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南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞凋亡及其分子机制的实验研究 被引量：27
1
作者 舒琦瑾 李萍 王彬彬 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1243-1247,共5页
目的探讨南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞的凋亡作用及其分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测南方红豆杉水提物对A549细胞的增殖抑制作用;以光镜、电镜、膜联蛋白Ⅴ-FITCPI(An-nexinⅤ-FITC/PI)标记法检测细胞凋亡;以蛋白印迹法分... 目的探讨南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞的凋亡作用及其分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测南方红豆杉水提物对A549细胞的增殖抑制作用;以光镜、电镜、膜联蛋白Ⅴ-FITCPI(An-nexinⅤ-FITC/PI)标记法检测细胞凋亡;以蛋白印迹法分析南方红豆杉水提物对细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2),c-jun氨基未端激酶1/2(JNK1/2)和生存素(survivin)蛋白表达的影响。结果南方红豆杉水提物能抑制A549细胞的增殖;南方红豆杉水提物处理A549细胞后,光镜与电镜下可见到明显的凋亡细胞;Annexin Ⅴ-FITC/PI标记法的定量检测进一步证实了南方红豆杉水提物诱导细胞凋亡的作用;蛋白印迹检测表明南方红豆杉水提物能使survivin表达下降,对ERK1/2和JNK1/2表达无影响。结论南方红豆杉水提物能显著抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,主要通过调节survivin蛋白的表达来实现。 展开更多
关键词 南方红豆杉 人肺癌A549细胞 凋亡
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流感病毒H1N1感染A549细胞诱导凋亡及黄芩苷干预作用的研究 被引量：21
2
作者 刘晓婷 张沂 +4 位作者 顾立刚 吴珺 邱泽计 于卓男 王玥琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期936-939,共4页
目的研究黄芩苷对流感病毒H1N1感染A549细胞诱导的凋亡干预作用,探讨黄芩苷抗流感病毒感染的作用机制。方法采用基因芯片技术研究流感病毒感染细胞后细胞内凋亡信号通路中相关基因转录的变化。同时,采用荧光定量PCR检测各组细胞中天门... 目的研究黄芩苷对流感病毒H1N1感染A549细胞诱导的凋亡干预作用,探讨黄芩苷抗流感病毒感染的作用机制。方法采用基因芯片技术研究流感病毒感染细胞后细胞内凋亡信号通路中相关基因转录的变化。同时,采用荧光定量PCR检测各组细胞中天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-8(caspase-8)和caspase-3的mRNA表达的变化。Western blot法检测各组细胞中的相关蛋白的变化。结果利用基因芯片技术,通过KEGG pathway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Casp3、Casp7、Casp8、Casp10、TRAIL、MYD88、IL1A、和IL1B明显上调;与H1N1感染组比较,奥司他韦对照组对差异表达基因Casp3、Casp4和Casp8明显下调;黄芩苷高剂量组对差异表达基因Casp3、Casp4、Casp6和Casp8明显下调;黄芩苷低剂量组除上述差异表达基因外,还明显下调了IL1RAP和Cn。qRT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组caspase-3和-8的mRNA表达均明显升高。与H1N1感染组比较,奥司他韦对照组、黄芩苷高低剂量组的caspase-3和-8的mRNA表达均明显降低(P<0.01);并且,黄芩苷低剂量组的治疗效果优于高剂量组;该结果和基因芯片表达的结果基本相符。结论流感病毒体外感染细胞A549后诱导凋亡,黄芩苷能通过调控天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白家族介导凋亡通路的相关基因表达,对病毒感染诱导的细胞凋亡有干预作用,从而发挥抗病毒作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 流感病毒H1N1 人肺腺癌上皮细胞A549 基因芯片 细胞凋亡 天冬半胱氨酸蛋白酶
