的通过分离培养原代人绒毛滋养层细胞(HTCs)并检测其对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径。方法将30例健康孕妇经负压真空吸引手术所得的流产早孕绒毛组织充分剪碎,用0.25%胰蛋白酶和0.2%DNA酶混合消化法制备细胞悬液,细胞悬液经200目不锈钢筛网过滤后用Percoll液密度梯度离心对HTCs进行初步纯化,细胞传代中应用反复胰酶消化法对HTC进行3~5次纯化,通过细胞学形态观察和免疫荧光染色方法对HTCs进行鉴定;用HCMV病毒株体外感染HTCs,应用PCR、Westernblot和免疫荧光方法对HCMV基因及蛋白进行检测,从而确定HTCs对HCMV的易感性。结果 Percoll分离联合胰酶、DNA酶消化法对原代HTCs有较好的分离效果,免疫荧光染色结果表明90%以上细胞表达CK-7相关抗原,HTCs体外感染HCMV 72h后形态学发生明显改变,病毒基因及蛋白均呈阳性表达。结论原代HTCs对HCMV易感,通过HTCs感染胎儿可能是HCMV宫内感染的重要传播途径之一。
关键词
人绒毛滋养层细胞
人巨细胞病毒
Keywords
human
trophoblastic
cell
hcmv
分类号
R714.2 [医药卫生—妇产科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
原代人绒毛滋养层细胞分离培养及其对巨细胞病毒的易感性研究
周淑
董丽群
关林波
于萍
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
原文传递
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