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川芎嗪对甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究 被引量：10
3
作者 于卓男 林树鹏 +3 位作者 顾立刚 吴珺 邱泽计 刘晓婷 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期2680-2683,共4页
目的:研究川芎嗪(TMP)对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法:培养A549细胞,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照(N)组、H1V1感染(M)组、奥司他韦对照(D)组,TMP高剂量(S)组及TMP低剂量(J)组... 目的:研究川芎嗪(TMP)对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法:培养A549细胞,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照(N)组、H1V1感染(M)组、奥司他韦对照(D)组,TMP高剂量(S)组及TMP低剂量(J)组。采用RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中IL-1β、IL-10、INF-γ、TNF-αm RNA及蛋白表达。结果:与N组比较,M组IL-1β、IL-10、TNF-αm RNA表达显著升高,而INF-γm RNA表达显著降低(P<0.01);与M组比较,D、S、J组IL-1β、IL-10、TNF-αm RNA表达均明显降低(P<0.01)。M组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α蛋白表达较N组显著升高(P<0.05);与M组比较,S、J组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:TMP可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-αm RNA表达及蛋白分泌,减轻炎性反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡。 展开更多
关键词 川芎嗪 甲型流感病毒H1N1 炎性细胞因子 人肺腺癌A549细胞
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小檗胺对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制研究 被引量：4
4
作者 程汝滨 杨波 +1 位作者 钟晓明 黄真 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1967-1973,共7页
目的研究小檗胺体外对人肺腺癌A549细胞凋亡及TNF-α-JNK信号通路的影响。方法 MTT比色法检测小檗胺对A549细胞增殖的影响;显微镜观察A549细胞形态变化;Annexin V/PI双标法检测细胞的凋亡率;Western blotting法检测细胞凋亡标记蛋白Bcl-... 目的研究小檗胺体外对人肺腺癌A549细胞凋亡及TNF-α-JNK信号通路的影响。方法 MTT比色法检测小檗胺对A549细胞增殖的影响;显微镜观察A549细胞形态变化;Annexin V/PI双标法检测细胞的凋亡率;Western blotting法检测细胞凋亡标记蛋白Bcl-x、Caspase-3和PARP表达的变化,c-jun氨基末端激酶(JNK)的蛋白表达及其磷酸化表达水平;荧光定量PCR和ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的变化;通过JNK通路抑制剂进一步验证TNF-α-JNK信号通路在小檗胺药效中的作用。结果小檗胺能够显著抑制A549细胞增殖,并呈浓度相关性,小檗胺给药后24 h的IC50值为9.01μmol/L;经小檗胺处理后,A549细胞可见典型的凋亡形态学改变,Annexin V/PI双标法检测结果也显示小檗胺可诱导A549细胞凋亡,小檗胺10μmol/L组细胞早期凋亡率为13.8%,为对照组的6.6倍;小檗胺可显著降低抗凋亡蛋白Bcl-x的表达,明显增强促凋亡蛋白Caspase-3和PARP的活性,显著提高TNF-α基因和蛋白表达及JNK蛋白的磷酸化表达水平,激活TNF-α-JNK通路。结论小檗胺能抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与TNF-α-JNK信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 小檗胺 人肺腺癌A549细胞 细胞增殖 细胞凋亡 TNF-α-JNK通路
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疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒H1N1感染人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路作用的研究 被引量：3
5
作者 葛世杰 卢娜娜 +6 位作者 刘晓婷 张沂 顾立刚 吴珺 邱泽计 张洪春 晁恩祥 《中医药学报》 CAS 2015年第2期23-26,共4页
目的:研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路的影响。方法:利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后TLR3/7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中... 目的:研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路的影响。方法:利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后TLR3/7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中的Toll样受体3(Toll-like receptor3,TLR3)、Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)、激活核因子Kappa B(nuclear factor-Kappa B,NF-κB)的mRNA及蛋白表达的变化。结果:在TLR3/7相关信号传导通路中,与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显下调。qRT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均显著升高(P<0.01)。与H1N1感染组比较,疏风宣肺组的TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),解表清里方对TLR3/7、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。同时,疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Western blotting结果显示,H1N1感染组TLR3/7、NF-κB蛋白较正常组显著升高(P<0.05)。与H1N1感染组比较,两种方药的TLR3/7、NF-κB表达均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:疏风宣肺方和解表清里方可以抑制流感病毒H1N1所诱导的TLR3/7信号通路活化,下调活性NF-κB的转录活性,发挥抗流感病毒的作用。 展开更多
关键词 疏风宣肺方 解表清里方 流感病毒 人肺腺癌A549细胞 TLR3/7信号通路
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番酯素诱导人肺癌A549细胞凋亡及其分子机制的实验研究 被引量：2
6
作者 刘莲芳 章永红 潘迎英 《现代中西医结合杂志》 CAS 2012年第34期3785-3789,3793,共6页
目的研究番酯素抑制人肺腺癌细胞A549增殖和诱导凋亡的作用及其机制。方法①MTT法观察番酯素对人肺腺癌A549细胞株、人肺腺癌NCI-H460细胞株体外增殖的影响;②流式细胞仪检测番酯素对细胞凋亡的影响。结果番酯素在体外对人肺腺癌细胞A54... 目的研究番酯素抑制人肺腺癌细胞A549增殖和诱导凋亡的作用及其机制。方法①MTT法观察番酯素对人肺腺癌A549细胞株、人肺腺癌NCI-H460细胞株体外增殖的影响;②流式细胞仪检测番酯素对细胞凋亡的影响。结果番酯素在体外对人肺腺癌细胞A549有一定的抑制作用,且这种抑制作用具有量-效关系,剂量越大,抑制作用越强;细胞经过番酯素处理72 h后,与对照组比较,番酯素各剂量线细胞均出现不同程度的凋亡,且总凋亡随着剂量的增加而增加。结论番酯素具有抑制人肺腺癌细胞A549增殖的作用,可以诱导其凋亡。 展开更多
关键词 番酯素 人肺癌A549细胞 细胞凋亡
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^(188)Re标记DTPA-DG对肺癌A549细胞增殖的影响
7
作者 熊青峰 陈跃 +3 位作者 何菱 邓存良 黄占文 李举联 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期747-750,共4页
目的研究不同浓度188Re-DTPA-DG(188Re标记二乙三胺五乙酸-葡糖胺)对人肺癌细胞A549增殖的影响,探讨其作用机制。方法将人肺癌细胞A549分成3组,实验组(188Re-DTPA-DG组)、对照组(含188ReO4-淋洗液、缓冲液及等量的DTPA-DG)及生理盐水组... 目的研究不同浓度188Re-DTPA-DG(188Re标记二乙三胺五乙酸-葡糖胺)对人肺癌细胞A549增殖的影响,探讨其作用机制。方法将人肺癌细胞A549分成3组,实验组(188Re-DTPA-DG组)、对照组(含188ReO4-淋洗液、缓冲液及等量的DTPA-DG)及生理盐水组(含生理盐水及等量缓冲液),前两组均设三种不同浓度,148、296、444MBq/L。观察细胞形态,采用四氮唑盐比色法(MTT法)评价188Re-DTPA-DG对癌细胞A549增殖的影响。结果188Re-DTPA-DG导致的细胞损伤比188ReO4-明显;随着药物浓度增加,188Re-DTPA-DG导致的损伤越显著。结论188Re-DTPA-DG对肿瘤细胞增殖有较明显的抑制效应,其机制可能是由于188Re-DTPA-DG进入到细胞内,其辐射效应更能导致肺癌细胞损伤。 展开更多
关键词 ^188RE标记 DTPA-DG 肺癌 A549细胞 增殖 MTT比色法
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黄芩苷和木犀草苷在体外对流感病毒H1N1感染A549细胞中NF-κB信号通路的调控作用 被引量：20
8
作者 刘晓婷 顾立刚 +4 位作者 邓东沅 于卓男 王玥琦 吴珺 邱泽计 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1937-1941,共5页
目的:探讨流感病毒H1N1体外感染诱导细胞NF-κB信号通路相关因子表达及黄芩苷和木犀草素-7-O-葡萄糖苷的调控作用。方法:正常生长细胞接种100TCID50的病毒液;吸附2h后分别加入黄芩苷(3.96、0.99mg/L)、木犀草苷(25.0、12.5mg/L),并以奥... 目的:探讨流感病毒H1N1体外感染诱导细胞NF-κB信号通路相关因子表达及黄芩苷和木犀草素-7-O-葡萄糖苷的调控作用。方法:正常生长细胞接种100TCID50的病毒液;吸附2h后分别加入黄芩苷(3.96、0.99mg/L)、木犀草苷(25.0、12.5mg/L),并以奥司他韦(0.75mg/L)做阳性对照。采用基因芯片技术分析各组细胞差异表达炎性因子。以RT-PCR和Western blot法检测细胞NF-κB信号通路相关因子m RNA和蛋白的表达变化。结果:与正常细胞对照组比较,H1N1感染组差异表达基因IRAK1、RIPK1、TAB2、NFKB、IL1B、IL8、TNFA和COX-2明显上调;与H1N1感染组比较,奥司他韦对照组基因NFKB、IL1B和TNFA明显下调,NFKBIA明显上调;黄芩苷高、低剂量组基因IRAK1、RIPK1、TAB2、NFKB、IL1B、IL8和TNFA明显下调,NFKBIA和TNFAIP3上调;木犀草苷高、低剂量组对差异表达基因RIPK1、IRAK1、TAB2、NFKB、IL1B、TNFA和COX-2明显下调,对NFKBIA上调作用。结论:流感病毒感染后活化NF-κB信号通路,引起炎性因子过度表达;黄芩苷和木犀草苷可以对活化通路的正负反馈进行调节,减轻病毒对宿主细胞的炎性损伤作用,发挥抗病毒作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 木犀草素-7-O-葡萄糖苷 流感病毒H1N1 人肺腺癌A549细胞 NF-ΚB信号通路 基因芯片
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低频超声辐射对化学治疗药物致人肺癌A549细胞凋亡作用的影响 被引量：1
9
作者 周艳秋 管洁 +2 位作者 田颖 王洪武 翁春晓 《中国医药》 2014年第7期978-982,共5页
目的探讨低频超声辐射是否增加化学治疗（化疗）药物对人肺癌细胞的凋亡作用。方法将人肺癌A549的细胞分成4组：空白对照组常规培养；单纯使用顺氯氨铂组（单纯化疗组，药物终浓度5 mg/L）；单纯低频超声辐射处理组（单纯超声组，频率30... 目的探讨低频超声辐射是否增加化学治疗（化疗）药物对人肺癌细胞的凋亡作用。方法将人肺癌A549的细胞分成4组：空白对照组常规培养；单纯使用顺氯氨铂组（单纯化疗组，药物终浓度5 mg/L）；单纯低频超声辐射处理组（单纯超声组，频率30 kHz,发射强度2.8 W/cm2,作用时间5 min）以及低频超声辐射联合顺氯氨铂化疗组（超声联合化疗组，超声治疗和化疗方法同单纯超声组和单纯化疗组）。经过各个条件处理的细胞培养36 h后应用流式细胞仪检测A549细胞凋亡率。结果超声联合化疗组A549细胞凋亡率［（7.84±2.74）%］明显高于单纯化疗组［（5.06±0.88）%］、单纯超声组［（2.71±0.99）%］和空白对照组［（2.64±0.99）%］，差异均有统计学意义（P= 0.012，P= 0.004，P=0.010）,同时超声联合化疗组及单纯化疗组A549细胞凋亡率也明显高于空白对照组，差异有统计学意义（P=0.004）,单纯超声组与空白对照组间A549细胞凋亡率差异无统计学意义（P=0.055）。结论体外低频超声辐射可以增加化疗药物对人肺癌细胞的凋亡作用。 展开更多
关键词 低频超声辐射 人肺癌细胞株 化学治疗 细胞凋亡率
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